Пирролопиримидиновое соединение

Изобретение относится к новому пирролопиримидиновому соединению общей формулы (I), его стереоизомеру или фармацевтически приемлемой соли. Соединения могут быть использованы для лечения опухоли, вызванной активностью Янус-киназы. Таким заболеванием может быть лимфома, лейкоз. В общей формуле (I)

каждый из R₁ и R₂ независимо выбран из группы, состоящей из Н, галогена, циано, С_1-8алкила, -NR₇R₈, -NH-С_1-6алкилен-NR₉R₁₀, -NHCO-C_1-6алкилен-NR₉R₁₀, -NH-С_1-6алкилен-СО-NR₉R₁₀, -NHCO-С_1-6алкилен-СОО-С_1-6алкила, -NH-С_3-6циклоалкилен-CO-NR₉R₁₀, -NH-С_2-6алкенилен-CONR₉R₁₀, -NH-C_1-6алкилен-циано, -NHCO-NH-R₁₁, -CONR₁₂R₁₃ и -CONH-C_1-6алкилен-NR₁₂R₁₃, при этом С_1-8алкил необязательно замещен гидроксилом, галогеном, -NH₂, -NH(С_1-6алкилом), -N(С_1-6алкилом)₂, при условии, что R₁ и R₂ одновременно не являются Н; каждый из R₇ и R₈ независимо выбран из группы, состоящей из Н, С_1-6алкила, C_1-6алкилкарбонила и C_1-6алкилсульфонила; или R₇ и R₈ вместе с атомом N, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членный гетероциклил, и данный 5- или 6-членный гетероциклил содержит атом N в качестве гетероатома и необязательно замещен оксо; каждый из R₉ и R₁₀ независимо выбран из группы, состоящей из Н, гидроксила и C_1-6алкила; или R₉ и R₁₀ вместе с атомом N, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членный гетероциклил с 1-2 гетероатомами, выбранными из N и О; R₁₁ выбран из группы, состоящей из 5-членного гетероарила, содержащего два атома N и атом О в качестве гетероатомов и необязательно имеющего в качестве заместителя С_1-4алкил; каждый из R₁₂ и R₁₃ независимо выбран из группы, состоящей из Н и C_1-6алкила; R₃ выбран из группы, состоящей из Н и галогена; R₄ выбран из группы, состоящей из циано и -CONH₂; и каждый из R₅ и R₆ независимо выбран из группы, состоящей из Н, гидроксила и галогена. 4 н. и 15 з.п. ф-лы, 7 табл., 34 пр.

 

ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННУЮ ЗАЯВКУ

Настоящая заявка испрашивает приоритет согласно заявке на патент Китая №201410784461.2, поданной 16 декабря 2014 г., содержание которой включено в настоящую заявку во всей полноте посредством ссылки.

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ

Настоящая заявка относится к области медицины. В частности, настоящая заявка относится к пирролопиримидиновому соединению, представленному Формулой (I), его стереоизомеру или фармацевтически приемлемой соли. Настоящая заявка также относится к способу получения пирролопиримидинового соединения, представленного Формулой (I), фармацевтической композиции, содержащей данное соединение, и к применению этого соединения для лечения заболевания, опосредованного Янус-киназой.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Протеинкиназы (РК), также называемые протеинфосфокиназами, представляют собой ферменты, которые катализируют реакцию фосфорилирования белка. Протеинкиназы осуществляют свои физиологические функции, включая влияние на клеточный рост, выживаемость и дифференцировку, формирование и морфологическое изменение органов, неоваскуляризацию, репарацию и регенерацию тканей, катализируя фосфорилирование белка. Однако протеинкиназы вовлечены не только в нормальные физиологические процессы, многие из них играют важную роль в заболеваниях человека (таких как рак). Канцерогенные протеинкиназы, то есть подгруппа протеинкиназ с нарушенной регуляцией активности, могут вызывать образование и рост опухолей и затем вызывать метастазирование и прогрессирование опухолей. На сегодняшний день канцерогенные протеинкиназы являются одной из наиболее важных мишеней для лечения рака.

Можно выделить два типа протеинкиназ, рецепторные и нерецепторные. Подсемейство нерецепторных тирозинкиназ (РТК) включает Янус-киназу (JAK). Подробно нерецепторные тирозинкиназы описаны, например, в статье Bolen JB., Nonreceptor tyrosine protein kinases, Oncogene, 1993, 8(8): 2025-31.

Янус-киназа (JAK) относится к нерецепторным тирозинкиназам (РТК), которые находятся в клетках и участвуют в передаче стимулирующего сигнала цитокинов через сигнальный путь JAK-STAT. Путем сигнальной трансдукции JAK-STAT внешний химический сигнал передается на промотор гена внутриядерной ДНК через клеточную мембрану и в итоге оказывает влияние на ДНК клетки, изменяя ее транскрипцию и уровень активности. Сигнальный путь JAK-STAT преимущественно состоит из трех компонентов: (1) рецептора; (2) Янус-киназы (JAK) и (3) белка STAT (проводника сигнала и активатора транскрипции). Рецептор может быть активирован интерфероном, интерлейкином, фактором роста или другим химическим посредником, и такая активация приводит к фосфорилированию самой киназы JAK. Затем белок STAT связывается с фосфорилированным рецептором, в результате STAT фосфорилируется киназой JAK. Затем фосфорилированные белки STAT диссоциирует от рецептора, образуют димеры и транслоцируются в ядро клетки, где связываются со специфическим сайтом ДНК и изменяют транскрипцию генов (Scott, М.J., С.J. Godshall et al. (2002) "Jaks, STATs, Cytokines, and Sepsis" Clin Diagn Lab Immunol 9(6): 1153-9).

Семейство JAK участвует в цитокин-зависимой регуляции пролиферации и клеточных функций, вовлеченных в иммунный ответ. В настоящее время у млекопитающих известно четыре члена семейства JAK: JAK1, JAK2, JAK3 и TYK2 (тирозинкиназа 2). Белки JAK имеют размер в диапазоне от 120 кДа до 140 кДа и содержат 7 консервативных доменов JAK-гомологии (JH). Один из них представляет собой функциональный каталитический киназный домен, а другой представляет собой псевдокиназный домен, который эффективно осуществляет регуляторную функцию и/или действует как докинг-сайт для белков STAT (Scott, Godshall et al. 2002, см. выше).

В настоящее время ингибиторы Янус-киназ или релевантных киназ описаны, например, в WO 9965909, США 20040198737, WO 2004099204, WO 2004099205, WO 200142246, WO 200472063, WO 9962908, WO 2007070514 и т.д.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Согласно одному из аспектов настоящей заявки предложено соединение, представленное Формулой (I), его стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль:

где

каждый из R₁ и R₂ независимо выбран из группы, состоящей из Н, атома галогена, циано, С_1-8алкила, -NR₇R₈, -NH-C_1-6алкилен-NR₉R₁₀, -NHCO-C_1-6алкилен-NR₉R₁₀, -NH-C_1-6алкилен-CO-NR₉R₁₀, -NHCO-С_1-6алкилен-СОО-С_1-6алкила, -NH-C_3-6циклоалкилен-CO-NR₉R₁₀, -NH-C_2-6aлкeнилeн-CONR₉R₁₀, -NH-C_1-6алкилен-циано, -NHCO-NH-R₁₁, -CONR₁₂R₁₃ и -CONH-C_1-6алкилен-NR₁₂R₁₃, при этом C_1-8алкил необязательно имеет в качестве заместителей гидроксил, атом галогена или амино, при условии, что R₁ и R₂ одновременно не являются Н;

каждый из R₇ и R₈ независимо выбран из группы, состоящей из Н, C_1-6алкила, C_1-6алкилацила и C_1-6алкилсульфонила; или R₇ и R₈ вместе с атомом N, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членный гетероциклил, и данный 5- или 6-членный гетероциклил необязательно имеет в качестве заместителя оксо;

каждый из R₉ и R₁₀ независимо выбран из группы, состоящей из Н, гидроксила и C_1-6алкила; или R₉ и R₁₀ вместе с атомом N, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членный гетероциклил;

R₁₁ выбран из группы, состоящей из 5- или 6-членного гетероарила, необязательно имеющего в качестве заместителя С_1-4алкил;

каждый из R₁₂ и R₁₃ независимо выбран из группы, состоящей из Н, C_1-6алкила, C_1-6алкилацила и C_1-6алкилсульфонила; или R₁₂ и R₁₃ вместе с атомом N, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членный гетероциклил, и данный 5- или 6-членный гетероциклил необязательно имеет в качестве заместителя оксо;

R₃ выбран из группы, состоящей из Н и атома галогена;

R₄ выбран из группы, состоящей из циано и -CONH₂;

каждый из R₅ и R₆ независимо выбран из группы, состоящей из Н, гидроксила и атома галогена.

Согласно другому аспекту настоящей заявки предложено соединение, представленное Формулой (I), его стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль для применения в лечении заболевания, опосредованного Янус-киназой.

Согласно другому аспекту настоящей заявки предложена фармацевтическая композиция, содержащая терапевтически эффективное количество соединения, представленного Формулой (I), его стереоизомера или фармацевтически приемлемой соли и один или более чем один фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент.

Согласно еще одному аспекту настоящей заявки предложено применение соединения, представленного Формулой (I), его стереоизомера или фармацевтически приемлемой соли, или описанной выше фармацевтической композиции, для получения лекарства для лечения заболевания, опосредованного Янус-киназой.

Согласно еще одному аспекту настоящей заявки предложен способ лечения заболевания, опосредованного Янус-киназой, включающий введение пациенту терапевтически эффективного количества соединения, представленного Формулой (I), его стереоизомера или фармацевтически приемлемой соли, или описанной выше фармацевтической композиции.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Согласно одному из аспектов настоящей заявки предложено соединение, представленное Формулой (I), его стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль:

где

каждый из R₁ и R₂ независимо выбран из группы, состоящей из Н, атома галогена, циано, С_1-8алкила, -NR₇R₈, -NH-C_1-6алкилен-NR₉R₁₀, -NHCO-C_1-6алкилен-NR₉R₁₀, -NH-C_1-6aлкилeн-CO-NR₉R₁₀, -NНСО-С_1-6алкилен-СОО-С_1-6алкила, -NH-C_3-6циклоалкилен-CO-NR₉R₁₀, -NH-C_2-6aлкeнилeн-CONR₉R₁₀, -NH-C_1-6алкилен-циано, -NHCO-NH-R₁₁, -CONR₁₂R₁₃ и -CONH-C_1-6алкилен-NR₁₂R₁₃, при этом С_1-8алкил необязательно имеет в качестве заместителей гидроксил, атом галогена или амино, при условии, что R₁ и R₂ одновременно не являются Н;

каждый из R₇ и R₈ независимо выбран из группы, состоящей из Н, C_1-6алкила, C_1-6алкилацила и C_1-6алкилсульфонила; или R₇ и R₈ вместе с атомом N, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членный гетероциклил, и данный 5- или 6-членный гетероциклил необязательно имеет в качестве заместителя оксо;

каждый из R₉ и R₁₀ независимо выбран из группы, состоящей из Н, гидроксила и C_1-6алкила; или R₉ и R₁₀ вместе с атомом N, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членный гетероциклил;

R₁₁ выбран из группы, состоящей из 5- или 6-членного гетероарила, необязательно имеющего в качестве заместителя С_1-4алкил;

каждый из R₁₂ и R₁₃ независимо выбран из группы, состоящей из Н, C_1-6алкила, C_1-6алкилацила и C_1-6алкилсульфонила; или R₁₂ и R₁₃ вместе с атомом N, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членный гетероциклил, и данный 5- или 6-членный гетероциклил необязательно имеет в качестве заместителя оксо;

R₃ выбран из группы, состоящей из Н и атома галогена;

R₄ выбран из группы, состоящей из циано и -CONH₂;

каждый из R₅ и R₆ независимо выбран из группы, состоящей из Н, гидроксила и атома галогена.

В некоторых предпочтительных вариантах осуществления изобретения каждый из R₁ и R₂ независимо выбран из группы, состоящей из Н, атома галогена, циано, C_1-6алкила, -NR₇R₈, -NH-С_1-4алкилен-NR₉R₁₀, -NHCO-С_1-4алкилен-NR₉R₁₀, -NH-C_1-4алкилен-CO-NR₉R₁₀, -NHCO-С_1-4алкилен-СОО -С_1-4алкила, -NH-C_3-5циклoaлкилeн-CO-NR₉R₁₀, -NH-C_2-4aлкeнилeн-CONR₉R₁₀, -NH-C_1-4алкилен-циано, -NHCO-NH-R₁₁, -CONR₁₂R₁₃ и -СОNН-С_1-4алкилен-NR₁₂R₁₃, при этом C_1-6алкил необязательно имеет в качестве заместителей гидроксил, атом галогена или амино, при условии, что R₁ и R₂ одновременно не являются Н.

В некоторых предпочтительных вариантах осуществления изобретения R₁ выбран из группы, состоящей из Н, атома галогена, циано, С_1-8алкила, -NR₇R₈, -NH-C_1-6алкилен-NR₉R₁₀, -NHCO-C_1-6алкилен-NR₉R₁₀, -NH-C_1-6алкилен-CO-NR₉R₁₀, -NHCO-С_1-6алкилен-СОО-С_1-6алкила, -NH-C_3-6циклоалкилен-CO-NR₉R₁₀, -NH-С_2-6алкенилeн-CONR₉R₁₀, -NH-C_1-6алкилен-циано, -NHCO-NH-R₁₁, -CONR₁₂R₁₃ и -CONH-C_1-6алкилен-NR₁₂R₁₃, при этом С_1-8алкил необязательно имеет в качестве заместителей гидроксил, атом галогена или амино; и R₂ выбран из группы, состоящей из Н и -NH₂, при условии, что R₁ и R₂ одновременно не являются Н.

В некоторых предпочтительных вариантах осуществления изобретения R₁ выбран из группы, состоящей из Н, атома галогена, циано, C_1-6алкила, -NR₇R₈, -NH-C_1-4алкилен-NR₉R₁₀, -NHCO-С_1-4алкилен-NR₉R₁₀, -NH-C_1-4алкилен-CO-NR₉R₁₀, -NHCO-С_1-4алкилен-СОО-С_1-4алкила, -NH-C_3-5циклoaлкилeн-CO-NR₉R₁₀, -NH-С_2-4алкенилен-CONR₉R₁₀, -NH-C_1-4алкилен-циано, -NHCO-NH-R₁₁, -CONR₁₂R₁₃ и -CONH-С_1-4алкилен-NR₁₂R₁₃, при этом C_1-6алкил необязательно имеет в качестве заместителей гидроксил, атом галогена или амино; и R₂ выбран из группы, состоящей из Н и -NH₂, при условии, что R₁ и R₂ одновременно не являются Н.

В некоторых предпочтительных вариантах осуществления изобретения каждый из R₇ и R₈ независимо выбран из группы, состоящей из Н, С_1-4алкила, С_1-4алкилацила и С_1-4алкилсульфонила; или R₇ и R₈ вместе с атомом N, к которому они присоединены, образуют гетероциклил, выбранный из группы, состоящей из , , , , и

В некоторых предпочтительных вариантах осуществления изобретения R₇ выбран из группы, состоящей из Н, C_1-6алкила, С_1-6алкиладила и C_1-6алкилсульфонила; R₈ выбран из группы, состоящей из Н и С_1-6алкила; или R₇ и R₈ вместе с атомом N, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членный гетероциклил, и данный 5- или 6-членный гетероциклил необязательно имеет в качестве заместителя оксо.

В некоторых предпочтительных вариантах осуществления изобретения R₇ выбран из группы, состоящей из Н, С_1-4алкила, С_1-4алкилацила и С_1-4алкилсульфонила; R₈ выбран из группы, состоящей из Н и С_1-4алкила; или R₇ и R₈ вместе с атомом N, к которому они присоединены, образуют гетероциклил, выбранный из группы, состоящей из , , , , и

В некоторых предпочтительных вариантах осуществления изобретения каждый из R₉ и R₁₀ независимо выбран из группы, состоящей из Н, гидроксила и С_1-4алкила; или R₉ и R₁₀ вместе с атомом N, к которому они присоединены, образуют пирролидинил, пиперидинил, морфолинил, пиперазинил или оксазолидинил.

В некоторых предпочтительных вариантах осуществления изобретения R₉ выбран из группы, состоящей из Н, гидроксила и C_1-6алкила; R₁₀ выбран из группы, состоящей из Н и C_1-6алкила; или R₉ и R₁₀ вместе с атомом N, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членный гетероциклил.

В некоторых предпочтительных вариантах осуществления изобретения R₉ выбран из группы, состоящей из Н, гидроксила и С_1-4алкила; R₁₀ выбран из группы, состоящей из Н и С_1-4алкила; или R₉ и R₁₀ вместе с атомом N, к которому они присоединены, образуют пирролидинил, пиперидинил, морфолинил, пиперазинил или оксазолидинил.

В некоторых предпочтительных вариантах осуществления изобретения R₁₁ представляет собой гетероарил, выбранный из группы, состоящей из , , , , , , и .

В некоторых предпочтительных вариантах осуществления изобретения каждый из R₁₂ и R₁₃ независимо выбран из группы, состоящей из Н, С_1-4алкила, С_1-4алкилацила и С_1-4алкилсульфонила; или R₁₂ и R₁₃ вместе с атомом N, к которому они присоединены, образуют гетероциклил, выбранный из группы, состоящей из , , , , и

В некоторых предпочтительных вариантах осуществления изобретения R₁₂ выбран из группы, состоящей из Н, C_1-6алкила, C_1-6алкилацила и C_1-6алкилсульфонила; R₁₃ выбран из группы, состоящей из Н и C_1-6алкила; или R₁₂ и R₁₃ вместе с атомом N, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членный гетероциклил, и данный 5- или 6-членный гетероциклил необязательно имеет в качестве заместителя оксо.

В некоторых предпочтительных вариантах осуществления изобретения R₁₂ выбран из группы, состоящей из Н, С_1-4алкила, С_1-4алкилацила и С_1-4алкилсульфонила; R₁₁ выбран из группы, состоящей из Н и С_1-4алкила; или R₁₂ и R₁₃ вместе с атомом N, к которому они присоединены, образуют гетероциклил выбранный из группы, состоящей из , , , , и .

В некоторых более предпочтительных вариантах осуществления изобретения каждый из R₁ и R₂ независимо выбран из группы, состоящей из Н, F, Cl, Br, I, циано, метила, этила, пропила, бутила, -NR₇R₈, -NH-метилен-NR₉R₁₀, -NH-этилен-NR₉R₁₀, -NH-пропилен-NR₉R₁₀, -NHCO-метилен-NR₉R₁₀, -NHCO-этилен-NR₉R₁₀, -NHCO-пропилен-NR₉R₁₀, -NH-метилен-CO-NR₉R₁₀, -NH-этилен-CO-NR₉R₁₀, -NH-пропилен-CO-NR₉R₁₀, -NHCO-метилен-СОО-метила, -NHCO-метилен-СОО-этила, -NHCO-метилен-СОО-пропила, -NHCO-этилен-СОО-метила, -NHCO-этилен-СОО-этила, -NHCO-этилен-СОО-пропила, -NHCO-пропилен-СОО-метила, -NHCO-пропилен-СОО-этила, -NHCO-пропилен-СОО-пропила, -NH-циклопропилен-CO-NR₉R₁₀, -NH-циклобутилен-CO-NR₉R₁₀, -NH-циклопентилен-CO-NR₉R₁₀, -NH-винилен-CONR₉R₁₀, -NH-пропенилен-CONR₉R₁₀, -NH-aллилeн-CONR₉R₁₀, -NH-метилен-циано, -NH-этилен-циано, -NH-пропилен-циано, -NHCO-NH-R₁₁, -CONR₁₂R₁₃, -CONH-метилен-NR₁₂R₁₃, -CONH-этилен-NR₁₂R₁₃ и -CONH-пропилен-NR₁₂R₁₃, при этом метил, этил, пропил или бутил необязательно имеет в качестве заместителей одну или более чем одну группу, выбранную из группы, состоящей из гидроксила, F, Cl, Br, I, метиламино, этиламино, пропиламино, диметиламино, диэтиламино, дипропиламино и метилэтиламино, при условии, что R₁ и R₂ одновременно не являются Н.

В некоторых более предпочтительных вариантах осуществления изобретения R₁ выбран из группы, состоящей из Н, F, Cl, Br, I, циано, метила, этила, пропила, бутила, -NR₇R₈, -NH-мeтилeн-NR₉R₁₀, -NH-этилен-NR₉R₁₀, -NH-пропилен-NR₉R₁₀, -NHCO-мeтилeн-NR₉R₁₀, -NHCO-этилен-NR₉R₁₀, -NHCO-пропилен-NR₉R₁₀, -NH-мeтилeн-CO-NR₉R₁₀, -NH-этилен-CO-NR₉R₁₀, -NH-пропилен-CO-NR₉R₁₀, -NHCO-метилен-СОО-метила, -NHCO-метилен-СОО-этила, -NHCO-метилен-СОО-пропила, -NHCO-этилен-СОО-метила, -NHCO-этилен-СОО-этила, -NHCO-этилен-СОО-пропила, -NHCO-пропилен-СОО-метила, -NHCO-пропилен-СОО-этила, -NHCO-пропилен-СОО-пропила, -NH-циклопропилен-CO-NR₉R₁₀, -NH-циклoбутилeн-CO-NR₉R₁₀, -NH-циклопентилен-CO-NR₉R₁₀, -NH-винилен-CONR₉R₁₀, -NH-пропенилен-CONR₉R₁₀, -NH-aллилeн-CONR₉R₁₀, -NH-метилен-циано, -NH-этилен-циано, -NH-пропилен-циано, -NHCO-NH-R₁₁, -CONR₁₂R₁₃, -CONH-метилен-NR₁₂R₁₃, -CONH-этилен-NR₁₂R₁₃ и -CONH-пропилен-NR₁₂R₁₃, при этом метил, этил, пропил или бутил необязательно имеет в качестве заместителей одну или более чем одну группу, выбранную из группы, состоящей из гидроксила, F, Cl, Br, I, метиламино, этиламино, пропиламино, диметиламино, диэтиламино, дипропиламино и метилэтиламино; и R₂ выбран из группы, состоящей из Н и -NH₂, при условии, что R₁ и R₂ одновременно не являются Н.

В некоторых более предпочтительных вариантах осуществления изобретения каждый из R₇ и R₈ независимо выбран из группы, состоящей из Н, метила, этила, пропила, формила, ацетила, пропионила, метилсульфонила, этилсульфонила и пропилсульфонила; или R₇ и R₈ вместе с атомом N, к которому они присоединены, образуют гетероциклил, выбранный из группы, состоящей из , и .

В некоторых более предпочтительных вариантах осуществления изобретения R₇ выбран из группы, состоящей из Н, метила, этила, пропила, формила, ацетила, пропионила, метилсульфонила, этилсульфонила и пропилсульфонила; R₈ выбран из группы, состоящей из Н, метила, этила и пропила; или R₇ и R₈ вместе с атомом N, к которому они присоединены, образуют гетероциклил, выбранный из группы, состоящей из , и .

В некоторых более предпочтительных вариантах осуществления изобретения каждый из R₉ и R₁₀ независимо выбран из группы, состоящей из Н, гидроксила, метила, этила и пропила; или R₉ и R₁₀ вместе с атомом N, к которому они присоединены, образуют пиперидинил, морфолинил или пиперазинил.

В некоторых более предпочтительных вариантах осуществления изобретения R₉ выбран из группы, состоящей из Н, гидроксила, метила, этила и пропила; R₁₀ выбран из группы, состоящей из Н, метила, этила и пропила; или R₉ и R₁₀ вместе с атомом N, к которому они присоединены, образуют пиперидинил, морфолинил или пиперазинил.

В некоторых более предпочтительных вариантах осуществления изобретения R₁₁ представляет собой гетероарил, выбранный из группы, состоящей из , , , и .

В некоторых более предпочтительных вариантах осуществления изобретения каждый из R₁₂ и R₁₃ независимо выбран из группы, состоящей из Н, метила, этила, пропила, формила, ацетила, пропионила, метилсульфонила, этилсульфонила и пропилсульфонила; или R₁₂ и R₁₃ вместе с атомом N, к которому они присоединены, образуют гетероциклил, выбранный из группы, состоящей из , и .

В некоторых более предпочтительных вариантах осуществления изобретения R₁₂ выбран из группы, состоящей из Н, метила, этила, пропила, формила, ацетила, пропионила, метилсульфонила, этилсульфонила и пропилсульфонила; R₁₃ выбран из группы, состоящей из Н, метила, этила и пропила; или R₁₂ и R₁₃ вместе с атомом N, к которому они присоединены, образуют гетероциклил, выбранный из группы, состоящей из , и .

В некоторых еще более предпочтительных вариантах осуществления изобретения каждый из R₁ и R₂ независимо выбран из группы, состоящей из Н, Вr, циано, метила, -NR₇R₈, -NH-этилен-NR₉R₁₀, -NHCO-метилен-NR₉R₁₀, -NH-мeтилeн-CO-NR₉R₁₀, -NH-этилен-CO-NR₉R₁₀, -NHCO-этилен-СОО-этила, -NH-циклoбутилeн-CO-NR₉R₁₀, -NH-пропенилен-CONR₉R₁₀, -NH-этилен-циано, -NHCO-NH-R₁₁, -CONR₁₂R₁₃ и -CONH-этилен-NR₁₂R₁₃, при этом метил необязательно имеет в качестве заместителей гидроксил, F или метиламино, при условии, что R₁ и R₂ одновременно не являются Н.

В некоторых еще более предпочтительных вариантах осуществления изобретения R₁ выбран из группы, состоящей из Н, Вr, циано, метила, -NR₇R₈, -NH-этилен-NR₉R₁₀, -NHCO-мeтилeн-NR₉R₁₀, -NH-метилен-CO-NR₉R₁₀, -NH-этилен-CO-NR₉R₁₀, -NHCO-этилен-СОО-этила, -NH-циклобутилен-CO-NR₉R₁₀, -NH-пропенилен-CONR₉R₁₀, -NH-этилен-циано, -NHCO-NH-R₁₁, -CONR₁₂R₁₃ и -CONH-этилен-NR₁₂R₁₃, при этом метил необязательно имеет в качестве заместителей гидроксил, F или метиламино; и R₂ выбран из группы, состоящей из Н и -NH₂, при условии, что R₁ и R₂ одновременно не являются Н.

В некоторых еще более предпочтительных вариантах осуществления изобретения каждый из R₇ и R₈ независимо выбран из группы, состоящей из Н, этила, ацетила и метилсульфонила; или R₇ и R₈ вместе с атомом N, к которому они присоединены, образуют .

В некоторых еще более предпочтительных вариантах осуществления изобретения R₇ выбран из группы, состоящей из Н, этила, ацетила и метилсульфонила; R₈ выбран из группы, состоящей из Н и этила; или R₇ и R₈ вместе с атомом N, к которому они присоединены, образуют .

В некоторых еще более предпочтительных вариантах осуществления изобретения каждый из R₉ и R₁₀ независимо выбран из группы, состоящей из Н и гидроксила; или R₉ и R₁₀ вместе с атомом N, к которому они присоединены, образуют морфолинил.

В некоторых еще более предпочтительных вариантах осуществления изобретения R₉ выбран из группы, состоящей из Н и гидроксила; R₁₀ выбран из Н; или R₉ и R₁₀ вместе с атомом N, к которому они присоединены, образуют морфолинил.

В некоторых еще более предпочтительных вариантах осуществления изобретения R₁₁ представляет собой .

В некоторых еще более предпочтительных вариантах осуществления изобретения каждый из R₁₂ и R₁₃ независимо выбран из группы, состоящей из Н и метила.

В некоторых еще более предпочтительных вариантах осуществления изобретения R₁₂ выбран из группы, состоящей из Н и метила; и R₁₃ выбран из группы, состоящей из Н и метила.

В некоторых особенно предпочтительных вариантах осуществления изобретения R₁ выбран из группы, состоящей из Н, Вr, циано, метила, -NR₇R₈, -NH-этилен-NR₉R₁₀, -NHCO-мeтилeн-NR₉R₁₀, -NH-метилен-CO-NR₉R₁₀, -NH-этилен-CO-NR₉R₁₀, -NHCO-этилен-СОО-этила, -NH-циклобутилен-CO-NR₉R₁₀, -NH-пропенилен-CONR₉R₁₀, -NH-этилен-циано, -NHCO-NH-R₁₁, -CONR₁₂R₁₃ и -CONH-этилен-NR₁₂R₁₃, при этом метил необязательно имеет в качестве заместителей гидроксил, F или метиламино; каждый из R₇ и R₈ независимо выбран из группы, состоящей из Н, этила, ацетила и метилсульфонила, или R₇ и R₈ вместе с атомом N, к которому они присоединены, образуют ; каждый из R₉ и R₁₀ независимо выбран из группы, состоящей из Н и гидроксила, или R₉ и R₁₀ вместе с атомом N, к которому они присоединены, образуют морфолинил; R₁₁ представляет собой ; каждый из R₁₂ и R₁₃ независимо выбран из группы, состоящей из Н и метила; и R₂ выбран из группы, состоящей из Н и -NH₂, при условии, что R₁ и R₂ одновременно не являются Н.

В некоторых особенно предпочтительных вариантах осуществления изобретения R₁ выбран из группы, состоящей из Н, Br, -CN, -NH₂, -NHC₂H₅, -N(C₂H₅)₂, -NHC(=O)CH₃, -NHSO₂CH₃, -NНСН₂СН₂-морфолинила, -NС(=O)СН₂-морфолинила, -NHСН₂СН₂С(=O)-морфолинила, -NHСН₂ С(=O)-морфолинила, -NHC(=O)СН₂СН₂C(=O)OC₂H₅, сукцинимидо, -NH-циклобутилен-С(=O)-морфолинила, -NHСН₂CH=CHC(=O)NHOH, -NHСН₂СН₂C(=O)NHOH, -NHСН₂СН₂CN, -NНС(=O)NH-(5-метил-1,2,4-оксадиазол-3-ил), -C(=O)NH₂, -C(=O)NHCH₃, -C(=O)NHСН₂СН₂NH₂, -СН₂ОН, -СН₂F, -CHF₂ и -СН₂NHCH₃; и R₂ выбран из группы, состоящей из Н и -NH₂, при условии, что R₁ и R₂ одновременно не являются Н.

В некоторых предпочтительных вариантах осуществления изобретения R₃ выбран из группы, состоящей из Н и Вr.

В некоторых предпочтительных вариантах осуществления изобретения каждый из R₅ и R₆ независимо выбран из группы, состоящей из Н, гидроксила и F.

В некоторых отдельных особенно предпочтительных вариантах осуществления изобретения предлагаемое соединение Формулы (I) выбрано из группы, состоящей из

и

В качестве предпочтительного варианта соединения Формулы (I), описанного в настоящей заявке, предложено соединение, представленное Формулой (Iа) (показанной ниже), его стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль:

где каждый из R₇ и R₈ независимо выбран из группы, состоящей из Н, C_1-6алкила, C_1-6алкилацила и C_1-6-балкилсульфонила.

В предпочтительном варианте соединения, представленного Формулой (Iа), каждый из R₇ и R₈ независимо выбран из группы, состоящей из Н, метила, этила, пропила, бутила, пентила, гексила, формила, ацетила, пропионила, бутирила, валерила, гексаноила, метилсульфонила, этилсульфонила, пропилсульфонила, бутилсульфонила, пентилсульфонила и гексилсульфонила.

В предпочтительном варианте соединения, представленного Формулой (Ia), R₇ выбран из Н и R₈ выбран из группы, состоящей из метила, этила, пропила, бутила, пентила, гексила, формила, ацетила, пропионила, бутирила, валерила, гексаноила, метилсульфонила, этилсульфонила, пропилсульфонила, бутилсульфонила, пентилсульфонила и гексилсульфонила.

В некоторых отдельных особенно предпочтительных вариантах осуществления изобретения предлагаемое соединение Формулы (Iа) выбрано из группы, состоящей из

В других особенно предпочтительных вариантах осуществления изобретения предлагаемое соединение Формулы (I) выбрано из группы, состоящей из

и

В некоторых вариантах осуществления изобретения более предпочтительный стереоизомер соединения Формулы (I) выбран из группы, состоящей из

ОПРЕДЕЛЕНИЯ

Если не указано иное, следующие термины, использованные в данном описании, имеют определенные ниже значения. Если конкретный термин или фраза прямо не определены, их нельзя считать неопределенными или неясными и следует понимать в соответствии с их обычными значениями, принятым в данной области техники. Когда в данном описании упомянуто торговое название, предполагается, что указан соответствующий продукт или его активный ингредиент.

Термин "необязательный" или "необязательно" означает, что описываемый далее факт или условие может иметь место или не может иметь места и что данное описание включает примеры, в которых указанный факт или условие имеет место, и примеры, в которых указанный факт или условие не имеет места. Например, когда этил "необязательно" имеет в качестве заместителя атом галогена, это означает, что этил может быть незамещенным (СН₂CH₃), монозамещенным (например СН₂СН₂F), полизамещенным (например CHFСН₂F, СН₂CHF₂ и так далее) или полностью замещенным (CF₂CF₃). Когда речь идет о какой-нибудь группе, содержащей один или более чем один заместитель, специалистам в данной области техники должно быть понятно, что в такие группы не мог быть введен любой заместитель или набор заместителей, которые пространственно не совместимы и/или введение которых невозможно с точки зрения синтеза.

"С_m-n" в контексте данного описания означает, что группировка содержит m-n атомов углерода. Например, "С_1-8алкил" означает, что алкильная группа содержит 1-8 атомов углерода.

Диапазон числовых значений в контексте данного описания относится к каждому целому числу в пределах данного диапазона. Например, "C_1-8" означает, что данная группа может иметь один атом углерода, два атома углерода, три атома углерода, четыре атома углерода, пять атомов углерода, шесть атомов углерода, семь атомов углерода или восемь атомов углерода.

Термин "замещенный" означает, что один или более чем один любой атом водорода у данного атома заменен заместителем(ями), при условии, что валентное состояние данного атома является нормальным и замещенное соединение является стабильным. Когда заместитель представляет собой оксо (то есть =O), это означает, что заменены два атома водорода и оксо не встречается в ароматической группе.

Когда какая-нибудь переменная (например R) встречается в композиции или структуре соединения более одного раза, в каждом случае данная переменная определена независимо. Поэтому, например, если группа имеет в качестве заместителей 0-2 R, данная группа может быть необязательно замещенной и иметь в качестве заместителей до двух R, и в каждом случае R выбран независимо. Кроме того, допустима комбинация заместителей и/или их вариантов, если такая комбинация приводит к образованию стабильного соединения.

Термин "атом галогена" относится к атому фтора, хлора, брома или иода.

Термин "гидроксил" относится к группе -ОН.

Термин "циано" относится к группе -CN.

Термин "оксо" относится к группе =O.

Термин "амино" относится к группе -NH₂, группе -NH(С_1-6алкил) или группе -N(С_1-6алкил)₂. Конкретные примеры аминогруппы включают, без ограничения, -NH₂, -NHCH₃, -N(CH₃)₂, -NHC₂H₅, -N(C₂H₅)₂, -N(C₃H₇)₂, -N(CH₃)C₂H₅ и тому подобное.

Термин "алкил" относится к нормальной или разветвленной насыщенной алифатической углеводородной группе, состоящей из атомов углерода и атомов водорода, которая присоединена к остальной части молекулы посредством простой связи. Неограничивающие примеры алкила включают метил, этил, пропил, бутил, пентил, гексил, гептил, октил, нонил, децил, -СН(CH₃)₂, -СН(CH₃)(СН₂CH₃), -СН(СН₂CH₃)₂, -С(CH₃)₃, -С(СН₂CH₃)₃, -СН₂СН(CH₃)₂, -СН₂СН(CH₃)(СН₂CH₃) и тому подобное. Термин "С_1-8алкил" относится к алкилу, имеющему 1-8 атомов углерода. Термин "C_1-6алкил" относится к алкилу, имеющему 1-6 атомов углерода. Термин "С_1-4алкил" относится к алкилу, имеющему 1-4 атомов углерода. "Алкил", "С_1-8алкил", "C_1-6алкил" или "С_1-4алкил" может быть незамещенным или может быть замещенным и иметь один или более чем один заместитель, выбранный из группы, состоящей из гидроксила, атома галогена и амино.

Группа, название которой составлено из константной части, указывающей количество атомов углерода, такой как "проп-", "бут-", "пент-" и тому подобное, и из функциональной части, включает все изомеры группы, например, 1) группа бутил включает СH₃СН₂СН₂-, (CH₃)₂СН-; 2) группа бутирил включает CH₃СН₂СН₂СО-, (CH₃)₂СНСО-.

Термин "алкилен" относится к нормальной или разветвленной насыщенной алифатической углеводородной группе, состоящей из атомов углерода и атомов водорода, которая присоединена к остальной части молекулы через два сайта связывания. Неограничивающие примеры алкилена включают метилен (-СН₂-), 1,1-этилен (-СН(СН₃)-), 1,2-этилен (-СН₂СН₂-), 1,1-пропилен (-СН(СН₂CH₃)-), 1,2-пропилен (-СН₂СН(СН₃)-), 1,3-пропилен (-СН₂СН₂СН₂-), 1,4-бутилен (-СН₂СН₂СН₂СН₂-) и тому подобное. Термин "C_1-6алкилен" относится к алкилену, имеющему 1-6 атомов углерода. Термин "С_1-4алкилен" относится к алкилену, имеющему 1-4 атомов углерода.

Термин "циклоалкилен" относится к насыщенному циклоалкану, который присоединен к остальной части молекулы через два сайта связывания. Неограничивающие примеры циклоалкилена включают 1,2-циклопропилен (), 1,1-циклопропилен (), 1,3-цикл обутилен (), 1,1-циклобутилен (), 1,3-циклопентилен (), 1,3-циклогексилен (), 1,4-циклогексилен () и тому подобное. Термин "С_3-6циклоалкилен" относится к циклоалкилену, имеющему 3-6 атомов углерода. Термин "С_3-5циклоалкилен" относится к циклоалкилену, имеющему 3-5 атомов углерода.

Термин "алкенилен" относится к нормальной или разветвленной ненасыщенной алифатической углеводородной группе, которая состоит из атомов углерода и атомов водорода, содержит по меньшей мере одну двойную связь и присоединена к остальной части молекулы через два сайта связывания. Неограничивающие примеры "алкенилена" включают, без ограничения, 1,2-винилен (-СН=СН-), 1,3-пропенилен (-СН=СН-СН₂-), 1,4-бут-2-енилен (-СН₂-СН=СН-СН₂-) и тому подобное. Термин "С_2-6алкенилен" относится к алкенилену, имеющему 2-6 атомов углерода. Термин "С_2-4алкенилен" относится к алкенилену, имеющему 2-4 атома углерода.

Термин "алкилацил" относится к группе, образованной путем соединения алкила с -СО-, и неограничивающие примеры алкилацила включают формил, ацетил, пропионил, бутирил и тому подобное. Термин "C_1-6алкилацил" относится к группе, образованной путем соединения C_1-6алкила с -СО-. Термин "С_1-4алкилацил" относится к группе, образованной путем соединения С_1-4алкила с -СО-.

Термин "алкилсульфонил" относится к группе, образованной путем соединения алкила с -SO₂-, и неограничивающие примеры алкилсульфонила включают метилсульфонил, этилсульфонил, пропилсульфонил, бутилсульфонил и тому подобное. Термин "C_1-6алкилсульфонил" относится к группе, образованной путем соединения C_1-6алкила с -SO₂-. Термин "С_1-4алкилсульфонил" относится к группе, образованной путем соединения С_1-4алкила с -SO₂-.

Термин "гетероарил" относится к моноциклической или конденсированной полициклической системе, у которой по меньшей мере один кольцевой атом выбран из N, О или S и другие кольцевые атомы представляют собой С, содержащей по меньшей мере одно ароматическое кольцо. Неограничивающие примеры "гетероарила" включают, без ограничения, пирролил, фурил, тиенил, имидазолил, оксазолил, 1,2,4-оксадиазолил, пиразолил, пиридил, пиримидил, пиразинил, хинолил, изохинолил, тетразолил, триазолил, триазинил, бензофурил, бензотиенил, индолил, изоиндолил и тому подобное. Термин "5- или 6-членный гетероарил" относится к гетероарилу, имеющему 5-6 кольцевых атомов. "Гетероарил" или "5- или 6-членный гетероарил" может быть незамещенным или может быть замещенным и иметь один или более чем один заместитель, выбранный из группы, состоящей из гидроксила, атома галогена и С_1-4алкила.

Термин "гетероциклил" относится к неароматической моноциклической, конденсированной полициклической, мостиковой или спиро кольцевой системе, у которой часть кольцевых атомов может являться гетероатомами, выбранными из N, О, S(O)_n (где n имеет значение 0, 1 или 2) и другие кольцевые атомы представляют собой С. Такое кольцо может быть насыщенным или ненасыщенным (например иметь одну или более чем одну двойную связь), но при этом не имеет полностью конъюгированной π-электронной системы. Неограничивающие примеры "гетероциклила" включают оксиранил, тииранил, азиранил, азетидинил, оксетанил, тиетанил, тетрагидрофуранил, пирролидинил, оксазолидинил, тетрагидропиразолил, пирролинил, дигидрофуранил, дигидротиенил, пиперидинил, тетрагидропиранил, тетрагидротиапиранил, морфолинил, пиперазинил, дигидропиридил, тетрагидропиридил, дигидропиранил, тетрагидропиранил, дигидротиапиранил, азациклогептил, оксациклогептил, тиациклогептил, окса-азабицикло[2.2.1]гептил, азаспиро[3.3]гептил и тому подобное. Термин "5- или 6-членный гетероциклил" относится к гетероциклилу, имеющему 5-6 кольцевых атомов. "Гетероциклил" или "5- или 6-членный гетероциклил" может быть незамещенным или может быть замещенным и иметь один или более чем один заместитель, выбранный из группы, состоящей из гидроксила, атома галогена, С_1-4алкила и оксо.

Термин "фармацевтически приемлемый" относится к соединениям, веществам, композициям и/или лекарственным формам, которые, по результатам медицинской оценки, могут быть использованы в контакте с тканями людей и животных и не вызывают чрезмерного токсического ответа, раздражения, аллергической реакции или других проблем или осложнений, соизмеримых с разумным соотношением польза/риск.

В качестве фармацевтически приемлемой соли может быть приведена, например, соль металла, аммониевая соль, соль, образованная с органическим основанием, соль, образованная с неорганической кислотой, соль, образованная с органической кислотой, соль, образованная со щелочной или кислой аминокислотой и тому подобное. Неограничивающие примеры соли металла включают, без ограничения, соль щелочного металла, такую как соль натрия, соль калия и тому подобное; соль щелочно-земельного металла, такую как соль кальция, соль магния, соль бария и тому подобное; соль алюминия и тому подобное. Неограничивающие примеры соли, образованной с органическим основанием, включают, без ограничения, соли, образованные с триметиламином, триэтиламином, пиридином, метилпиридином, 2,6-диметилпиридином, этанол амином, диэтанол амином, триэтанол амином, циклогексиламином, дициклогексиламином, и тому подобное. Неограничивающие примеры соли, образованной с неорганической кислотой, включают, без ограничения, соли, образованные с соляной кислотой, бромистоводородной кислотой, азотной кислотой, серной кислотой, фосфорной кислотой, и тому подобное. Неограничивающие примеры соли, образованной с органической кислотой, включают, без ограничения, соли, образованные с муравьиной кислотой, уксусной кислотой, трифторуксусной кислотой, фумаровой кислотой, щавелевой кислотой, яблочной кислотой, малеиновой кислотой, винной кислотой, лимонной кислотой, янтарной кислотой, метансульфоновой кислотой, бензолсульфоновой кислотой, пара-метилбензолсульфоновой кислотой, и тому подобное. Неограничивающие примеры соли, образованной со щелочной аминокислотой, включают, без ограничения, соли, образованные с аргинином, лизином, орнитином, и тому подобное. Неограничивающие примеры соли, образованной с кислой аминокислотой, включают, без ограничения, соли образованные с аспарагиновой кислотой, глутаминовой кислотой, и тому подобное.

Фармацевтически приемлемая соль в контексте данного описания может быть синтезирована из исходного соединения, содержащего кислотный радикал или основной радикал, с использованием стандартных химических методик. В общем случае, методика получения такой соли включает взаимодействие указанных соединений в форме свободной кислоты или основания со стехиометрическим количеством подходящего основания или кислоты в воде, или органическом растворителе, или смеси воды и органического растворителя и последующее выделение полученной соли в виде твердого вещества из реакционного раствора. Однако могут быть использованы и другие методики получения соли. В общем случае, неводная среда, такая как диэтиловый эфир, этилацетат, этанол, изопропанол, ацетонитрил и тому подобное, является предпочтительной.

Некоторые соединения, как описано в настоящей заявке, могут существовать в виде несольватированной формы или сольватированной формы, включая гидратированную форму. В общем случае, сольватированная форма сравнима с несольватированной формой, и в настоящем изобретении предложены обе формы. Некоторые соединения, как описано в настоящей заявке, могут существовать в виде поликристаллической или аморфной формы.

Некоторые соединения, как описано в настоящей заявке, могут иметь асимметричный атом углерода (оптический центр) или двойную связь. Все рацематы, диастереоизомеры, геометрические изомеры и индивидуальные изомеры включены в объем настоящего изобретения.

Графические представления рацемических, амбискалемических и скалемических или энантиомерно чистых соединений в данном описании соответствуют Maehr, J. Chem. Ed. 1985, 62: 114-120. Если не указано иное, связь в виде клиновидной линии и связь в виде пунктирной линии использованы для изображения абсолютной конфигурации стереоскопичного центра. Когда соединения в данном описании содержат олефиновую двойную связь или другой геометрически асимметричный центр, если не указано иное, они включают геометрические изомеры Е и Z. Точно так же все таутомерные формы включены в объем настоящего изобретения.

Соединения, предлагаемые в настоящей заявке, могут иметь конкретные геометрические изомеры или стереоизомерные формы. Все такие соединения входят в настоящую заявку, включая цис- и транс-изомеры, Z- и Е-изомеры, (-)- и (+)-энантиомеры, (R)- и (S)-энантиомеры, диастереоизомеры, (D)-изомеры, (L)-изомеры, и рацемические смеси данных изомеров, и другие смеси, такие как энантиомерно- или диастереоизомернообогащенная смесь. Все такие смеси включены в объем настоящего изобретения. Заместители, такие как алкильная группа, могут иметь дополнительные асимметричные атомы углерода. Все такие изомеры и их смеси включены в объем настоящего изобретения.

Оптически активные (R)- и (S)-изомеры и D- и L-изомеры могут быть получены с использованием хирального расщепления, хирального синтеза или хиральных реагентов, или других стандартных методик. Если желательно получить один индивидуальный энантиомер некоторого соединения, предложенного в настоящей заявке, данный энантиомер может быть получен путем асимметрического синтеза или дериватизации с использованием вспомогательного хирального вещества, что включает разделение смеси диастереоизомеров и отщепление вспомогательных групп с получением желаемого чистого энантиомера. Альтернативно, когда молекула содержит щелочную функциональную группу (такую как аминогруппа) или кислотную функциональную группу (такую как карбоксильная группа), молекула может образовать диастереоизомерную соль с подходящей оптически активной кислотой или основанием, затем данный диастереоизомер выделяют с использованием методик фракционной кристаллизации или хроматографии, хорошо известных в данной области техники, и в результате получают чистый энантиомер. Кроме того, разделение энантиомера и диастереоизомера обычно осуществляют путем хроматографии с использованием хиральной стационарной фазы или необязательного комбинирования данной методики с методикой химической дериватизации (например с использованием амина для получения карбаматной соли).

Соединение, предлагаемое в настоящей заявке, может содержать атомные изотопы в соотношении, не встречающемся в природе, у одного или более чем одного атома, входящего в состав соединения. Например, соединение может быть мечено радиоактивным изотопом, таким как тритий (³Н), иод-125 (¹²⁵I) или углерод-14 (¹⁴С). Все варианты соединения, предлагаемого в настоящей заявке, образованные всеми этими изотопами, независимо от того, являются они радиоактивными или нет, включены в настоящую заявку.

Соединение, предлагаемое в настоящей заявке, также включает пролекарство данного соединения. Термин "пролекарство" в контексте данного описания относится к любым ковалентно связанным носителям, которые высвобождают активное исходное соединение, когда такое пролекарство вводят нуждающемуся в этом млекопитающему. Пролекарство может быть получено путем модификации функциональных групп, присутствующих в соединении, таким образом, что пролекарство может быть превращено в исходное соединение с использованием стандартной манипуляции или in vivo. Пролекарство включает, например, соединение, в котором гидроксильная группа, аминогруппа, меркаптогруппа или карбоксильная группа связана с любыми группами и отщепляется с образованием свободной гидроксильной группы, свободной аминогруппы, свободной меркаптогруппы или свободной карбоксильной группы, соответственно, когда пролекарство вводят нуждающемуся в этом млекопитающему. Примеры пролекарства включают, без ограничения, ацетатные, формиатные и бензоатные производные спиртовой функциональной группы в соединениях согласно настоящему изобретению или метиламинные и этиламинные производные функциональной аминогруппы в соединениях согласно настоящему изобретению.

Соединения, предлагаемые в настоящей заявке, могут быть получены с использованием различных методик синтеза, хорошо известных специалисту в данной области техники, включая конкретные варианты осуществления изобретения, проиллюстрированные в данном описании ниже, варианты осуществления изобретения, полученные путем комбинации конкретных вариантов осуществления изобретения с другими химическими методиками синтеза, а также эквивалентные варианты осуществления изобретения, хорошо известные специалисту в данной области техники. Предпочтительные варианты осуществления изобретения включают, без ограничения, Примеры, описанные в настоящей заявке.

Химические реакции в конкретных вариантах осуществления изобретения, описанных в настоящей заявке, проводят в подходящих растворителях, которые должны быть пригодны для химической модификации, описанной в настоящей заявке, а также для реагентов и веществ, необходимых для такой модификации. Для получения соединений, предлагаемых в настоящей заявке, специалисту в данной области техники иногда необходимо модифицировать или выбирать стадии синтеза или методики реакций на основе существующих вариантов осуществления изобретения.

Одним из важных факторов, который необходимо учитывать в любой Схеме синтеза в данной области техники, является выбор подходящих защитных групп для реакционноспособных функциональных групп (таких как аминогруппа в настоящей заявке). Для любого квалифицированного специалиста-практика авторитетным руководством в данной области является книга Greene and Wuts, Protective Groups In Organic Synthesis, Wiley and Sons, 1991. Все источники, цитированные в настоящей заявке, включены в данное описание посредством ссылки во всей своей полноте.

За ходом реакций, приведенных в данном описании, можно следить с использованием любых подходящих методик, известных в данной области техники. Например, за образованием продукта можно следить с использованием широкого круга методик, например спектроскопии ядерного магнитного резонанса (такой как ¹Н- или ¹³С-ЯМР), инфракрасной спектроскопии, спектрофотометрии (например, в видимой и ультрафиолетовой областях) или масс-спектрографии, или путем хроматографии, например высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) или тонкослойной хроматографии.

Некоторые из соединений Формулы (I), предлагаемых в настоящей заявке, могут быть получены специалистом в области органического синтеза в соответствии со стандартной методикой, используемой в данной области техники, согласно Схеме 1.

Как показано на Схеме 1, соединения 1-8 и 1-10, содержащие амино-замещенное пиразолильное ядро, могут быть синтезированы из пирроло[2,3-b]пиримидина, в качестве исходного вещества. Аминогруппа соединения 1-1 может быть защищена подходящей защитной группой (P₁) с получением соединения 1-2, которое подвергают взаимодействию с цианоуксусной кислоты этиловым эфиром с получением соединения 1-3; соединение 1-3 подвергают декарбоксилированию с получением соединения 1-4, которое затем подвергают взаимодействию с N,N-диметилформамидом-диметилацеталем (ДМФА-ДМА) с получением соединения 1-5; соединение 1-5 подвергают взаимодействию с гидратом гидразина и затем подвергают циклизации с получением соединения 1-6, содержащего амино-замещенное пиразолильное ядро, затем соединение 1-6 может быть подвергнуто взаимодействию с реагентом 1-11 (где L представляет собой уходящую группу) с получением соединения 1-7; в результате снятия защитной группы у соединения 1-7 получают соединение 1-8, предлагаемое в настоящей заявке. В соединение 1-7 вводят различные боковые цепи с получением соединения 1-9; в результате снятия защитной группы у соединения 1-9 получают соединение, предлагаемое в настоящей заявке, содержащее амино-замещенный пиразол.

Некоторые из соединений Формулы (I), предлагаемых в настоящей заявке, также могут быть получены специалистом в области органического синтеза в соответствии со стандартной методикой, используемой в данной области техники, согласно Схеме 2.

Как показано на Схеме 2, соединения 2-14, 2-9 и 2-16, содержащие амино/аминоацил/циано-замещенное пиразолильное ядро, могут быть синтезированы из пиразола 2-1, имеющего в качестве заместителя сложноэфирную группу (Р₂ представляет собой защитную группу), в качестве исходного вещества. Соединение 2-1 подвергают взаимодействию с соединением 1-2, используя реакцию сочетания Сузуки, с получением соединения 2-2, которое подвергают гидролизу и перегруппировке Курциуса с получением амино-замещенного пиразольного соединения 2-4; в результате снятия защитной группы на пиразолиле у соединения 2-4 получают соединение 2-10, которое подвергают взаимодействию с реагентом 1-11 (где L представляет собой уходящую группу) с получением соединения 2-11; у соединения 2-11 может быть снята защитная группа с получением соединения 2-12, предлагаемого в настоящей заявке, или защитная группа может быть снята после введения боковой цепи в аминогруппу с получением соединения 2-14, предлагаемого в настоящей заявке. У соединения 2-2 может быть снята защитная группа, и затем полученное соединение может быть подвергнуто взаимодействию с реагентом 1-11 (где L представляет собой уходящую группу) с получением соединения 2-6, которое подвергают гидролизу и затем конденсации с амином, или сразу взаимодействию с амином, с получением соединения 2-8. У соединения 2-8 может быть снята защитная группа с получением амидо-замещенного соединения 2-9, предлагаемого в настоящей заявке, или амидо-группу подвергают гидролизу с получением циано-замещенного соединения 2-15, и затем у соединения 2-15 снимают защитную группу с получением соединения 2-16, предлагаемого в настоящей заявке.

Некоторые из соединений Формулы (I), предлагаемых в настоящей заявке, также могут быть получены специалистом в области органического синтеза в соответствии со стандартной методикой, используемой в данной области техники, согласно Схеме 3.

Как показано на Схеме 3, соединения 3-4, 3-8, 3-13 и 3-17, которые содержат гидроксилметильную/фторметильную/дифторметильную/аминометильную группу, могут быть синтезированы из соединения 2-2, полученного в соответствии со Схемой 2. Соединение 2-2, имеющее в качестве заместителя сложноэфирную группу, восстанавливают алюмогидридом лития с получением спирта 3-1, который обрабатывают DAST (диэтиламиносератрифторидом) с получением фтор-соединения 3-5. Соединение 2-2 также может быть восстановлено ДИБАГ (диизобутилалюминийгидридом) с получением соединения 3-9, имеющего в качестве заместителя альдегидную группу, которое может быть обработано DAST с получением дифтор-соединения 3-10 или подвергнуто восстановительному аминированию с получением соединения 3-14. Полученные промежуточные соединения 3-1, 3-5, 3-10 и 3-14 после снятия защитной группы подвергают взаимодействию с соединением 1-11 (где L представляет собой уходящую группу), и затем снимают защитную группу с получением, соответственно, соединений 3-4, 3-8, 3-13 и 3-17, предлагаемых в настоящей заявке.

Некоторые из соединений Формулы (I), предлагаемых в настоящей заявке, также могут быть получены специалистом в области органического синтеза в соответствии со стандартной методикой, используемой в данной области техники, согласно Схеме 4.

Как показано на Схеме 4, соединение 4-3, содержащее групп галогена, может быть синтезировано из соединения 4-1 (то есть из соединения 1-7, показанного на Схеме 1, или из соединения 2-11, показанного на Схеме 2). Соединение 4-1 подвергают диазотированию и галогенированию с получением соединения 4-2, и после снятия защитной группы на аминогруппе у соединения 4-2 получают соединение 4-3, предлагаемое в настоящей заявке.

Согласно другому аспекту настоящей заявки предложено применение соединения, представленного Формулой (I), его стереоизомера или фармацевтически приемлемой соли для получения лекарства для лечения заболевания, опосредованного Янус-киназой.

Согласно еще одному аспекту настоящей заявки предложен способ лечения заболевания, опосредованного Янус-киназой, включающий введение пациенту терапевтически эффективно количества соединения, представленного Формулой (I), его стереоизомера или фармацевтически приемлемой соли.

Заболевание, опосредованное Янус-киназой, описанное в настоящей заявке, включает, без ограничения, опухоль (такую как лимфома, лейкоз). Лимфома, описанная в настоящей заявке, может включать, без ограничения, болезнь Ходжкина или неходжкинскую лимфому, и неходжкинская лимфома включает, без ограничения, В-клеточную лимфому и Т-клеточную лимфому. Лейкоз, описанный в настоящей заявке, включает, без ограничения, острый лимфобластный лейкоз, хронический лимфоцитарный лейкоз, острый миелоидный лейкоз и хронический миелоцитарный лейкоз.

Соединения, описанные в разделе Примеры настоящей заявки, проявляют значительную JAK-ингибирующую активность. Например, в одном или более чем одном из тестов, приведенных в данном описании, JAK-ингибирующая активность соединений составляет менее 1000 нМ, в предпочтительном варианте JAK-ингибирующая активность составляет менее 200 нМ, в более предпочтительном варианте JAK-ингибирующая активность составляет менее 100 нМ и в особенно предпочтительном варианте JAK-ингибирующая активность составляет менее 20 нМ.

В сравнении с другими ингибиторами киназы JAK некоторые типичные соединения, предлагаемые в настоящей заявке, также обладают прекрасными фармакокинетическими свойствами, и данные соединения, в качестве активных ингредиентов, могут быть введены пациенту в более низкой дозе, что уменьшает стоимость лечения пациента.

Термин "пациент" относится к любым животным, включая млекопитающих, предпочтительно мышей, крыс, других грызунов, кроликов, собак, кошек, свиней, крупный рогатый скот, овец, лошадей или приматов, наиболее предпочтительно человека.

Фраза "терапевтически эффективное количество" в контексте данного описания относится к такому количеству активного соединения или фармацевтического агента, которое вызывает биологический или терапевтический эффект, который может быть обнаружен в ткани, системе, животном, субъекте или человеке исследователем, ветеринаром, врачом или другими клиницистами, включая один или более чем один эффект, выбранный из следующего списка:

(1) предупреждение заболевания, например предупреждение заболевания, расстройства или состояния у субъекта, который может быть предрасположен к данному заболеванию, расстройству или состоянию, но у которого еще не проявляется или еще не обнаружена патология или симптоматика данного заболевания;

(2) подавление развития заболевания, например подавление развития заболевания, расстройства или состояния у субъекта, у которого проявляется или обнаружена патология или симптоматика данного заболевания, расстройства или состояния (то есть предупреждение дальнейшего прогрессирования патологии и/или симптоматики);

(3) ослабление заболевания, например ослабление заболевания, расстройства или состояния у субъекта, у которого проявляется или обнаружена патология или симптоматика данного заболевания, расстройства или состояния (то есть регресс патологии и/или симптоматики).

Согласно другому аспекту настоящей заявки предложена фармацевтическая композиция, содержащая терапевтически эффективное количество соединения, представленного Формулой (I), или его фармацевтически приемлемой соли, и один или более чем один фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент.

При использовании в качестве лекарства соединения, предлагаемые в настоящей заявке, могут быть введены в форме фармацевтических композиций. Данные композиции могут быть получены с использованием методик, хорошо известных в области фармацевтики, и могут быть введены различными путями, в зависимости от того, местное или системное лечебное действие желательно получить, и от того, какая система организма нуждается в лечении. Введение может быть местным (например трансдермальное, эпидермальное введение, введение через глаз и через слизистую оболочку, включая интраназальную, вагинальную и ректальную доставку), пульмональным (например ингаляция или инсуффляция порошков или аэрозолей, включая их введение с помощью небулайзера; внутритрахеальное или интраназальное введение), пероральным или парентеральным. Парентеральное введение включает внутривенную, внутриартериальную, подкожную, интраперитонеальную или внутримышечную инъекцию или инфузию или интракраниальное, такое как интратекальное или интравентрикулярное, введение. Парентеральное введение может быть выполнено в форме однократной большой дозы или, например, в форме продолжительной перфузии с использованием насоса. Фармацевтические композиции и препараты для местного введения могут включать чрезкожные пластыри, мази, лосьоны, кремы, гели, капли, суппозитории, спреи, жидкости и порошки. Использование стандартных фармацевтических носителей, воды, порошков или масляных основ, загустителей и тому подобного может быть необходимым или желательным. Также могут быть использованы презервативы и перчатки с покрытием и тому подобное.

Настоящая заявка также включает фармацевтическую композицию, которая содержит одно или более чем одно соединение, предлагаемое в настоящей заявке, в качестве активного ингредиента, в комбинации с одним или более чем одним фармацевтически приемлемым носителем. При получении композиции, предлагаемой в настоящей заявке, активный ингредиент обычно смешивают с эксципиентом, разбавляют эксципиентом или помещают внутрь такого носителя в форме, например, капсулы, саше, бумаги или другого контейнера. Когда эксципиент используют в качестве разбавителя, он может быть твердым, полужидким или жидким веществом, которое выполняет роль наполнителя, носителя или среды для активного ингредиента. Поэтому композиция может находиться в форме таблеток, пилюль, порошков, лепешек, саше, облаток, эликсиров, суспензий, эмульсий, растворов, сиропов, аэрозолей (твердых или растворенных в жидкой среде); мазей, содержащих, например, до 10% по массе активного соединения, мягких и твердых желатиновых капсул, суппозиториев, стерильных инъекционных растворов и стерильных упакованных порошков.

Некоторые примеры подходящих эксципиентов включают лактозу, декстрозу, сахарозу, сорбит, маннит, крахмалы, гуммиарабик, фосфат кальция, альгинаты, трагакант, желатин, силикат кальция, микрокристаллическую целлюлозу, поливинилпирролидон, целлюлозу, воду, сироп и метилцеллюлозу. Препараты дополнительно могут включать смазывающие агенты, такие как тальк, стеарат магния и минеральное масло; увлажняющие агенты; эмульгирующие агенты и суспендирующие агенты; консерванты, такие как метилбензоат и гидроксилпропил бензоат; подслащивающие агенты и корригенты. Композиции, предлагаемые в настоящей заявке, могут быть получены, с использованием методик, известных в данной области техники, в виде препаратов с быстрым, замедленным или отсроченным высвобождением активного ингредиента после введения пациенту.

Композиции могут быть представлены в виде препарата в стандартной лекарственной форме, при этом каждая доза содержит от приблизительно 5 до 1000 мг активного ингредиента, обычно приблизительно 100-500 мг. Термин "стандартная лекарственная форма" относится к физически дискретной единице, которая может быть использована в качестве однократной дозы для нуждающегося в этом человека и для других млекопитающих, при этом каждая единица содержит заданное количество активного вещества (способное, согласно расчетам, вызывать желаемый терапевтический эффект), смешанное с подходящим фармацевтическим эксципиентом.

Активное соединение может быть эффективным в широком диапазоне доз, и для введения обычно используют фармацевтически эффективное количество активного соединения. Однако подразумевается, что фактически вводимое количество соединения, как правило, определяет врач в зависимости от имеющихся обстоятельств, включая состояние, нуждающееся в лечении, выбранный путь введения, фактически вводимое соединение, возраст, массу и ответ индивидуального пациента, тяжесть симптомов пациента и тому подобное.

Для получения композиции в твердой форме, такой как таблетки, основной активный ингредиент смешивают с фармацевтическим эксципиентом с получением твердой композиции в виде "предпрепарата" (preformulation), содержащей гомогенную смесь соединения, предлагаемого в настоящей заявке. Когда указано, что композиции в виде "предпрепарата" являются гомогенными, это означает, что активный ингредиент обычно распределен равномерно по всей композиции, так что композиция может быть легко разделена на одинаково эффективные стандартные лекарственные формы, такие как таблетки, пилюли и капсулы. Данный твердый "предпрепарат" затем разделяют на стандартные лекарственные формы описанных выше типов, содержащие, например, приблизительно 0,1-1000 мг активного ингредиента, предлагаемого в настоящей заявке.

Для получения лекарственной формы, дающей преимущества пролонгированного действия, таблетки или пилюли, предлагаемые в настоящей заявке, могут быть покрыты оболочкой или изготовлены иным образом. Например, таблетка или пилюля может содержать внутренний компонент дозы и внешний компонент дозы, при этом последний находится в форме оболочки для первого. Эти два компонента могут быть разделены энтеросолюбильным слоем, который защищает от дезинтеграции в желудке и позволяет внутреннему компоненту пройти в неизменном виде через двенадцатиперстную кишку или обеспечивает его отсроченное высвобождение. Для получения таких энтеросолюбильных слоев или покрытий может быть использовано множество веществ, такие вещества включают ряд полимерных кислот и смесей полимерных кислот с такими веществами, как шеллак, цетиловый спирт и ацетилцеллюлоза.

Жидкие формы для перорального введения или введения путем инъекции, которые могут быть использованы для соединений и композиций, предлагаемых в настоящей заявке, включают водные растворы, подходящим образом ароматизированные сиропы, водные или масляные суспензии и эмульсии, ароматизированные пищевыми маслами, такими как хлопковое масло, кунжутное масло, кокосовое масло или арахисовое масло, а также эликсиры и подобные фармацевтические наполнители.

Композиции для ингаляции или инсуффляции включают растворы и суспензии, разведенные в фармацевтически приемлемых водных или органических растворителях или их смесях, и порошки. Данная жидкая или твердая композиция может содержать подходящий фармацевтически приемлемый эксципиент, такой, как описано выше. Согласно некоторым вариантам осуществления изобретения данные композиции вводят пероральным или назальным респираторным путем для достижения местного или системного эффекта. Композиции могут быть распылены с использованием инертного газа. Распыляемые растворы можно вдыхать прямо из распыляющего устройства, или распыляющее устройство может быть присоединено к лицевой маске-палатке или к дыхательному аппарату с перемежающимся положительным давлением. Композиции в форме раствора, суспензии или порошка могут быть введены перорально или через нос с использованием устройств, которые доставляют данный препарат подходящим образом.

Количество соединения или композиции, которое вводят пациенту, варьирует в зависимости от того, что вводят, от цели введения (профилактика или терапия), состояния пациента, методики введения и т.п. В терапевтических целях композицию можно вводить пациенту, уже страдающему от заболевания, в количестве, достаточном для лечения или по меньшей мере для частичного купирования симптома заболевания и его осложнения. Эффективная доза зависит от состояния болезни, которую лечат, а также от решения лечащего врача, в котором учитываются такие факторы, как тяжесть заболевания, возраст, масса и общее состояние пациента и тому подобное.

Композиции, вводимые пациенту, могут находиться в форме фармацевтических композиций, описанных выше. Данные композиции могут быть стерилизованы с использованием стандартных методик стерилизации или могут быть стерильно отфильтрованы. Водные растворы могут быть упакованы для использования как есть или лиофилизированы, лиофилизированный препарат перед введением смешивают со стерильным водным носителем. Препараты соединений обычно имеют значения рН в диапазоне 3-11, более предпочтительным диапазоном является диапазон 5-9 и наиболее предпочтительным - 7-8. Подразумевается, что использование некоторых из вышеупомянутых эксципиентов, носителей или стабилизаторов приводит к образованию фармацевтических солей.

Терапевтическая доза соединений, предлагаемых в настоящей заявке, может быть определена на основании, например, их конкретного применения в лечении, методики введения соединения, здоровья и состояния пациента и мнения врача, назначающего лекарство. Доля или концентрация соединения, предлагаемого в настоящей заявке, в фармацевтической композиции может варьировать в зависимости от нескольких факторов, включая дозу, химические свойства (например гидрофобность) и путь введения. Например, предлагаемое в настоящей заявке соединение, предназначенное для парентерального введения, может быть представлено в водном физиологическом буферном растворе, содержащем приблизительно 0,1-10% (масса/об.) соединения. Некоторые типичные диапазоны доз находятся в пределах от приблизительно 1 мкг/кг до приблизительно 1 г/кг массы тела в сутки. Согласно некоторым вариантам осуществления изобретения диапазон доз находится в пределах от приблизительно 0,01 мг/кг до приблизительно 100 мг/кг массы тела в сутки. Размер дозы, по-видимому, зависит от таких переменных, как тип и степень прогрессирования заболевания или состояния, общее состояние здоровья конкретного пациента, относительная биологическая эффективность выбранного соединения, препарат эксципиента и путь введения. Эффективные дозы могут быть установлены путем экстраполяции кривых доза-ответ, полученных in vitro или в тест-системах с использованием животных моделей.

ПРИМЕРЫ

Далее настоящее изобретение описано более подробно с использованием конкретных примеров. Приведенные ниже примеры являются исключительно иллюстративными и не ограничивают настоящее изобретение каким-либо образом. Специалисту в данной области техники будет легко понять, что некоторые несущественные параметры могут быть изменены или модифицированы с получением по существу тех же самых результатов. Найдено, что соединения, представленные в следующих примерах, являются JAK-ингибиторами согласно одному или более чем одному из тестов, приведенных в данном описании.

Пример 1: 3-[3-амино-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрил

Стадия А: 3-циклопентилакрилонитрил

К раствору 1,0 М трет-бутилата калия (28,0 г, 250 ммоль, 1,2 экв.) в свежеперегнанном тетрагидрофуране добавляли по каплям раствор цианометилфосфорной кислоты диэтилового эфира (44,3 г, 250,0 ммоль, 1,2 экв.) в тетрагидрофуране при перемешивании в ледяной бане. Ледяную баню удаляли, и реагенты перемешивали в течение 0,5 ч при комнатной температуре. Затем добавляли по каплям циклопентанкарбальдегид (20,0 г, 204 ммоль, 1,0 экв.) при охлаждении ледяной бани. После завершения добавления реагенты перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, затем реакцию гасили путем добавления воды, и полученную смесь экстрагировали два раза этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом 3-циклопентилакрилонитрила (22,3 г, выход: 91%).

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 6.69 (dd, J=18.8 Гц, J=10.4 Гц, 0.5Н, транс-олефины), 6.37 (t, J=10.8 Гц, 0.5Н, цис-олефины), 5.29 (d, J=17.6 Гц, 0.5Н, транс-олефины), 5.20 (d, J=10.8 Гц, 0.5Н, цис-олефины), 3.06-2.99 (m, 0.5Н, цис-продукт), 2.62-2.56 (m, 0.5Н, транс-продукт), 2.04-1.82 (m, 2Н), 1.74-1.59 (m, 4Н), 1.42-1.26 (m, 2Н).

Стадия В: 4-хлор-7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин

К раствору 4-хлор-7H-пирроло[2,3-d]пиримидина (20,0 г, 130,4 ммоль, 1,0 экв.) в сухом ДМФА добавляли NaH (6,6 г, 57%, 156,8 ммоль, 1,2 экв.), при перемешивании в ледяной бане. Данные реагенты перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре, затем добавляли по каплям SEMCl (2-(триметилсилил)этоксиметилхлорид) (26,1 г, 156,5 ммоль, 1,2 экв.) при охлаждении ледяной бани. После завершения добавления реагенты перемешивали в течение 1 ч в ледяной бане, затем реакцию гасили путем добавления воды, и полученную смесь экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом 4-хлор-7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидина (33,43 г, выход: 90,4%).

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 8.67 (s, 1Н), 7.39 (d, J=3.6 Гц, 1H), 6.67 (d, J=3.6 Гц, 1H), 5.65 (s, 2H), 3.53 (dd, J=9.2 Гц, J=8.0 Гц, 2H), 0.91 (t, J=8.4 Гц, 2H), 0.00 (s, 9H).

m/z=284[M+1]⁺.

Стадия С: этил 2-циано-2-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d] пиримидин-4-ил)ацетат

К смеси этил цианоацетата (40,1 г, 354,0 ммоль, 3,0 экв.) и карбоната калия (33,0 г, 238 ммоль, 2,0 экв.) добавляли 4-хлор-7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин (33,5 г, 118 ммоль, 1,0 экв.) с перемешиванием при комнатной температуре. Данные реагенты нагревали до 60°С, и реакцию проводили в течение 0,5 ч, затем температуру повышали до 130°С, и реакцию продолжали в течение 1,0 ч. Затем полученную смесь охлаждали до комнатной температуры, реакцию гасили путем добавления воды, и полученную смесь экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом этил 2-циано-2-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)ацетата (30,6 г, выход: 72%).

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 13.87 (brs, 1Н), 8.05 (s, 1H), 7.44 (d, J=4.0 Гц, 1H), 7.20 (d, J=3.6 Гц, 1H), 5.57 (s, 2H), 4.30 (dd, J=14.4 Гц, J=7.2 Гц, 2H), 3.5 (t, J=8.4 Гц, 2H), 1.37 (t, J=7.2 Гц, 3H), 0.92 (t, J=8.4 Гц, 2H), 0.00 (s, 9H).

m/z=361[M+1]⁺.

Стадия D: 2-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил) ацетонитрил

К этил 2-циано-2-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d] пиримидин-4-ил)ацетату (30,6 г, 84,9 ммоль, 1,0 экв.) в смешанном растворителе ДМСО (диметилсульфоксид)/вода добавляли хлорид натрия (49,7 г, 849,0 ммоль, 10,0 экв.) с перемешиванием при комнатной температуре. Данную реакционную жидкость помещали в защитную атмосферу азота для проведения реакции в течение 5 суток при 150°С. Реакционную жидкость охлаждали до комнатной температуры, затем реакцию гасили путем добавления воды, и полученную смесь экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом 2-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)ацетонитрила (18,4 г, выход: 75%).

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 8.87 (s, 1Н), 7.40 (d, J=3.6 Гц, 1H), 6.80 (d, J=3.6 Гц, 1H), 5.67 (s, 2H), 4.15 (s, 2H), 3.53 (t, J=8.4 Гц, 2H), 0.92 (t, 8.4 Гц, 2H), 0.01 (s, 9H).

m/z=289[M+1]⁺.

Стадия E: 3-(диметиламино)-2-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло [2,3-d]пиримидин-4-ил)акрилонитрил

В герметически закрываемую пробирку, содержащую раствор ДМФА, добавляли 2-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)ацетонитрил (5,3 г, 18,38 ммоль, 1,0 экв.) и ДМФА-ДМА (6,57 г, 55,14 ммоль, 3,0 экв.). Данную реакционную жидкость перемешивали в течение ночи при 140°С. Реакционную жидкость охлаждали до комнатной температуры, затем реакцию гасили путем добавления воды, и полученную смесь экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом 3-(диметиламино)-2-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)акрилонитрила (3,35 г, выход: 53%).

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 8.61 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 7.37 (d, J=3.6 Гц, 1H), 7.27 (d, J=3.6 Гц, 1H), 5.66 (s, 2H), 3.58 (t, J=8.4 Гц, 2H), 3.38 (brs, 6H), 1.04 (t, J=6.8 Гц, 2H), 0.00 (s, 9H).

m/z=344[M+1]⁺.

Стадия F: 4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-3-амино-1H-пиразол

К раствору 3-(диметиламино)-2-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)акрилонитрила (1,2 г, 3,5 ммоль, 1,0 экв.) в этаноле добавляли гидрат гидразина (85%, 2,1 г, 35,6 ммоль, 10,0 экв.) с перемешиванием при комнатной температуре. Данную реакционную жидкость помещали в защитную атмосферу азота и перемешивали в течение ночи при 90°С. Реакционную жидкость охлаждали до комнатной температуры, затем реакцию гасили путем добавления воды, и полученную смесь экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом 4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-3-амино-1H-пиррола (456 мг, выход: 40%).

¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ: 12.20 (brs, 1Н), 8.75 (s, 1Н), 8.30 (brs, 1H), 7.71 (d, J=3.2 Гц, 1Н), 7.11 (d, J=3.6 Гц, 1H), 6.66 (brs, 2Н), 5.70 (s, 2Н), 3.62 (t, J=8.0 Гц, 2Н), 0.93 (t, J=8.0 Гц, 2Н), 0.00 (s, 9Н).

m/z=331[M+1]⁺.

Стадия G: 3-[3-амино-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрил

3-[5-амино-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрил

и

К раствору 4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-3-амино-1H-пиразола (5,6 г, 16,95 ммоль, 1,0 экв.) в ацетонитриле добавляли 3-циклопентилакрилонитрил (5,176 г, 42,71 ммоль, 2,52 экв.) с перемешиванием при комнатной температуре, и затем добавляли DBU (5,42 г, 35,60 ммоль, 2,1 экв.). Данную реакционную жидкость помещали в защитную атмосферу азота и перемешивали в течение ночи при 70°С. Реакционную жидкость охлаждали до комнатной температуры, затем реакцию гасили путем добавления воды, и полученную смесь экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом 3-[3-амино-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрила (4,49 г, выход: 59%) и 3-[5-амино-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрила (1,60 г, выход: 21%).

G1: ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 8.79 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.34 (d, J=3.6 Гц, 1H), 6.68 (d, J=3.6 Гц, 1H), 5.66 (brs, 4H), 4.00 (t, J=2.0 Гц, 1H), 3.53 (t, J=8 Гц, 2H), 3.08 (dd, J=16.8 Гц, J=8.4 Гц, 1H), 2.89 (dd, J=16.8 Гц, J=3.6 Гц, 1H), 2.53 (s, 1H), 1.95-1.93 (m, 1H), 1.74-1.57 (m, 5H), 1.28-1.22 (m, 2H), 0.92 (dd, J=14 Гц, J=8.4 Гц, 2H), 0.00 (s, 9H).

m/z=452[M+1]⁺.

G2: ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 8.74 (s, 1Н), 8.13 (s, 1H), 7.33 (d, J=3.6 Гц, 1H), 6.80 (d, J=3.6 Гц, 1H), 6.12 (brs, 2H), 5.30 (s, 2H), 4.12-4.07 (m, 1H), 3.53 (t, J=8.4 Гц, 2H), 3.14 (dd, J=16.8 Гц, J=9.6 Гц, 1H), 2.90 (dd, J=16.8 Гц, J=4.0 Гц, 1H), 2.60-2.57 (m, 1H), 1.94-1.91 (m, 1H), 1.74-1.54 (m, 5H), 1.34-1.22 (m, 2H), 0.92 (t, J=8.0 Гц, 2H), 0.00 (s, 9H).

m/z=452[M+1]⁺.

Стадия H: 3-[3-амино-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрил

К раствору 3-[3-амино-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пиppoлo[2,3-d]пиpимидин-4-ил)-1H-пиpaзoл-1-ил]-3-циклoпeнтилпpoпaннитpилa (3,395 г, 7,52 ммоль, 1,0 экв.) в дихлорметане добавляли трифторуксусную кислоту (20 мл) при перемешивании в ледяной бане. Данную реакционную жидкость помещали в защитную атмосферу азота и перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную жидкость концентрировали под вакуумом, остаток растворяли в дихлорметане, и концентрировали под вакуумом еще два раза. Данный концентрат растворяли в метаноле, и добавляли этилендиамин (2 мл), затем полученную смесь перемешивали в течение ночи. Полученную смесь концентрировали под вакуумом, разбавляли водой и этилацетатом, и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом 3-[3-амино-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрила (1,94 г, выход: 80,0%).

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ10.45 (s, 1Н), 8.79 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.33 (dd, J=3.9 Гц, 2.4 Гц, 1H), 6.66 (dd, J=3.9 Гц, 2.4 Гц, 1H), 5.69 (brs, 2H), 3.98-4.03 (m, 1H), 3.08 (dd, J=16.8 Гц, 8.4 Гц, 1H), 2.88 (dd, J=16.8 Гц, 3.6 Гц, 1H), 2.49-2.59 (m, 1H), 1.89-1.96 (m, 1H), 1.56-1.74 (m, 4H), 1.21-1.29 (m, 3H).

m/z=322[M+1]⁺.

Пример 2: 3-[3-амино-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропанамид

Соединение Примера 2 (0,45 г, выход: 18%) получали в результате разделения путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке на стадии Н Примера 1.

¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ: 11.93 (s, 1H), 8.58 (s, 1Н), 8.37 (s, 1Н), 7.45-7.47 (m, 1H), 7.27 (s, 1Н), 6.88-6.89 (m, 1H), 6.74 (s, 1Н), 6.09 (s, 2Н), 4.30-4.37 (m, 1Н), 2.79 (dd, J=15.2 Гц, 9.6 Гц, 1Н), 2.54 (dd, J=15.2 Гц, 4.0 Гц, 1H), 2.22-2.31 (m, 1Н), 1.69-1.79 (m, 1Н), 1.37-1.62 (m, 4Н), 1.19-1.32 (m, 3Н).

m/z=340 [M+1]⁺.

Пример 3: 3-[5-амино-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрил

3-[5-Амино-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиpимидин-4-ил)-1H-пиpaзoл-1-ил]-3-циклoпeнтилпpoпaннитpил (130 мг, 0,289 ммоль) получали на стадии G Примера 1, и соединение Примера 3 (14 мг, выход: 15,1%) получали в соответствии с методикой, использованной на стадии Н Примера 1.

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 10.51-10.61 (brs, 1H), 8.70 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.33-7.35 (m, 1H), 6.80-6.81 (m, 1H), 6.01-6.35 (brs 2H), 4.11-4.17 (m, 1H), 3.17 (dd, 16.8 Гц, J=9.6 Гц, 1H), 2.92 (dd, J=16.8 Гц, J=4.0 Гц, 1H), 2.56-2.64 (m, 1H), 1.90-1.98 (m, 1H), 1.53-1.75 (m, 4H), 1.25-1.35 (m, 3H).

m/z=322[M+1]⁺.

Пример 4: 3-[5-амино-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропанамид

3-[5-Амино-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиpимидин-4-ил)-1H-пиpaзoл-1-ил]-3-циклoпeнтилпpoпaннитpил (130 мг, 0,289 ммоль) получали на стадии G Примера 1, и соединение Примера 4 (65 мг, выход: 70%) получали в соответствии с методикой, использованной на стадии Н Примера 1.

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 11.94 (s, 1Н), 8.60 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.46 (t, J=3.2 Гц, 1H), 7.39 (s, 1H), 6.92-6.94 (s, 1H), 6.90 (s, 2H), 6.87 (s, 1H), 4.43-4.48 (m, 1H), 2.86 (dd, J=15.2 Гц, 10.0 Гц, 1H), 2.65 (dd, J=15.2 Гц, 3.6 Гц, 1H), 2.35-2.44 (m, 1H), 1.80-1.89 (m, 1H), 1.45-1.73 (m, 4H), 1.23-1.39 (m, 3H).

m/z=340[M+1]⁺.

Пример 5: (3R)-3-[3-амино-4-(7H-пирроло [2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрил

3-[3-Амино-4-(7H-пирроло [2,3-d] пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентил-пропаннитрил, полученный на стадии Н Примера 1, разделяли путем препаративной ВЭЖХ (колонка: OJ-H, 20% изопропанол/н-гексан, температура колонки: 25°С, скорость потока: 1,0 мл/мин, время удерживания: 20,30 мин) с получением соединения, имеющего (R)-конфигурацию.

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 9.37 (s, 1Н), 8.79 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.32 (dd, J=3.9 Гц, 2.4 Гц, 1H), 6.68 (dd, J=3.9 Гц, 2.4 Гц, 1H), 5.69 (brs, 2H), 3.99-4.03 (m, 1H), 3.08 (dd, J=16.8 Гц, 8.8 Гц, 1H), 2.89 (dd, J=16.8 Гц, 3.6 Гц, 1Н), 2.52-2.58 (m, 1H), 1.90-1.98 (m, 1H), 1.58-1.77 (m, 4H), 1.23-1.33 (m, 3H).

m/z=322[M+1]⁺.

(3R)-3-[3-амино-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрила гидрохлорид

К раствору (3R)-3-[3-амино-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрила (2,0 г, 6,223 ммоль, 1,0 экв.) в ацетонитриле добавляли по каплям концентрированную соляную кислоту (12 М, 0,52 мл, 6,223 ммоль, 1,0 экв.) при комнатной температуре. Данную реакционную жидкость перемешивали в течение 1 ч при 60°С, пока раствор не становился прозрачным. Данный раствор перемешивали и охлаждали при комнатной температуре, наблюдали выпадение в осадок твердого вещества. Полученную смесь концентрировали при пониженном давлении, добавляли дихлорметан, и полученную смесь концентрировали два раза с получением неочищенного продукта (2,3 г) в виде темно-желтого твердого вещества. К неочищенному продукту добавляли этилацетат (12 мл). Данную смесь нагревали до 60°С и перемешивали в течение 1 ч, затем охлаждали при перемешивании до комнатной температуры. В результате фильтрования получали светло-желтое хлопьевидное твердое вещество, которое промывали этилацетатом и сушили досуха, используя насос, с получением светло-желтого твердого вещества (2,2 г, выход: 99,6%, чистота: 99,82%, значение ее (энантиомерный избыток): более 99,0%).

Пример 6: (3S)-3-[3-амино-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрил

3-[3-Амино-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентил-пропаннитрил, полученный на стадии Н Примера 1, разделяли путем препаративной ВЭЖХ (колонка: OJ-H, 20% изопропанол/н-гексан, температура колонки: 25°С, скорость потока: 1,0 мл/мин, время удерживания: 17,20 мин) с получением соединения, имеющего (S)-конфигурацию.

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 9.23 (s, 1Н), 8.78 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.32 (dd, J=3.9 Гц, 2.4 Гц, 1H), 6.68 (dd, J=3.9 Гц, 2.4 Гц, 1H), 5.69 (brs, 2H), 3.98-4.03 (m, 1H), 3.08 (dd, J=16.8 Гц, 8.8 Гц, 1H), 2.89 (dd, J=17.2 Гц, 3.6 Гц, 1H), 2.52-2.58 (m, 1H), 1.90-1.95 (m, 1H), 1.58-1.74 (m, 4H), 1.22-1.33 (m, 3H).

m/z=322[M+1]⁺.

Пример 7: 3-[3-этиламино-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрил

Стадия А: 3-[3-этиламино-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрил

К раствору 3-[3-амино-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрила (500 мг, 1,11 ммоль, 1,0 экв., получен на стадии G Примера 1) и карбоната калия (460 мг, 3,33 ммоль, 3,0 экв.) в ДМФА добавляли иодэтан (347 мг, 2,22 ммоль, 2,0 экв.) при комнатной температуре. Данную реакционную жидкость помещали в защитную атмосферу азота и перемешивали в течение ночи при 70°С. Полученную смесь разбавляли водой и этилацетатом, и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом 3-[3-этиламино-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрила (116 мг, выход: 22,6%).

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 8.77 (s, 1Н), 8.01 (s, 1H), 7.32 (d, J=3.6, 1H), 7.01-7.17 (brs, 1H), 6.67 (d, J=4.0, 1H), 5.65 (s, 2H), 4.07-4.01 (m, 1H), 3.55-3.51 (m, 2H), 3.46-3.41 (m, 2H), 3.10 (dd, J=16.8 Гц, J=8, 1H), 2.91 (dd, J=17.2 Гц, J=4, 1H), 2.62-2.60 (m, 1H), 1.96-1.93 (m, 1H), 1.74-1.55 (m, 7H), 1.35-1.22 (m, 3H), 0.91 (t, J=8.0, 2H), 0.00 (s, 9H).

m/z=480[M+1]⁺.

Стадия В: 3-[3-этиламино-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрил

Соединение Примера 7 получали в соответствии с методикой, использованной на стадии Н Примера 1, за тем исключением, что 3-[3-амино-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрил заменяли 3-[3-этиламино-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрилом.

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 9.47 (s, 1Н), 8.76 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.29-7.30 (m, 1H), 7.01-7.17 (brs, 1H), 6.66-6.68 (m, 1H), 4.03-4.08 (m, 1H), 3.44 (q, J=7.2 Гц, 2H), 3.11 (dd, J=16.8 Гц, 7.6 Гц, 1H), 2.92 (dd, J=16.8 Гц, 3.6 Гц, 1H), 2.58-2.64 (m, 1H), 1.91-1.99 (m, 1H), 1.59-1.78 (m, 4H), 1.34 (t, J=7.2 Гц, 3H), 1.27-1.32 (m, 3H).

m/z=350[M+1]⁺.

Пример 7A: (R)-3-[3-этиламино-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрил

3-[3-Этиламино-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрил, полученный в Примере 7, разделяли путем препаративной ВЭЖХ (колонка: OD-H, 5% абсолютный этанол/н-гексан, температура колонки: 30°С, скорость потока: 1,0 мл/мин, время удерживания: 35,32 мин) с получением соединения, имеющего (R)-конфигурацию.

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 9.47 (s, 1Н), 8.77 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.29-7.30 (m, 1H), 7.03-7.17 (brs, 1H), 6.65-6.67 (m, 1H), 4.04-4.08 (m, 1H), 3.44 (q, J=7.2 Гц, 2H), 3.11 (dd, J=16.8 Гц, 7.6 Гц, 1H), 2.92 (dd, J=16.8 Гц, 3.6 Гц, 1H), 2.58-2.64 (m, 1H), 1.91-1.98 (m, 1H), 1.59-1.78 (m, 4H), 1.34 (t, J=7.2 Гц, 3H), 1.27-1.32 (m, 3H).

m/z=350[M+1]⁺.

Пример 7B: (S)-3-[3-этиламино-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрил

3-[3-Этиламино-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрил, полученный в Примере 7, разделяли путем препаративной ВЭЖХ (колонка: OD-H, 5% абсолютный этанол/н-гексан, температура колонки: 30°С, скорость потока: 1,0 мл/мин, время удерживания: 32,13 мин) с получением соединения, имеющего (S)-конфигурацию.

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 9.46 (s, 1H), 8.77 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.29-7.30 (m, 1H), 7.02-7.17 (brs, 1H), 6.65-6.67 (m, 1H), 4.03-4.08 (m, 1H), 3.44 (q, J=7.2 Гц, 2H), 3.11 (dd, J=16.8 Гц, 7.6 Гц, 1H), 2.92 (dd, J=16.8 Гц, 3.6 Гц, 1H), 2.58-2.63 (m, 1H), 1.91-1.99 (m, 1H), 1.59-1.77 (m, 4H), 1.34 (t, J=7.2 Гц, 3H), 1.27-1.32 (m, 3H).

m/z=350[M+1]⁺.

Пример 8: 3-циклопентил-3-[3-(диэтиламино)-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиpимидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]пропионитрил

Стадия A: 3-циклопентил-3-[3-(диэтиламино)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]пропионитрил

К раствору 3-[3-амино-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрила (500 мг, 1,11 ммоль, 1,0 экв., получен на стадии G Примера 1) и карбоната калия (460 мг, 3,33 ммоль, 3,0 экв.) в ДМФА добавляли иодэтан (347 мг, 2,22 ммоль, 2,0 экв.) при комнатной температуре. Данную реакционную жидкость помещали в защитную атмосферу азота и перемешивали в течение ночи при 70°С. Полученную смесь разбавляли водой и этилацетатом, и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом 3-[3-этиламино-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрила (2 мг, выход: 0,4%).

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 8.90 (s, 1Н), 8.01 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.14 (s, 1H), 5.72 (s, 2H), 4.13-4.09 (m, 1H), 3.62 (t,J=8.0, 2H), 3.25-3.18 (m, 4H), 3.14 (dd, J=16.8 Гц,J=8.0 Гц, 1H), 2.91 (dd, J=16.8 Гц, J=4.0 Гц, 1H), 2.70-2.53 (m, 1H), 2.05-1.95 (m, 1H), 1.82-1.51 (m, 4H), 1.43-1.31 (m, 3H), 1.17-1.11 (m, 6H), 1.04-0.90 (m, 2H), 0.00 (s, 9H).

m/z=508[M+1]⁺.

Стадия В: 3-циклопентил-3-[3-(диэтиламино)-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил] пропионитрил

Соединение Примера 8 получали в соответствии с методикой, использованной на стадии Н Примера 1, за тем исключением, что 3-[3-амино-4-(7-{[2-(тpимeтилcилил)этoкcи]мeтил}-7H-пиppoлo[2,3-d]пиpимидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрил заменяли 3-[3-(диэтиламино)-4-(7-{[2-(тpимeтилcилил)этoкcи]мeтил}-7H-пиppoлo[2,3-d]пиpимидин-4-ил)-1H-пиpaзoл-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрилом.

m/z=378[M+1]⁺.

Пример 9: N-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-ил]ацетамид

Стадия А: N-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-ил]ацетамид

К раствору 3-[3-амино-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрила (100 мг, 0,221 ммоль, 1,0 экв., получен на стадии G Примера 1) в дихлорметане добавляли по каплям ацетилхлорид (17,4 мг, 0,211 ммоль, 1,0 экв.) при 0°С. Данную реакционную жидкость перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. После того, как реакция была завершена, полученную смесь разбавляли водой и этилацетатом, и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом N-(1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-ил]ацетамида (90 мг, выход: 83%).

Стадия B: N-(1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-ил)ацетамид

Соединение Примера 9 получали в соответствии с методикой, использованной на стадии Н Примера 1, за тем исключением, что 3-[3-амино-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрил заменяли N-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-ил]ацетамидом.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 11.51-11.61 (brs, 1H), 10.21-10.41 (brs, 1H), 8.83 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.41 (dd, J=3.2 Гц, J=2.4 Гц, 1H), 6.70 (s, 1H), 4.27-4.39 (m, 1H), 3.11 (dd, J=16.8 Гц, J=7.6 Гц, 1H), 2.97-3.01 (m, 1H), 2.43-2.71 (m, 4H), 1.94-2.01 (m, 1H), 1.56-1.79 (m, 4H), 1.25-1.31 (m, 3H).

m/z=364[M+1]⁺.

Пример 9A: N-[1-((R)-2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7H-пирроло[2,3-d] пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-ил]ацетамид

N-(1-(2-Циано-1-циклопентилэтил)-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-ил)ацетамид, полученный в Примере 9, разделяли путем препаративной ВЭЖХ (колонка: OJ-H, 7% абсолютный этанол/н-гексан, температура колонки: 35°С, скорость потока: 1,0 мл/мин, время удерживания: 60,6 мин) с получением соединения, имеющего (R)-конфигурацию.

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 11.52-11.61 (brs, 1H), 10.22-10.41 (brs, 1H), 8.83 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.41 (dd,J=3.2 Гц,J=2.4 Гц, 1H), 6.70 (s, 1H), 4.27-4.39 (m, 1H), 3.11 (dd, J=16.8 Гц, J=7.6 Гц, 1H), 2.97-3.02 (m, 1H), 2.41-2.71 (m, 4H), 1.93-2.01 (m, 1H), 1.56-1.78 (m, 4H), 1.24-1.31 (m, 3H).

m/z=364[M+1]⁺.

Пример 9B: N-[1-((S)-2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-ил]ацетамид

N-(1-(2-Циано-1-циклопентилэтил)-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-ил)ацетамид, полученный в Примере 9, разделяли путем препаративной ВЭЖХ (колонка: OJ-H, 7% абсолютный этанол/н-гексан, температура колонки: 35°С, скорость потока: 1,0 мл/мин, время удерживания: 55,5 мин) с получением соединения, имеющего (S)-конфигурацию.

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 11.52-11.62 (brs, 1Н), 10.22-10.41 (brs, 1Н), 8.83 (s, 1H), 8.20 (s, 1Н), 7.41 (dd, J=3.2 Гц, J=2.4 Гц, 1Н), 6.70 (s, 1Н), 4.27-4.40 (m, 1Н), 3.11 (dd, J=16.8 Гц, J=7.6 Гц, 1Н), 2.98-3.04 (m, 1Н), 2.41-2.72 (m, 4Н), 1.94-2.01 (m, 1Н), 1.55-1.79 (m, 4Н), 1.24-1.33 (m, 3Н).

m/z=364[M+1]⁺.

Пример 10: N-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-ил]метилсульфамид

Стадия А: N-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-ил]метилсульфамид

К раствору 3-[3-амино-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрила (100 мг, 0,221 ммоль, 1,0 экв., получен на стадии G Примера 1) в дихлорметане добавляли по каплям пиридин (30,0 мг, 0,379 ммоль, 1,7 экв.) при 0°С, и затем добавляли по каплям метансульфохлорид (25,0 мг, 0,211 ммоль, 1,0 экв.). Данную реакционную жидкость перемешивали в течение 72 ч при комнатной температуре. После того, как реакция была завершена, полученную смесь разбавляли водой и этилацетатом, и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом N-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d] пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-ил]метилсульфамида (85 мг, выход: 73%).

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 11.20-10.70 (brs, 1Н), 8.78 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.40 (s, 1H), 6.67 (s, 1H), 5.65 (s, 2H), 4.21-4.18 (m, 1H), 3.53 (t, J=8.0, 2H), 3.31 (s, 3H), 3.16-3.10 (m, 1H), 2.94 (d, J=8.0 Гц, 1H), 2.62-2.60 (m, 1H), 2.03-1.92 (m, 1H), 1.75-1.58 (m, 4H), 1.32-1.23 (m, 3H), 0.93-0.85 (m, 2H), 0.00 (s, 9H).

m/z=530[M+1]⁺.

Стадия B: N-(1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиpимидин-4-ил)-1H-пиpaзoл-3-ил)мeтилcульфaмид

Соединение Примера 10 получали в соответствии с методикой, использованной на стадии Н Примера 1, затем исключением, что 3-[3-амино-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрил заменяли N-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиpимидин-4-ил)-1H-пиразол-3-ил]метилсульфамидом.

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 12.25 (s, 1Н), 10.80 (s, 1H), 8.91 (s, 1H), 8.72 (s, 1H), 7.65 (dd,J=3.2 Гц, J=2.4 Гц, 1H), 7.01 (dd, J=3.6 Гц, J=1.6 Гц, 1H), 4.40-4.46 (m, 1H),3.32 (s, 3H), 3.24 (dd, J=17.6 Гц, J=9.2 Гц, 1H), 3.18 (dd, J=17.6 Гц, J=4.4 Гц, 1H), 2.40-2.46 (m, 1H), 1.77-1.86 (m, 1H), 1.35-1.63 (m, 7H).

m/z=400[M+1]⁺.

Пример 11: 3-циклопентил-3-[3-(2-морфолинилэтиламино)-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]пропионитрил

Стадия А: 3-циклопентил-3-(3-(2-морфолинилэтиламино)-4-7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]пропионитрил

К раствору 3-[3-амино-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрил а (100 мг, 0,211 ммоль, 1,0 экв., получен на стадии G Примера 1) в ацетонитриле добавляли 4-(2-хлорэтил)морфолин (46 мг, 0,243 ммоль, 1,1 экв.), карбонат калия (91 мг, 0,663 ммоль, 3,0 экв.) и иодид калия (4 мг, 0,023 ммоль, 0,1 экв.) при комнатной температуре. Данную реакционную жидкость выдерживали в микроволновом реакторе в течение 3 ч при 90°С. Полученную смесь разбавляли водой и этилацетатом, и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом 3-циклопентил-3-[3-(2-морфолинилэтиламино)-4-7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]пропионитрила (12 мг, выход: 9,7%).

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 8.84 (s, 1Н), 8.06 (s, 1H), 7.68-7.43 (brs, 1H), 7.36 (d, J=3.2 Гц, 1H), 6.73 (d, J=3.6 Гц, 1H), 5.71 (s, 2H), 4.12-4.06 (m, 1H), 3.96-3.83 (m, 4H), 3.76-3.65 (m, 2H), 3.63 (t, J=12.4 Гц, 2H), 3.20-3.14 (m, 1H), 2.98-2.92 (m, 3Н), 2.89-2.70 (m, 4H), 2.68-2.62 (m, 1H), 2.01-1.98 (m, 1H), 1.80-1.63 (m, 4H), 1.38-1.30 (m, 3H), 0.99-0.91 (m, 2H), 0.00 (s, 9H).

m/z=565[M+1]⁺.

Стадия В: 3-циклопентил-3-[3-(2-морфолинилэтиламино)-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]пропионитрил

Соединение Примера 11 получали в соответствии с методикой, использованной на стадии Н Примера 1, за тем исключением, что 3-[3-амино-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрил заменяли 3-циклопентил-3-[3-(2-морфолинилэтиламино)-4-7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]пропионитрилом.

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 10.98 (s, 1Н), 8.78 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.46-7.58 (brs, 1H), 7.34 (d, J=2.0 Гц, 1H), 6.64 (d, J=3.2 Гц, 1H), 4.03-4.08 (m, 1H), 3.77-3.90 (m, 4H), 3.56-3.70 (m, 2H), 3.13(dd, J=16.8 Гц, J=8.4 Гц, 1H), 2.92 (dd, J=16.8 Гц, J=3.6 Гц, 1H), 2.54-2.79 (m, 7H), 1.92-1.99 (m, 1H), 1.59-1.78 (m, 4H), 1.28-1.32 (m, 3H).

m/z=435[M+1]⁺.

Пример 12: N-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиpимидин-4-ил)-1H-пиpaзoл-3-ил]-2-мopфoлинилaцeтaмид

Стадия A: 2-хлор-N-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-ил]ацетамид

К раствору 3-[3-амино-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрила (60 мг, 0,13 ммоль, 1,0 экв., получен на стадии G Примера 1) и триэтиламина (20 мг, 0,20 ммоль, 1,5 экв.) в сухом ТГФ (тетрагидрофуране) добавляли хлорангидрид 2-хлоруксусной кислоты (17 мг, 0,15 ммоль, 1,1 экв.) при перемешивании в ледяной бане. Данную реакционную жидкость перемешивали в течение 15 мин при комнатной температуре. Полученную смесь разбавляли водой и этилацетатом, и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Остаток использовали как есть на следующей стадии реакции.

¹Н ЯМР (CDCl₃) δ: 12.78 (1Н, s), 8.86 (1Н, s), 8.25 (1Н, s), 7.45 (1Н, d, J=3.6 Гц), 6.76 (1Н, d, J=3.6 Гц), 5.71 (2Н, s), 4.30-4.39 (3Н, m), 3.57 (2Н, t, J=8.4 Гц), 3.14 (1Н, dd, J=17.2 Гц, 7.2 Гц), 3.03 (1Н, dd, J=17.2 Гц, 3.6 Гц), 2.70-2.80 (1Н, m), 1.99-2.06 (1Н, m), 1.55-1.80 (4Н, m), 1.34-1.38 (3Н, m), 0.95 (2Н, t, J=8.4 Гц), - 0.02 (9Н, s).

m/z=528[М+1]⁺.

Стадия В: N-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-ил]-2-морфолинилацетамид

Неочищенный продукт, полученный на предыдущей стадии, растворяли в растворе ДМФА (5 мл), и добавляли морфолин (13 мг, 0,15 ммоль, 1,1 экв.), карбонат калия (37 мг, 0,27 ммоль, 2,2 экв.) и иодид натрия (20 мг, 0,13 ммоль, 1,0 экв.). Данную смесь перемешивали в течение ночи при 100°С. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой и этилацетатом, и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом указанного в заголовке соединения (97 мг) в виде желтого твердого вещества.

¹Н ЯМР (CDCl₃) δ: 12.27 (1H, s), 8.97 (1Н, s), 8.21 (1Н, s), 7.41 (1H, d, J=3.6 Гц), 6.73 (1Н, d, J=3.6 Гц), 5.68 (2Н, s), 4.30-4.35 (1H, m), 3.84-3.89 (4Н, m), 3.57 (2Н, t, J=8.4 Гц), 3.26 (2Н, s), 3.10 (1Н, dd, J=17.3 Гц, 6.9 Гц), 3.02 (1H, dd, J=17.2 Гц, 3.6 Гц), 2.72-2.77 (1H, m), 2.66-2.70 (4Н, m), 1.97-2.04 (1Н, m), 1.58-1.80 (4Н, m), 1.30-1.34 (3Н, m), 0.93 (2Н, t, J=8.4 Гц), -0.05 (9Н, s).

m/z=579[M+1]⁺.

Стадия C: N-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7H-пирроло [2,3-d]пиpимидин-4-ил)-1H-пиpaзoл-3-ил]-2-мopфoлинилaцeтaмид

Соединение, полученное на предыдущей стадии, подвергали дальнейшему превращению в соответствии с методикой, использованной на стадии Н Примера 1 с получением указанного в заголовке соединения (40 мг, выход: 67%) в виде белого твердого вещества.

¹Н ЯМР (CDCl₃) δ: 12.27 (1Н, s), 9.71 (1Н, s), 8.97 (1Н, s), 8.24 (1H, s), 7.41 (1H, d, J=3.2 Гц), 6.74 (1Н, d, J=3.2 Гц), 4.33-4.38 (1H, m), 3.87-3.90 (4Н, m), 3.28 (2Н, s), 3.11 (1H, dd, J=17.2 Гц, 6.8 Гц), 3.02 (1Н, dd, J=17.2 Гц, 4.0 Гц), 2.69-2.72 (5Н, m), 1.95-2.06 (1H, m), 1.55-1.81 (4Н, m), 1.28-1.34 (3Н, m).

m/z=449[M+1]⁺.

Пример 13: 3-циклопентил-3-[3-(3-морфолинил-3-оксопропиламино)-4-(7H-пиppoлo[2,3-d]пиpимидин-4-ил)-1H-пиpaзoл-1-ил]пpoпиoнитpил

Стадия А: 3-циклопентил-3-[3-(3-морфолинил-3-оксопропиламино)-4-7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]пропионитрил

Данное соединение получали в соответствии с методикой, использованной на стадии А Примера 11, за тем исключением, что вместо 4-(2-хлорэтил)морфолина в качестве источника боковой цепи добавляли 3-бром-N-пропионилморфолин.

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 8.76 (s, 1Н), 8.00 (s, 1H), 7.65-7.58 (brs, 1H), 7.36 (d, J=3.6 Гц, 1H), 6.60 (d, J=4.0 Гц, 1H), 5.65 (s, 2H), 4.02-4.01 (m, 1H), 3.82-3.73 (m, 2H), 3.64-3.59 (m, 4H), 3.55-3.15 (m, 6H), 3.12-3.08 (dd, J=16.8 Гц, J=8.8 Гц, 1H), 2.89-2.72 (m, 3H), 2.62-2.52 (m, 1H), 1.94-1.92 (m, 1H), 1.74-1.57 (m, 4H), 1.33-1.24 (m, 3H), 0.93-0.88 (m, 2H), 0.00 (s, 9H).

m/z=593[M+1]⁺.

Стадия В: 3-циклопентил-3-[3-(3-морфолинил-3-оксопропиламино)-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]пропионитрил

Соединение Примера 13 получали в соответствии с методикой, использованной на стадии Н Примера 1, за тем исключением, что 3-[3-амино-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрил заменяли 3-циклопентил-3-[3-(3-морфолинил-3-оксопропиламино)-4-7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]пропионитрилом.

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 10.59 (s, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.31 (d, J=2.8 Гц, 1H), 6.62 (d, J=2.8 Гц, 1H), 4.01-4.06 (m, 1H), 3.75-3.80 (m, 2H), 3.46-3.66 (m, 8H), 3.12 (dd, J=16.8 Гц, J=8.8 Гц, 1H), 2.82-2.91 (m, 2H), 2.71-2.78 (m, 1H), 2.51-2.57 (m, 1H), 1.88-1.96 (m, 1H), 1.54-1.75 (m, 4H), 1.27-1.32 (m, 3H).

m/z=463[M+1]⁺.

Пример 14: 3-циклопентил-3-[3-(2-морфолинил-2-оксоэтиламино)-4-(7H-пирроло [2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]пропионитрил

Стадия А: этил-2-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7-{[2-(тpимeтилcилил)этoкcи]мeтил}-7H-пиppoлo[2,3-d]пиpимидин-4-ил)-1H-пиpaзoл-3-иламино]ацетат

Данное соединение получали в соответствии с методикой, использованной на стадии А Примера 11, за тем исключением, что вместо 4-(2-хлорэтил)морфолина в качестве источника боковой цепи добавляли бромуксусной кислоты этиловый эфир.

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 8.81 (s, 1Н), 8.01 (s, 1H), 7.33 (d, J=3.6 Гц, 1H), 6.67 (d, J=3.6 Гц, 1H), 5.66 (s, 2H), 4.27-4.19 (m, 4H), 4.03-4.01 (m, 1H), 3.53 (t, J=8.4 Гц, 2H), 3.10 (dd, J=16.8 Гц, J- 8.4 Гц, 1H), 2.90 (dd, J=16.8 Гц, J=4.0 Гц, 1H), 2.60-2.60 (m, 1H), 1.97-1.90 (m, 1H), 1.72-1.57 (m, 5H), 1.31-1.24 (m, 5H), 0.93-0.89 (t, J=8.4 Гц, 2H), 0.00 (s, 9H).

m/z=538[M+1]⁺.

Стадия B: 2-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7-{[2-(тpимeтилcилил)этoкcи]мeтил}-7H-пиppoлo[2,3-d]пиpимидин-4-ил)-1H-пиpaзoл-3-иламино]уксусная кислота

К раствору этил-2-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-иламино]ацетата (223 мг, 0,415 ммоль, 1,0 экв.) в смеси метанола и воды (метанол/вода = 5/1) добавляли моногидрат гидроксида лития (88 мг, 2,08 ммоль, 5,0 экв.) при комнатной температуре, и полученную смесь перемешивали в течение ночи. После того, как реакция была завершена, растворитель удаляли под вакуумом. Полученную смесь разбавляли водой, и рН раствора доводили до значения 1-2 путем добавления соляной кислоты, разбавленной до концентрации 2 н., и затем фильтровали с получением 2-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-иламино]уксусной кислоты (170 мг, выход: 81%).

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 8.80 (s, 1Н), 8.06 (s, 1H), 7.37 (d, J=3.2 Гц, 1H), 6.68 (d, J=3.2 Гц, 1H), 5.67 (s, 2H), 4.22 (d, J=3.6 Гц, 2H), 4.10-4.03 (m, 1H), 3.53 (t, J=8.0 Гц, 2H), 3.06 (dd, J=8.4 Гц, J=4.0 Гц, 1H), 2.91 (dd, J=16.4 Гц, J=2.8 Гц, 1H), 2.56-2.54 (m, 1H), 1.95-1.91 (m, 1H), 1.72-1.23 (m, 4H), 1.58-1.20 (m, 3H), 0.94-0.89 (m, 2H), 0.00 (s, 9H).

m/z=510[M+1]⁺.

Стадия С: 3-циклопентил-3-[3-(2-морфолинил-2-оксоэтиламино)-4-(7-{[2-(тpимeтилcилил)этoкcи]мeтил}-1H-пиppoлo[2,3-d]пиpимидин-4-ил)-1H-пиpaзoл-1-ил]пропионитрил

Морфолин (10,3 мг, 0,118 ммоль, 1,2 экв.), HATU (2-(7-аза-1Н-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония гексафторфосфат) (27 мг, 0,07 ммоль, 0,7 экв.) и 2-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-иламино]уксусную кислоту (50 мг, 0,098 ммоль, 1,0 экв.) растворяли в ДМФА при комнатной температуре. Данную реакционную жидкость перемешивали и охлаждали до 0°С, и затем добавляли DIEA (N,N-диизопропилэтиламин) (19 мг, 0,147 ммоль, 1,5 экв.). Данную реакционную жидкость перемешивали в течение ночи. После того, как реакция была завершена, полученную смесь разбавляли водой и этилацетатом, и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом 3-циклопентил-3-[3-(2-морфолинил-2-оксоэтиламино)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]пропионитрила (42 мг, выход: 74%).

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 8.94 (s, 1Н), 8.08 (s, 1H), 7.38 (d, J=3.6 Гц, 1H), 6.73 (d, J=3.6 Гц, 1H), 5.72 (s, 2H), 4.30 (s, 2H), 4.12-4.06 (m, 1H), 3.93-3.70 (m, 6H), 3.62-3.57 (m, 4H), 3.14 (dd, J=17.2 Гц, J=8.0 Гц, 1H), 2.96 (dd, J=17.2 Гц, J=7.6 Гц, 1H), 2.63-2.61 (m, 1H), 2.03-1.98 (m, 1H), 1.82-1.63 (m, 4H), 1.38-1.29 (m, 3H), 0.97-0.94 (m, 2H), 0.00 (s, 9H).

m/z=579[M+1]⁺.

Стадия D: 3-циклопентил-3-[3-(2-морфолинил-2-оксоэтиламино)-4-(7H-пирроло[2,3-d] пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]пропионитрил

Соединение Примера 14 получали в соответствии с методикой, использованной на стадии Н Примера 1, затем исключением, что 3-[3-амино-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрил заменяли 3-циклопентил-3-[3-(2-морфолинил-2-оксоэтиламино)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]пропионитрилом.

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 10.21 (s, 1Н), 8.80 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.27 (d, J=3.2 Гц, 1H), 6.60 (d, J=3.2 Гц, 1H), 4.25 (s, 2H), 4.02-4.07 (m, 1H), 3.64-3.80 (m, 6H), 3.57-3.61 (m, 2H), 3.09 (dd, J=16.8 Гц, J=8.0 Гц, 1H), 2.91 (dd, J=16.8 Гц, J=4.0 Гц, 1H), 2.52-2.63 (m, 1H), 1.94-2.07 (m, 1H), 1.55-1.81 (m, 4H), 1.25-1.32 (m, 3H).

m/z=449[M+1]⁺.

Пример 15: этил 4-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7H-пирроло[2,3-d] пирими дин-4-ил)-1H-пиразол-3-иламино]-4-оксобутаноат

Стадия А: этил 4-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-иламино]-4-оксобутаноат

К раствору 3-[3-амино-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрила (250 мг, 0,553 ммоль, 1,0 экв., получен на стадии G Примера 1) и N,N-диизопропилэтиламина (86 мг, 0,664 ммоль, 1,2 экв.) в дихлорметане (10 мл) добавляли 4-хлор-4-оксобутановой кислоты этиловый эфир (109 мг, 0,664 ммоль, 1,2 экв.) при перемешивании в ледяной бане. Данную реакционную жидкость перемешивали в течение 3 ч при комнатной температуре, и затем добавляли еще одну порцию N,N-диизопропилэтиламина (0,2 мл) и 4-хлор-4-оксобутановой кислоты этилового эфира (0,1 мл). Реакцию продолжали в течение ночи, полученную смесь разбавляли водой и этилацетатом, и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом указанного в заголовке соединения (237 мг, выход: 74%).

¹Н ЯМР (CDCl₃) δ: 11.63-11.68 (1H, brs), 8.85 (1Н, s), 8.18 (1Н, s), 7.41 (1Н, d, J=3.6 Гц), 6.72 (1Н, d, J=3.6 Гц), 5.68 (2Н, s), 4.22-4.36 (1Н, m), 4.16 (2Н, q, J=7.2 Гц), 3.55 (2Н, t, J=8.4 Гц), 3.13 (1Н, dd, J=17.2 Гц, 7.6 Гц), 2.99 (1Н, dd, J=17.2 Гц, 3.6 Гц), 2.62-2.88 (5Н, m), 1.93-2.01 (1H, m), 1.60-1.80 (4Н, m), 1.28-1.34 (3Н, m), 1.26 (3Н, t, J=7.2 Гц), 0.93 (2Н, t, J=8.4 Гц), -0.04 (9Н, s).

m/z=580[M+1]⁺.

Стадия В: этил 4-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-иламино]-4-оксобутаноат

Соединение (237 мг, 0,409 ммоль, 1 экв.), полученное на предыдущей стадии, растворяли в ацетонитриле (4 мл) и воде (0,5 мл), и добавляли LiBF₄ (383 мг, 4,09 ммоль, 10 экв.). Данную смесь перемешивали в течение ночи при 90°С и затем охлаждали до комнатной температуры. Добавляли раствор аммиака, и полученную смесь перемешивали в течение 1 ч. Добавляли солевой раствор и этилацетат, и полученную смесь экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом указанного в заголовке соединения.

¹Н ЯМР (CDCl₃) δ: 11.65 (1H, s), 9.78 (1H, s), 8.80 (1H, s), 8.23 (1H, s), 7.38 (1Н, d, J=3.6 Гц), 6.68 (1Н, d, J=3.6 Гц), 4.29-4.36 (1Н, m), 4.25 (2Н, q, J=7.2 Гц), 3.24 (1Н, dd, J=17.2 Гц, 8.0 Гц), 3.04 (1Н, dd, J=17.2 Гц, 3.6 Гц), 2.82-2.94 (4Н, m), 2.67-2.76 (1Н, m), 1.97-2.05 (1H, m), 1.57-1.83 (4Н, m), 1.34 (3Н, t, J=7.2 Гц), 1.28-1.32 (3Н, m).

m/z=450[M+1]⁺.

Пример 16: 3-циклопентил-3-[3-(сукцинимид-1-ил)-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиpимидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]пропионитрил

Стадия A: 3-циклопентил-3-[3-(сукцинимид-1-ил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]пропионитрил

3-[3-Амино-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиpимидин-4-ил)-1H-пиpaзoл-1-ил]-3-циклoпeнтилпpoпaннитpил (200 мг, 0,443 ммоль, 1,0 экв., получен на стадии G Примера 1) и янтарный ангидрид (88 мг, 0,879 ммоль, 2,0 экв.) растворяли в 1,2-дихлорэтане (10 мл), и данную смесь подвергали дефлегмации в течение ночи. Полученную смесь концентрировали под вакуумом и разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом указанного в заголовке соединения (103 мг, выход: 44%).

¹Н ЯМР (CDCl₃) δ: 8.70 (1Н, s), 8.31 (1Н, s), 7.37 (1Н, d, J=4.0 Гц), 6.67 (1H, d, J=4.0 Гц), 5.64 (2Н, s), 4.26-4.32 (1H, m), 3.50 (2Н, t, J=8.4 Гц), 3.08 (1Н, dd, J=17.2 Гц, 6.8 Гц), 3.02 (1Н, dd, J=17.2 Гц, 4.8 Гц), 2.94 (4Н, s), 2.62-2.70 (1Н, m), 1.96-2.05 (1Н, m), 1.59-1.77 (4Н, m), 1.27-1.34 (3Н, m), 0.90 (2Н, t, J=8.4 Гц), -0.06 (9Н, s).

m/z=534[M+1]⁺.

Стадия В: 3-циклопентил-3-[3-(сукцинимид-1-ил)-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиpимидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]пропионитрил

Соединение (103 мг, 0,193 ммоль, 1 экв.), полученное на предыдущей стадии, растворяли в ацетонитриле (4 мл) и воде (0,5 мл), и добавляли LiВF₄ (181 мг, 1,93 ммоль, 10 экв.). Данную смесь перемешивали в течение ночи при 90°С и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли раствор аммиака, и данную смесь перемешивали в течение 1 ч. Добавляли солевой раствор и этилацетат, и полученную смесь экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом указанного в заголовке соединения.

¹Н ЯМР (CDCl₃) δ: 9.41-9.46 (1Н, brs), 8.69 (1H, s), 8.34 (1Н, s), 7.32 (1H, d, J=3.2 Гц), 6.63 (1Н, d, J=3.2 Гц), 4.30-4.35 (1Н, m), 3.11 (1H, dd, J=17.2 Гц, 7.2 Гц), 3.04 (1Н, dd, J=17.2 Гц, 4.4 Гц), 2.96 (4Н, s), 2.61-2.69 (1Н, m), 1.95-2.04 (1Н, m), 1.56-1.78 (4Н, m), 1.28-1.33 (3Н, m).

m/z=404[M+1]⁺.

Пример 17: 3-[3-(3-морфолин-4-карбонил)циклобутиламино-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразолил]-3-циклопентилпропаннитрил

Стадия А: метил 3-оксоциклобутанкарбоксилат

К раствору 3-оксоциклобутанкарбоновой кислоты (1 г, 8,77 ммоль) в метаноле добавляли по каплям концентрированную серную кислоту (0,2 мл), и данную смесь подвергали дефлегмации при 75°С. После того, как взаимодействие исходных веществ полностью завершалось, реакционную смесь гасили путем добавления бикарбоната натрия, и удаляли растворитель. Полученный остаток экстрагировали с выходом метил 3-оксоциклобутанкарбоксилата (1,1 г, выход: 99%).

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 3.22-3.34 (m, 3Н), 3.40-3.47 (m, 2Н), 3.78 (s, 3Н).

Стадия B: метил 3-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-иламино]циклобутанкарбоксилат

К раствору 3-[3-амино-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрила (410,0 мг, 0,91 ммоль, получен на стадии G Примера 1) в 1,2-дихлорэтане добавляли метил 3-оксоциклобутанкарбоксилат (117,0 мг, 0,91 ммоль), уксусную кислоту (54,6 мг, 0,91 ммоль) и цианоборгидрид натрия (80,0 мг, 1,27 ммоль) в ледяной бане. Ледяную баню удаляли, и данную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. После того, как взаимодействие исходных веществ полностью завершалось, реакционную смесь гасили путем добавления насыщенного раствора хлорида аммония. Полученную смесь промывали водой и экстрагировали этилацетатом с выходом указанного в заголовке соединения (172 мг, выход: 34%).

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 8.85 (s, 1Н), 8.00 (s, 1H), 7.36 (m, 1H), 6.93 (brs, 1H), 6.75 (s, 1H), 5.69 (s, 2H), 4.91 (d, 1H), 4.00-4.05 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.55 (t, J=8.4 Гц, 2H), 3.00-3.20 (m, 1H), 1.80-2.95 (m, 8H), 1.25-1.80 (m, 7H), 0.91 (t, J=8.0, 2H), -0.05 (s, 9H).

m/z=564[M+1]⁺.

Стадия C: 3-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-иламино]циклобутанкарбоновая кислота

К раствору метил 3-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-иламино]циклобутанкарбоксилата (84 мг, 0,144 ммоль) в метаноле добавляли по каплям водный раствор моногидрата гидроксида лития (30 мг, 0,72 ммоль) в ледяной бане. Данную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. После того, как взаимодействие исходных веществ полностью завершалось, растворитель удаляли. Полученную смесь промывали водой, экстрагировали этилацетатом, сушили над безводным сульфатом натрия и подвергали колоночной хроматографии (этилацетат: петролейный эфир = 1:1 и затем метанол) с получением указанного в заголовке соединения (29 мг, выход: 37%).

Стадия С: 3-{3-[3-(морфолин-4-карбонил)циклобутиламино]-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразолил}-3-циклопентилпропаннитрил

К раствору 3-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-иламино]циклобутанкарбоновой кислоты (25 мг, 0,0455 ммоль) в ДМФА последовательно добавляли морфолин (4,78 мг, 0,0545 ммоль) и HBTU (17,3 мг, 0,0455 ммоль) в ледяной бане. Данную смесь перемешивали в течение 5 мин, затем добавляли DIEA (11,8 мг, 0,091 ммоль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре. После того, как взаимодействие исходных веществ полностью завершалось, согласно данным ТСХ-анализа, реакционную смесь гасили путем добавления воды. Полученную смесь экстрагировали этилацетатом и сушили над безводным сульфатом натрия с выходом неочищенного продукта, который как есть использовали на следующей стадии.

Стадия D: 3-[3-(3-(морфолин-4-карбонил)циклобутиламино)-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразолил]-3-циклопентилпропаннитрил

Неочищенный продукт, полученный на стадии С, растворяли в дихлорметане, и затем добавляли трифторуксусную кислоту (3 мл). Данную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. После удаления растворителя получали желтое маслянистое вещество, которое растворяли в метаноле. Добавляли две капли этилен диамина, и данную смесь перемешивали при комнатной температуре. После того, как взаимодействие исходных веществ полностью завершалось, согласно данным ТСХ-анализа, растворитель удаляли. Полученную смесь промывали водой и экстрагировали этилацетатом с выходом указанного в заголовке соединения (17 мг, выход после двух стадий: 76%).

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 9.53 (brs, 1Н), 8.76 (s, 1H), 8.0 (s, 1H), 7.35 (brs, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.65 (s, 1H), 4.24-4.34 (m, 1H), 4.00-4.03 (m, 1H), 3.50-3.65 (m, 6H), 3.40-3.43 (m, 2H), 3.05-3.12 (m, 1H), 2.88-2.92 (m, 2H), 2.37-2.72 (m, 5H), 1.90-1.98 (m, 1H), 1.10-1.80 (m, 7H).

m/z=489[M+1]⁺.

Пример 18: 3-[3-бром-4-(5-бром-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрил

Стадия А: 3-[3-бром-4-(5-бром-7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пиppoлo[2,3-d]пиpимидин-4-ил)-1H-пиpaзoл-1-ил]-3-циклoпeнтилпpoпaннитpил

К раствору 3-[3-амино-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрила (200 мг, 0,442 ммоль, 1,0 экв., получен на стадии G Примера 1) в ацетонитриле добавляли бромид меди (198 мг, 0,886 ммоль, 2,0 экв.) при комнатной температуре. Данную реакционную жидкость помещали в защитную атмосферу азота и перемешивали в течение 0,5 ч при 60°С. Затем к реакционной жидкости добавляли по каплям трет-бутилнитрит (68 мг, 0,66 ммоль, 1,5 экв.), и данную смесь перемешивали в течение 3 ч при 60°С. Полученную смесь разбавляли водой и этилацетатом, и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом 3-[3-бром-4-(5-бром-7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрила (123 мг, выход: 54%).

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 8.99 (s, 1Н), 7.86 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 5.77 (s, 2H), 4.21-4.19 (dd, J=2.4 Гц, J=1.2 Гц, 1H), 3.58 (t, J=8.4 Гц, 2H), 3.16-3.10 (m, 1Н), 2.95 (dd, J=16.8 Гц, J=4.0 Гц, 1H), 2.63-2.56 (m, 1H), 2.00-1.90 (m, 1H), 1.71-1.56 (m, 4H), 1.32-1.17 (m, 3H), 0.96-0.86 (m, 2H), 0.00 (s, 9H).

m/z=595[M+1]⁺.

Стадия В: 3-[3-бром-4-(5-бром-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрил

Соединение Примера 18 получали в соответствии с методикой, использованной на стадии Н Примера 1, за тем исключением, что 3-[3-амино-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрил заменяли 3-[3-бром-4-(5-бром-7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрилом.

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 9.71-9.73 (brs, 1H), 8.99 (s, 1Н), 7.89 (s, 1H), 7.42 (s, 1H), 4.18-4.31 (m, 1H), 3.14 (dd, J=17.2 Гц, J=8.8 Гц, 1H), 2.96 (dd, J=17.2 Гц, J=4.0 Гц, 1H), 2.58-2.64 (m, 1H), 1.90-2.01 (m, 1H), 1.59-1.76 (m, 4H), 1.25-1.32 (m, 3H).

m/z=465[M+1]⁺.

Пример 19: 3-[3-бром-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрил

Стадия А: 3-[3-бром-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрил

3-[3-Амино-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрил (100 мг, 0,221 ммоль, 1,0 экв., получен на стадии G Примера 1) добавляли в раствор соляной кислоты, разбавленной до концентрации 2 н., при перемешивании в ледяной бане, и данную реакционную жидкость перемешивали в течение 0,5 ч. К реакционной жидкости быстро добавляли большую часть водного раствора нитрита натрия (61 мг, 0,884 ммоль, 4,0 экв.), и затем добавляли остаток нитрита натрия и бромид натрия (23 мг, 0,33 ммоль, 1,5 экв.). Данную реакционную жидкость перемешивали в течение 0,5 ч при 0°С. Полученную смесь разбавляли водой и этилацетатом, и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом 3-[3-бром-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрила (9 мг, выход: 8%).

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 9.00 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.43 (s, 1H), 6.82 (s, 1H), 5.73 (s, 2H), 4.30-4.18 (m, 1H), 3.61 (t, J=8.4 Гц, 2H), 2.95 (dd, J=17.2 Гц, J=8.4 Гц, 1H), 3.01 (dd, J=16.8 Гц, J=8.0 Гц, 1H), 2.72-2.61 (m, 1H), 2.05-1.99 (m, 1H), 1.82-1.64 (m, 4H), 1.47-1.18 (m, 3H), 1.09-0.76 (m, 2H), 0.00 (s, 9H).

m/z=516[M+]⁺.

Стадия В: 3-[3-бром-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрил

Соединение Примера 19 получали в соответствии с методикой, использованной на стадии Н Примера 1, за тем исключением, что 3-[3-амино-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрил заменяли 3-[3-бром-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрилом.

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 10.01-10.08 (brs, 1Н), 8.95 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 3.38-7.40 (m, 1H), 6.76-6.78 (m, 1H), 4.19-4.25 (m, 1H), 3.12 (dd, J=17.2 Гц, J=8.4 Гц, 1H), 2.97 (dd, J=17.2 Гц, J=4.0 Гц, 1H), 2.57-2.69 (m, 1H), 1.93-2.07 (m, 1H), 1.58-1.79 (m, 4H), 1.28-1.32 (m, 3H).

m/z=386[M+1]⁺.

Пример 20: (E)-4-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиpимидин-4-ил)-1H-пиpaзoл-3-илaминo]-N-гидpoкcил-2-бyтeнaмид

Стадия A: (E)-метил-4-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7-{[2-(тpимeтилcилил)этoкcи]мeтил}-1H-пиppoлo[2,3-d]пиpимидин-4-ил)-7H-пиpaзoл-3-иламино]-2-бутеноат

Данное соединение получали в соответствии с методикой, использованной на стадии А Примера 11, за тем исключением, что вместо 4-(2-хлорэтил)морфолина в качестве источника боковой цепи добавляли метил 4-бромкротонат.

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 8.77 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.47 (t, J=5.6 Гц, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.16-7.10 (m, 1H), 6.68 (s, 1H), 6.07 (d, J=15.6 Гц, 1H), 5.66 (s, 2H), 4.22 (d, J=9.2 Гц, 2H), 4.04-4.01 (m, 1H), 3.72 (s, 3H), 5.53 (t, J=8.4 Гц, 2H), 3.08 (dd, J=16.8 Гц, J=8.4 Гц, 1H), 2.88 (dd, J=13.2 Гц, J=6.4 Гц, 1H), 2.62-2.48 (m, 1H), 1.97-1.92 (m, 1H), 1.72-1.56 (m, 4H), 1.33-1.21 (m, 3H), 0.92-0.86 (m, 2H), 0.00 (s, 9H).

m/z=550 [M+1]⁺.

Стадия B: (E)-4-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7-{[2-(тpимeтилcилил)этoкcи]мeтил}-7H-пиppoлo[2,3-d]пиpимидин-4-ил)-1H-пиpaзoл-3-иламино]-2-бутеновая кислота

К раствору (E)-метил-4-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-иламино]-2-бутеноата (215 мг, 0,391 ммоль, 1,0 экв.) в смеси тетрагидрофурана и воды (тетрагидрофуран/вода = 5/1) добавляли моногидрат гидроксида лития (91 мг, 2,0 ммоль, 5,0 экв.) при комнатной температуре, и данную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. После того, как реакция была завершена, растворитель удаляли под вакуумом. Полученную смесь разбавляли водой, и рН раствора доводили до значения 1-2 путем добавления соляной кислоты, разбавленной до концентрации 2 н., и данную смесь фильтровали с получением (E)-4-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-иламино]-2-бутеновой кислоты (91 мг, выход: 44%).

Стадия С: (E)-4-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-иламино]-N-(тетрагидро-2H-пиран-2-окси)-2-бутенамид

O-(Тетрагидро-2H-пиран-2-ил)гидроксиламин (40,0 мг, 0,34 ммоль, 2,0 экв.), HATU (65 мг, 0,17 ммоль, 1,0 экв.) и (E)-4-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-иламино]-2-бутеновую кислоту (91 мг, 0,17 ммоль, 1,0 экв.) растворяли в ДМФА при комнатной температуре. Данную реакционную жидкость перемешивали и охлаждали до 0°С, и затем добавляли DIEA (44 мг, 0,34 ммоль, 2,0 экв.). Данную реакционную жидкость перемешивали в течение ночи. После того, как реакция была завершена, смесь разбавляли водой и этилацетатом, и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом указанного в заголовке соединения (66 мг, выход: 62%).

m/z=635[M+1]⁺.

Стадия D: (Е)-4-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-иламино]-N-гидроксил-2-бутенамид

Соединение Примера 20 получали в соответствии с методикой, использованной на стадии Н Примера 1, за тем исключением, что 3-[3-амино-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрил заменяли (E)-4-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-иламино]-N-(тетрагидро-2H-пиран-2-окси)-2-бутенамидом.

m/z=421[M+1]⁺.

Пример 21: 3-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-иламино]-N-гидроксилпропанамид

Стадия А: этил-3-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-иламино]пропионат

Данное соединение получали в соответствии с методикой, использованной на стадии А Примера 11, за тем исключением, что вместо 4-(2-хлорэтил)морфолина в качестве источника боковой цепи добавляли 3-бромпропионовой кислоты этиловый эфир.

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 8.76 (s, 1Н), 8.00 (s, 1H), 7.40 (brs, 1H), 7.32 (d, J=3.6 Гц, 1H), 6.66 (d, J=4.0 Гц, 1H), 5.65 (s, 2H), 4.19-4.14 (m, 2H), 4.03-3.99 (m, 1H), 3.72 (d, J=6.8 Гц, 2H), 3.52 (d, J=8.0 Гц, 2H), 3.11 (dd, J=16.4 Гц, J=8.0 Гц, 1H), 2.92 (dd, J=16.8 Гц, J=3.6 Гц, 1H), 2.75 (t, J=6.4 Гц, 2H), 2.64-2.53 (m, 1H), 1.98-1.88 (m, 1H), 1.67-1.57 (m, 5H), 1.30-1.22 (m, 5H), 0.91 (d, J=8.0 Гц, 2H), -0.06 (s, 9H).

m/z=552[M+1]⁺.

Стадия В: 3-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-иламино]пропионовая кислота

Данное соединение получали в соответствии с методикой, использованной на стадии В Примера 14, за тем исключением, что этил-2-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиpимидин-4-ил)-1H-пиpaзoл-3-илaминo]aцeтaт заменяли этил-3-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d] пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-иламино] пропионатом.

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 8.79 (s, 1Н), 8.04 (s, 1H), 7.9-7.4 (brs, 1H), 7.35 (d, J=4.0 Гц, 1H), 6.68 (d, J=3.6 Гц, 1H), 5.67 (s, 2H), 4.08-4.01 (m, 1H), 3.73 (t, J=6.0 Гц, 2H), 3.53 (t, J=8.4 Гц, 2H), 3.09 (dd, J=17.2 Гц, J=8.8 Гц, 1H), 2.94-2.83 (m, 3H), 2.64-2.56 (m, 1H), 1.96-1.93 (m, 1H), 1.74-1.59 (m, 4H), 1.30-1.23 (m, 3H), 0.91 (t, J=8.4 Гц, 2H), -0.06 (s, 9H).

m/z=524[M+1]⁺.

Стадия С: N-(бензилокси)-3-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-иламино]пропанамид

Данное соединение получали в соответствии с методикой, использованной на стадии С Примера 20, за тем исключением, что (E)-4-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-иламино]-2-бутеновую кислоту заменяли 3-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-иламино]пропионовой кислотой и O-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)гидроксиламин заменяли О-бензи лгидроксиламином.

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 9.08 (brs, 1H), 8.83 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.52 (brs, 1H), 7.42-7.30 (m, 5H), 6.73 (d, J=3.6 Гц, 1H), 5.72 (s, 2H), 4.92 (s, 2H), 4.04-3.99 (m, 1H), 3.78 (d, J=4.8 Гц, 2H), 3.60 (t, J=8.4 Гц, 2H), 3.03-2.95 (m, 2H), 2.67-2.59 (m, 3H), 1.99-1.96 (m, 1H), 1.81-1.64 (m, 4H), 1.50-1.28 (m, 3H), 1.00-0.93 (m, 2H), 0.00 (s, 9H).

m/z=629[M+1]⁺.

Стадия D: 3-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиpимидин-4-ил)-1H-пиpaзoл-3-илaминo]-N-гидpoкcилпpoпaнaмид

Соединение Примера 21 получали в результате удаления SEM в соответствии с методикой, использованной на стадии Н Примера 1, и удаления бензила, за тем исключением, что 3-[3-амино-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрил заменяли N-(бензилокси)-3-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-иламино]пропанамидом.

m/z=409[M+1]⁺.

Пример 22: 3-[3-(2-цианоэтиламино)-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрил

Стадия А: 3-[1-(2-циано-1-циклопропилэтил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-иламино]пропанамид

К раствору 3-[1-(2-циано-1-циклопропилэтил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-иламино]пропионовой кислоты (1,0 экв., получена на стадии В Примера 21) в ДМФА добавляли карбонилдиимидазол (1,5 экв.) при перемешивании в ледяной бане. Полученную смесь перемешивали в течение 0,5 ч при 0°С, затем нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 ч. В реакционную жидкость вводили газообразный аммиак, и барботировали в течение 1 ч. Полученную смесь разбавляли водой и этилацетатом, и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом указанного в заголовке соединения.

m/z=523[M+1]⁺.

Стадия B: 3-[3-(2-цианоэтиламино)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрил

При перемешивании в ледяной бане 3-[1-(2-циано-1-циклопропилэтил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-иламино]пропанамид (1,0 экв.) растворяли в дихлорметане, и затем добавляли триэтиламин (5 экв.) и трифторуксусный ангидрид (2 экв.). Данную реакционную жидкость нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Полученную смесь разбавляли водой и этилацетатом, и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом указанного в заголовке соединения.

m/z=505[M+1]⁺.

Стадия С: 3-[3-(2-цианоэтиламино)-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрил

Соединение, полученное на предыдущей стадии, растворяли в ацетонитриле (4 мл) и воде (0,5 мл), и добавляли LiВF₄ (10 экв.). Данную смесь перемешивали в течение ночи при 90°С и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли раствор аммиака, и данную смесь перемешивали в течение 1 ч. Добавляли солевой раствор и этилацетат, и полученную смесь экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом указанного в заголовке соединения.

m/z=375[M+1]⁺.

Пример 23: 1-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-ил]-3-(5-метил-1,2,4-оксадиазол-3-ил)мочевина

Стадия А: 1-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-ил]-3-(5-метил-1,2,4-оксадиазол-3-ил)мочевина

При перемешивании в ледяной бане к раствору 3-[3-амино-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрила (1,0 экв., получен на стадии G Примера 1) в дихлорметане добавляли трихлорметил хлорформиат (0,6 экв.) и затем триэтиламин (1,2 экв.). Данную реакционную жидкость перемешивали в течение 0,5 ч при 0°С. Затем добавляли 5-метил-1,2,4-оксадиазол-3-амин (2 экв.) и затем триэтиламин (1,2 экв.), и полученную смесь перемешивали в течение 3 ч. Реакцию гасили путем добавления воды, и полученную смесь экстрагировали дихлорметаном. Объединенные органические фазы промывали последовательно насыщенным раствором хлорида аммония, насыщенным раствором бикарбоната натрия и солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом указанного в заголовке соединения.

m/z=577[M+]⁺.

Стадия В: 1-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-ил]-3-(5-метил-1,2,4-оксадиазол-3-ил)мочевина

Соединение Примера 23 получали путем удаления SEM в соответствии с методикой, использованной на стадии Н Примера 1, за тем исключением, что 3-[3-амино-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]ииримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрил заменяли 1-[1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d] пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-ил]-3-(5-метил-1,2,4-оксадиазол-3-ил)мочевиной.

m/z=447[M+1]⁺.

Пример 24: 1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-формамид

Стадия А: этил 1H-пиразол-3-формиат

1H-Пиразол-3-муравьиную кислоту (7,25 г, 64,7 ммоль) растворяли в абсолютном этаноле (100 мл), и добавляли концентрированную серную кислоту (0,7 мл). Данную реакционную жидкость нагревали и подвергали дефлегмации в течение ночи. Затем реакционную жидкость концентрировали под вакуумом, и остаток разбавляли этилацетатом, промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия, и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом с получением этил 1H-пиразол-3-формиата (8,35 г, выход: 92%) в виде желтоватого твердого вещества.

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 12.4 (brs, 1Н), 7.74 (d, J=2.4 Гц, 1H), 6.86 (d, J=2.4 Гц, 1H), 4.42 (q, J=7.2 Гц, 2H), 1.41 (t, J=7.2 Гц, 3H).

Стадия В: этил 4-иод-1H-пиразол-3-формиат

Используя перемешивание при комнатной температуре, к раствору этил 1H-пиразол-3-формиата (8,35 г, 59,6 ммоль, 1,0 экв.) в ацетонитриле (150 мл) добавляли иод (15,6 г, 61,5 ммоль, 1,03 экв.), и затем порциями добавляли гексанитратоцерат (IV) аммония (32,7 г, 59,6 ммоль, 1,0 экв.). Данную реакционную жидкость перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Затем реакцию гасили путем добавления 5% раствора NaHSO₃, и отфильтровывали нерастворимые вещества. Осадок на фильтре промывали водой и этилацетатом. Полученный фильтрат экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали водой и солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом с получением этил 4-иод-1H-пиразол-3-формиата (15,0 г, выход: 95%).

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 13.4 (brs, 1Н), 7.89 (s, 1H), 4.46 (q, J=7.2 Гц, 2H), 1.46 (t, J=7.2 Гц, 3H).

Стадия С: этил 4-иод-1-(4-метоксибензил)-1H-пиразол-5-формиат и этил 4-иод-1-(4-метоксибензил)-1H-пиразол-3-формиат

и

К раствору этил 4-иод-1H-пиразол-3-формиата (4,2 г, 15,8 ммоль, 1,0 экв.) и карбоната калия (4,37 г, 31,6 ммоль, 2,0 экв.) в ацетонитриле (45 мл) добавляли пара-метоксибензилхлорид (3,09 г, 19,7 ммоль, 1,25 экв.) с перемешиванием при комнатной температуре. Данную реакционную жидкость помещали в защитную атмосферу азота и перемешивали в течение ночи при 60°С. Затем реакционную жидкость охлаждали до комнатной температуры, и отфильтровывали нерастворимые вещества. Осадок на фильтре промывали этилацетатом. Фильтрат концентрировали под вакуумом и разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с получением этил 4-иод-1-(4-метоксибензил)-1H-пиразол-5-формиата (С1, 1,94 г, выход: 32%) и этил 4-иод-1-(4-метоксибензил)-1H-пиразол-3-формиата (С2, 2,90 г, выход: 47%).

C1: ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 7.61 (s, 1Н), 7.21 (d, J=8.4 Гц, 2H), 6.82 (d, J=8.4 Гц, 2H), 5.70 (s, 2H), 4.37 (q, J=7.2 Гц, 2H), 3.77 (s, 3Н), 1.40 (t, J=7.2 Гц, 3Н).

m/z=409[M+Na]⁺.

C2: ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 7.36 (s, 1H), 7.22 (d, J=8.8 Гц, 2H), 6.90 (d, J=8.4 Гц, 2H), 5.31 (s, 2H), 4.44 (q, J=7.2 Гц, 2H), 3.81 (s, 3H), 1.43 (t, J=7.2 Гц, 3Н).

m/z=409[M+Na]⁺.

Стадия D: этил 1-(4-метоксибензил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-5-формиат

В защитной атмосфере азота к раствору этил 4-иод-1-(4-метоксибензил)-1H-пиразол-5-формиата (1,54 г, 4,0 ммоль, 1,0 экв.), диборной кислоты пинаколового эфира (1,12 г, 4,4 ммоль, 1,1 экв.) и ацетата калия (1,18 г, 12,0 ммоль, 3,0 экв.) в ДМСО (30 мл) добавляли Pd(dppf)Cl₂ (146 мг, 0,2 ммоль, 0,05 экв.). Данные реагенты помещали в защитную атмосферу азота и перемешивали в течение ночи при 80°С. Полученную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой и этилацетатом, и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали водой и солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом с получением 5-(этоксикарбонил)-1-(4-метоксибензил)-1H-пиразол-4-илбороновой кислоты пинаколового эфира (1,8 г) в виде неочищенного продукта.

Полученный неочищенный 5-(этоксикарбонил)-1-(4-метоксибензил)-1Н-пиразол-4-илбороновой кислоты пинаколовый эфир (1,8 г, 4,0 ммоль, 1,0 экв.) растворяли в ДМФА (50 мл), и затем добавляли 4-хлор-7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин (1,25 г, 4,4 ммоль, 1,1 экв.), фосфат калия (1,7 г, 8,0 ммоль, 2,0 экв.) и Pd(PPh₃)₂Cl₂ (140 мг, 0,2 ммоль, 0,05 экв.). Данные реагенты помещали в защитную атмосферу азота и перемешивали в течение ночи при 100°С. Полученную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем разбавляли водой и этилацетатом, и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали водой и солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом указанного в заголовке соединения (1,35 г, выход: 67%) в виде коричневой маслянистой жидкости.

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 8.87 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.34 (d, J=4.0 Гц, 1H), 7.29 (d, J=8.8 Гц, 2H), 6.85 (d, J=8.8 Гц, 2H), 6.51 (d, J=4.0 Гц, 1H), 5.67 (s, 4H), 4.13 (q, J=7.2 Гц, 2H), 3.78 (s, 3H), 3.54 (t, J=8.4 Гц, 2H), 0.92 (m, 5H), -0.06 (s, 9H).

m/z=508[M+1]⁺.

Стадия Е: 1-(4-метоксибензил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-5-муравьиная кислота

К перемешиваемому раствору этил 1-(4-метоксибензил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-5-формиата (204 мг, 0,40 ммоль, 1,0 экв.) в смеси метанола (5 мл) и воды (1 мл) добавляли моногидрат гидроксида лития (84 мг, 2,0 ммоль, 5,0 экв.) с перемешиванием при комнатной температуре. Данную реакционную жидкость перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре и концентрировали под вакуумом. Добавляли этилацетат и 1 н. водный раствор гидроксида натрия. Органическую фазу два раза экстрагировали 1 н. раствором гидроксида натрия. Объединенную жидкость основной (водной) фазы подкисляли путем добавления 1 н. соляной кислоты, и полученную кислую жидкость экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения (171 мг, выход: 89%).

¹Н ЯМР (CDCl₃) δ: 8.80 (1Н, s), 8.40 (1Н, s), 7.58 (1Н, d, J=3.6 Гц), 7.43 (2Н, d, J=8.8 Гц), 6.99 (1H, d, J=3.6 Гц), 6.84 (2Н, d, J=8.4 Гц), 6.02 (2Н, s), 5.72 (2Н, s), 3.77 (3Н, s), 3.56 (2Н, t, J=8.4 Гц), 0.93 (2Н, t, J=8.4 Гц), -0.05 (9Н, s).

m/z=480[M+1]⁺.

Стадия F: 1-(4-метоксибензил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-5-формамид

К раствору 1-(4-метоксибензил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-5-муравьиной кислоты (295 мг, 0,615 ммоль, 1,0 экв.) в ДМФА добавляли карбонилдиимидазол (150 мг, 0,923 ммоль, 1,5 экв.) при перемешивании в ледяной бане. Данную реакционную жидкость перемешивали в течение 10 мин при 0°С, и затем нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 1 ч. В реакционную жидкость вводили газообразный аммиак, и барботировали в течение 1 ч. Затем реакционную жидкость помещали в защитную атмосферу азота, и реакцию проводили в течение ночи. Реакционную жидкость разбавляли водой и этилацетатом, и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом указанного в заголовке соединения (200 мг, выход: 68%).

¹Н ЯМР (CDCl₃) δ: 11.29 (1Н, s), 8.83 (1H, s), 8.09 (1Н, s), 7.44 (1Н, d, J=3.6 Гц), 7.38 (2Н, d, J=8.4 Гц), 6.86 (2Н, d, J=8.4 Гц), 6.79 (1Н, d, J=3.6 Гц), 5.91 (2Н, s), 5.72 (1Н, s), 5.69 (2Н, s), 3.78 (3Н, s), 3.56 (2Н, t, J=8.4 Гц), 0.93 (2Н, t, J=8.4 Гц), -0.05 (9Н, s).

m/z=479[M+1]⁺.

Стадия G: 4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-формамид

К 1-(4-метоксибензил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-1H-пиppoлo[2,3-d]пиpимидин-4-ил)-1H-пиpaзoл-5-фopмaмидy (200 мг, 0,418 ммоль, 1,0 экв.) в смешанном растворителе ацетонитрил (1,5 мл)/вода (1,5 мл) добавляли гексанитратоцерат (IV) аммония (687 мг, 1,25 ммоль, 3,0 экв.) при перемешивании в ледяной бане. Данную реакционную жидкость перемешивали в течение 1,5 ч при 0°С, разбавляли солевым раствором и этилацетатом, и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом указанного в заголовке соединения (79 мг, выход: 53%).

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 11.94 (brs, 1H), 11.40 (brs, 1Н), 8.87 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.50 (d, J=3.6 Гц, 1H), 6.93 (d, J=3.6 Гц, 1H), 6.00 (brs, 1H), 5.71 (s, 2H), 3.57 (t, J=8.2 Гц, 2H), 0.94 (t, J=8.2 Гц, 2H), -0.04 (s, 9H).

m/z=359[M+1]⁺.

Стадия H: 1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-формамид

К раствору 4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-формамида (79 мг, 0,22 ммоль, 1,0 экв.) и 3-циклопентилакрилонитрила (67 мг, 0,55 ммоль, 2,5 экв., получен на стадии А Примера 1) в ацетонитриле добавляли 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ен (70 мг, 0,46 ммоль, 2,1 экв.) при комнатной температуре. Данную реакционную жидкость перемешивали в течение 3 суток при комнатной температуре, разбавляли солевым раствором и этилацетатом, и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом указанного в заголовке соединения (76 мг, выход: 72%).

¹Н ЯМР (CDCl₃) δ: 10.93 (1Н, s), 8.90 (1Н, s), 8.29 (1H, s), 7.47 (1H, d, J=3.6 Гц), 6.78 (1Н, d, J=3.6 Гц), 5.93 (1Н, s), 5.71 (2Н, s), 4.40-4.45 (1H, m), 3.58 (2Н, t, J=8.4 Гц), 3.17 (1Н, dd, J=17.2 Гц, 7.2 Гц), 3.06 (1Н, dd, J=17.2 Гц, 3.6 Гц), 2.75-2.82 (1H, m), 2.01-2.06 (1Н, m), 1.54-1.82 (4Н, m), 1.32-1.36 (3Н, m), 0.95 (2Н, t, J=8.4 Гц), -0.02 (9Н, s).

m/z=480[M+1]⁺.

Стадия I: 1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-формамид

Соединение Примера 24 (14 мг, выход: 96%), в виде белого твердого вещества, получали путем удаления SEM в соответствии с методикой, использованной на стадии Н Примера 1, за тем исключением, что 3-[3-амино-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрил заменяли 1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-формамидом (20 мг, 0,042 ммоль).

¹Н ЯМР (CDCl₃) δ: 11.21 (2Н, s), 8.89 (1Н, s), 8.34 (1Н, s), 7.45 (1Н, d, J=3.6 Гц), 7.12 (1Н, s), 6.73 (1H, d, J=3.6 Гц), 4.43-4.47 (1H, m), 3.17 (1Н, dd, J=17.2 Гц, 7.2 Гц), 3.05 (1H, dd, J=17.2 Гц, 4.0 Гц), 2.72-2.79 (1Н, m), 1.95-2.04 (1Н, m), 1.56-1.80 (4Н, m), 1.29-1.34 (3Н, m).

m/z=350[M+1]⁺.

Пример 25: 1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-N-метил-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиpимидин-4-ил)-1H-пиpaзoл-3-фopмaмид

Соединение Примера 25 синтезировали в соответствии с методикой, описанной в Примере 24, за тем исключением, что раствор аммиака на стадии F заменяли раствором метиламина.

¹Н ЯМР (CDCl₃) δ: 10.67 (1Н, s), 9.89 (1Н, s), 8.90 (1H, s), 8.27 (1Н, s), 7.44 (1Н, d, J=3.6 Гц), 6.75 (1H, d, J=3.6 Гц), 4.42-4.47 (1Н, m), 3.15 (1Н, dd, J=17.2 Гц, 7.2 Гц), 3.01-3.08 (4Н, m), 2.69-2.81 (1H, m), 1.99-2.06 (1Н, m), 1.57-1.81 (4Н, m), 1.32-1.35 (3Н, m).

m/z=364[M+1]⁺.

Пример 26: N-(2-аминоэтил)-1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-формамид

Стадия А: этил 1-(4-метоксибензил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-формиат

В защитной атмосфере азота к раствору этил 4-иод-1-(4-метоксибензил)-1H-пиразол-3-формиата (1,0 г, 2,6 ммоль, 1,0 экв., получен на стадии С Примера 26), диборной кислоты пинаколового эфира (0,7 г, 2,8 ммоль, 1,1 экв.) и ацетата калия (0,76 г, 7,8 ммоль, 3,0 экв.) в ДМСО (30 мл) добавляли Pd(dppf)Cl₂ (95 мг, 0,13 ммоль, 0,05 экв.). Данные реагенты помещали в защитную атмосферу азота и перемешивали в течение ночи при 80°С. Полученную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем разбавляли водой и этилацетатом, и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали водой и солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом с получением 3-(этоксикарбонил)-1-(4-метоксибензил)-1H-пиразол-4-илбороновой кислоты пинаколового эфира (1,2 г) в виде неочищенного продукта.

Полученный неочищенный 3-(этоксикарбонил)-1-(4-метоксибензил)-1H-пиразол-4-илбороновой кислоты пинаколовый эфир (1,2 г, 2,6 ммоль, 1,0 экв.) растворяли в ДМФА (50 мл), и затем добавляли 4-хлор-7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин (0,8 г, 2,8 ммоль, 1,1 экв.), фосфат калия (1,1 г, 5,2 ммоль, 2,0 экв.) и Pd(PPh₃)₂Cl₂ (91 мг, 0,13 ммоль, 0,05 экв.). Данные реагенты помещали в защитную атмосферу азота и перемешивали в течение ночи при 100°С. Смесь охлаждали до комнатной температуры, затем разбавляли водой и этилацетатом, и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали водой и солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом указанного в заголовке соединения (960 мг, выход: 73%), в виде коричневой маслянистой жидкости.

¹Н ЯМР (CDCl₃) δ: 8.86 (1Н, s), 8.02 (1Н, s), 7.32 (1Н, d, J=3.6 Гц), 7.30 (2Н, d, J=8.4 Гц), 6.90 (2Н, d, J=8.4 Гц), 6.39 (1Н, d), 5.65 (2Н, s), 5.39 (2Н, s), 4.28 (2Н, q, J=7.2 Гц), 3.81 (3Н, s), 3.54 (2Н, t, J=8.4 Гц), 1.15 (3Н, t, J=7.2 Гц), 0.92 (2Н, t, J=8.4 Гц), -0.06 (9Н, s).

m/z=508[M+1]⁺.

Стадия В: этил 4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиpимидин-4-ил)-1H-пиразол-3 -формиат

К этил 1-(4-метоксибензил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-формиату (336 мг, 0,66 ммоль, 1,0 экв.) в смешанном растворителе ацетонитрил (1,5 мл)/вода (1,5 мл) добавляли гексанитратоцерат (IV) аммония (1,1 г, 2,01 ммоль, 3,0 экв.) при перемешивании в ледяной бане. Данную реакционную жидкость перемешивали в течение 1,5 ч при 0°С. Затем реакционную жидкость разбавляли солевым раствором и этилацетатом, и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом указанного в заголовке соединения (175 мг, выход: 63%).

¹Н ЯМР (CDCl₃) δ: 9.04 (1Н, s), 8.26 (1H, s), 7.55 (1H, d, J=3.6 Гц), 6.73 (1H, d, J=3.6 Гц), 5.73 (2H, s), 4.34 (2H, q, J=7.2 Гц), 3.60 (2H, t, J=8.4 Гц), 1.24 (3Н, t, J=7.2 Гц), 0.95 (2H, t, J=8.4 Гц), -0.03 (9H, s).

m/z=388[M+1]⁺.

Стадия С: этил 1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7-{ [2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-формиат

К раствору этил 4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиpимидин-4-ил)-1H-пиpaзoл-3-фopмиaтa (173 мг, 0,446 ммоль, 1,0 экв.) и 3-циклопентилакрилонитрила (135 мг, 1,11 ммоль, 2,5 экв., получен на стадии А Примера 1) в ацетонитриле (10 мл) добавляли 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ен (142 мг, 0,94 ммоль, 2,1 экв.) при комнатной температуре. Данную реакционную жидкость перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, затем нагревали до 60°С, и продолжали реакцию в течение 5 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, затем разбавляли солевым раствором и этилацетатом, и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом указанного в заголовке соединения (79 мг, выход: 35%) в виде желтоватого твердого вещества.

¹Н ЯМР (CDCl₃) δ: 8.88 (1Н, s), 7.98 (1Н, s), 7.32 (1Н, d, J=3.6 Гц), 6.46 (1Н, d, J=3.6 Гц), 5.65 (2Н, s), 4.27-4.35 (1Н, m), 4.23 (2Н, q, J=7.2 Гц), 3.53 (2Н, t, J=8.4 Гц), 3.11 (1Н, dd, J=17.2 Гц, 7.6 Гц), 2.97 (1Н, dd, J=17.2 Гц, 4.0 Гц), 2.58-2.69 (1Н, m), 1.88-1.99 (1H, m), 1.51-1.74 (4Н, m), 1.22-1.30 (3Н, m), 1.08 (3Н, t, J=7.2 Гц), 0.90 (2Н, t, J=8.4 Гц), -0.05 (9Н, s).

m/z=509[M+1]⁺.

Стадия D: N-(2-аминоэтил)-1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7H-пиppoлo[2,3-d]пиpимидин-4-ил)-1H-пиразол-3-формамид

К раствору этил 1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-формиата (79 мг, 0,16 ммоль) в дихлорметане добавляли трифторуксусную кислоту (0,5 мл) при перемешивании в ледяной бане. Данную реакционную жидкость помещали в защитную атмосферу азота и перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную жидкость концентрировали под вакуумом, остаток растворяли в дихлорметане, и полученный раствор концентрировали под вакуумом еще два раза. Концентрат растворяли в этаноле (5 мл), и добавляли этилендиамин (0,5 мл). Данную смесь перемешивали в течение 0,5 ч при комнатной температуре и концентрировали под вакуумом при 60°С. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом соединения, указанного в заголовке Примера 26 (57 мг, выход: 91%), в виде бежевого твердого вещества.

¹Н ЯМР (CDCl₃) δ: 11.27 (1Н, s), 10.20 (1H, brs), 8.79 (1Н, s), 8.23 (1Н, s), 7.32 (1H, d, J=3.6 Гц), 6.64 (1Н, d, J=3.6 Гц), 4.36-4.42 (1Н, m), 3.57-3.65 (2Н, m), 3.17 (1Н, dd, J=17.2 Гц, 7.2 Гц), 3.01-3.06 (3Н, m), 2.69-2.74 (1H, m), 1.95-2.02 (1Н, m), 1.61-1.78 (4Н, m), 1.28-1.33 (3Н, m).

m/z=393[M+1]⁺.

Пример 27: 1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7H-пирроло [2,3-d]пиpимидин-4-ил)-1H-пиpaзoл-3-кapбoнитpил

Стадия А: 1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-карбонитрил

При перемешивании в ледяной бане 1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-формамид (50 мг, 0,10 ммоль, 1,0 экв., получен на стадии Н Примера 24) растворяли в дихлорметане (5 мл), и затем добавляли триэтиламин (95 мг, 0,94 ммоль, 9 экв.) и трифторуксусный ангидрид (88 мг, 0,42 ммоль, 4 экв.). Данную реакционную жидкость нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Затем реакционную жидкость разбавляли солевым раствором и этилацетатом, и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения в виде неочищенного продукта (64 мг).

¹Н ЯМР (CDCl₃) δ: 8.98 (1Н, s), 8.25 (1Н, s), 7.45 (1Н, d, J=3.6 Гц), 6.81 (1Н, d, J=3.6 Гц), 5.70 (2Н, s), 4.33-4.37 (1Н, m), 3.57 (2Н, t, J=8.4 Гц), 3.11 (1H, dd, J=17.2 Гц, 8.0 Гц), 2.98 (1H, dd, J=17.2 Гц, 4.0 Гц), 2.60-2.63 (1H, m), 1.96-2.00 (1H, m), 1.54-1.71 (4H, m), 1.23-1.25 (3H, m), 0.93 (2H, t, J=8.4 Гц), -0.05 (9H, s).

m/z=462[M+1]⁺.

Стадия B: 1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиpимидин-4-ил)-1H-пиpaзoл-3-кapбoнитpил

Соединение Примера 27 (30 мг, выход: 87%), в виде белого твердого вещества, получали путем удаления SEM в соответствии с методикой, использованной на стадии Н Примера 1, за тем исключением, что 3-[3-амино-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрил заменяли неочищенным 1-(2-циано-1-циклопентилэтил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-карбонитрилом (64 мг).

¹Н ЯМР (CDCl₃) δ: 9.40 (1H, s), 8.97 (1H, s), 8.25 (1H, s), 7.43 (1Н, dd, J=3.6 Гц, 2.4 Гц), 6.80 (1Н, dd, J=3.6 Гц, 2.0 Гц), 4.31-4.37 (1Н, m), 3.15 (1Н, dd, J=17.2 Гц, 8.4 Гц), 2.99 (1Н, dd, J=17.2 Гц, 3.6 Гц), 2.60-2.66 (1Н, m), 1.98-2.05 (1H, m), 1.59-1.78 (4Н, m), 1.29-1.34 (3Н, m).

m/z=332[M+1]⁺.

Пример 28: 3-циклопентил-3-[3-(гидроксиметил)-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиpимидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]пропионитрил

Стадия А: [1-(4-метоксибензил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-5-ил]метанол

К раствору этил 1-(4-метоксибензил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-5-формиата (300 мг, 0,60 ммоль, 1,0 экв., получен на стадии D Примера 24) в сухом тетрагидрофуране (5 мл) добавляли порциями алюмогидрид лития (50 мг, 1,32 ммоль, 2,2 экв.) в защитной атмосфере азота и с использованием ледяной бани. Данную реакционную жидкость перемешивали в течение 3 ч при комнатной температуре. При охлаждении ледяной бани добавляли воду (0,05 мл), и затем 1 М раствор NaOH (0,05 мл) и воду (0,15 мл). Осадок отфильтровывали с использованием диатомита, и осадок на фильтре промывали этилацетатом. К фильтрату добавляли насыщенный солевой раствор, и полученную смесь экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения (250 мг, выход: 90%) в виде желтой маслянистой жидкости.

¹Н ЯМР (CDCl₃) δ: 8.87 (1Н, s), 8.18 (1Н, s), 7.47 (1Н, d, J=3.6 Гц), 7.20 (2Н, d,J=8.4 Гц), 6.91 (1Н, d,J=3.6 Гц), 6.87 (2Н, d, J=8.4 Гц), 5.70 (2Н, s), 5.47 (2Н, s), 4.74-4.88 (2Н, brs), 3.78 (3Н, s), 3.55 (2Н, t, J=8.4 Гц), 0.93 (2Н, t, J=8.4 Гц), -0.05 (9Н, s).

m/z=466[M+1]⁺.

Стадия В: [4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиpимидин-4-ил)-1H-пиразол-3-ил]метанол

К [1-(4-метоксибензил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-5-ил]метанолу (250 мг, 0,537 ммоль, 1,0 экв.) в смешанном растворителе ацетонитрил (1,5 мл)/вода (1,5 мл) добавляли гексанитратоцерат (IV) аммония (883 мг, 1,61 ммоль, 3,0 экв.) при перемешивании в ледяной бане. Данную реакционную жидкость перемешивали в течение 7 ч при 0°С, разбавляли солевым раствором и этилацетатом, и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом указанного в заголовке соединения (41 мг, выход: 22%).

m/z=346[М+1]⁺.

Стадия С: 3-циклопентил-3-[3-(гидроксиметил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]пропионитрил

К раствору [4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-ил]метанола (40 мг, 0,12 ммоль, 1,0 экв.) и 3-циклопентилакрилонитрила (35 мг, 0,29 ммоль, 2,5 экв., получен на стадии А Примера 1) в ацетонитриле добавляли 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ен (35 мг, 0,23 ммоль, 2,0 экв.) при комнатной температуре. Данную реакционную жидкость перемешивали в течение 5 ч при комнатной температуре, затем нагревали до 60°С и перемешивали в течение ночи. Реакционную жидкость охлаждали до комнатной температуры, затем разбавляли солевым раствором и этилацетатом, и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом указанного в заголовке соединения (13 мг, выход: 24%).

¹Н ЯМР (CDCl₃) δ: 8.86 (1Н, s), 8.24 (1Н, s), 7.42 (1H, d, J=3.6 Гц), 7.10-7.19 (1H, brs), 6.77 (1Н, d, J=3.6 Гц), 5.69 (2Н, s), 4.80 (2Н, s), 4.20-4.28 (1Н, m), 3.55 (2Н, t, J=8.4 Гц), 3.11 (1Н, dd, J=17.2 Гц, 8.0 Гц), 2.95 (1Н, dd, J=17.2 Гц, 4.0 Гц), 2.61-2.69 (1Н, m), 1.93-2.02 (1Н, m), 1.58-1.79 (4Н, m), 1.28-1.33 (3Н, m), 0.93 (2Н, t, J=8.4 Гц), -0.05 (9Н, s).

m/z=467[M+1]⁺.

Стадия D: 3-циклопентил-3-[3-(гидроксиметил)-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиpимидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]пропионитрил

3-Циклопентил-3-[3-(гидроксиметил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]пропионитрил (13 мг, 0,028 ммоль) растворяли в ацетонитриле (1 мл) и воде (1 мл), и добавляли LiВF₄ (54 мг, 0,58 ммоль) Данную смесь перемешивали в течение ночи при 90°С и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли раствор аммиака, и данную смесь перемешивали в течение 2 ч. Полученную смесь разбавляли солевым раствором и этилацетатом, и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом указанного в заголовке соединения (6 мг, выход: 64%) в виде желтоватого твердого вещества.

¹Н ЯМР (CDCl₃) δ: 10.26 (1Н, s), 8.85 (1Н, s), 8.25 (1H, s), 7.41 (1H, d, J=3.2 Гц), 6.75 (1Н, d, J=3.2 Гц), 4.81 (2Н, s), 4.21-4.27 (1Н, m), 3.11 (1Н, dd, J=17.2 Гц, 8.0 Гц), 2.96 (1Н, dd, J=17.2 Гц, 3.6 Гц), 2.61-2.67 (1H, m), 1.95-2.04 (1Н, m), 1.57-1.78 (4Н, m), 1.28-1.33 (3Н, m).

m/z=337[M+1]⁺.

Пример 29: 3-циклопентил-3-[3-(фторметил)-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил] пропионитрил

Стадия А: 4-[5-(фторметил)-1-(4-метоксибензил)-1H-пиразол-4-ил)-7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин

К раствору [1-(4-метоксибензил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-(1]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-5-ил]метанола (78 мг, 0,17 ммоль, 1,0 экв., получен на стадии А Примера 28) в сухом тетрагидрофуране (5 мл) добавляли диэтиламиносератрифторид (54 мг, 0,34 ммоль, 2,0 экв.) при перемешивании в ледяной бане. Данную реакционную жидкость перемешивали в течение 3 ч при комнатной температуре. Реакцию гасили путем добавления насыщенного раствора бикарбоната натрия, и полученную смесь экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом указанного в заголовке соединения.

¹Н ЯМР (CDCl₃) δ: 8.86 (1Н, s), 8.15 (1Н, s), 7.39 (1Н, d, J=3.6 Гц), 7.25 (2Н, d, J=8.4 Гц), 6.88 (2Н, d, J=8.4 Гц), 6.81 (1Н, d, J=3.6 Гц), 6.02 (2Н, d,J=48.4 Гц), 5.68 (2Н, s), 5.48 (2Н, s), 3.80 (3Н, s), 3.55 (2Н, t, J=8.4 Гц), 0.92 (2Н, t, J=8.4 Гц), -0.05 (9Н, s).

m/z=468[M+1]⁺.

Стадия B: 4-[3-(фторметил)-1H-пиразол-4-ил)-7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин

К 4-[5-(фторметил)-1-(4-метоксибензил)-1H-пиразол-4-ил)-7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидину (1,0 экв.) в смешанном растворителе ацетонитрил (1,5 мл)/вода (1,5 мл) добавляли гексанитратоцерат (IV) аммония (3,0 экв.) при перемешивании в ледяной бане. Данную реакционную жидкость перемешивали в течение 7 ч при 0°С, разбавляли солевым раствором и этилацетатом, и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом указанного в заголовке соединения.

m/z=348[M+1]⁺.

Стадия С: 3-циклопентил-3-[3-(фторметил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]пропионитрил

К раствору 4-[3-(фторметил)-1H-пиразол-4-ил)-7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидина (1,0 экв.) и 3-циклопентилакрилонитрила (2,5 экв., получен на стадии А Примера 1) в ацетонитриле добавляли 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ен (2,0 экв.) при комнатной температуре. Данную реакционную жидкость перемешивали в течение 5 ч при комнатной температуре, затем нагревали до 60°С и перемешивали в течение ночи. Реакционную жидкость охлаждали до комнатной температуры, затем разбавляли солевым раствором и этилацетатом, и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом указанного в заголовке соединения.

m/z=469[M+1]⁺.

Стадия D: 3-циклопентил-3-[3-(фторметил)-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]пропионитрил

3-Циклопентил-3-[3-(фторметил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-е]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]пропионитрил (1,0 экв.) растворяли в ацетонитриле (1 мл) и воде (1 мл), и добавляли LiBF₄ (10,0 экв.). Данную смесь перемешивали в течение ночи при 90°С и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли раствор аммиака, и данную смесь перемешивали в течение 2 ч. Добавляли солевой раствор и этилацетат, и полученную смесь экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом соединения Примера 29.

m/z=339[M+1]⁺.

Пример 30: 3-циклопентил-3-[3-(дифторметил)-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]пропионитрил

Стадия А: 1-(4-метоксибензил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-5-формальдегид

К раствору этил 1-(4-метоксибензил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-5-формиата (1,0 экв., получен на стадии D Примера 26) в сухом толуоле (5 мл) добавляли диизобутилалюминия гидрид (1,2 экв., 1 М в толуоле) в защитной атмосфере азота при -78°С. Данную реакционную жидкость перемешивали в течение 1 ч при -78°С. Реакцию гасили путем добавления насыщенного раствора тартрат калия-натрия, полученную смесь перемешивали в течение 15 мин, и затем экстрагировали диэтиловым эфиром. Объединенные органические фазы промывали водой и солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом указанного в заголовке соединения.

m/z=464[M+1]⁺.

Стадия В: 4-[5-(дифторметил)-1-(4-метоксибензил)-1H-пиразол-4-ил)-7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин

К раствору 1-(4-метоксибензил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-5-формальдегида (1,0 экв.) в сухом тетрагидрофуране (5 мл) добавляли реагент DAST (диэтиламиносератрифторид, 4,0 экв.) при перемешивании в ледяной бане. Данную реакционную жидкость перемешивали в течение 3 ч при комнатной температуре. Реакцию гасили путем добавления насыщенного раствора бикарбоната натрия, и полученную смесь экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом указанного в заголовке соединения.

m/z=486[M+1]⁺.

Стадия С: 4-[3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин

К 4-[5-(дифторметил)-1-(4-метоксибензил)-1H-пиразол-4-ил)-7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидину (1,0 экв.) в смешанном растворителе ацетонитрил (1,5 мл)/вода (1,5 мл) добавляли гексанитратоцерат (IV) аммония (3,0 экв.) при перемешивании в ледяной бане. Данную реакционную жидкость перемешивали в течение 7 ч при 0°С, разбавляли солевым раствором и этилацетатом, и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом указанного в заголовке соединения.

m/z=366[M+1]⁺.

Стадия D: 3-циклопентил-3-[3-(дифторметил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]пропионитрил

К раствору 4-[3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидина (1,0 экв.) и 3-циклопентилакрилонитрила (2,5 экв., получен на стадии А Примера 1) в ацетонитриле добавляли 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ен (2,0 экв.) при комнатной температуре. Данную реакционную жидкость перемешивали в течение 5 ч при комнатной температуре, затем нагревали до 60°С и перемешивали в течение ночи. Реакционную жидкость охлаждали до комнатной температуры, затем разбавляли солевым раствором и этилацетатом, и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом указанного в заголовке соединения.

m/z=487[M+1]⁺.

Стадия Е: 3-циклопентил-3-[3-(дифторметил)-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]пропионитрил

3-Циклопентил-3-[3-(дифторметил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]пропионитрил (1,0 экв.) растворяли в ацетонитриле (1 мл) и воде (1 мл), и добавляли LiBF₄ (10,0 экв.). Данную смесь перемешивали в течение ночи при 90°С и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли раствор аммиака, и данную смесь перемешивали в течение 2 ч. Добавляли солевой раствор и этилацетат, и полученную смесь экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом соединения Примера 30.

m/z=357[M+1]⁺.

Пример 31: 3-циклопентил-3-{3-[(метиламино)метил]-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил}пропионитрил

Стадия А: 1-[1-(4-метоксибензил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-5-ил]-N-метилметиламин

К раствору 1-(4-метоксибензил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-5-формальдегида (1,0 экв., получен на стадии А Примера 30), уксусной кислоты (1 экв.) и ацетальдегида (40%, 1,0 экв.) в 1,2-дихлорэтане добавляли цианоборгидрид натрия (2,0 экв.) при комнатной температуре. Ледяную баню удаляли, и данный раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакцию гасили путем добавления насыщенного раствора хлорида аммония. Полученную смесь экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом указанного в заголовке соединения.

m/z=479[M+1]⁺.

Стадия В: N-метил-1-[4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-ил]метиламин

К 1-[1-(4-метоксибензил)-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-5-ил]-N-метилметиламину (1,0 экв.) в смешанном растворителе ацетонитрил (1,5 мл)/вода (1,5 мл) добавляли гексанитратоцерат (IV) аммония (3,0 экв.) при перемешивании в ледяной бане. Данную реакционную жидкость перемешивали в течение 7 ч при 0°С, разбавляли солевым раствором и этилацетатом, и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом указанного в заголовке соединения.

m/z=359[М+1]⁺.

Стадия С: 3-циклопентил-3-{3-[(метиламино)метил]-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил}пропионитрил

К раствору N-метил-1-[4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-3-ил]метиламина (1,0 экв.) и 3-циклопентилакрилонитрила (2,5 экв., получен на стадии А Примера 1) в ацетонитриле добавляли 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ен (2,0 экв.) при комнатной температуре. Данную реакционную жидкость перемешивали в течение 5 ч при комнатной температуре, затем нагревали до 60°С и перемешивали в течение ночи. Реакционную жидкость охлаждали до комнатной температуры, затем разбавляли солевым раствором и этилацетатом, и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом указанного в заголовке соединения.

m/z=480[М+1]⁺.

Стадия D: 3-циклопентил-3-{3-[(метиламино)метил]-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил}пропионитрил

3-Циклопентил-3-{3-[(метиламино)метил]-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил}пропионитрил (1,0 экв.) растворяли в ацетонитриле (1 мл) и воде (1 мл), и добавляли LiВF₄ (1,0 экв.). Данную смесь перемешивали в течение ночи при 90°С и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли раствор аммиака, и данную смесь перемешивали в течение 2 ч. Добавляли солевой раствор и этилацетат, и полученную смесь экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом соединения Примера 31.

m/z=350[M+1]⁺.

Пример 32: 3-[3-амино-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-(3-гидроксилциклопентил)пропионитрил

Стадия А: 3-гидроксилциклопентанкарбоновая кислота

К раствору 3-карбонилциклопентанкарбоновой кислоты (3,7 г, 28,9 ммоль) в метаноле добавляли порциями боргидрид натрия (1,64 г, 43,2 ммоль) в ледяной бане. После завершения добавления реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре. После того, как реакция была завершена, реакционную жидкость гасили путем добавления 1 М раствора соляной кислоты. Удаляли растворитель с получением неочищенного продукта, который использовали как есть на следующей стадии.

Стадия В: этил 3-гидроксилциклопентанформиат

К раствору неочищенного продукта, полученного на стадии А, в этаноле добавляли концентрированную серную кислоту (1,5 мл), и данную смесь выдерживали в течение ночи при 90°С, пока продолжалась реакция. После того, как реакция была завершена, реакционную смесь гасили путем добавления насыщенного раствора бикарбоната натрия, и удаляли этанол. К данному концентрату добавляли воду, и полученную смесь экстрагировали этилацетатом и подвергали колоночной хроматографии (этилацетат/петролейный эфир = 1/5) с выходом рацемического этил 3-гидроксилциклопентанформиата (2,27 г, выход: 50%).

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 4.30-4.34 (m, 1Н), 4.10-4.18 (m, 2H), 2.82-2.90 (m, 1H), 1.60-2.20 (m, 7H), 1.20-1.29 (m, 3H).

Стадия С: этил 3-трет-бутилдиметилсилоксициклопентанформиат

К раствору 1H-имидазола (1,96 г, 28,73 ммоль) и трет-бутилхлордиметилсилана (2,17 г, 14,37 ммоль) в ДМФА добавляли этил 3-гидроксилциклопентанформиат (2,27 г, 14,37 ммоль). Данную смесь перемешивали в течение ночи, пока полностью не завершалось взаимодействие исходных веществ. Затем реакционную жидкость экстрагировали н-гексаном, и экстрагент три раза промывали водой и сушили над сульфатом натрия. Удаляли растворитель с получением рацемического этил 3-трет-бутилдиметилсилоксициклопентанформиата (3,92 г, 100%).

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 4.10-4.19 (m, 1Н), 4.05-4.09 (m, 2H), 2.64-2.68 (m, 1H), 2.00-2.07 (m, 2H), 1.62-1.86 (m, 4H), 1.19-1.23 (m, 3H), 0.82-0.87 (m, 10H), -0.02-0.06 (m, 6H).

Стадия D: 3-трет-бутилдиметилсилоксициклопентанформальдегид

При -78°С к раствору рацемического этил 3-трет-бутилдиметилсилоксициклопентанформиата (3,92 г) в н-гексане добавляли по каплям 1,2 М раствор диизобутилалюминия гидрида в толуоле, и полученный раствор выдерживали в течение 1 ч, пока продолжалась реакция. После того, как реакция была завершена, реакционную смесь гасили путем добавления метанола. Данную смесь промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия и сушили над сульфатом натрия. Полученную смесь подвергали колоночной хроматографии (этилацетат/петролейный эфир = 1:30) с выходом желаемого продукта (2,34 г, выход: 65%).

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 9.64(s, 1Н), 4.29-4.31 (m, 1H), 2.64-2.68 (m, 1H), 1.56-2.13(m, 6H), 0.82-0.87(m, 10H), 0.00-0.15(m, 6H).

Стадия E: 3-[3-(трет-бутилдиметилсилокси)циклопентил]акрилонитрил

К раствору трет-бутилата калия (246,8 мг, 2,2 ммоль) в тетрагидрофуране добавляли (цианометил)диэтиловый эфир фосфорной кислоты (426,0 мг, 2,4 ммоль) в ледяной бане. Ледяную баню удаляли, и полученный раствор перемешивали в течение 15 мин при комнатной температуре и снова охлаждали до 0°С. К раствору добавляли по каплям 3-трет-бутилдиметилсилоксициклопентанформальдегид (458,0 мг, 2,0 ммоль), и полученный реакционный раствор выдерживали в течение 1 ч при комнатной температуре, пока реакция не была завершена. Полученную смесь подвергали колоночной хроматографии (этилацетат/петролейный эфир = 1/60) с выходом желаемого продукта (435 мг, выход: 87%).

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 6.50-6.80 (m, 1H), 5.16-5.29 (m, 1H), 4.27-4.33 (m, 1H), 2.64-2.68 (m, 1H), 1.40-2.13 (m, 6H), 0.85-0.89 (m, 10H), 0.00-0.07 (m, 6H).

Стадия F: 3-[3-амино-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-(3-гидроксилциклопентил)пропионитрил

К раствору 3-[3-(трет-бутилдиметилсилокси)циклопентанил]акрилонитрила в ацетонитриле добавляли 4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-3-амино-1H-пиразол (полученный на стадии F Примера 1) и 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ен, и данную смесь перемешивали в течение 3 суток при комнатной температуре. После того, как взаимодействие исходных веществ полностью завершалось, полученную смесь концентрировали, подвергали колоночной хроматографии (этилацетат/н-гексан = 1/15) и затем обрабатывали 20% раствором трифторуксусной кислоты в дихлорметане в течение 3 ч. Полученную жидкость упаривали и обрабатывали избыточным количеством раствора этилендиамина в метаноле в течение ночи. Полученную смесь перемешивали со смесью этанол/вода/концентрированная соляная кислота (в объемном соотношении 10:4:3) в течение 3 ч для удаления оставшихся TBS-групп. Полученную смесь разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом соединения Примера 32.

m/z=338[M+1]⁺.

Пример 33: 3-[3-амино-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-(3-фторциклопентил)пропионитрил

Стадия А: этил 3-фторциклопентанформиат

К раствору этил 3-гидроксилциклопентанформиата (1,0 экв., получен на стадии В Примера 32) в сухом тетрагидрофуране (5 мл) добавляли диэтиламиносератрифторид (2,0 экв.) при перемешивании в ледяной бане. Данную реакционную жидкость перемешивали в течение 3 ч при комнатной температуре. Реакцию гасили путем добавления насыщенного раствора бикарбоната натрия, и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом указанного в заголовке соединения.

Стадия В: 3-[3-амино-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-(3-фторциклопентил)пропионитрил

Соединение Примера 33 получали в соответствии с методиками, использованными на стадиях D-F Примера 32, за тем исключением, что этил 3-трет-бутилдиметилсилоксициклопентанформиат заменяли этил 3-фторциклопентанформиатом.

m/z=340[M+1]⁺.

Пример 34: 3-[3-амино-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-(3,3-дифторциклопентил)пропионитрил

Стадия А: этил 3,3-дифторциклопентанформиат

К раствору этил 3-карбонилциклопентанформиата (1,0 экв.) в сухом тетрагидрофуране (5 мл) добавляли диэтиламиносератрифторид (4,0 экв.) при перемешивании в ледяной бане. Данную реакционную жидкость перемешивали в течение 3 ч при комнатной температуре. Реакцию гасили путем добавления насыщенного раствора бикарбоната натрия, и полученную смесь экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом указанного в заголовке соединения.

Стадия В: 3,3-дифторциклопентанформальдегид

К раствору этил 3,3-дифторциклопентанформиата (1,0 экв.) в сухом толуоле (5 мл) добавляли диизобутилалюминия гидрид (1,2 экв., 1 М в толуоле) в защитной атмосфере азота при -78°С. Данную реакционную жидкость перемешивали в течение 1 ч при -78°С. Реакцию гасили путем добавления насыщенного раствора тартрата калия-натрия, и полученную смесь перемешивали в течение 15 мин и затем экстрагировали диэтиловым эфиром. Объединенные органические фазы промывали водой и солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом указанного в заголовке соединения.

Стадия С: 3-(3,3-дифторциклопентил)акрилонитрил

К раствору 1,0 М трет-бутилата калия (1,2 экв.) в свежеперегнанном тетрагидрофуране добавляли по каплям раствор цианометилфосфорной кислоты диэтилового эфира (1,2 экв.) в тетрагидрофуране при перемешивании в ледяной бане. Ледяную баню удаляли, и реагенты перемешивали в течение 0,5 ч при комнатной температуре. Затем добавляли по каплям 3,3-дифторциклопентанформальдегид (1,0 экв.) при охлаждении ледяной бани. После завершения добавления реагенты перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, затем реакционную смесь гасили путем добавления воды, и два раза экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом 3-(3,3-дифторциклопентил)акрилонитрила.

Стадия D: 3-[3-амино-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-(3,3-дифторциклопентил)пропионитрил

Используя перемешивание при комнатной температуре, к раствору 4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-3-амино-1H-пиразола (1,0 экв., получен на стадии F Примера 1) в ацетонитриле добавляли 3-(3,3-дифторциклопентил)акрилонитрил (2,52 экв.), и затем добавляли DBU (2,1 экв.). Данную реакционную жидкость помещали в защитную атмосферу азота и перемешивали в течение ночи при 70°С. Реакционную жидкость охлаждали до комнатной температуры, затем реакцию гасили путем добавления воды, и полученную смесь экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток разделяли путем колоночной хроматографии на силикагелевой колонке с выходом указанного в заголовке соединения.

m/z=488[M+1]⁺.

Стадия Е: 3-[3-амино-4-(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-(3,3-дифторциклопентил)пропионитрил

Соединение Примера 34 получали путем удаления SEM в соответствии с методикой, использованной на стадии Н Примера 1, за тем исключением, что 3-[3-амино-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-циклопентилпропаннитрил заменяли 3-[3-амино-4-(7-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1H-пиразол-1-ил]-3-(3,3-дифторциклопентил)пропионитрилом.

m/z=358[M+1]⁺.

АНАЛИЗ БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ

1. Анализ ферментативной активности (ИК₅₀) соединений

Платформа для анализа киназной активности JAK2 (дикого типа и мутанта V617F) соответствовала использованной методике гомогенной флуоресценции с временным разрешением (HTRF), и активность исследуемых соединений тестировали с использованием данной платформы. Получали серию трехкратных последовательных разбавлений соединений, начиная с исходной концентрации 1 мМ, в 100% ДМСО (всего 11 разбавлений). Аликвоты объемом 4 мкл из каждого разбавления добавляли к 96 мкл реакционного буфера (50 мМ HEPES (N-2-гидроксиэтилпиперазин-N'-этансульфоновая кислота), рН 7,4, 10 мМ MgCl₂, 1 мМ EGTA (этиленгликольтетрауксусная кислота), 0,01% Твин-20, 0,005% ВAS, 2 мМ DTT (дитиотрейтол)), и перемешивали до гомогенного состояния. Затем 2,5 мкл полученной жидкости вносили в 384-луночный планшет (OptiPlate-384, полученный от PerkinElmer), и затем добавляли 5 мкл киназы JAK2 (полученной от Саrnа). Данную смесь перемешивали до гомогенного состояния путем центрифугирования. Затем для инициализации реакции добавляли 2,5 мкл смеси АТФ (конечная концентрация соответствовала значению К_m) и ТК-пептида (из набора HTRF^® KinEASE™-TK, полученного от Cisbio) (общий объем реакционной смеси составлял 10 мкл). Затем 384-луночный планшет помещали в термостат, и проводили реакцию в течение 120 мин при 23°С. Затем реакцию останавливали путем добавления 5 мкл меченого Еu³⁺-криптатом антитела против фосфотирозина (полученного от Cisbio) и 5 мкл Стрептавидин-ХL-665 (из набора HTRF^® KinEASE™-TK, полученного от Cisbio). Планшет инкубировали в термостате в течение 1 ч, и затем значения флуоресценции регистрировали на планшет-ридере Envision (полученном от PerkinElmer). Длина волны возбуждения составляла 320 нм, а флуоресцентное излучение регистрировали на длинах волн 665 нм и 620 нм. Ферментативную активность вычисляли как отношение значений флуоресцентного излучения, полученных на этих двух длинах волн. Ферментативную активность каждого соединения тестировали при 11 концентрациях, и значения ИК₅₀ (концентрации, обеспечивающей 50%-ое ингибирование) соединений вычисляли путем обработки полученных данных с использованием программы GraFit6.0 (Erithacus Software).

2. Анализ активности (ИК₅₀) соединений в отношении клеточной пролиферации

Клетки линии HEL лейкоза человека (полученные от Beijing Cuizhu Biotechnology LLC) инкубировали в культуральной среде 1640 с добавлением 10% FBS (фетальной телячьей сыворотки) и 1% P/S (пенициллина/стрептомицина) в термостате (37°С, 5% СО₂). В данном анализе соединений клетки HEL высевали в 96-луночный планшет (Corning) с плотностью 3000 клеток/195 мкл на лунку. Получали серию трехкратных последовательных разбавлений соединений, начиная с исходной концентрации 10 мМ (всего 11 разбавлений). Аликвоты объемом 4 мкл из каждого разбавления добавляли к 96 мкл культуральной среды 1640 с получением 25х разбавлений соединения. Затем 5 мкл полученной жидкости добавляли к 195 мкл клеточной культуральной среды (конечная концентрация в ДМСО составляла 0,1% об./об.). После обработки в течение 72 ч добавляли 35 мкл реагента CellTiter-Blue^® (полученного от Promega). Флуоресцентные сигналы регистрировали с помощью Flex Station3 (Molecular Devices) в соответствии с протоколами, приведенными в инструкции. Назначения соединений, ингибирующие клеточную пролиферацию, вычисляли с использованием программы GraphPad Prism 5,0.

Ниже приведены результаты анализа биологической активности соединений, синтез которых описан в данной заявке.

1. Ингибирующая активность (ИК₅₀) соединений в отношение дикого типа (WT) и мутантного типа (V617F) киназы JAK2

2. Активность некоторых соединений в отношении ингибирования пролиферации клеток линии HEL лимфомы человека (JAK2^V617F) (ИК₅₀)

Из данных, приведенных в таблицах, следует, что ферментативная и цитологическая ингибирующая активность соединений, описанных в настоящей заявке в разделе Примеры, сравнима с ферментативной и цитологической активностью руксолитиниба.

3. Анализ эффективности с использованием мышиной модели подкожного ксенотрансплантата опухоли

Использовали 5-6-недельных самок "голых" мышей линии Balb/c, имеющих SPF-статус (свободные от специфических патогенов). Каждой мыши в правый бок подкожно инъецировали 0,1 мл суспензии клеток Ba/F3-JAK2V617F в бессывороточной культурой среде (содержащей 1×107 клеток, 50% MatriGel). Когда средний объем опухоли достигал приблизительно 500 мм³, мышей, несущих опухоль, умерщвляли. Опухолевые ткани асептически извлекали и разрезали на небольшие кусочки, которые подкожно имплантировали "голым" мышам Balb/c в оба бока. Когда средний объем опухоли достигал приблизительно 100 мм³, всем мышам присваивали порядковые номера, и измеряли размеры их опухолей и массу тела, соответственно. Данных мышей распределяли случайным образом на группы, начиная с мышей с маленькой по объему опухолью и кончая животными с большой по объему опухолью, и каждую группу животных корректировали таким образом, чтобы значения средней массы животных во всех группах находились на одном уровне. Для тестирования использовали следующие пять групп: группу негативного контроля, группу позитивного контроля, группу, которой вводили низкую дозу, группу, которой вводили среднюю дозу, и группу, которой вводили высокую дозу, при этом в каждую группу входило пять мышей. Введение начинали в день распределения на группы, введение выполняли два раза в сутки в течение 14 суток. В период введения объемы опухолей и массы тела измеряли два раза в неделю. В конце эксперимента мышей умерщвляли, и выделяли и взвешивали селезенку.

В ходе эксперимента измеряли максимальный продольный диаметр (L) и максимальный поперечный диаметр в вертикальном направлении (W) опухоли, и вычисляли объем опухоли (V) в соответствии с формулой V (мм³)=LxW²/2. Степень ингибирования роста опухоли вычисляли в соответствии с формулой TGI (%)=100% × (1- (T_t-T₀)/(V_t-V₀)), где T_t представляет собой среднее значение объема опухоли, измеренное в указанный момент времени в группе, получающей лечение; Т₀ представляет собой среднее значение объема опухоли, измеренное сразу после распределения в группе, получающей лечение; V_t представляет собой среднее значение объема опухоли, измеренное в указанный момент времени в контрольной группе; V₀ представляет собой среднее значение объема опухоли, измеренное сразу после распределения в контрольной группе.

Полученные данные приведены в следующей таблице.

Из данных, приведенных в таблице, следует, что гидрохлорид соединения Примера 5, in vivo ингибирующее действие которого на опухоль тестировали в животной модели с использованием мышей, несущих Ba/F3-JAK2V617F-опухоль, оказывает дозо-зависимое ингибирующее действие на рост Ba/F3-JAK2V617F-опухоли и его супрессирующее действие на опухоль является весьма значительным. После перорального введения гидрохлорида соединения Примера 5 в дозе 100 мг/кг два раза в сутки в течение 14 суток степень ингибирования роста опухоли (TGI) достигала 85,8%, тогда как позитивный контроль руксолитиниб (100 мг/кг) в эквивалентных условиях показывал степень ингибирования роста опухоли (TGI) только 64,5%. Гидрохлорид соединения Примера 5 в дозе 50 мг/кг также оказывал значительное супрессирующее действие на опухоль, и значение TGI достигало 68,4%, что сравнимо с супрессирующим действием на опухоль позитивного контроля руксолитиниба (100 мг/кг). Это означает, что гидрохлорид соединения Примера 5 оказывает весьма значительное супрессирующее действие на опухоль и значительно превосходит в этом руксолитиниб.

Фармакокинетический анализ

Фармакокинетический анализ, выполненный на взрослых самцах/самках SD-крыс

Самцы/самки SD-крыс были получены из Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd.; руксолитиниба фосфат получали самостоятельно. Крыс распределяли на группы, по три крысы на группу, и каждому животному перорально вводили суспензию тестируемого образца (5 мг/кг или 15 мг/кг) путем однократного внутрижелудочный введения. Перед экспериментом животных не кормили в течение ночи, период голодания начинался за 10 ч до введения и заканчивался через 4 ч после введения. Забор крови для анализа проводили через 0,25 ч, 0,5 ч, 1 ч, 2 ч, 4 ч, 6 ч, 8 ч и 24 ч после введения. После того как животным давали наркоз изофлураном с использованием наркозного аппарата для небольших животных, из венозного сплетения (fundus venous plexus) отбирали 0,3 мл цельной крови, которую помещали в пробирку, содержащую в качестве антикоагулянта гепарин. Данную пробу центрифугировали (4000 об/мин) в течение 5 мин при 4°С, и плазму переносили в центрифужную пробирку, которую хранили при -80°С до начала анализа. Тестируемый образец соединения, содержащийся в плазме, экстрагировали с использованием методики преципитации белков, и жидкий экстракт анализировали путем ЖХ-МС/МС.

Примечание: b. данные получены из фармакологического обзора, опубликованного FDA (U.S. Food & Drug Administration).

Примечание: а. данные получены в настоящем исследовании; b. данные получены из фармакологического обзора, опубликованного FDA (U.S. Food & Drug Administration).

Из полученных фармакокинетических данных следует, что в эквивалентных дозах соединение Примера 1 и соединение Примера 7 имеют значения AUC и С_mах намного выше, чем соответствующие значения руксолитиниба, и их фармакокинетические свойства значительно превосходят фармакокинетические свойства руксолитиниба.

Здоровые взрослые самки SD-крыс были получены из Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd. Крыс распределяли на две группы, по три крысы на группу, и каждому животному перорально вводили суспензию тестируемого образца (30 мг/кг) путем однократного внутрижелудочный введения. Перед экспериментом животных не кормили в течение ночи, период голодания начинался за 10 ч до введения и заканчивался через 4 ч после введения. Забор крови для анализа проводили через 0,25 ч, 0,5 ч, 1 ч, 2 ч, 4 ч, 6 ч, 8 ч и 24 ч после введения. После того как животным давали наркоз изофлураном с использованием наркозного аппарата для небольших животных, из венозного сплетения (fundus venous plexus) отбирали 0,4 мл цельной крови, которую помещали в пробирку, содержащую в качестве антикоагулянта гепарин. Данную пробу центрифугировали (4200 об/мин) в течение 5 мин при 4°С, и плазму переносили в центрифужную пробирку, которую хранили при -80°С до начала анализа. Тестируемый образец соединения, содержащийся в плазме, экстрагировали с использованием методики преципитации белков, и жидкий экстракт анализировали путем ЖХ-МС/МС.

Примечание: а. данные получены из фармакологического обзора, опубликованного FDA (U.S. Food & Drug Administration).

Из фармакокинетических данных, полученных на крысах (30 мг/кг перорально), следует, что фармакокинетические характеристики свободного основания и гидрохлорида соединения Примера 5 превосходят фармакокинетические характеристики руксолитиниба.

Фармакокинетический анализ, выполненный на взрослых собаках породы бигль

В данном исследовании использовали четыре здоровых взрослых собаках породы бигль, полученных из Beijing Marshall Biotechnology Co., Ltd.. Данное исследование проводили два раза: первый раз животным (двум самцам и двум самкам) вводили дозу 5 мг/кг путем однократной внутривенной инъекции; во второй раз той же группе животных (двум самцам и двум самкам) через неделю вводили дозу 10 мг/кг путем однократно внутрижел уд очного введения. Перед экспериментом животных, которым назначали внутрижелудочное введение, не кормили в течение ночи, период голодания начинался за 10 ч до введения и заканчивался через 4 ч после введения. Группе животных, которым назначали внутривенное введение, предоставляли свободный доступ к корму. В группе внутривенного введения забор крови для анализа проводили через 0,083 ч, 0,25 ч, 0,5 ч, 1 ч, 2 ч, 4 ч, 6 ч, 8 ч и 24 ч после введения. В группе внутрижелудочного введения забор крови для анализа проводили через 0,25 ч, 0,5 ч, 1 ч, 2 ч, 4 ч, 6 ч, 8 ч и 24 ч после введения. После того как животным давали легкий наркоз изофлураном, из орбитального венозного сплетения отбирали 0,4 мл цельной крови в стеклянную пробирку для сбора крови, и затем кровь помещали в пробирку, содержащую в качестве антикоагулянта гепарин. Данную пробу центрифугировали (4200 об/мин) в течение 5 мин при 4°С, и плазму переносили в центрифужную пробирку, которую хранили при -80°С до начала анализа. Тестируемый образец соединения, содержащийся в плазме, экстрагировали с использованием методики преципитации белков, и жидкий экстракт анализировали путем ЖХ-МС/МС.

Примечание: а. данные получены из фармакологического обзора, опубликованного FDA (U.S. Food & Drug Administration).

Из фармакокинетических данных, полученных на собаках (10 мг/кг перорально, 5 мг/кг внутривенно), следует, что значение AUC соединения Примера 5 при внутривенном введении сравнимо с соответствующим значением позитивного контроля руксолитиниба, но биодоступность соединения Примера 5 при пероральном введении намного превосходит биодоступность позитивного контроля руксолитиниба (114% vs 57%).

1. Соединение, представленное формулой (I), его стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль

где

каждый из R₁ и R₂ независимо выбран из группы, состоящей из Н, галогена, циано, С_1-8алкила, -NR₇R₈, -NH-С_1-6алкилен-NR₉R₁₀, -NHCO-C_1-6алкилен-NR₉R₁₀, -NH-С_1-6алкилен-СО-NR₉R₁₀, -NHCO-С_1-6алкилен-СОО-С_1-6алкила, -NH-С_3-6циклоалкилен-CO-NR₉R₁₀, -NH-С_2-6алкенилен-CONR₉R₁₀, -NH-C_1-6алкилен-циано, -NHCO-NH-R₁₁, -CONR₁₂R₁₃ и -CONH-C_1-6алкилен-NR₁₂R₁₃, при этом С_1-8алкил необязательно замещен гидроксилом, галогеном, -NH₂, -NH(С_1-6алкилом), -N(С_1-6алкилом)₂, при условии, что R₁ и R₂ одновременно не являются Н;

каждый из R₇ и R₈ независимо выбран из группы, состоящей из Н, С_1-6алкила, C_1-6алкилкарбонила и C_1-6алкилсульфонила; или R₇ и R₈ вместе с атомом N, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членный гетероциклил, и данный 5- или 6-членный гетероциклил содержит атом N в качестве гетероатома и необязательно замещен оксо;

каждый из R₉ и R₁₀ независимо выбран из группы, состоящей из Н, гидроксила и C_1-6алкила; или R₉ и R₁₀ вместе с атомом N, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членный гетероциклил с 1-2 гетероатомами, выбранными из N и О;

R₁₁ выбран из группы, состоящей из 5-членного гетероарила, содержащего два атома N и атом О в качестве гетероатомов и необязательно имеющего в качестве заместителя С_1-4алкил;

каждый из R₁₂ и R₁₃ независимо выбран из группы, состоящей из Н и C_1-6алкила;

R₃ выбран из группы, состоящей из Н и галогена;

R₄ выбран из группы, состоящей из циано и -CONH₂; и

каждый из R₅ и R₆ независимо выбран из группы, состоящей из Н, гидроксила и галогена.

2. Соединение, представленное формулой (I), по п. 1, его стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль, в котором

каждый из R₁ и R₂ независимо выбран из группы, состоящей из Н, галогена, циано, C_1-6алкила, -NR₇R₈, -NH-C_1-4алкилен-NR₉R₁₀, -NHCO-С_1-4алкилен-NR₉R₁₀, -NH-C_1-4алкилен-CO-NR₉R₁₀, -NHCO-С_1-4алкилен-СОО-С_1-4алкила, -NH-С_3-5циклоалкилен-CO-NR₉R₁₀, -NH-C_2-4алкенилен-CONR₉R₁₀, -NH-С_1-4алкилен-циано, -NHCO-NH-R₁₁, -CONR₁₂R₁₃ и -CONH-C_1-4алкилен-NR₁₂R₁₃, при этом C_1-6алкил необязательно замещен гидроксилом, галогеном, -NH₂, -NH(C_1-6алкилом) или -N(C_1-6алкилом)₂, при условии, что R₁ и R₂ одновременно не являются Н;

каждый из R₇ и R₈ независимо выбран из группы, состоящей из Н, С_1-4алкила, С_1-4алкилкарбонила и С_1-4алкилсульфонила; или R₇ и R₈ вместе с атомом N, к которому они присоединены, образуют гетероциклил, выбранный из группы, состоящей из , , , , и ;

каждый из R₉ и R₁₀ независимо выбран из группы, состоящей из Н, гидроксила и C_1-4алкила; или R₉ и R₁₀ вместе с атомом N, к которому они присоединены, образуют пирролидинил, пиперидинил, морфолинил, пиперазинил или оксазолидинил;

R₁₁ представляет собой гетероарил, выбранный из группы, состоящей из и ; и

каждый из R₁₂ и R₁₃ независимо выбран из группы, состоящей из Н и С_1-4алкила.

3. Соединение, представленное формулой (I), по п. 2, его стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль, в котором

каждый из R₁ и R₂ независимо выбран из группы, состоящей из Н, F, Cl, Br, I, циано, метила, этила, пропила, бутила, -NR₇R₈, -NH-метилен-NR₉R₁₀, -NH-этилен-NR₉R₁₀, -NH-пропилен-NR₉R₁₀, -NHCO-метилен-NR₉R₁₀, -NHCO-этилен-NR₉R₁₀, -NHCO-пропилен-NR₉R₁₀, -NH-метилен-CO-NR₉R₁₀, -NH-этилен-CO-NR₉R₁₀, -NH-пропилен-CO-NR₉R₁₀, -NHCO-метилен-СОО-метила, -NHCO-метилен-СОО-этила, -NHCO-метилен-СОО-пропила, -NHCO-этилен-СОО-метила, -NHCO-этилен-СОО-этила, -NHCO-этилен-СОО-пропила, -NHCO-пропилен-СОО-метила, -NHCO-пропилен-СОО-этила, -NHCO-пропилен-СОО-пропила, -NH-циклопропилен-CO-NR₉R₁₀, -NH-циклобутилен-СО-NR₉R₁₀, -NH-циклопентилен-CO-NR₉R₁₀, -NH-винилен-CONR₉R₁₀, -NH-пропенилен-CONR₉R₁₀, -NH-аллилен-CONR₉R₁₀, -NH-метилен-циано, -NH-этилен-циано, -NH-пропилен-циано, -NHCO-NH-R₁₁, -CONR₁₂R₁₃, -CONH-метилен-NR₁₂R₁₃, -CONH-этилен-NR₁₂R₁₃ и -CONH-пропилен-NR₁₂R₁₃, при этом метил, этил, пропил или бутил необязательно замещены одной или более группой, выбранной из группы, состоящей из гидроксила, F, Cl, Br, I, метил-NH-, этил-NH-, пропил-NH-, (диметил)-N-, (диэтил)-N-, (дипропил)-N- и (метил)(этил)-N-, при условии, что R₁ и R₂ одновременно не являются Н;

каждый из R₇ и R₈ независимо выбран из группы, состоящей из Н, метила, этила, пропила, ацетила, пропионила, метилсульфонила, этилсульфонила и пропилсульфонила; или R₇ и R₈ вместе с атомом N, к которому они присоединены, образуют гетероциклил, выбранный из группы, состоящей из , и ;

каждый из R₉ и R₁₀ независимо выбран из группы, состоящей из Н, гидроксила, метила, этила и пропила; или R₉ и R₁₀ вместе с атомом N, к которому они присоединены, образуют пиперидинил, морфолинил или пиперазинил;

R₁₁ представляет собой гетероарил, выбранный из группы, состоящей из и ; и

каждый из R₁₂ и R₁₃ независимо выбран из группы, состоящей из Н, метила, этила и пропила.

4. Соединение, представленное формулой (I), по п. 3, его стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль, в котором

каждый из R₁ и R₂ независимо выбран из группы, состоящей из Н, Br, циано, метила, -NR₇R₈, -NH-этилен-NR₉R₁₀, -NHCO-метилен-NR₉R₁₀, -NH-метилен-CO-NR₉R₁₀, -NH-этилен-CO-NR₉R₁₀, -NHCO-этилен-СОО-этила, -NH-циклобутилен-CO-NR₉R₁₀, -NH-пропенилен-CONR₉R₁₀, -NH-этилен-циано, -NHCO-NH-R₁₁, -CONR₁₂R₁₃ и -CONH-этилен-NR₁₂R₁₃, при этом метил необязательно замещен гидроксилом, F или метил-NH-, при условии, что R₁ и R₂ одновременно не являются Н;

каждый из R₇ и R₈ независимо выбран из группы, состоящей из Н, этила, ацетила и метилсульфонила; или R₇ и R₈ вместе с атомом N, к которому они присоединены, образуют ;

каждый из R₉ и R₁₀ независимо выбран из группы, состоящей из Н и гидроксила; или R₉ и R₁₀ вместе с атомом N, к которому они присоединены, образуют морфолинил;

R₁₁ представляет собой ; и

каждый из R₁₂ и R₁₃ независимо выбран из группы, состоящей из Н и метила.

5. Соединение, представленное формулой (I), по п. 4, его стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль, в котором

R₁ выбран из группы, состоящей из Н, Br, циано, метила, -NR₇R₈, -NH-этилен-NR₉R₁₀, -NHCO-метилен-NR₉R₁₀, -NH-метилен-CO-NR₉R₁₀, -NH-этилен-CO-NR₉R₁₀, -NHCO-этилен-СОО-этила, -NH-циклобутилен-CO-NR₉R₁₀, -NH-пропенилен-CONR₉R₁₀, -NH-этилен-циано, -NHCO-NH-R₁₁, -CONR₁₂R₁₃ и -CONH-этилен-NR₁₂R₁₃, при этом метил необязательно замещен гидроксилом, F или метил-NH-;

каждый из R₇ и R₈ независимо выбран из группы, состоящей из Н, этила, ацетила и метилсульфонила; или R₇ и R₈ вместе с атомом N, к которому они присоединены, образуют

каждый из R₉ и R₁₀ независимо выбран из группы, состоящей из Н и гидроксила; или R₉ и R₁₀ вместе с атомом N, к которому они присоединены, образуют морфолинил;

R₁₁ представляет собой ;

каждый из R₁₂ и R₁₃ независимо выбран из группы, состоящей из Н и метила; и

R₂ выбран из группы, состоящей из Н и -NH₂, при условии, что R₁ и R₂ одновременно не являются Н.

6. Соединение, представленное формулой (I), по п. 1, его стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль, в котором

R₁ выбран из группы, состоящей из Н, Br, -CN, -NH₂, -NHC₂H₅, -N(C₂H₅)₂, -NHC(=O)CH₃, -NHSO₂CH₃, -NHCH₂CH₂-морфолинила, -NHC(=O)СН₂-морфолинила, -NHCH₂CH₂C(=О)-морфолинила, -NHCH₂C(=O)-морфолинила, -NHC(=O)CH₂CH₂C(=O)OC₂H₅, сукцинимидо, -NH-циклобутил-С(=O)-морфолинила, -NHCH₂CH=CHC(=O)NHOH, -NHCH₂CH₂C(=O)NHOH, -NHCH₂CH₂CN, -NHC(=O)NH-(5-метил-1,2,4-оксадиазолил), -C(=O)NH₂, -C(=O)NHCH₃, -C(=O)NHCH₂CH₂NH₂, -CH₂OH, -CH₂F, -CHF₂ и -CH₂NHCH₃; и

R₂ выбран из группы, состоящей из Н и -NH₂;

при условии, что R₁ и R₂ одновременно не являются Н.

7. Соединение, представленное формулой (I), по п. 1, его стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль, в котором R₃ выбран из группы, состоящей из Н и Br.

8. Соединение, представленное формулой (I), по п. 1, его стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль, в котором каждый из R₅ и R₆ независимо выбран из группы, состоящей из Н, гидроксила и F.

9. Соединение, представленное формулой (I), по п. 1, его стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль, которое выбрано из группы, состоящей из

10. Соединение, представленное формулой (I), по п. 1, его стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль, которое представляет собой соединение формулы (Ia)

где каждый из R₇ и R₈ независимо выбран из группы, состоящей из Н, C_1-6алкила, C_1-6алкилкарбонила и C_1-6алкилсульфонила.

11. Соединение, представленное формулой (Ia), по п. 10, его стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль, в котором каждый из R₇ и R₈ независимо выбран из группы, состоящей из Н, метила, этила, пропила, бутила, пентила, гексила, ацетила, пропионила, бутирила, валерила, гексаноила, метилсульфонила, этилсульфонила, пропилсульфонила, бутилсульфонила, пентилсульфонила и гексилсульфонила.

12. Соединение, представленное формулой (Ia), по п. 10, его стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль, в котором R₇ представляет собой Н и R₈ выбран из группы, состоящей из метила, этила, пропила, бутила, пентила, гексила, ацетила, пропионила, бутирила, валерила, гексаноила, метилсульфонила, этилсульфонила, пропилсульфонила, бутилсульфонила, пентилсульфонила и гексилсульфонила.

13. Соединение по п. 10, его стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль, которое выбрано из группы, состоящей из

14. Соединение по п. 10, его стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль, которое выбрано из группы, состоящей из

15. Соединение по п. 10, его стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль, которое выбрано из группы, состоящей из

16. Соединение по любому из пп. 1-15, его стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль для применения в лечении опухоли, вызванной активностью Янус-киназы.

17. Фармацевтическая композиция для лечения опухолевого заболевания, вызванного активностью Янус-киназы, содержащая терапевтически эффективное количество соединения по любому из пп. 1-15, его стереоизомер или фармацевтически приемлемую соль и один или более фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент.

18. Применение соединения по любому из пп. 1-15, его стереоизомера или его фармацевтически приемлемой соли или фармацевтической композиции по п. 17 для получения лекарства для лечения опухоли.

19. Способ лечения опухоли, включающий введение пациенту терапевтически эффективного количества соединения по любому из пп. 1-15, его стереоизомера или фармацевтически приемлемой соли или фармацевтической композиции по п. 17.