Способ приготовления гистологических препаратов для выявления внутриклеточных липидных включений в тканях человека и животных


G01N1/30 - Исследование или анализ материалов путем определения их химических или физических свойств (разделение материалов вообще B01D,B01J,B03,B07; аппараты, полностью охватываемые каким-либо подклассом, см. в соответствующем подклассе, например B01L; измерение или испытание с помощью ферментов или микроорганизмов C12M,C12Q; исследование грунта основания на стройплощадке E02D 1/00;мониторинговые или диагностические устройства для оборудования для обработки выхлопных газов F01N 11/00; определение изменений влажности при компенсационных измерениях других переменных величин или для коррекции показаний приборов при изменении влажности, см. G01D или соответствующий подкласс, относящийся к измеряемой величине; испытание

Владельцы патента RU 2705594:

Федеральное государственное бюджетное научное учреждение Федеральный исследовательский центр "Институт цитологии и генетики Сибирского отделения Российской академии наук" (ИЦиГ СО РАН) (RU)

Изобретение относится к области медицины, конкретно к гистологии и патологической анатомии. Раскрыт способ приготовления гистологических препаратов для выявления внутриклеточных липидных включений в тканях человека и животных, включающий забор образцов исследуемой ткани, фиксацию образцов ткани в 10%-ном растворе формалина, отмывку от фиксатора, обезвоживание, приготовление гистологических срезов, нанесение срезов на предметные стекла с последующей окраской срезов в растворе Судана черного «В». При этом уплотненные в фиксаторе образцы исследуемой ткани нарезают на полоски толщиной не более 2 мм, обезвоживают в трех порциях ацетона при температуре 0-4°С в течение 20 минут в каждой порции, далее из последней порции ацетона полоски ткани переносят в расплавленный парафин, содержащий 5% пчелиного воска, с последующим изготовлением парафиновых блоков, приготовлением гистологических срезов и нанесением их на предметные стекла, далее проводят депарафинизацию срезов на стеклах в О-ксилоле и спирте убывающей концентрации, затем срезы окрашивают раствором Судана черного «В» в этиленгликоле в концентрации 15,3 ммоль/л, далее срезы переносят в 85%-ный водный раствор этиленгликоля и выдерживают в течение 2-3 минут. Изобретение обеспечивает упрощение и удешевление известного способа, а также повышение качества гистологических препаратов. 3 з.п. ф-лы, 2 ил., 2 пр.

 

Изобретение относится к области медицины, конкретно к цитологии, гистологии и патологической анатомии и может быть использовано при приготовлении гистологических препаратов для выявления внутриклеточных липидных включений в тканях человека и животных.

Важность выявления клеточных липидных включений в патоморфологии как человека, так и экспериментальных животных сложно переоценить. Это связано с тем, что атеросклероз, гипертоническая болезнь и ишемическая болезнь сердца (ИБС) составляют печальную триаду XXI века. К этой триаде с полным правом можно добавить и тесно связанные с атеросклерозом неврологические заболевания - инсульт и сосудистую деменцию, учитывая их высокую социальную значимость и инвалидизирующие последствия [1]. Атеросклероз-ассоциированные цереброваскулярные заболевания (ЦВЗ) - вторая по частоте (20%) причина деменции в США и Европе после болезни Альцгеймера (БА) [2]. Отмечается существенный вклад ЦВЗ в патогенез ряда нейродегенеративных заболеваний: около 50% лиц, страдающих БА, имеют признаки ЦВЗ, выявляемые при патоморфологических исследованиях [3, 4, 5]. Липиды содержатся во всех клетках человека и животных [6]. Будучи одним из основных компонентов биологических мембран клеток, липиды влияют на проницаемость их мембран и активность многих клеточных ферментов, а также участвуют в передаче нервного импульса, в мышечном сокращении, в создании межклеточных контактов и иммунохимических процессах. Липиды образуют энергетический резерв организма человека и животных, участвуют в создании водоотталкивающих и термоизоляционных покровов живых существ и защищают различные органы от механических воздействий.

При определенных условиях (например, в полевых условиях) для целей окраски липидов невозможно использование замороженных срезов, приготовленных в криостате, или с использованием замораживающего микротома (учитывая громоздкость и сложность транспортировки этого оборудования, а также его дороговизну). В этом случае на помощь приходит применение альтернативных методик окраски тканей на липидные включения. Для этого удобно использовать окраски на парафиновых срезах, изготовленных из парафиновых блоков, фиксацию, проводку и заливку для которых можно выполнить в любых условиях, включая походные.

Актуальность предлагаемого способа для биологии, цитологии, гистологии и патологической анатомии обусловлена ролью фосфолипидов и цереброзидов в организме в норме и патологии.

Известен способ приготовления гистологических препаратов для выявления внутриклеточных липидных включений в животных тканях [7], включающий взятие образцов исследуемой ткани, фиксацию последних в течение 1-5 недель в 40% растворе формальдегида, содержащем соли кобальта и кальция, последующую обработку образцов 3% раствором бихромата калия (K2Cr2O7) в течение 2 суток, обезвоживание образцов тканей в ацетоне комнатной температуры, погружение их в расплавленный парафин. Из полученных парафиновых блоков на микротоме изготавливались срезы и наносились на предметные стекла. В дальнейшем они обрабатывались по следующей схеме [8]: срезы переносились в 70% этиловый спирт, окрашивались в течение 30 мин. при комнатной температуре в насыщенном растворе Судана черного «В» в 70% этиловом спирте, избыток красителя удалялся ополаскиванием в 70% этиловом спирте, срезы промывались водопроводной водой, при необходимости, докрашивались квасцовым кармином Майера (в течение 16 часов), промывались водой, заключались в водную глицерин-желатиновую среду для хранения.

Недостатками известного способа являются длительность процесса фиксации образцов и окрашивания срезов, использование достаточно токсичных солей хрома и применение этанола.

Наиболее близким к заявляемому способу-прототипу является способ приготовления гистологических препаратов для выявления внутриклеточных липидных включений в животных тканях [9], включающий взятие образцов исследуемой ткани, фиксацию последних в 10% растворе формалина, приготовление, без заливки в парафин, из них срезов на замораживающем микротоме (или в криостате) и наклеивание последних на предметные стекла. В дальнейшем срезы, наклеенные на стекла (гистологический препарат), обрабатывались по следующей схеме: срезы окрашивались в растворе Судана черного «В» в пропиленгликоле в течение 5-7 мин. Краситель приготовлялся растворением 0,7 г. Судана черного «В» в 100 мл чистого пропиленгликоля, при нагревании до 100° в течение нескольких минут. Далее гистологические препараты переносились в 85% раствор пропиленгликоля на 2 мин., затем переносились в 50% раствор пропиленгликоля на 2 мин., далее промывались в теплой воде в течение 1 мин., при необходимости, докрашивались гематоксилином Майера в течение 4 мин., повторно промывались водой и заключались в водную глицерин-желатиновую среду.

Недостатками прототипа являются сложность и длительность способа, необходимость наличия специальных условий (криостат, или замораживающий микротом), и применение не всегда доступного пропиленгликоля, а также использование водной глицерин-желатиновой среды, требующей довольно трудоемкой окантовки покровного стекла валиком из специальной мастики для создания так называемой «влажной камеры», не удобной для длительного архивного хранения полученных гистологических препаратов.

Задачей изобретения является упрощение и удешевление известного способа, обеспечение возможности выполнения способа в полевых условиях, а также исключение применения водной глицерин-желатиновой среды для заключения окрашенных гистологических препаратов и их архивного хранения.

Технический результат: упрощение и удешевление известного способа, повышение качества гистологических препаратов.

Поставленная задача достигается предлагаемым способом, заключающимся в следующем.

После забора биоматериала, образцы изучаемой ткани заливают фиксирующим раствором (фиксатором) на основе 10% раствора формалина, содержащего соли нитрата кобальта и ацетата кальция, и выдерживают в течение 13-15 дней в темноте при температуре 10-15°С. Уплотненные в фиксаторе образцы изучаемой ткани при помощи бритвы нарезают на тонкие полоски, толщиной не более 2 мм, обсушивают при помощи фильтровальной бумаги, избегая нажима на исследуемую ткань. Полученные полоски ткани, без предварительной промывки в воде, быстро обезвоживают в трех порциях холодного чистого ацетона (при температуре 0-4°С), по 20 минут в каждой порции, при постоянном перемешивании. Из последней порции ацетона образцы изучаемой ткани переносят сразу же в расплавленный парафин, содержащий 5% пчелиного воска. Далее по стандартной методике выполняют изготовление парафиновых блоков, приготовление из них гистологических срезов толщиной от 7 до 15 микрометров на санном или ротационном микротоме, фиксацию расправленных парафиновых срезов на предметных стеклах, предварительно покрытых для лучшей адгезии тонким слоем яичного белка и высушенных в термостате.

После депарафинизации срезов в О-ксилоле, стекла со срезами «проводят» по водным растворам изопропилового спирта убывающей концентрации (от 100% до 70%, с шагом в 10%), споласкивают в двух порциях дистиллированной воды, а затем выдерживают в двух порциях 100% этиленгликоля. После этого приступают к процессу окраски срезов в растворе Судана черного «В» в этиленгликоле (концентрация раствора 15,3 ммоль/л) в течение 7-9 минут при комнатной температуре.

Далее стекла со срезами, без промывки, переносят в 85% водный раствор этиленгликоля и выдерживают в течение 2-3 минут. Затем стекла со срезами промывают в трех сменах дистиллированной воды в течение 3-4 минут, после чего заключают срезы в 16% водный раствор поливинилового спирта под покровные стекла для изучения препаратов под микроскопом и длительного архивного хранения полученных гистологических препаратов.

Определяющими отличиями предлагаемого способа от прототипа, являются:

- образцы исследуемой ткани обезвоживают в трех порциях ацетона при температуре 0-4°С, по 20 минут в каждой порции, при постоянном перемешивании, что позволяет упростить способ за счет исключения стадий их предварительной промывки в проточной воде и уплотнения в спиртах возрастающей концентрации (путем проводки материала по батарее, состоящей из растворов этилового спирта возрастающей концентрации: 50%, 60%, 70%, 80%, 96%, абсолютный (100% этанол) 1-й, абсолютный 2-й);

- для заливки образцов используют расплавленный парафин, содержащий 5% пчелиного воска, что позволяет улучшить пластические свойства парафина и получить более тонкие срезы на санном или ротационном микротоме;

- для окраски срезов используют раствор Судана черного «В» в этиленгликоле в концентрации 15,3 ммоль/л, который является более дешевым и легко доступным, обладающим лучшей проникающей способностью в ткани, чем раствор в пропиленгликоле, используемый в прототипе;

- после депарафинизации в О-ксилоле, стекла с наклеенными на них срезами (гистологические препараты) «проводят» по водным растворам изопропилового спирта убывающей концентрации, что позволяет упростить и удешевить способ за счет большей доступности и дешевизны изопропилового спирта, по сравнению с этиловым спиртом, используемым в прототипе;

- для целей архивного хранения, окрашенные Суданом черным «В», гистологические препараты помещают в 16% водный раствор поливинилового спирта, что позволяет исключить применение водной глицерин-желатиновой среды, требующей довольно трудоемкой окантовки покровного стекла валиком из специальной мастики для создания так называемой «влажной камеры», не удобной для длительного архивного хранения полученных гистологических препаратов.

Предлагаемый способ является более простым, чем способ-прототип, поскольку в нем отсутствуют стадии отмывки образцов тканей в проточной воде и уплотнение их в спиртах возрастающей концентрации, приготовление срезов на замораживающем микротоме или в криостате.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами конкретного выполнения.

Пример 1.

Образцы ткани печени мыши заливают фиксатором на основе 10% раствора формалина, содержащего соли нитрата кобальта и ацетата кальция, и выдерживают в течение 15 дней в темноте при температуре 10°С. Водный раствор фиксатора содержит в своем составе кальция ацетат безводный в концентрации 158,06 ммоль/л, кобальта нитрат безводный в концентрации 54,66 ммоль/л, растворенные при комнатной температуре в 10% (1:10) водном растворе свежего продажного формалина.

Уплотненные в фиксаторе образцы изучаемой ткани при помощи бритвы нарезают на тонкие полоски, толщиной не более 2 мм. Полученные полоски обсушивают при помощи фильтровальной бумаги, затем быстро обезвоживают в трех порциях холодного чистого ацетона (при температуре 0-4°С), по 20 минут в каждой порции, при постоянном перемешивании. Из последней порции ацетона образцы ткани переносят в расплавленный парафин, содержащий 5% пчелиного воска. Далее, выполняют изготовление парафиновых блоков, приготовление из них гистологических срезов толщиной от 7 до 15 микрометров на санном микротоме, фиксацию расправленных парафиновых срезов на предметных стеклах, предварительно покрытых для лучшей адгезии тонким слоем яичного белка и высушенных в термостате.

После депарафинизации в О-ксилоле, стекла со срезами «проводят» по водным растворам изопропилового спирта убывающей концентрации (от 100% до 70%, с шагом в 10%), споласкивают в двух порциях дистиллированной воды, а затем выдерживают в двух порциях 100% этиленгликоля.

Готовят красящий раствор путем растворения 0,7 г Судана черного «В» в 100 мл безводного этиленгликоля при нагревании на водяной бане (до 100°С) и постоянном помешивании в течение 3-5 минут, затем полученный раствор охлаждают до комнатной температуры и фильтруют под вакуумом. После этого приступают к процессу окраски срезов в растворе Судана черного «В» в этиленгликоле (в концентрации 15,3 ммоль/л) в течение 7 минут при комнатной температуре.

Далее срезы на стеклах переносят в 85% водный раствор этиленгликоля и выдерживают в течение 2-х минут. Затем срезы на стеклах промывают в трех сменах дистиллированной воды в течение 3-х минут, после чего заключают в 16% водный раствор поливинилового спирта под покровные стекла для изучения препаратов под микроскопом и длительного архивного хранения полученных гистологических препаратов.

Липиды в гепатоцитах и эритроцитах печени мыши окрашиваются в черный или темно-коричневый цвет, что зависит от содержания в них липидов.

В результате получают гистологические препараты высокого качества с сохраненной гистоструктурой, позволяющей быстро и достоверно провести исследование.

На фиг. 1 представлена фотография среза печени мыши (увеличение ×250). На фотографии видно значительное накопление липидов, жировой гепатоз с очаговой вакуольной, гидропической дистрофией гепатоцитов. На фоне неравномерно выраженного капиллярно-венозного полнокровия с эритростазами неравномерное расширение перисинусоидальных пространств Диссе.

Пример 2.

Образцы ткани печени мыши заливают фиксатором на основе 10% раствора формалина, содержащего соли нитрата кобальта и ацетата кальция, и выдерживают в течение 13 дней в темноте при температуре 15°С. Водный раствор фиксатора содержит в своем составе кальция ацетат безводный в концентрации 158,06 ммоль/л, кобальта нитрат безводный в концентрации 54,66 ммоль/л, растворенные при комнатной температуре в 10% (1:10) водном растворе свежего продажного формалина.

Уплотненные в фиксаторе образцы изучаемой ткани при помощи бритвы нарезают на тонкие полоски, толщиной не более 2 мм. Полученные полоски обсушивают при помощи фильтровальной бумаги, затем быстро обезвоживают в трех порциях ацетона (при температуре 0-4°С), по 20 минут в каждой порции, при постоянном перемешивании. Из последней порции ацетона образцы ткани переносят в расплавленный парафин, содержащий 5% пчелиного воска. Далее, по стандартной методике, выполняют изготовление парафиновых блоков, приготовление из них гистологических срезов толщиной от 7 до 15 микрометров на санном или ротационном микротоме, фиксацию расправленных парафиновых срезов на предметных стеклах, предварительно покрытых для лучшей адгезии тонким слоем яичного белка и высушенных в термостате.

После депарафинизации в О-ксилоле, стекла со срезами (гистологические препараты) «проводят» по водным растворам изопропилового спирта убывающей концентрации (от 100% до 70%, с шагом в 10%), споласкивают в двух порциях дистиллированной воды, а затем выдерживают в двух порциях 100% этиленгликоля.

После этого приступают к процессу окраски срезов в растворе Судана черного «В» в этиленгликоле (в концентрации 15,3 ммоль/л) в течение 9 минут при комнатной температуре.

Далее срезы на стеклах переносят в 85% водный раствор этиленгликоля и выдерживают в течение 3-х минут. Затем срезы на стеклах промывают в трех сменах дистиллированной воды в течение 4-х минут, после чего заключают гистологические препараты в 16% водный раствор поливинилового спирта под покровные стекла для изучения препаратов под микроскопом и длительного архивного хранения полученных гистологических препаратов.

На фиг. 2 представлена фотография среза печени мыши (увеличение ×400). Отмечается умеренно выраженное накопление липидов, очаговая вакуольная дистрофия гепатоцитов.

В результате выполнения предлагаемого способа были получены хорошие результаты окрашивания структур исследуемой ткани, содержащих липиды. Это позволяет рекомендовать данный способ для приготовления гистологических препаратов исследуемых тканей для выявления внутриклеточных липидных включений в полевых условиях при отсутствии криостата или замораживающего микротома.

Литература.

1. Яхно Н.Н., Захаров В.В., Деменции М.: Мед-пресс-информ. 2011. 272 с.

2. Fratiglioni L, Launer LJ, Andersen K, et al. Incidence of dementia and major subtypes in Europe: a collaborative study of population-based cohorts. Neurologic diseases in the elderly research group. Neurology 2000; 54(11 Suppl 5):S10-5.

3. Левин O.C., Трусова H.A. Сосудистые факторы риска болезни Альцгеймера // Журнал неврологии и психиатрии им. Корсакова. 2013. Т. 113. №7. С. 3-12.

4. Schneider J.A. High blood pressure and microinfarcts: a link between vascular risk factors, dementia, and clinical Alzheimer's disease. J. Am Geriatr Soc. 2009 Nov; 57(11):2146-7. doi: 10.1111/j.1532-5415.2009.02521.x.

5. Schneider J.A., Bennett D.A. Where vascular meets neurodegenerative disease. Stroke 2010; 41(10 Suppl): S144-6.

6. Fahy E. et al. A comprehensive classification system for lipids // J. Lipid. Res. 2005. V. 46, №5. P. 839-861.

7. McManus J.F.A. Granules of the human polymorphonuclear leucocyte // Nature. - 1945. - T. 156. - №.3954. - C. 173.

8. McManus J.F.A. The demonstration of certain fatty substances in paraffin sections // The Journal of pathology and bacteriology. - 1946. - T. 58. - №.1. - C. 93-95.

9. Chiffelle T.L., Putt F.A. Propylene and ethylene glycol as solvents for Sudan IV and Sudan black В // Stain technology. - 1951. - T. 26. - №.1. - C. 51-56.

1. Способ приготовления гистологических препаратов для выявления внутриклеточных липидных включений в тканях человека и животных, включающий забор образцов исследуемой ткани, фиксацию образцов ткани в 10%-ном растворе формалина, отмывку от фиксатора, обезвоживание, приготовление гистологических срезов, нанесение срезов на предметные стекла с последующей окраской срезов в растворе Судана черного «В», отличающийся тем, что уплотненные в фиксаторе образцы исследуемой ткани нарезают на полоски толщиной не более 2 мм, обезвоживают в трех порциях ацетона при температуре 0-4°С в течение 20 минут в каждой порции, далее из последней порции ацетона полоски ткани переносят в расплавленный парафин, содержащий 5% пчелиного воска, с последующим изготовлением парафиновых блоков, приготовлением гистологических срезов и нанесением их на предметные стекла, далее проводят депарафинизацию срезов на стеклах в О-ксилоле и спирте убывающей концентрации, затем срезы окрашивают раствором Судана черного «В» в этиленгликоле в концентрации 15,3 ммоль/л, далее срезы переносят в 85%-ный водный раствор этиленгликоля и выдерживают в течение 2-3 минут.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что фиксацию образцов ткани осуществляют в 10%-ном водном растворе формалина, содержащего соли нитрата кобальта в концентрации 54,66 ммоль/л и ацетата кальция в концентрации 158,06 ммоль/л.

3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что после депарафинизации в О-ксилоле, стекла со срезами перед окраской «проводят» по водным растворам изопропилового спирта убывающей концентрации - от 100% до 70%, с шагом в 10%, споласкивают в двух порциях дистиллированной воды, а затем выдерживают в двух порциях 100% этиленгликоля.

4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что для целей архивного хранения окрашенные Суданом черным «В» гистологические препараты помещают в 16%-ный водный раствор поливинилового спирта.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к медицине, а именно к хирургии, и может быть использовано для диагностики стафилококковой абдоминальной хирургической инфекции. Проводят исследование биологических жидкостей.

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для скрининга рака молочной железы и предрасположенности к нему. Проводят маммографию и УЗИ.

Изобретение относится к области медицины, а именно к способам выявления опухолевых клеток, находящихся в стадии эпителиально-мезенхимального перехода в асцитических жидкостях.

Группа изобретений относится к ускоренному и высокочувствительному способу обнаружения бактериальных патогенов. Раскрыт способ обнаружения бактерий, включающий обеспечение одной или более чем одной суспензии, причем каждая содержит по меньшей мере один вид меченых тестируемых бактериофагов, которые специфично связываются с видом бактерий, подлежащим обнаружению; добавление образца, подлежащего проверке на наличие по меньшей мере одного вида бактерий; фильтрацию полученной реакционной смеси; обнаружение комплексов бактерии-бактериофаги в концентрате; обнаружение несвязанных бактериофагов в фильтрате; обработку полученных сигналов, сгенерированных в результате обнаружения, и вывод результатов обнаружения пользователю.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для мониторинга возможного стойкого отклонения от нормы энергетического метаболизма эритроцитов и/или нарушения структуры их мембран.

Изобретение относится к области медицины, а именно к андрологии. Способ прогнозирования высокой степени фрагментации ДНК сперматозоидов и невынашивания беременности в паре включает исследование эякулята на содержание триклозана, при обнаружении концентрации триклозана ≥0,11 нг/мл методом газовой хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием устанавливается высокий риск фрагментации ДНК сперматозоидов и невынашивания беременности в паре.

Изобретение относится к медицине и ветеринарии и может быть использовано для идентификации видового состава нематод методом MALDI TOFF Biotyper. Для этого проводят механическую ультразвуковую гомогенизацию головного конца нематод, который предварительно обрабатывают антибиотиками широкого спектра действия.

Изобретение может быть использовано при контроле включений и выделений, присутствующих в металлических материалах. Для извлечения частиц соединения металла из металлического материала путем травления металлического материала в электролитическом растворе используют электролитический раствор на основе неводного растворителя, содержащий реактив, который образует содержащий металл M' комплекс.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к грызуну для экспрессии гуманизированного белка IL-4Rα, где геном грызуна содержит замену геномного фрагмента гена IL-4Rα грызуна по эндогенному локусу IL-4Rα грызуна последовательностью нуклеиновой кислоты человеческого гена IL-4Rα с образованием гуманизированного гена IL-4Rα, к эмбриональной стволовой клетке и эмбриону вышеуказанного грызуна, а также к способу его получения.
Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и позволяет прогнозировать выживаемость пациентов с аденокарциномой легкого. Способ прогнозирования выживаемости у пациентов с аденокарциномой легкого, несущей мутации в гене KRAS, включает забор фрагментов опухолевой ткани у пациента с аденокарциномой легкого после хирургического удаления опухолевой ткани, из которых часть используют для выявления наличия мутаций в гене KRAS, а часть - для выделения РНК, в случае обнаружения мутаций в гене KRAS из образцов РНК готовят библиотеки кДНК для секвенирования и секвенируют, из данных секвенирования определяют нормализованную экспрессию генов константных участков тяжелых цепей иммуноглобулинов IGHG1, IGHG2, IGHG3, IGHG4, IGHA1, IGHA2, рассчитывают коэффициент К по формуле К=IGHG1/IGH, где IGH=IGHG1+IGHG2+IGHG3+IGHG4+IGHA1+IGHA2, и при значении К>0,14 прогноз считают благоприятным, в противном случае – не благоприятным.

Группа изобретений относится к технологии изготовления волоконно-оптических матриц для биочипов и может быть использовано в аналитической химии, молекулярной биологии, биотехнологии, фармакологии, медицине.

Изобретение относится медицине и предназначено для выбора средств антиретровирусной терапии при коинфекции вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ) и вирусом гепатита С (ВГС) с учетом угрозы прогрессирования фиброза печени.

Изобретение относится к электронным портативным контрольно-измерительным устройствам. Портативное контрольно-измерительное устройство содержит электро- и теплоизолирующую оболочку с обращенной наружу поверхностью, по меньшей мере с одним электрическим компонентом контрольно-измерительного устройства с тепловой контактной частью, расположенной внутри электроизолирующей оболочки, и по меньшей мере с одним тепловым каналом, выполненным из жесткого термопластика с добавками теплопроводных и электроизолирующих микрочастиц или наночастиц.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для диагностики стрептококковой абдоминальной хирургической инфекции. Для этого проводят исследование биологических жидкостей у хирургических больных с перитонитом одновременно в сыворотке крови и перитонеальной жидкости определяют концентрации продуктов деградации фибриногена, лактоферрина и общего белка и вычисляют диагностический коэффициент ДК по разработанной формуле.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для диагностики грамотрицательной абдоминальной хирургической инфекции. Для этого проводят исследование биологических жидкостей, у хирургических больных с послеоперационным перитонитом одновременно в сыворотке крови и перитонеальной жидкости определяют концентрации лизоцима, лактоферрина и общего белка и вычисляют диагностический коэффициент ДК по разработанной формуле.
Изобретение относится к области медицины, в частности к детской хирургии и неонатологии, и может быть использовано для ранней диагностики язвенно-некротического энтероколита у новорожденных.

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии и профессиональным заболеваниям, и может использоваться для прогнозирования возникновения гипертрофии миокарда левого желудочка.

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии и профессиональным заболеваниям, и может использоваться для прогнозирования возникновения атеросклеротических изменений сосудов у работников химических производств.
Изобретение относится к области медицины, в частности к пульмонологии. Изобретение представляет собой способ ранней диагностики хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ), включающий оценку мукоцилиарного клиренса в фазу ремиссии патологического процесса и регистрацию стойкого снижения показателей клиренса на 1/3 от нижней границы нормальных значений при наличии факторов риска, отличающийся тем, что дополнительно динамически оценивают адгезионность бронхиального содержимого и при нормальном ее уровне осуществляют морфологическое исследование бронхиального эпителия и диагностируют данную патологию.

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к способу определения антагонистической активности штаммов бактерий в отношении Pseudomonas aeruginosa, включающему культивирование Pseudomonas aeruginosa и тестируемых штаммов на питательных средах, отличающемуся тем, что выявление антагонистической активности тестируемых штаммов осуществляют путем оценки продукции оксифеназинов P.
Изобретение относится к области медицины, а именно к офтальмологии. Для прогнозирования тяжелого течения увеальной меланомы проводят патоморфологическое исследование микроокружения опухоли энуклеированного глаза.

Изобретение относится к области медицины, конкретно к гистологии и патологической анатомии. Раскрыт способ приготовления гистологических препаратов для выявления внутриклеточных липидных включений в тканях человека и животных, включающий забор образцов исследуемой ткани, фиксацию образцов ткани в 10-ном растворе формалина, отмывку от фиксатора, обезвоживание, приготовление гистологических срезов, нанесение срезов на предметные стекла с последующей окраской срезов в растворе Судана черного «В». При этом уплотненные в фиксаторе образцы исследуемой ткани нарезают на полоски толщиной не более 2 мм, обезвоживают в трех порциях ацетона при температуре 0-4°С в течение 20 минут в каждой порции, далее из последней порции ацетона полоски ткани переносят в расплавленный парафин, содержащий 5 пчелиного воска, с последующим изготовлением парафиновых блоков, приготовлением гистологических срезов и нанесением их на предметные стекла, далее проводят депарафинизацию срезов на стеклах в О-ксилоле и спирте убывающей концентрации, затем срезы окрашивают раствором Судана черного «В» в этиленгликоле в концентрации 15,3 ммольл, далее срезы переносят в 85-ный водный раствор этиленгликоля и выдерживают в течение 2-3 минут. Изобретение обеспечивает упрощение и удешевление известного способа, а также повышение качества гистологических препаратов. 3 з.п. ф-лы, 2 ил., 2 пр.

Наверх