Способ определения токсичности жидкости

 

Изобретение относится к медицине, в частности к определению токсичности воды. Целью изобпетения является упрощение способа. Это достигается TeMs что в качестве тест-объекта используются эритроциты, которые после инкубации в изотонических растворах эталонной и исследуемой гладкостей выдерживают до полного гемолиза при 55-65 С, измеряя оптическую плотность обеих проб. Затем по полученным данным находят время ЕТ50, в течение которого разрушается 50% эритроцитов4 а относительную токсичность исследуемой кости определяют по формуле. 1 ил.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

„„SU„„1707537 щ) С 01 Г1 33/52

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИп циты.

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4772083/14 (22) 22.12.89 (46) 23.01.92. Бюл. P 3 (71) Эксперииентальная лаборатория медико-биологических проблем (72) С.Г.Сергеев, А.В.Кравчук и И.И.пихаленко (53) 616.07(088.8) (56) Blondin С.A. ес all, Fnviron.

Contan. Tm icol ., 198?, т. 38, р. 467-478. (54) СПОСОБ 0Л ГДКЛГЛ. Л ТГ1КС17ПК1С И

ЖИДКОСТИ

Изобр енц.. >тноо п оя к медицине, к определению токсичности )ащкостей.

Цель изобретения — упрощение способа.

На черте>се приведен график, иллю.стрирующий ппедлагаеиый способ.

Л р и и е р 1. Приготовляют испытуемую пробу. К 5 ил изотонического раствора исследуеиой пробы добавляют эритроцитарную массу в количестве

50 мкл.

Затем приготовляюч контрольную пробу. К 5 мл чистого изотонического раствора (физиологический раствор, приготовленный на бидистиллированной воде) добавляют 50 икл эритроцитапной массы.

Затеи цр } ™цк)б.:. уют 15 ицн при температуре 23 С. а

После ипкубирования взвеси эритроцитов в контрольной и исследуемой

2 (57) Изобретение относится к медицине, s частности к определению токсичности воды; Целью изобретения является упрощение способа. Это достигается тем, что в качестве тест-объекта используются эритроциты. которые после инкубации в изотонических растворах эталонной и исследуемой жидкостей выдеркивают до полного геиолнза при 55-65 С, о измеряя оптическую плотность обеих проб. Затеи по полученным данным находят время FT50, в течение ко орого разрушается 507 эритроцитов, а 1носительную токсичность исследуеиой;ид кости определяют по фооиуле. 1 ил. пробах эритроциты выделяют из растворов посредствои центрцЬугирования в течение 10 мин при ускорении 5 г,. После центрибугирования надосадочную жидкость в обеих пробах удаляют и доливают чистый физиологический раствор до прежнего объеиа.

Затеи 1 ил контрольной пробы поиещают в кювету.для спектрофотометрии о

° и нагревают до 58 С, изиеряют величину пропускания Т (,".) луча света (пои длине волны 67 ) нм) через кювету

4 с пробой до момента полного гемолиэа.

Полученные данные регистрируют, например, в вице графика зависимости величины пропускания T от вреиени термического воздействия на эритроАналогичные действия проводят с исследуемой пробой.

17075

Концентрация токсиканта в модельных растворах, мг/л, по способу

Токсикант известному предлагаемому

Нитрат серебра

Медный купорос

Хлороформ

1,3

0,9

1,6

2980,0

1,0

1290,0

Затем определяют ЕТ О (опыт) и

ЕТ50 (контроль) — время, в течение которого происходит гемолиз 5АХ эри- троцитов в растворе. Графически эта величина представляет собой проекцию инфпексной точки кривой, отражающей функциональную зависимость величины пропускания Т от времени на ось абсцисс.,10

Относительную токсичность S исследуемой жидкости определяют по формуле

ЕТ50 ьяыт

ET50K4HTpohb где ET50<„b,z - время гемолиза полови- 15 ны эритроцитов в конт- рольной пробе;

ЕТ50 контроль — время гемолиза утоловины эритроцитов в иссле- дуемой жидкости. 10

Относительная токсичность S в данком примере согласно приведенной выше формуле равна . 980 с

S — — — =2,45.

400 с ?5

Значения ЕТ50одыг- (980 с) и ЕТ50 контроль (400 с) взяты иэ графика проведенного исследования.

В таблице приведены сравнительные результаты определения ЕТ50 митохонд- 30 риальным (известным) и эритроцитарным

37

4 . е (предлагаемым) тестами для некоторых веществ.

Статистический анализ показал, что между значениями ЕТ50, полученными этими двумя тестами для веществ, приведенных в таблице, существует прямая скпьная корреляция (г=0,99), т .е . результаты предложенного теста xopoего сопоставимы с известными и достаточно распространенными методами определения токсичности воды, а главное, по чувствительности не уступают таковым. формула изобретения

Способ определения токсичности жидкости путем инкубирования тест-объек-, та в исследуемой и контрольной жидкостях с последующей спектроскопией, отличающийся тем, что, с цельюупрощения способа, в качестве тест-объекта используют суспензию эритроцитов в изотоническом растворе, инкубируют при 55-65 С, измеряют оптическую плотность обеих проб во время гемолиза, определяют время разрушения 507 эритроцитов в обеих пробах и по отношению времени разрушения 507 эритроцитов в опытной и контрольной пробах рассчитывают относительную токсичность исследуемой жидкости.

1707537

Редактор Н.Лазаренко

Ъаказ 264 Тирах Подписное

ВЫПИ Госу.

113035, Москва, ri(-35 ° Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул. Гагарина, 101

Т%

Составитель В.Мйтюшин

Техред М,Моргентал Корректоо М.Самборская