Способ расщепления коллагенсодержащих тканей

 

O П И С А Н И Е (п)922634

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советски к

Социапистическик

Респубпии (61) Дополнительное к авт. спид-ву(22) Заявлено 27,03.80 (21) 289980 I /28-13 и с присоединением заявки М (23) Приоритет(5! ) М. Кд .

G 01 и 33/48

Гооударсикниый комитет

СССР (53) УДК 612.13 (088.8) Опубликовано 23. 04. 82, Бюллетень М 15

Дата опубликования описания 23. 04. 82 по делам изабретеиий и открытий

С, В. Андреев, Я. Д. Мамедов, P. Г. Сафа

О. А. Нариманбвков, P. Г. Гашимов и А . В (72) Авторы изобретения (71) Заявитель (54) СПОСОЬ РАСЩЕПЛЕНИЯ КОЛЯАГЕНОСОДЕРЖАЦ ИХ

ТКАНЕЙ!

Изобретение относится к медициríå, а именно биохимии, для ферментативного расщепления белковосодержащих биологических тканей.

Известен способ расщепления коллагеносодержащих тканей путем обра5 ботки ткани раствором ферментов tl ) .

Однако этот. способ сложен, так как связан с необходимостью предварительной обработки исходных образцов коллагеносодержащих тканей буферными растворами. Кроме того, в известном способе используют дорогостоящие ферменты животного происхождения, технология производства которых сложна и малопроизводительна, а сами они легко подвержены действию таких факторов как температу ра, химические реагенты, облучение, при этом в зависимости от природы коллагеносодержащих тканей, обязательным условием является избирательный подбор соответствующего фермента.

Цель изобретения - упрощение способа.

Эта цель достигается тем, что, согласно способу расщепления колла геносодержащих тканей-путем обработки ткани раствором ферментов, обработку ведут 0,6-2,54-ным раствором террилитина при соотношении его с субстратом 1:1О, температуре

34-36 С в течение 18-24 ч.

Способ осуществляют следующим образом .

Образец коллагеносодержащей ткани помещают в водный раствор террилитина при соотношении субстрат-фермент 1: 10. Проводят совместную их инкубацию в термостате при и =25-36 С о в течение 15-24 ч до расщепления обрабатываемой ткани. В процессе ферментативного расщепления коллагеносодержащих тканей протеолизу подвергаются межмолекулярные фрагменты тканей с отщеплением коротких пептидов. Глубину процесса протеолиза

922634

Составитель С. Михалева

Редактор А . Козориз Техред С Мигунова Корректор " Пожо

Заказ 2572/58 Тираж 883 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул.Проектная, 4 контролируют проведением ИК-спектрального анализа надосадочной жидкости и по характеристическим полосам поглощения пептидов в интервалах

1400 см, 1600 см "и 2800 см " судят о степени ферментативного расщепления тканей.

Пример 1. Протеолиз коммерческого коллагена осуществляют при условиях. температура протеолиза о

25-36 С объем раствора 5 мл, количество коллагена 205 мг, количество террилитина 30 мг, продолжительность 18 ч„

Пример 2. Протеолиз хряща (ухо кролика), содержащего в качестве основного компонента белковой массы эластин, осуществляют при условиях: температура протеолиза 2536 С, объем раствора 5 мл, количество ткани (после обезжиривания)

180 мг, количество террилитина 30 мг, продолжительность 12 ч.

Пример 3. Протеолиз хряща (гиалиновый хрящ) с содержанием в качестве основного компонента белко, вой массы коллагена осуществляют при следующих условиях: температура протеолиза - 25-36 С, объем раствора 5 мл, количество ткани 190 мг, количество террилитина 30 мг, продолжительность 18 ч.

Пример 4. Протеолиз дермы кролика осуществляют при следующих условиях: температура протеолиза

25-36 С» объем раствора 5 мл, количество ткани 96 мг, количество террилитина 30 мг, продолжительность 24 ч.

Таким образом, предложенный способ экономичен . Он позволяет

1О упростить проведение ферментативного расщепления коллагеносодержащих тканей и расширить диапазон обрабатываемых тканей.

1$ формула изобретения

Способ расщепления коллагеносодержащих тканей путем обработки ткани раствором фермента, о т л и о чающий с я тем, что, с целью упрощения способа, обработку ведут

0,6-2,54-ным раствором террилитина при соотношении его с субстратом

1: l0, температуре 3ч-36 С в течение в 18-24 ч. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Коллагенопластика в медицине.

Под ред. В, В. Кованова и И. А. Сыченикова. М., "Медицина", с. 303, 1978 °