Способ прогнозирования течения ретинобластомы после энуклеации

 

Использование: в медицине, в, частности к офтальмологии. Сущность изобретения: проводят исследование тканей опухоли, при этом высушенную до постоянного веса ткань опухоли исследуют методом рентгеноструктурного анализа, определяют процентное содержание апатита в ней и при его значении 4% и менее прогнозируют благоприятное течение, а при значении более 4% - неблагоприятное. Способ позволяет повысить точность прогноза течения ретинобластомы. 2 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (5!)5 G 01 N 33/48

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОП ИСА 1 И Е ИЗОБРЕТЕ НИ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4809073/14 (22) 19.02.90 (46) 15.11.92. Бюл. М 42 (71) Казахский научно-исследовательский институт глазных болезней (72) Ж.Г.Мустафина, Г.А.Дьякова, P.3.Галимова и Б,А.Савостин (56) Дыбов С. Ретинобластома, — София, Медицина и физкультура, 1975, 234 с. (54) СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ТЕЧЕНИЯ РЕТИНОБЛАСТОМЫ ПОСЛЕ ЭНУКЛЕАЦИИ

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмоонкологии и может быть использовано для прогнозирования клинического течения ретинобластомы.

Известны клинико-инструментальные способы клинического прогнозирования . ретинобластомы, включающие рентгенографию, диафаноскопию. эхографию, изотопную диагностику. Тем не менее труднО установить дифференциальный диагноз заболеваний, напоминающих ретинобластому и заболеваний, за которыми может скрываться ретинобластома.

Клинический прогноз ретинобластомы данными методами весьма затруднителен.

Известен способ прогнозирования клинического течения ретинобластомы путем иссечения ткани опухоли из энуклеированных глаз, приготовление образца химическим путем, а именно сжиганием ткани в атмосфере кислорода воздуха в муфельной печи при температуре 450 С, смешением золы с броми Ы 1775669 А1 (57) Использование: в медицине, в, частности к офтальмологии. Сущность изобретения: проводят исследование тканей опухоли, при этом высушенную до постоянного веса ткань опухоли исследуют методом рентгеноструктурного анализа, определяют процентное содержание апатита в ней и при

его значении 47б и менее прогнозируют благоприятное течение, а при значении более.

4 — неблагоприятное. Способ позволяет повысить точность прогноза течения ретинобластомы. 2 табл.

Фн ие

3 стым калием и исследовании полученной смеси методой ИК-спектроскопии, Соглас- но данным авторов более неблагоприятно- . му прогнозу ретинобластомы соответствуют образцы, содержащие в своем составе двухи однозамещенные фосфаты кальция. Однако данные о том, какие именно заместители «в присутствуют в составе фосфатов авторами не приводятся. Помимо этого, из-за присутствия в анализируемых образцах соли галоида, бромистого калия, на наш взгляд, представляетсязатруднительным идентификацию галогеновых заместителей. Более Ch благоприятному клиническому течению ре- ЧО тинобластомы соответствует присутствие в анализируемых образцах трехзамещенного

° ввеВ фосфата кальция.

Из литературных данных известно, что в природе встречаются два вида трехзамещенного кальция — зто витлоктит Р-Саз(Р04)2 и аморфный фосфат кальция Саэ(Р04)2. ()ба этих минерала являются метастабильными соединениями даже в обычной среде при РН 7,0, 1775669 легко гидролиэуются с образованием гидроксилапатита Cag(P04$0H. Обнаруживаются данные минералы в магматических породах, т.е. образованных в жестких условиях (высокая температура, давление). Следовательно существование трехзамещенных фосфатов кальция в тканях опухоли при обычных условиях вызывает сомнение. Очевидно зарегистрированные автором трехзамещенные фосфаты кальция образовались при приготовлении образцов во время озоления проб при 450 — 500 С в атмосфере кислорода воздуха.

ИК-спектроскопия является эффективным методом анализа и определения структуры оргаНических соединений и значительно Менее пригоден в случае соединений фосфбра. Неорганические фосфаты, как правило, не всегда дают хорошие результаты при И К-спектроскопии.

Известен способ прогнозирования клинического течения ретинобластомы путем исследовэния морфологическим методом, взятый нами за прототип. Основными критериями злокачественности являются форма, размер опухоли и склонность к прорастанию в соседние ткани. В случае смешанной формы ретинобластомы, где могут присутствовать как дифференцированные. так и недифференцированные клетки, визуально определить преобладание одних над другими порой бывает трудно, особенно, когда опухоль находится в начальной стадии развития и еще не проросла в близлежащие ткани. Правильно прогнозировать клиническое течение заболевания патогистологу бывает затруднительно.. Целью предполагаемого изобретения является повышение точности клинического прогноза ретинобластомь1, Поставленная цель достигается путем исследования кристаллической фазы ткани опухоли методом рентгеноструктурного анализа. Методика эксперимента заключается в следующем: свежий нефиксированный опухолевый материал помещается между двумя предметными стеклами, на которые накладывается груз весом 300 гр.

Опухолевая ткань равномерно расплющивается и высушивается в термостате до постоянного веса при температуре 37 С.

Сухую ткань тщательно растирали в агатовой ступке и в количестве 0,02 г. исследовали на дифрактометре Дроп-2 с медным излучением, длина волны равна 1,54051, фильтр никель, площадь исследуемой поверхности - 1,5 см . Межплоскостные расстояния рассчитывали по формуле

Вульфа-брегга.

Исследовались образцы опухолевой ткани ретинобластомы. В результате исследования установлено, что образцы тканей опухоли ретинобластомы содержат минерал фтор-апатит CaQPO4)gF. Идентификация данного соединения и сравнение проводились по известным методам. Межплоскостные расстояния d и интенсивности наиболее сильных рефлексов в усл. ед. представлены в табл. 1.

Из табл, 1 видно, что наибольшей интенсивностью обладает рефлекс при межплоо скостном расстоянии d= 2,798 А. Он был взят в качестве основного критерия оценки содержания фтор-апатита в ткани ретинобластомы. Исследованные образцы опухолевой ткани ретинобластомы смешанного типа, i, ll, Ш, И стадий развития. Установлено, что большей степени злокачественности опухоли соответствует большая интенсивность рефлекса при d = 2,798 Я фтор-апатита и большая степень совершенства кристаллов минерала (большая информативность рентгенограммы). Установлена корреляция между клеточным составом ретинобластомы, интенсивностью сильного рефлекса о фтор-апатита при d = 2,798 А и степень злокачественности. Степень злокачественности поданным авторов, не всегда зависит от стадии развития опухоли. В табл, 2 представлена зависимость различного клеточного состава тканей ретинобластомы смешанного типа от интенсивности рефлеко са фтор-апатита при d = 2,798 А.

В тканях ретинобластомы смешанного типа 1 — И стадий развития, содержащих солидные поля и псевдорозетки и истинные розетки, где преобладают солидные поля рефлекс при d = 2,798 А имеет наибольшую интенсивность, а именно 16,25 + 3,7 усл. ед.

В опухолевых тканях ретинобластомы смешанного типа, где превалируют псевдоо розетки рефлекс при d = 2,798 А снижается и имеет значение 8,0 +. 1,41, В опухолевых тканях ретинобластомы смешанного типа, где превалируют истинные розетки интено сивность рефлекса при d = 2,798 А составляет4,33 + 0,47усл. ед.

Предлагаемый способ отличается .от прототипа тем, что прогноз заболевания ретинобластомы устанавливается путем исследования высушенных до постоянного веса опухолевых тканей на дифрэктометре

Дрон-2 с медным излучением, длина волны равна 1,54051, фильтр никель. площадь ис1775669

d А

l,óñë.ед

3,060

1,930 1,720

2 2

3,430

2,702

2,769

2,798

d, А

l,óñë.ед о

d,А

l,óñë.åä

2,769

2,702

2,798

7 следуемой поверхности равна 1,5 см . Межплоскостные расстояния рассчитывались по формуле Вульфа-Брегга.

Пример 1. Больной С-в, 1 год 10 месяцев. ист. б-зни 3296 за 1989 r. пр. 5

М 1899-1908. Клинический диагноз: ретинобластома правого глаза. Энуклеация произведена 10 августа 1989 г, Патогисто2,798 2,769 2,702

13 10 7

В состав кристаллической фазы образца входит фтор-апатит с интенсивностью силь- 15 ного рефлекса 13 усл, ед. Опухоль очень злокачественная, превалируют солидные поля.

П ример 2. Больной К-р,3,5мес.0, Ист. б-зни М 3156 за 1989 r, пр М 1884-93. Кли- 20 нический диагноз: ретинобластома левого

В состав кристаллической фазы образ-, ца входит фтор-апатит с интенсивностью сильного рефлекса 13 усл, ед. Превалируют солидные поля. Опухоль очень злокаче- 30 ственная, хотя имеет небольшой размер и не проросла в близлежащие ткани.

Пример 3. Больная В-ч, 6 л. Ист. б-зни М 2214 эа 1989 г. пр, hL 1325-34.

Клинический диагноз: ретинобластома 35

В состав кристаллической фазы образца входит фтор-апатит с интенсивностью сильного рефлекса 7 усл. ед. Опухоль злокачественная.

Пример 4. Больной К-а. 5 лет, Ист. 45 б-зни 2415 за 1989 г. пр. М 16-65. Клинический диагноз: ретинобластома правого глао

d А 2,798 2,769 2,702

l,óñë.ед 7 6 4

В состав кристаллической фазы образца, входит фтор-апатит с интенсивностью сильного рефлекса 7 усл. ед. Опухоль злокачест- 55 венная, хотя имеет небольшой размер и не проросла в близлежащие ткани.

Пример 5. больная Н-а, 7 лет, Ист. б-эни N 1538 за 1989 г. Пр % 947-56. логический диагноз: ретинобластоMа сетчатки, нед 1фференцированный тип с инфильтрацией сосудистой оболочки, внутренних слоев склеры и ствола зрительного нерва не достигая линии отсечения, lV стадия.

Результаты рентгеноструктурного анализа.

3,430 3,060 1,920 1,720

7 3 2 0 глаза. Энуклеация произведена 4 августа

1989 г. Патогистологический диагноз: ретинобластома сетчатки, недифференцированный тип, с инфильтрацией диска зрительного нерва, не достигая ламина криброза, l стадия, Результаты рентгеноструктурного внализа: правого глаза. Энуклеация произведена 2 июня 1989 r. Патогистологический диагноз: ретинобластом а сетчатки, недифференцированного типа с инфильтрацией ствола зрительнОro нерва с прорастанием за ламина криброза, не достигая линии отсечения:

Результаты рентгеноструктурного анализа:

2,430 3,060 1,930 1,720

4 2 1 1 эа. Произведена энуклеация 27 июня 1989 r.

Патогистологический диагноз: ретинобластома сетчатки, недифференцированного типа, прорастание начальных отделов диска зрительного нерва, 1 стадия.

Результаты рентгеноструктурного анализа

2,430 3,060 1,930 1,720

3 2 1 1

Клинический диагноз: ретинобластома?

Вторичная глаукома?

Знукяеация произведена 13 апреля

1989 г.

Патогистологический диагноз: ретинобластома сетчатки, смешанного типа (истинные и псевдорозетки) превалируют

1775669

Результаты рентгеноструктурного анализа

2,430

d А

1,усл.ед только ретийобластоме приводим примеры результатов рентгеноструктурного анализа нормальной трупной сетчатки глаза (снято 10 образцов) и других офтальмопатологий.

Пример 6. Нормальная трупная сетчатка глаза

В состав кристаллической фазы образца входит фтор-апатит низкой степени совершенства кристаллов с интенсивностью 10 сильного рефлекса 4 усл. ед. Опухоль менее

- злокачественная.

Чтобы доказать, что наличие в исследуемом образце фтор-апатита присуще

3,140 2,820 1,991 1,627 1,410 1,260

3 31 12 3 2 3

Образец содержит в основном аморфl ную фазу. На рентгенограмме галообраз: ный (диффузный) максимум при межплоскостном расстоянии 4,2267 А с мак, симумом интенсивности 11 усл. ед, Фторапатит отсутствует.

Пример 8, Больная К-ва, 1 год 2 мес., . Ист, б-зни 2972 за 1989 г. Пр. N 1833

Клинический диагноз: ретинЬбластома

s состоянии спонтанной регрессии правого . глаза.

Энуклеация произведена 2 августа 1989

d, А 7,622 6,146 4,037 3,341 3,260

I,усл.ед 2 7 7 2 3

В состав кристаллической фазы образца 20 не входит фтор-апатит.

Пример 7, Больной Л-в, 5 лет, Ист. б-зни В 682 за 1989 r. Пр М 336.

Клинический диагноз: ретинобластома правого глаза. 25

Энуклеация произведена 23 февраля

1989 г. Патогистологический диагноз:; зксудативный ретинит Коатса с частичной отслойкой сетчатки. 30

Результаты рентгеноструктурногб анализа г.

Патогистологический диагноз: ретинобластома с явлениями спонтанной регрессии.

Результаты рентгеноструктурного анализа

d, А 7,6220 6,214 6,146 4,2267 3,341 35

I óñë.åä 3 3 4 11 4 о

d,А

l,óñë.ед

2,712 2,882 ; 3,437

6 4 4

2,815

1,991

6,188 10,039

4 2!

Произведена энуклеация 18 ноября

, 1988 г, 45 Патогистологический диагноз: обшир, ное субретинальное кровоизлияние. Отслойка сетчатки. Катаракта.

Результаты рентгеноструктурного ана, лиза.

50. На рентгенограмме два галообразных (диффузных) пика с межплоскостным расстоянием 9,302 А, интенсивностью 7 усл. ед. и 4,2267 А, интенсивность 13 усл, ед. Фторапатит отсутствует.

55 б

d А 9,302 6,146 4.227 3,341 3,093

I óñë.åä 7 6 13 3 3 истинные розетки, прорастания в близлежащие ткани нет, I стадия, 2,798 2,769 2,702

4 3 3

В состав кристаллической фазы образца входит минерал подолит, Са1о(Р04)6СОз. имеющий следующие межплоскостные раСстояния и интенсивность сильных линий; согласно (13) М карт 570

d, А 2,8t1 2,712 3,437 1,993

Зуслед 10 6 2 1

Следовательно, при спонтанной регрессии ретинобластомы ионы фтора замещаются на карбонат-ионы.

П ример 9. Больная Н-о,14дней, Ист. б-эни М 5024 за 1988 г. Пр. М 2201.

Клинический диагноз: ретинобластома

II стадии левого глаза.

3.060 1,930, 1,720

2 1 1

1775669

Преимущества предлагаемого способа

1. Можно установить прогноз и степень злокачественности ретинобластомы смешанного типа в начальной стадии развития опухоли.

2. Прогноз устанавливается одномоментно. Кристаллический фтор-апатит может определяться методом рентгеноструктурного. анализа даже в виде следов, Таблица 1

Межплоскостные расстояния и интенсивность рефлексов минерала фтор-апатиат, Са5(Р04)эР. ЬЬ карт. 567

dð А

I, след

2,70

3,43

1,94

1,72 3

3,06

2,77

1,83

1.46

2,789

Таблица 2

Интенсивность рефлекса фтор-anlòèòa при d-2.798

Д в сл.е.

Степень злокачественности

Исследуемые образцы НЧ стадия развития

16,251 3,7 очень злокачественная

8+1,41 р<0,05 злокачественная

4,33+047 <005 менее злокачественная

Составитель Ж.Мустафина

Техред М.Моргентал Корректор.Й.Гунько

Редактор

Заказ 4032 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101

Ретинобластома, смешанный тип (превалируют солидные поля) и-6

Ретинобластома, смешанный тип (превалируют псевдорозетки) п=6

Ретинобластома, смешанный тип (превалируют истинные озетки и= 5

Формула изобретения

Способ прогнозирования течения ретинобластомы после знуклеации путем исследования тканей опухоли, о т л и ч а ю щ и й5 с я тем, что, с целью повышения точности способа, высушенную до постоянного веса ткань опухоли исследуют методом рент еноструктурного анализа, определяют процентное содержание апатита в ней. и при

10 егоэначении4 и менее прогнозируют благоприятное течение, а при значении более

4 — неблагоприятное,