Способ определения активности репаративного процесса при язвенной болезни желудка и 12-перстной кишки

 

Использование: в области медицины, а именно для оценки эффективности лечения язвенной болезни. Сущность изобретения: определяют микроскопически в слизистой оболочке гастродуоденальной зоны наличие тучных клеток продолговатой формы, вытянутых по базаяьной мембране, и секретируемых ими веществ в базальной мембране ямочного эпителия желудка и крипт двенадцатиперстной кишки и при их наличии определяют процесс как активный Способ прост в исполнении и имеет точность 82%

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (5 )5 6 01 N 33/48

ГОСУДА Р СТВ Е ННЫ Й КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4859424/14 (22) 13.08.90 (46) 30.10.92, Бюл. N 40 (71) Нижегородский государственный медицинский институт им. С.M. Кирова и Нижегородский научно-исследовательский педиатрический институт (72) В,Ф. Новиков, П,П. Потехин, И.П. Василевская и С.С. Куликов (56) В.М. Успенский и др. Тучные клетки как критерий активности репаративных процессов при язвенных поражениях желудка (Архив патологии. — 1980, Гч . 6, с. 14-18, Изобретение относится к области медицины, а именно к терапии, и может быть использовано для оценки эффективности лечения язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки.

Важнейшими критериями эффективного лечения язвенной болезни является скорость заживления язвы и предотвращение рецидивов. а система оценки должна быть основана на наборе адекватных показателей, позволяющих объективно судить о качестве проводимого лечения. В настоящее время таких критериев разработано недостаточно.

3а прототип предлагаемого изобретения выбран известный способ определения активности репаративного процесса при язвенных поражениях желудка, включающий определение тучных клеток в собственной пластинке слизистой.. Ж,» 17727 Я А1 (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ РЕПАРАТИВНОГО ПРОЦЕССА ПРИ

ЯЗВЕННОЙ БОЛЕЗНИ ЖЕЛУДКА И 12ПЕРСТНОЙ КИШКИ (57) Использование; в области медицины, а именно для оценки эффективности лечения язвенной болезни, Сущность изобретения: определяют микроскопически s слизистой оболочке гастродуоденальной зоны наличие тучных клеток продолговатой формы, вытянутых по базальной мембране, и секретируемых ими веществ в базальной мембране ямочного эпителия желудка и крипт двенадцатиперстной кишки и при их наличии определяют процесс как активный, Способ прост в исполнении и имеет точность 82%.

Способ заключается в том. что oc) ствляется гистохимическое и морфометрическое изучение тучных клеток. Для зтп <. кусочки слизистой оболочки желудка фиксируют 10;ь нейтральным формалином забуференным по Лилли и заливают в парафин.

Срезы толщиной 5 мкм окрашивактт гематоксилином и зозином. Идентификацию тучных клеток осуществляют методом окраски основным коричневым по М.Г. Шубину, НΠ— толуидиновым синим после кислотного гидролиза и ШИК-реакцией. Тучные клетки дифференцируют по степени зрелости (зрелые, средней зрелости и юные1, по степени дегрануляции (максимально дегранулированные, частично дегранулированные, максимально гранулированные) и подсчитывают на площади измерения 1 мм .

Предлагаемый способ позволяет установить активный репаративный процесс в рубцующейся язве при наличии значитель 1 772748 ного увеличеНия количества тучных клеток.

При этом в крае рубцующейся язвы менее выражена тенденция у "омоложению" тучных клеток и характерно увеличение количества зрелых тучных клеток с гранулами, насыщенными мукополисахаридами.

Исследование тучных клеток в слизистой оболочке желудка и s крае язвы может быть способом оценки активности репаративных процессов, эффективности лечебных мероприятий, решением вопросов прогнозирования рубцевания язвы и дальнейшего течения заболевания. Однако при использовании этого способа оценки активности репаративного процесса определением количества тучных клеток на 1 мм слизистой трудно выявить, где нижняя граница цифровых показателей активно протекающей репарации и верхняя граница процесса текущего замедленно (372 и 68,4 и 281 +. 49), так как количество клеток имеет больший размах колебаний от средних цифр, Сам количественный подсчет требует значительных временных затрат, определенных условий, кроме того. что еще необходима классификация тучных клеток по степени зрелости) зрелые, средней степени зрелости, юные) и по степени дегрануляции (максимально дегранулированные, частично гранулированные,максимально гранулированные/, и только при сопоставлении целого комплекса количественных и качественных показателей можно судить об активности репаративного процесса. Подобные анализ особенно затруднен в практике изучения биоптатов слизистой, полученных у детей как из-за меньших размеров биоптатов, так и иэ-за более строгих показаний к получению биопсий.

Целью изобретения является повышение точности и упрощение способа.

Поставленная цель достигается тем, что в известном способе определения активности репаративного процесса при язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки, включающем определение тучных клеток, определяют наличие тучных клеток продолговатой формы (вытянутых по базальной мембране и секретируемых ими веществ в базальной мембране ямочного эпителия желудка и крипт двенадцатиперстной кишки.

Способ осуществляется следующим образом:

Депарафинированные срезы помещают в раствор красителя на 1 ч.

Раствор красителя: основной коричневый — 0,5 r, этиловый спирт 96 — 80 мл, 5

55 соляная кислота 1 Н вЂ” 20 мл, Перед употреблением раствор красителя фильтруют, После часовой экспозиции в красящем растворе, препарат извлекают и проводят последовательно через три порции 70О спирта по 1 минуте в каждой, просветляют в ксилоле и заключают в бальзам.

Срез микроскопируют с использованием иммерсионного объектива. Находят вытянутые по длине баэальной мембраны тучные клетки и продукты их реакции в виде цепочек гранул. При их наличии прогнозируется отсутствие рецидивов и завершение регенерации

Пример 1. Больная И. 12 лет, поступила с диагнозом; язвенная болезнь двенадцатиперстной кишки, язва луковицы двенадцатиперстной кишки в стадии t I.

Динамический эпикриз через 18 дней после поступления. Проводится курс лечения антицидными препаратами, карнитином. Учитывая, что самочувствие ее не нарушено, активна, аппетит хороший. жалоб за время наблюдения не было, язык влажный чистый, живот безболезненный, доступен глубокой пальпации, решено раньше окончания курса лечения провести контрольную гастрофибродуоденоскопию, желудочное зондирование.

На контрольной гастрофибродуоденоскопии на 22 день хорошая положительная динамика. 8 срезах, полученных из биоптата луковицы двенадцатиперстной кишки легко выявляются тучные клетки продолговатой формы вытянутых по базальной мембране и секретируемые ими вещества в базальной мембране отдельных крипт. Контрольный осмотр через три месяца; жалоб нет. По результатам гастрофибродуоденоскопии не отмечено эрозивных проявлений.

П р им е р2, Больная Ш. 9 лет, поступила с диагнозом; хронический гастродуоденит; ожирение И ст.

На 4-й день проведена фиброгастродуоденоскопия: Пищевод свободно проходим, кардия смыкается полностью. Слизистые кардии умеренно гиперемированы. 8 желудке натощак обычное количество жидкости с примесью небольшого количества слизи. Тонус желудка резко повышен.

Складки утолщены„расправляются плохо.

Слизистые тела и антрального отдела желудка бледно-розовые с неровным микрорельефом. Привратник сомкнут не полностью. Складки его утолщены. слизистые привратника бледно-розовые. Луковица двенадцатиперстной кишки деформирована. На месте язвенного дефекта на передней стенке локализуется в углублении участка грануляционной ткани.

1772748

35

Складки вокруг места дефекта утолщены, до конца не расправляются, умеренно отечны.

Непосредственно у места дефекта слизистая гиперемировэнэ. Слизистые остальной части двенадцатиперстной кишки бледнорозовые. Тонус двенадцатиперстной кишки повышен. При прохождении бульбодуоденального перехода отмечается болезненность, прохождения затруднено.

Заключение: Язва луковицы двенадцатиперстной кишки в ст. 11. Луковица двенадцатиперстной кишки деформирована.

Хронический гэстродуоденит вне обострения, B результате проведенного лечения (режим, диета, отвары трав, витамины, антациды, гастрофарм, викалин, растительное масло, новокаино-атропиновая смесь, ношпа, молоко, тум, лактобэктерин, фенкарон) девочка выписывается домой в удовлетворительном состоянии. Болей в животе нет.

Живот мягкий, безболезненный, доступен глубокой пальпации. Выписана на 37-ой ден ь.

Данные фиброгэстродуоденоскопии, полученные перед выпиской: Язва луковицы двенадцатиперстной кишки в ст, III. Луковица двенадцатиперстной кишки деформирована. Хронический гэстродуоденит вне обострения.

При анализе срезов, полученных из биоптата луковицы двенадцатиперстной кишки, окрашенных основным коричневым по

М.Г. Шубичу, тучных клеток и сектерируемых ими веществ на протяжении базальной мембраны не определяется

При амбулаторном осмотре у девочки при проведении зндоскопического обследования выявлен зрозивный бульбит, Пример 3. Больной 33 лет, поступил с диагнозом; язвенная болезнь двенадцатиперстной кишки в стадии обострения.

При проведении фиброгэстродуоденоскопии на задней стенке луковицы двенадцатиперстной кишки выявили дефект около

1 см в диаметре с дном, покрытым фибрином. Данные гистологического исследования свидетельствуют о наличии диффузного диоде нита. Л эбо рэто р но-биохимические исследования крови и мочи не выявили отклонений от нормы.

B результате проведенного комплексного лечения с включением эндоскопической фототерапии с помощью широкополосного фильтра КС вЂ” 10 состояние улучшилось, болевой синдром полностью ликвидировался, При фиброгэстродуоденоскопии, проведенной на

20 день от начала лечения выявлена полная эпитализация дефекта. Качественное изучение тучных клеток в срезах из биоптата двенадцатиперстной кишки, окрашенных основным коричневым по M.Ã. Шубичу свидетельствует о нахождении тучных клеток продолговатой формы и секретируемых ими веществ в бэзальной мембране отдельных крипт.

При контрольном вызове через 1.5 года больной жалоб не предъявляет.

Было обследовано 20 человек с язвенной болезнью двенадцатиперстной кишки,„

8 человек с язвенной болезнью желудка (взрослых) и 16 больных детей в возрасте от

9 до 14 лет, имеющих язвенную болезнь двенаДцатиперстной кишки. 8зрослые больные получали сеансы фототерэпии некогерентным красным светом, дети получали медикаментозное лечение по общепринятой методике. У 2 из 20 больных с язвенной болезнью двенадцатиперстной кишки на 17 день лечения в биоптате на фоне содержания тучных Клеток в собственной пластинке слизистой не обнаружено наличие тучных клеток продолговатой формы вытянутых по базальной мембране в основании крипт двенадцатиперстной кишки, Через

6 месяцев у Iбольного возник рецидив,,у 2-го больного — хирургическое осложнение. Из 8 больных с язвенной болезнью желудка у 1 больного в биоптатах, полученных на 17 и 21 день тучные клетки в слизистой желудка были единичные, Улучшения нет. У 2-го больного с аналогичными показателями через месяц после лечения был диагностирован гастрит пересгройки, что свидетельствовало об ухудшении структуры слизистой с явлениями атрофии. Из 16 человек детей у двоих при контрольных эндоскопических исследованиRx по выписке из стационара в биоп1атах, полученных из луковицы двенадцатиперстной кишки, не обнаружено тучных клеток продолговатой формы в криптальном слое двенадцатиперстной кишки. Через три месяца при амбулаторном исследовании эндоскопически обнаружены эрозивные дуодениты.

У всех остальных больных в базальной мембраны отдельных крипт двенадцатиперстной кишки легко выявляются тучные клетки продолговатой формы и секретируемые ими вещества, способствующие стабилизации баээльной мембраны.

Способ прост в исполнении, не требует сложных математических подсчетов, дорогих реактивов. Точность способа 82, Формула изобретения

Способ определения активности репаративного процесса при язвенной болезни желудка и 12-перстной кишки путем микроскопического исследования тучных клеток в слизистой оболочке гастродуоденэльной зо1772748

Составитель П.Потехин

Техред M.Моргентал Корректор Jl.Ëивринц

Редактор A.Бер

Заказ 3844 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035. Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул.Гагарина, 101 ны, отличающийся тем,.что, с целью ные клетки вытянутые по бэзальной мембповышения точности и упрощения способа, ране и при их наличии определяют процесс в слизистой определяют стромальные туч- как активный,