Средство, обладающее антибактериальной активностью

 

Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано для повышения общего иммунологического статуса и борьбы со стафилококковой инфекцией . Цель - повышение биологической активности средства. Сущность изобретения: средство содержит живую культуру ацидофильных лактобактерий в сочетании с комплексом сывороточных иммуноглобулинов , взятых в одинаковых весовых частях, при концентрации жизнеспособных микробных клеток 10 -10 на массу 0,1 г и процентном соотношении компонентов в комплексе иммуноглобулина G:M:A, равном (55-60):(20-25):(15-20). Положительный эффект: средство обладает высокой биологической активностью за счет двоякого механизма противомикробного действия. сл с

союз соВетских

СОЦИАЛ ИСТИЧ Е С К ИХ

РЕСПУБЛИК (я)з А 61 K 35/74, 39/395

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ!

Ю (л) ,4

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4897957/14 (22) 28.12.90 (46) 07.12.92. Бюл. N. 45 (71) Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н.Габричевского (72) В,B.Ïîñïåëoaà, Г.И.Ханина. И.В.Борисова, В.А,Алешкин, Н.Г.Рахимова и Н.Н.Ворошилина (56) 1. Авторское свидетельство СССР

N. 727195, кл, А 61 К 5/00, 1974.

2. Авторское свидетельство СССР

N. 1252333, кл. А 61 К 39/108, 1985.

3. Бодяжина В.И. и др. Руководство для врачей. М.: Медицина, 1990, с. 543.

4. Патент CLUA N . 4588595, кл. А 23 С

9/127, С 12 N 1/20, 1986. (54) СРЕДСТВО, ОБЛАДАЮЩЕЕ АНТИБАКТЕРИАЛЬНОЙ АКТИВНОСТЬЮ

Изобретение относится к медицине, в частности к медицинской микробиологии и микробиологической технологии, и касается составов лечебных препаратов, содержащих эубиотики.

Высокий уровень носительства патогенных и условно-патогенных микроорганизмов на слизистых полостей, и в частности ороназофарингеальной и вагинальной, представляет потенциальную опасность развития воспалительных процессов, что приобретает особую значимость в условиях растущего распространения лекарственно-устойчивых штаммов. Проблема санации т. называемого здорового носительства госпитальных штаммов, а также лечения обусловленных ими уже развившихся неспецифических воспалительных. Ы«1779377 А1 (57) Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано для повышения общего иммунологического статуса и борьбы со стафилококковой инфекцией. Цель — повышение биологической активности средства. Сущность изобретения: средство содержит живую культуру ацидофильных лактобактерий в сочетании с комплексом сывороточных иммуноглобулинов, взятых в одинаковых весовых частях, при концентрации жизнеспособных микробных клеток 10 — 10 на массу 0,1 г и про8 центном соотношении компонентов в комплексе иммуноглобулина G:М:А, равном (55-60):(20 — 25):(15-20). Положительный эффект: средство обладает высокой биологической активностью за счет двоякого механизма противомикробного действия. процессов приобретает особую активность для контингентов ослабленных групп — детей раннего возраста, беременных женщин, реконвалесцентов после длительных заболеваний и др. В числе таких групп особо ранимыми являются лица с нарушенным иммунологическим статусом, который нередко сочетается с дисбактериозом.

Лечение таких пациентов антибиотиками и другими химиотерапевтическими препаратами не достигает должного эффекта и еще более усугубляет дисбактериоз при одновременном снижении общей иммунологической резистентности. Это требует новых подходов к тактике терапии путем использования мягко действующих препаратов биологической природы, свободных

1779377

55 от побочного действия химических противомикробных средств.

Известны составы для лечения неспецифических гнойно-воспалительных процессов ороназофарингеальной области, содержащие противостафилококковый анатоксин и бактериофаг в различных сочетаниях с дезинфицирующими средствами и др. Однако эти составы характеризует узкая направленность санирующего действия против стафилококковой этиологии носительства и отсутствие активности против других этиологических факторов, в том числе грамотрицательных микробов, которые приобретают все более важную роль в развитии неспецифических воспалений указанных открытых полостей.

Для целей повышения иммунологической резистентности у ослабленных больных находит применение коммерческий гамма-глобулин. Однако, в его составе содержится главным образом р-иммуноглобулин, тогда как антибактериальные антитела относятся к фракции М. Этим можно обьяснить недостаточную эффективность обычных препаратов гамма-глобулина при острых инфекциях у детей раннего возраста, кровь которых отличается низким содержанием иммуноглобулинов классов M и А. Очевидно, что для преодоления этого недостатка необходимы иммуноглобулиновые препараты обогащенного состава, содержащие как G, так M u

А-антитела. Наиболее обоснованным и перспективным для указанных целей следует считать подбор сочетаний таких обогащенных иммуноглобулиновых комплексов с микробными эубиотиками, обладающими достаточно широким спектром и высоким уровнем антагонистической активности против возбудителей современных инфекций оппортунистического ряда, Наиболее близким к заявляемому является состав, содержащий живую культуру молочнокислых бактерий и бифидобактерий согласно патенту США 1986 г. Из описания данного аналога, принятого за прототип, следует, что применяемый состав содержит по существу три микробных компонента, поскольку в ега технологии, кроме молочнокислых и бифидобактерий, используется культура термофильного стрептококка.

Однако наличие трехкомпонентного межвидового микробного комплекса в составе препарата указывает на недостаточную активность молочнокислых бактерий в чистом виде, входящих в препарат. Вместе с тем, усложнение состава является нежелательным качеством препарата из живых культур микроорганизмов в силу сложности

45 технологии, а главное качественного контроля за стабильностью каждого из компонентов. Кроме того, включение в состав прототипа указанного третьего микробного компонента требует использования в качестве ростового субстрата молока, что снижает биологическую активность препарата для значительного контингента больных из числа наиболее ослабленных групп, страдающих лактэзной недостаточностью.

Преодоление данного недостатка требует дополнительных разработок, которые порой служат предметом специальных изобретений. К числу существенных недостатков прототипа следует также отнести и ограниченность механизма его действия, который определяется, в первую очередь, местным коррекционным влиянием на микрофлору патологического очага и не направлен на быстрое купирование воспаления и санацию от возбудителя при помощи противомикробных антител через иммунную систему, В отличие от.прототипа, заявляемое средства, наряду с полезно действующими живыми микробами; содержит в своем составе мощный иммуноглобулиновый компонент, что определяет вторую, не менее важную сторону антибактериальной активности. Последняя обеспечивает не только местное подавление патогенного начала в очаге воспаления, но и стимулирует быструю противомикробную защиту через системный иммунитет. Таким образом, приведенное сопоставление четко определяет принципиальные преимущества по биологической активности заявляемого средства перед известным, Приведенные соображения иллк5стрируются как результатами лабораторных наблюдений зэ стабильностью показателей биологической активности средства в процессе хранения (таблицы ММ 1, 2, 3 Акта в комплекте первичных документов заявки), так и данными экспериментов на модели острой диареи у обезьян, В группе из 15 обезьян, страдающих острой диареей (жидкий стул с кровью), применение через рот или ректально комплекса иммуноглобулинов КИП в составе средства обеспечивало купировэние диареи уже к 34 дню лечения. При исследовании сыворотки крови леченых обезьян в РПГА обнаружено повышение титров антител против шигелл, эшерихий и сальмонелл на

2-3 двукратных разведения по сравнению с исходным, что указывало на поступление средства в кровь после энтерального введения.

1779377

Кроме больных обезьян, свечи с КИП были испытаны на трех здоровых обезьянах массой тела 8 — 10 кг с целью контроля за состоянием сывороточных антител. Кровь для серологических исследований брали до введения свечей, а также на 3-й и 7-й день после их применения. В РПГА определяли титры антител против эшерихий, шигелл и сальмонелл. У всех обезьян на 3 сутки отмечено нарастание титров антител к Е,colI (Одиагностикум комплексный) на 2 — 3 двукратных разведения по сравнению с исходными и сохранение повышенных титров до 7 суток, что свидетельствовало о поступлении средства в кровь после ректального введения.

Цель изобретения — повышение биологической активности средств, содержащих микробные эубиотики.

Поставленная цель достигается тем, что средство содержит живую культуру ацидофильных лактобактерий в сочетании с комплексом сывороточных иммуноглобулинов в одинаковых весовых частях при концентрации жизнеспособных микробных клеток

10 -10 на массу 0,1 г и процентном соотношении компонентов в комплексе иммуноглобулинов G:M:А,равном (55 — 60):(20 — 25):

:(15 — 20).

В зависимости от способа введения заявляемое средство представляет собой две различных лекарственных формы, а именно:

1) таблетки для орального применения, содержащие: сухую биомассу ацидофильных лактобактерий 25 — 0,1 г сухую биомассу комплекса иммуноглобулинов 25 — 0.1 г сахарный гранулят 50 — 0,2 г стеарат кальция 1.0 — 0,004 г тальк 1,0% — 0,004 г

2) медицинские свечи для интравагинал ьного введения содержат: сухую биомассу ацидофильных лактобактерий 10,0 — 0,2 г. сухую биомассу комплекса иммуноглобулина 10,0 — 0,2 r кондитерский жир 80 0 — 1,5 г парафин 7, 0 /о — О, 1 5 г

Способ получения предлагаемого двухкомпонентного средства заключается в следующем.

Иммуноглобулиновый компонент КИП получают из (1I фракции Кона (осадок В) путем солевой экстракции, с последующей обработкой экстракта осадка В хлороформом и декстрансульфатом с целью удаления липопротеидов; далее осуществляют осаждение иммуноглобулинов водорастворимым полимером полиэтиленгликолем (ПЭГ) 5

50 в концентрации 12 . Готовый препарат содержит 2 глюкозы. Для предотвращения фрагментации Ig p препарат лиофилизируют, В сухом препарате содержится комплекс иммуноглобулинов <р, М, А в соотношении 55 — 60, 20-25 и 15-20 cоответственно. По сравнению с коммерческим иммуноглобулином КИП содержит повышенные титры антител против ряда энтеробактерий (шигелл, сальмонелл, эшерихий), а также против псевдомонад, менингококков и ротавирусов.

Для получения микробного компонента биомассу эцидофильных лактобактерий выращивают в казеиново-дрожжевой среде и сушат лиофильным способом, Сухую микробную биомассу соединяют с сухой биомассой КИП в соотношении 1: 1 и используют для приготовления оральной или ректальной формы заявляемого средства.

Для получения таблеточной формы к смешанной биомассе добавляют структурные и вспомогательные вещества, Получаемый состав тщательно перемешивают и тэблетируют на ротационном прессе любой марки.

Для получения свечей смешанную биомассу соединяют с расплавленной жировой основой, Полученный состав перемешивают и разливают в охлажденный формовочный аппарат, Заявляемое средство обладает высокой прямой антибактериальной активностью против широкого круга патогенных и условно-патогенных микробов местно в очаге воспаления или носительства и одновременно содержит антимикробные антитела против кишечной палочки, сальмонелл, шигелл, псевдомонад и менингококка, тогда как обычно применяемый нормальный человеческий гамма-глобулин содержит IgM только в количестве не более 4 от общего белка. Таким образом, средство обеспечивает антибактериальную активность за счет поступающих в кровь антител против таких распространенных этиологических факторов патологии, как шигеллы, сальмонеллы, энтеропатогенные кишечные палочки, псевдомонады, менингококк, ротавирусы и др.

В группе из 30 взрослых здоровых людей-добровольцев были изучены иммунологические сдвиги в сыворотке крови после введения комплекса иммуноглобулинов в состав средства, содержанию О-антител в

РПГА с эритроцитарными диагностикумами — сальмонеллезными (комплексным), из шигелл Флекснера и эшерихиозным (комплек1779377

Составитель M.ÌàíBåëoBà

Редактор С.Кулакова Техред М.Моргентал Корректор О.Юрковецкая

Заказ 4401 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Г1роизводственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 сным). Средство вводили через рот (таблетки) или ректально (свечи), После однократного перорального введения через 2 дня было выявлено нарастание титров антител к энтеробактериям на

2-3 двукратных разведения у всех добровольцев. После ректального введения отмечено нарастание титров антител к энтеробактериям также через 2 дня, преимущественно на 2 двукратных разведения.

Группе добровольцев через 3 недели после перорального введения средство было применено ректально. Выявлено повторное нарастание титров антител до уровня, достигнутого при пероральном введении.

В прилагаемом акте лабораторных испытаний заявляемого средства приведены данные об удовлетворительной стабильности микробного и иммуноглобулинового компонентов в его составе при длительном хранении.

Таким образом, предлагаемое средство отличается от ранее известных одновременным наличием антибактериальной активности двоякого механизма действия (местный и системный), что предусматривает сочетанное воздействие как непосредственно на микрофлору патологического очага, так и на общую иммунную систему организма.

Результаты предварительных клинических испытаний определяют перспективность применения заявляемого средства с целью лечения воспалительных процессов открытых полостей и быстрой санации от возбудителей оппортунистических инфекций у лиц с ослабленным иммунологическим статусом и принадлежавших к группам рис5 ка по развитию инфекции. Внедрение средства в арсенал отечественных средств бактериальной терапии предполагает и определенный экономический эффект за счет сокращения сроков лечения и расхода ме10 нее действенных эубиотиков моносостава, а также нормального иммуноглобулина, 3амена инъекционного пути введения последнего на энтеральный у таких больных облегчает лечебную процедуру, что особен15 но существенно для детей, которые составляют наиболее обширный контингент нуждающихся в коррекционной бактерио- и иммунотерапии.

20 Формула изобретения

Средство, обладающее антибактериальной активностью, содержащее микробные эубиотики, о т л и ч а ю щ е е с я тем, что, с целью повышения биологической ак25 тивности, в качестве микробного эубиотика средство содержит живую культуру ацидофильных лактобактерий и дополнительно комплекс сывороточных иммуноглобулинов

G, М, А при следующем соотношении компо30 нентов, мас. : живая культура ацидофильных лактобактерий в концентрации 10 -10/71г 50 комплекс сывороточных иммуноглобулинов G M:A (55 — 60):(20 — 25):(15-20) 50