Способ консервации аллотканей

 

Союз Советских

Социалистических

Республик

< >969220 (5l) М. Кл.з

А Ol N 1/02

Гююударствеиимй кюмитет лю делам изююретеиий и юткрытий (53) УДК 615.36 (088.8) (72) Авторы изобретения

М. В. Зайкова и В. В. Жаров

И

ТЕХНИЧЕСКАЯ и нстиИфВЛИОТЕКА (71) Заявитель

Ижевский государственный медицинский (54) СПОСОБ КОНСЕРВАЦИИ АЛЛОТКАНЕЙ

Изобретение относится к медицине, в частности к трансплантологии, и может быть применено для консервации аллотканей с последущим применением консервированной ткани как пластического материала, при хирургических вмешательствах.

Известен способ консервации аллотканей путем помещения их в консервирующую среду (1).

Однако аллоткани консервированные известным способом обладают повышенной антигенной активностью.

Цель изобретения — уменьшение антигенной активности консервируемых аллотканей и увеличение срока их хранения.

Эта цель достигается тем, что в способе консервации аллотканей путем помещения их в консервирующую среду, аллоткань с консервантом помещают в однородное постоянное магнитное поле напряженностью

35 — 37 МТ при 8 — 12 С на весь срок консервации.

Способ осуществляют следующим образом.

Аллоткань, предназначенную для консервации, через 1 — 20 ч после смерти донора забирают и помещают в стерильный сосуд, наполненный консервирующим раствором, при 8 — !2 С. Сосуд с аллотканью помещают в однородное постоянное магнитное поле напряженностью 35 — 37 МТ и выдерживают до момента использования. Непосредственно перед операцией консервируемую аллоткань извлекают из сосуда и используют для пересадки.

Пример 1. Через 1 — 20 ч после смерти донора забирают любую из перечисленных выше видов аллотканей. Для консервации используют установку, снабженную соленоидом, внутри которого помещена камера консервации в виде полого цилиндра с внутренним диаметром 38 мм, длиной 450 мм, установленную на подставке в вертикальis ном положении. Включение в сеть переменного тока производят через понижающий трансформатор и выпрямитель с вмонтированным амперметром для регулировки напряженности постоянного магнитного поля внутри соленоида.

Для отведения тепла, образующегося при работе соленоида, и охлаждения камеры консервации (полого цилиндра), вокруг соленоида размещены латунные трубки с проточной водой (температура воды 6—

969220

8 С), камера консервации плотно закрывается с обоих торцов для уменьшения влияния окружающей среды.

В стерильный стеклянный сосуд помешают аллоткань, сосуд заполняют 0,23ным раствором тимола при 8 — 10 С и помещают в камеру консервации в постоянное магнитное поле напряженностью 35 — 37 МТ.

Для оценки качества консервации аллоткани проводились гистологические исследования в различные сроки консервации (1, 3, 7, 14, 30 дней и ежемесячно в течение года). Контролем служит консервированная в 0,2О/оном растворе тимола аллоткань с тем же сроком консервации без обработки аллоткани магнитным полем. При помещении аллотканей в постоянное магнитное поле признаки распада тканей (мукоидное и фибриноидное набухание, фрагментация ядер) не наблюдались при хранении аллотканей в течение 12 — 12,5 мес. В контрольной группе признаки распада консервируемой аллоткани наблюдались уже через 5 — 6 мес.

Если принять содержание ядер в клетках тканей в часы забора аллотканей перед консервацией за 100О/р, то в опытной группе через 12 — 12,5 мес. после консервации количество ядер составляло 79 — 85 /О, в зависимости от вида аллоткани. В контрольной группе такой процент содержания ядер в клетках выявлен уже к 4 — 6 мес. консервации.

Предлагаемый способ консервации аллотканей апробирован на группе больных (70 человек), в возрасте 5 — 75 лет, с диагнозами: проникающие ранения глаз — 20 чел), сенильная катаракта (после экстракции катаракты) — 30 чел., после антиглаукоматозных операций — 20 чел. Как пластический материал использованы аллосклера, твердая мозговая оболочка и склера мертворожденных плодов, амниотическая оболочка новорожденных.

При этом реакция тканей на перенесенную травму и пересадку аллоткани при использовании предлагаемого способа консервации держалась после экстракции катаракты в среднем 5, 8 дня, после аллопластики при прободных ранениях склеры в среднем 7,5 дня, после антиглаукоматозных операций 3,7 дня, отторжение трансплантатов, консервированных предлагаемым способом, не наблюдали.

Длительность пребывания больных в стационаре: после операции экстракции катаракты в среднем 9,7 дня, после прободных склеральных ранений в среднем 17,4 дня, после антиглаукоматозных операций в среднем 8,6 дня.

Пример 2. Больной H„67 лет, поступил в глазную клиническую больницу с диагнозом: сенильная зрелая катаракта правого глаза, незрелая катаракта левого глаза.

Проведена экстракапсулярная экстракция

Зо

35 катаракты на правом глазу с первичной аллосклеропластикой, без осложнений.

Способ консервации: в 0,2О/О-ном растворе тимола и постоянном магнитном поле напряженностью 35 — 37 МТ. Срок консервации пересаживаемой аллоткани 212 дней.

Реакция тканей на травму (локальная, перикорнеальная инъекция, легкий хемиз в области раны) держалась 5 дней. При выписке глаз спокоен. ОД = 0,03 + 10 ОД = 0,9.

В области раны сформировался гладкий, нежный, не втянутый рубец.

Для контроля использована группа больных численностью 60 человек 9 — 73 лет.

По диагнозам, при которых проводилась пересадка указанных выше аллотканей, больные распределялись следующим образом: при экстракции сенильной катаракты—

30 чел., при прободных склеральных ранениях глаз, первичная хирургическая обработка склеральных ран — 15 чел., при антиглаукоматозных операциях — 20 чел. Консервация аллотканей производилась в 0,2 /оном растворе тимола без внесения в постоянное магнитное поле. Срок консервации до

5 мес.

Получены следующие результаты. Реакция тканей на травму держалась после экстракции катаракты в среднем 9,0 дней (7 дней — 4; 8 дней — 5; 9 дней — 14;

10 дней — 3; 11 дней — 2; 12 дней — 2 глаза), после первичной хирургической обработки склеральных ран — в среднем 10,6 дня, после антиглаукоматозных операций—

6,2 дня.

Отторжение трансплантата наблюдалось в трех случаях (5,0 /o) в сроки 3 — 17 дней, с присоединением гнойной инфекции в ранние сроки отторжения (3 — 5 дней) (I сл) и без таковой, в поздние сроки (2 сл.), что указывает на наличие повышенной антигенной активности примененных аллотканей.

Длительность пребывания больных в стационаре после операции экстракции катаракты в среднем 14,3 дня, после прободных склеральных ранений — 23,8 дня, после антиглаукоматозных операций — 11,7 дня.

Послеоперационное лечение больных в опытной и контрольной группах идентично.

Сравнительные клинические испытания показали, что аллоткани, консервированные по предлагаемому способу, обладают сниженной антигенной активностью. Реакция тканей глаза на травму, пересадку аллоткани проходит быстрее в среднем в 1,5—

2 раза по сравнению с контрольной группой. (Результат достоверен: р = 0,02 после экстракции катаракты; р = 0,02 после первичной хирургической обработки склеральных ран; р = 0,05 — после антиглаукоматозных операций). Отторжение аллоткани в контроле (5О/z) и отсутствие

его в опытной группе.

Длительность пребывания больных в стационаре в опытной группе в среднем в 1,5—

969220

Формула изобретения

Составитель С. Малютина

Редактор И. Ковальчук Техред И. Верес Корректор Н. Король

Заказ 7376/2 Тираж 699 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

1 l 3035, Москва, Ж вЂ” 35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП «Патент», г. Ужгород, ул. Проектная, 4

2 раза меньше в сравнении с контрольной группой (P = 0,02). При этом продолжительность хранения аллотканей, консервированных по предлагаемому способу, по сравнению с известным увеличивается в два раза.

Пример 3. Через 1 — 20 ч после смерти донора выделяют любую из перечисленных выше видов аллотка ней. Ткань помещают в стерильный стеклянный тонкостенный сосуд при 8 — 10 С и помещают в описанную выше камеру консервации в постоянное маг- 10 нитное поле напряженностью 35 — 37 МТ.

Для оценки качества консервации аллотканей проводились гистологические исследования в различные сроки консервации (1, 3, 7, 10, 14, 30, 45, 60 дней).

Контролем служат консервированные в сухой стерильной посуде при 2 — 4 С аллоткани с тем же сроком консервации без обработки аллоткани магнитным полем.

При помещении аллотканей в постоянное магнитное поле признаки распада тканей 20 (мукоидное и фибриноидное набухание, фрагментация ядер) не наблюдались nph хранении аллотканей в течение 45 дней (ткань жизнеспособна). Лишь после 60 дней консервации появляются начальные признаки мукоидного набухания.

В контрольной группе начальные признаки распада консервируемой аллоткани появились уже на 10-ый день консервации (начальные признаки мукоидного набухания, фрагментация ядер), а на 14-ый день консервации — явления распада ткани явно выражены (мукоидное, умеренно-выраженное фибриноидное набухание, фрагментация ядер) .

Количество ядер в опытной группе через

45 дней консервации — 76 — 84в/в. В контрольной группе такой процент содержания ядер в консервируемой аллоткани наблюдали при 7-дневном сроке консервации. Аллоткань в момент взятия у донора содержала 100% ядер.

Предлагаемый способ консервации аллотканей был применен на группе больных, 50 чел, при операциях по поводу: экстракция сенильной катаракты — 20 чел., про, никающих ранений склеры — 15 чел., ан45 тиглаукоматозных операций — 15 чел.

При этом реакция тканей на перенесенную травму и пересадку аллоткани при использовании предлагаемого способа консервации держалась после экстракции катаракты в среднем 5,3 дня; после аллопластики при прободных ранениях склеры в среднем 7,1 дня; после антиглаукоматозных операций — в среднем 3,4 дня. Отторжение трансплантатов аллотканей, консервированных по предлагаемому способу, не наблюдали.

Длительность пребывания больных в стационаре после экстракции катаракты в среднем 9,3 дня, после прободных склеральных ранений — в среднем 17,0 дня, после антиглаукоматозных операций в среднем 8,1 дня.

Предлагаемый способ консервации аллотканей позволяет увеличить срок сохранения жизнеспособности консервированной аллоткани в 2 — 4 раза по сравнению с известным. При этом антигенная активность консервированного трансплантата значительно уменьшается (уменьшение сроков реакции, например, глаза на травму и пересадку трансплантата, отсутствие отторжений трансплантатов). Это позволит сократить в 1,5 — 2 раза сроки пребывания больных в стационаре.

При применении аллотканей, консервированных по предлагаемому способу, острота зрения, поле зрения и другие функциональные показатели не ниже, чем в опытной и контрольной группах.

Способ консервации аллотканей путем помещения их в консервирующую среду, отличающийся тем, что, с целью уменьшения антигенной активности консервируемых аллотканей и увеличения срока хранения их, аллоткань с консервантом помещают в однородное постоянное магнитное поле напряженностью 35 — 37 МТ при 8 — 12 С на весь срок консервации.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Бордюкова Г. Система реконструкции переднего отдела глаза, автореферат докт. диссерт. M., 1980, с. 7