Способ определения течения травматического шока

 

Изобретение относится к медицине, а именно к паталогической физиологии, и может быть использовано для прогно- ;зирования течения и исхода травматического шока. Целью изобретения является упрощение при сохранении точности и ускорении способа. Поставленная цель достигается тем, что в плазме крови определяют активность адг.нилатдезаминазы (А.МФ-амино гидрола.зм, КФ 3.5.4.6) и при увеличении этого показателя до 400% по сравнению с исходным уровнем прогнозируют менее тяжелые течения травматического шока . (без летального исхода), а при увеличении от 400% и выше - тяжелое необратимое течение шока с развитием лет тального исхода. Использование данного способа позволит повысить точность прогнозирования течения шока до 100% и значительно сократить длительность осуществления способа по сравнению с известным. 3 табл. с ю

, Ф о в

4 ,в

;в0 .дд7хя.

СО1СЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН

А1 (51)5 Гх 01 N 33/68

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ!

1 в (г

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ

r1P ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯм

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4644960/14 (22) 02 ° 02. 89 (46) 23.01. 92. Бюл. ?? 3 (71) Кишиневский государственный медицинский институт (72) В.С.Гудумак, В.П.?1арченко и В.И.Нигуляну (53) -615 . 47 5 (088. 8) (56) Патологическая физиология и экспериментальная терапия, 1980, ?? 5, с. 20-? . (54) СПОСОБ ОПРЕ, !1ЛЕ161Я ТЕЧГШ?Я

TPABNATH×ÅÑÅ0ÃÎ 1 ?ОКА (57) Изобретение относится к медицине, а именно к паталогической физиологии, и может быть использовано для лрогно; зирования течения и исхода травматического шока. Целью изобретения являИзобретение относится к медицине, а именно к патологической физиологии, и может быть использовано для прогнозирования течения и исхода травматического шока.

Целью изобретения является упрощение способа при сохранении точности и ускорении его.

Способ осуществляют следую, им образом.

У животных проводят в условиях .наркоза подготовку к опыту и после выхола их из наркотического состояO г ния вызывают шок «п методу Кеннона (нанесение каждс явотному с динаковой травмы, приводящей к размножению мягких тканей бедра без разрыва кожных покровов и перелома кости). До и сразу после травмы забирают по

2 ется упрощение при сохранении точности и ускорении способа. Постанленьая цель достйгается тем, что в плазме крови определяют актинность адснилатдезаминазы (А?1Ф-аминогидролаэы, КФ 3.5.4.6) и при увеличении этого показателя до 400% по сравнению с исходным уровнем прогнозируют менее тяжелые течения травматического шока . (без летального исхода), а при увеличении от 4007. и вьые — тяжелое Hc обратимое течение шока с развитием летального исхода. Испольэонание данного способа позволит повысить точност" прогнозирования течения шока до 1007. и значительно сократить длительность с осуществления способа по сравнению с известным. 3 табл. в

0,1 мл периферической крови и отделяют плазму центрифугированием. Затем : из каждой пробы дважды переносят в отдельные микропробирки по 0,02 мл ппаэмы (h - 1 — опыт, Ф ? — контроль), в которых оорвдеввют вктихнооть вропил1хЫ атдезаминазы. Для этого опытные пробы + инкубируют 30 мин прч 37 С с субстратно-буферным раствором, содержащим субстрат (аденозинмонойосфат), активато" ры аденилатдезаминазы (аденозинтрифосфат, ионы магния и калия) и фосфатный буфер (рН 7,4). Количество аммиака, образовавшегося под нл"пни . эдеI нилатдезаьн назы из адово;:,и ...ë.l ", .-.-.,.-.— та, выявляют с помощью цнетнои Лево iнитропруссид-гипохлоритной реакции

Бертло, для чего н каждую пробу последовательно добавляют реактив ? " 1 (вод3

1707543

Как видно иэ табл. 1 — 3 активность аденилатдеэаминаэы у 14 животных (9 1, 3, 5-8, 10, 11, 13-16, 19 и 2 ÔJ составляет =разу после травмы 41 5-о!0 - но сравнению с нсходньм уровнем до травмы и в Дальнейшем животные погибают (группа 2).

Таким образом, увеличение активности аденилатде аминазы сразу после

50 ный раствор нитропруссида натрия и фенола) и реактив - 2 (водный раствор гипохлорита натрия и На РО4 12HzO) и инкубируют 30 мин при 37 С. Опытную пробу колориметрируют против контрольной на спектрофотометре при длине волны 600 нм. Количество аммиака определяют по калибровочному графику.

Активность аденилатдезаминазы выража- jp ют в мкмоль образовавшегося аммиака на 1 л плазмы крови за 1 с (мкмоль/ni c), c

Исследование было проведено на

20 самцах белых крыс. Результаты определения активности аденилатдезаминазы 15 прецставлены в табл. 1, а данные ранжировки животных в зависимости от степени увеличения активности аденилатдезаминазы — в табл. " и 3

Как видно из табл. 1 — 3, активность аденилатдезаминазы у 6 животных (И 2, 4, 9, 12, 17 и 18) составляет сразу после травмы 283 — 395% по сравнению с исходным уровнем до травмы и . в дальнейшем животные выживают (груп- 25 па 1). Таким образом, увеличение активности аденилатдезаминаэы сразу после травмы в пределах 283 — 395% по сравнению с исходнь уровнем позволяет прогнозировать у 6 ж.вотных разви- 30 тие менее тяжелого течения травматического шока без летального исхода.

Действительно, у животных этой группы артериальное давление (АД) во время травмы и сразу после нее,поднималось до 140 мм рт.ст., затем упало до

70 мм рт.ст, незначительно колебалось на этом уровне, затем имело тенденцию к росту и по истечении 1 — 2,5 ч АД стабилизировалось на субнормальном 40 уровне — 100 мм рт.ст. В дальнейшем у животных нормализовались внешние рефлексы и АД. Все животные через 2

4 ч вышли из шока и при наблюдении до

48 ч продолжали жить, что свидетель- 45 ствует о развитии у всех животных этой группы менее тяжелого и обратимого течения травматического шока без летального исхода. травмы в пределах 415-61 % по сравнению с исходным уровнем позволяет прогнозировать у 14 подопытных животных развитие тяжелого необратимого течения травматического шока (с летальным исходом).

Действительно, у животных этой группы артериальное давление во время травмы и сразу после нее поднималось до 145 мм рт.ст., затем упало

pо 60 мм рт.ст., на этом уровне наблюдались в течении 12-20 мин неустойчивые колебания АД в пределах

+15 мм рт.ст., затем АД имело тенденцию к увеличению и стабилизировалось на уровне 85-9Q мм рт.ст., но уже через 1-3 ч снова стало прогрессивно падать и через 0,5-2 ч развилось терминальное состояние. Через 3-5 ч от начала травмы у 1 животных наступил летальный исход, а остальные 4 крысы погибли позже в течение одних суток после травмы, что свидетельствует о развитии у всех животных этой группы более тяжелого и необратимого течения травматического шока с летальным исходом.

Таким обра"=.1л, увеличение сразу после травмы активности аденилатдеэаминазы до 400% по сравнению с исходным уровнем указывает на компенсируемую гипотонию, которая купируется и шок характеризуется менее тяжелым течением (без летального исхода), а при увеличении от 400% и выше — указывает на некомпенсируемые нарушения гемодинамики, что свидетельствует о развитии тяжелого необратимого течения травматического шока с развитием летального исхода.

Пример 1. У самца белой крысы массой 215 r (опыт У 17) осуществляют подготовку к опыту, моделирование шока и определение в плазме крови активности аденилатдеэаминазы по описанной методике. Как видно из табл.1 и 2, активност аденилатдеэаминаэы в плазме крови животного до травмы определена в 0,349 мкмоль/л с, а сразу после травмы — 1,377 мкмоль/л с, т.е. составила 395% по сравнению с исходньс у .овнем. Так< е увеличение активностн аде.н1!..aò,",ñ ë.ïn,a.,.:.ñ во .llло прогноэир1вать у животного раэвити» менее тяжелого и обратимого течения травматического шока без летального исхода.

1707543

Действительно, у этого животного артериальное давление во время травмы и сразу после нее поднималось до

140 мм рт.ст., затем упало до 70 мм рт.ст., незначительно (< 5 мм рт.ст.) колебалось на этом уровне, затем имело тенденцию к росту и по истечении

3 ч АЛ стабилизировалось на субнор-, мальном уровне — 100 мм рт.ст. В даль- р нейшем у животного нормализовалисьвнешние рефлексы и артериальное дав.ление. г пвотное через 5 ч вьлпло иэ шока и при на11людении до 48 ч продолжало жить, 15

Пример 2. У самца белых крыс массой 180 r (опыт Р 3) осуществляют подготовку к опыту, моделирование шока и определение в плазме крови активности аденилатдеэаминазы так, как ука-20

sano в примере 1. Как видно нэ табл. 1 и 2, активность аденилатдезаминазы в плазме крови животного до травмы определена в 0,423 мкмоль/л.с, а сразу после травмы — 1,756 мкмоль/л с, 25 т.е. составила 415К исходного уровня.

Такое увеличение активности аденилатдезаминаэы по сравнению с исходным уровнем позволило прогнозировать у животного развитие тяжелого необрати- 3р мого течени1 травматического шока с

° летальным исходом.

Действительно, у этого животного артериальное давление во время травмы и сразу после травмы поднималось до

140 мм рт .ст ., затем снижалось до

60 мм рт.ст., на этом уровне наблюдались в течение 15 мин неустойчивые колебания АД в пределах 1 l мм рт.ст., затем Kl имело тенденцию к увеличе- 4р нию и стабилизировалось на уровне

80 мм рт.ст. в течение 7 ч, после чего

Т а блица 1

Опыт аденилатдезаминазы в плазДо травмы Сразу после травмы

443

307

386

574

442

2,633

1,491

1,756

1,278

1,756

2,633

2,369

2,633

0,595

0,485

0,423

О, 331

0,238

0,459

0,544

0,595

2

4

6

Показатели активности ме крови, мкмоль/л с стало про грессив но снижаться до

35 мм рт.ст. и развилось терминальное состояние. Через 9 ч от начала травмы наступил JTPTaJIbnbTA исход.

Таким образом, предлагаемый способ позволяет уже в раннем посттравматическом периоде определять течение травматического шока и его исход. Целесообразность.применения предлагаемогр способа в сравнении с известным обусловлена упрощением способа (так как для его выполнения требуется определение лишь одного показателя — аденилатдезаминаэы в объеме 20 мкл плазмы крови в течение 60 мин), возможностью раннего прогнозирования тяжести течения и обратимости травматического шока, поиска и проверки средств адекватной патогенетической терапии, что значительно может помочь в лечении травматического шока, особенно его тяжелых форм..

Использование данного способа позволит повысить точность прогнозирования течения кока до 100Х и значительно сократить длительность осуществления способа по сравнению с иэ-, вестнь

Формула иэо бретения

Способ определения течения травматического шока путем биохимического исследования крови, о т л и ч а юшийся тем, чего, с целью упроцения при сохранении точности и ускорении способа, определяют активность аденилатдезаминазы .и при увеличении ее íà, 400Х и выше определяют yrpo woщее жизни течение шока.

1707543

Продолжение табл.1

Показатели активности аденилатдезаминазы в плазме крови, мкмоль/л с

До травмы Сразу по- К*, Х сле травмы

ИсхОд жизни

*К вЂ” степень повышения активности аденилатдезаминазы сразу после травмы по отношению к исходному до травмы.

Т а. б л и..ц. а 2

Опыт* Повышени активности аденилатдезаминазы, мкмоль/л.с о травмы Сразу после К, 7 травмы

Исход жизни

2 °

17

3 .

20

19

1О

15

5 Результаты приво;,ятся в порядке увеличения процента активности аденилатдезаминазы по сравнению с исходным уровнем до травмы (К).

11

12.

13

14

16

17

18

19

0,472

0,447

0,389

0,423

0,513

0,389

0,400

О, 389

О, 349

0,331

0,459

0,447.

0,472

0,423

0,485

0,331

0,331

0,349

0,423

0,513

0,544

0,447

0,595

0,595

09459

0,389

0,447

0,389

0 400

0,389

0,459

0 ° 288

1,337

2,215

1,950 1,278

2,215

1,892

2, 105

2, 105

1, 377

1,227

2,215

1, 950

1,337

1,"78

1,491

1,227

1,278

1,377

1,756

2,215

2,369

1,950

2,633

2,633

2,215

1,892

2,215

1,950

2,105

2,105

2, 633

1,756

283

496

501

302

432

486

526

541

371

483

436

283 . +

302 +

307 +

371 +

386 +

395 +

432

436

442

443

483

486

496

501

526

541

574

610

1О

1707543

Та блица 3

К, 7

Группа Количество животных

Сразу после травмы

До травмы

*Достоверные различия между группами 11 1 и Р 2 по критерию Стьюдента t.

**Достоверные различия с контролем (до травмы) по критерию Стьюдента t.

Составитель А.Л>лчкова

Техоед М.Моргентал Корректор A.Обручар

Редактор Н. Ia.".аренко

Заказ 264 Тираж Подписное

BHHHIIH Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Paymcкая наб., д. 4/5

Пронзволственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина, 101

6

0,398 0,029*

0,45240,023*

1, 331+0,039*"

2 ю 17 3 0 ч 082**

334

481