Штамм инфузории colpoda steinii для приготовления токсикологического диагностикума
Использование: в токсикологии и биотехнологии при изготовлении диагностического токсикологического препарата и в токсикологических исследованиях объектов внешней среды Сущность изобретения: штамм инфузории Colpoda steinii Сигма-2В получен путем клонирования и депонирован в коллекции микроорганизмов ВНИИ ОЧБ под per. NF1N1. Штамм выращивают на минеральном растворе Лозина - позинского с суспензией клеток Bacillus subtilis -30-20 мкм. Форма клеток - овальная, уплощенная с брюшной стороны с цистомальной полостью на боковой стороне клетки. Поверхность клетки покрыта ресничками. Размножается делением в сенном настое, в настое банановой корки. При недостатке субстрата на растворе Лозина - Лозинского образует цисты покоя шарообразной формы диаметром 5-20 мкм в течение 18 - 20 ч При искусственном обогащении среды субстратом эксцетируется з течение 10-12 ч Обладает чувствительностью к токсинам в питательной среде на уровне токсических для человека и животных концентраций Благодаря чувствительности к токсинам, стабильности этих свойств, а также способности к цистообразованию штамм пригоден для создания токсикологического диагностикума длительного хранения 2 табл.
(19) Щ (и) 2001951 Cl (51) 5
Комитет Российской Федерации по патентам и товарным знакам
У. т.!, . .-,, цу
К 1тАЪЕНТу
: ОМВНС4 ЪЗ Ь .З йй1. ЮХйО: МЮУЮИЛВЙЗЗВ4ЮЛ (21) 5036042/13 (22) 25.03.92 (46) 30.10.93 Бюл. f4 39-40 (7G) Виноходов Дмитрий Олегович; Виноходов
Владимир Олегович (54) ШТАММ ИНФУЗОРИИ STEINll) ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ТОКСИКОЛОГИЧЕСКОГО ДИАГНОСТИКУМА (57) Использование: s токсикологии и биотехнологии при изготовлении диагностического токсикологического препарата и в токсикслогических исследованиях обьектов внеи)ней среды Сущность изобретения: штамм инфузории Сброда steinii "Сигма-2В" получен путем клонирования и депонирован в коллекции микроорганизмов ВНИИ ОЧБ под рег. МПМ1. Штамм выращивают на минеральном растворе Лозина — лозинского с суспензией клеток Bacilfus ыЬт111в - 30 20 мкм. Форма клеток— овальная, уплощенная с брюшной стороны с цисто— мальной полостью на боковой стороне клетки Поверхность клетки покрыта ресничками. Размножается делением в сенном настое, в настое банановой корки При недостатке субстрата на растворе Лозина — Лозинского образует цисты покоя шарообразной формы диаметром 5 — 20 мкм в течение 18 — 20 ч При искусственном обогащении среды субстратом эксцетируется в течение 10-12 ч. Обладает чувствительностью к токсинем в питательной среде на уровне токсических для человека и животных концентраций Благодаря чувствительности к токсинам, стабильности этих свойств, а также способности к цистообразованию штамм пригоден для создания токсикологического диагностикума длительного хранения. 2 табл. 2001951 Изобретение относится к токсикологии и биотехнологии и может быть использовано при изготовлении диагностического токсикологического препарата и в токсикологических исследованиях объектов внешней среды, Известен штамм инфузории Tetrahymena pyrlformls используемый для определения токсичности различных объектов. Однако инфузории данного вида нв образуют цист покоя, что приводит к необходимости постоянного их культивирования и не позволяет создать диагностический препарат длительного хранения. Известна культура инфузории Paramecium caudatum, также традиционно применяемая для токсикологических исследований, но ей присуща широкая вариабельность чувствительности к токсинам в зависимости от стадии жизненного цикла. Кроме того, она не обладает способностью к цис ообразованию, что исключает воэ- можность создания на ее основе диагностического токсикологического препарата с длительным сроком хранения. Целью иэобретения является штамм инфузории с узким диапазоном физиологических и морфологических особЬнностей, обладающий способностью к цистообразованию и в результате этого пригодный для создания диагностического токсикологического препарата со стабильной чувствительностью к токсинам, длительный период времени сохраняющий беэ изменения свои свойства и не требующий при этом затрат материалов, труда и времени. Это достигается получением штамма инфузории Colpoda steinll Сигма-2В путемотбора и исследования морфологических и физиологических свойств на соответствие требованиям, предъявляемым к токсикологическому диагностикуму (Рег, М штамма П N1). Штамм инфузории С.зсе!и11 Сигма-2В имеет следующие морфологические и физиологические характеристики. Величина клеток 48-часовой культуры, выращенной на минеральном растворе Лозина-Лозинского с суспензией клеток Bacillus subtilis, 30 х 20 мкм. Форма клеток — овальная. уплощенная с брюшной стороны с цистомальной полостью на боковой стороне клетки. Поверхность клетки покрыта ресничками. Размножается делением в сенном настое, в настое банановой корки, питается клетками Вас.subtllls, Klebslella aегоgenes, Е.coll, Saccaromyces cerevlslae. При недостатке субстрата на растворе Лозина-Лозинского образует цисты покоя шарообразной формы диаметром 15-20 10 мкм в течение 18-20 ч При искусственном обогащении среды субстратом эксцистируется в течение 10-12 ч. Обладает чувствительностью к токсинам 15 в питательной среде на уровне токсических для человека и животных концентраций. Была исследована чувствительность заявляемого штамма к токсинам. Параллельно исследовали чувствительность к этим же ве20 ществам P.caudatum. Исследования проводили по двум параметрам: времени гибели 100 особей (табл. 1) и летальной дозы100 (Jlp>oo) при экспозиции 45 мин (табл.). Как свидетельствуют данные сравни. тельных лабораторных исследований, часть результатов которых изложена в табл, 1.2, предлагаемый штамм отличается от прототипа стабильно и достоверно более высокой чувствительностью к токсическим веществам, представляющим в настоящее время в силу широкого загрязнения ими окружающей среды серьезную опаснос гь для человека и всей живой природы. Кроме того, предлагаемый штамм облаЗ5 дает способностью к цистообраэованию, что позволяет испольэовать его для создания токсикологического диагностикума, длительно хранящегося, не требующего затрат труда и материалов на поддержание 40 культуры инфузорий. I (56) Спесивцева Н.А. Микоэы и микотоксикозы животных, М.: Сельхоэгиэ, 1960, с, 402, 409; 45 Агеев В.,Долторнияэов И. Определение токсичности корма. Птицеводство, М 8, 1988, с. 42. &labbert J.L., Maree J.P. Evalutlon of interactive .„тох3с effects of chemicals ln woter 50 using а ТвйгаЫеепа pyrlformis toxicity screenln . "Water $А", 1986. N 2, р. 57-62. 2001951 таблица I Чувствительность инфузорий С.stelnii (штамм Сигма-2B) и P.caudatum к токсичным веществам <0,01 <0,01 <О,OE <0,01 <0,05 <0,001 <0,01 <0,05 Таблица 2 Чувствительность инфузории С,steinli (штамм Сигма-28) и P.caudatum к токсичным веществам 2001951 Составитель Д. Виноходов Техред М,Моргентал Корректор В. Патрушева Редактор Л. Павлова Заказ 3156 Тираж Подписное НПО "Поиск" Роспатента 113035. Москва, Ж-35, Раушская наб„4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 Формула изобретения Штамм инфузории Colpoda stelnlt Рег. N П N 1 ВНИИ ОЧБ для приготовления токсикологического диагностикума.
