Способ получения производных олеандомицина

 

СОЮЗ СойЕТСНИХ

СОЦИАЛИСтИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН

ыв С .07 Н 17/08

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ

К AATKHT JJ 8(>>)z Ц Ас

О-"

R0--. ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР ПО делАм изОБРетений и ОтнРытий (2 1 ) 2573251/2633653/23-04 . (22 ) 10. 07., 78

{23) 17:.01.78 (31 ) 765486 (32 ) 04.02.77. (33 ) США (46 ) 23. 05, 83. Бюл, М 19 (72) фрэнк Кристиан. Сциаволино (США) (71 ) Пфайзер ИНК (СЩА) (53) 547,457.07(088.8 ) (56) 1. Coreu .Е. t.,К1а С. U. Новый и высокоэффективный метод окисления.первичных и вторичных .спиртов до карбонильных соединений.-1.Amer. Chem.Soc, 1972. 9 . 7586. (54 )(57 ) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ

ОЛЕАНДОИИЦИНА общей формулы

М (СИу) о 4

„Я0„„1020004 А где R - атом водорода или ацетил;

R - метил -СН -CH>- или -СН О.1,Е Ф

А - алканоил, содержащий 2 или 3 атома углерода, отличающийся тем, что осуществляют взаимодействие соединений общей формулы П

1 rpe R и f4 имеют указанные значения, с 1 моль й-хлорсукцинимида и

1 моль диметилсульфида в смеси толуо-. yaaa ла и бензола при 0- (-25) С с последую- ф щим взаимодействием с 1 моль триэтил-. фф амина. 4Р

1020004

30

40

Изобретение относится к способам получения новых производных олеандомицина,. которые являются промежуточными соединениями для получения новых антибактериальных агентов полусинтетического олеандомицина.

Известен способ, основанный на реайции окисления гидроксила углевода (1).

Цель изобретения - получение новых полезных соединений, обладающих ценными фармакологическими свойствами, которые позволяют получить новые антибактериальные агенты и расширяю- щие арсенал средства воздействия на живой организм, достигается путем синтеза последних, Эта цель достигается способом полу чения производных олеандомицина об- 20 щей формулы где R - атом водорода или ацетил;

К4- метил, -СН.2-СН2-, или

-СН О-;

Ас - алканоил, содержащий 2 или 3 атома углерода, заключающимся в том, что соединение формулы с

На практике М-хлорсукцинимид сначала смешивают с диметилсульфидом и инертным по отношению к реакции растворителем примерно при ООС, Через

10-20 мин температуру полученной смеси устанавливают. 0- (-25) С и добавляют вещества формулы (П) при поддержании указанной температуры. По ис« течении 2-4 ч в реакцию добавляют тре тичный амин и убирают охлаждающую ванну °

Пример 1, 2-Ацетил-4-дезокси-4-оксоолеандомицин.

Диметилсульфид 337 мл добавляют к мутному раствору 467 мг й-хлорсукци нимида в 20 мп толуола и 6 мп бенэола, охлажденному. до -5oC и находящемуся в атмосФере азота. После перемешивания при 0 С в течение

20 мин смесь охлаждают до -25 С и добавляют 1,46 г 2- ацетилолеандомицина и 15 мл толуола. Перемешивание продолжают в течение 2 ч при

-20 С, с последующим добавлением

0,46 мл триэтиламина. Реакционную смесь поддерживают при -20 C в те-; о чение еще,5 мин. и затем нагревают до 0 С. Смесь переливают при перемешивании в 50 мл воды и 50 мл этилацетата. рН водной смеси устанавливают равным 9,5 добавлением водного раствора гидроокиси натрия.

Затем органический слой отделяют, сушат над сульфатом натрия и концентрируют в вакууме до белой пены (1,5 г,). Растирание в порошок с диэтиловым эфиром дает 865 мг сырого продукта, который дважды перекри3 сталлизовывают из хлористого метилена и диэтилового эфира и получают

212 мг чистого продукта (14,51), т,пл. -183-185,5 С.

Вычислено: С 51, 1, Н 8,5; И 1,9.

CpH@Q N

Найдено: С 60,9; Н 8,4; N 1,9.

Спектр ЯИР (О СДС1з ): 5,60 (1H) мул ьти плет (м ) 3,50 (ЗН ) син гпет (с }, 2,73:. (2Н), 2,33 (6Н) и 2,03 (ЗН) с. где R u R имеют указанные значения, l взаимодеи-твует c моль N- порсукци 55 нимида и 1 моль диметилсульфида в о смеси толуола и бензола при 0 -(-25)С с послсдукицим взаимодействием с 1 моль триэтиламина.

Используя описанный метод, но взяв в качестве исходного 2-пропио)

I нилолеандомицин получают 2-nponuotl Я нил-4-дезокси-4-оксоолеандомици н.

Пример.2. Соединение получают путем окисления.

К 4,5 г И-хлорсуксинимида, 50 мл бензола и 150 мл толуола в сухую, колбу, снабженную магнитной мешалкой и отверстием для ввода азота

3 1 и охлажденную. до -5 С, добавляют

3,36 мл диметилсульфида. После перемешивания при О С в течение 20 мин содержимое охлаждают до -25 С и обрабатывают 5,0 r 11,2-диацетилолеандомицина в 100 мл толуола. Охлаждение и. перемешивание продолжают в течение 2 ч с последующим добавлением 4,73 мл триэтиламина.

Реакционную смесь перемешивают при 0 С в течение 15 мин и затем переливают в 500 мл воды. рН устанавливают равныи 9,51 н.водным гидратом окиси натрия и органический слой отделяют, промывают водой и раствором соли и сушат над сульфат ом натрия. После удаления растворителя под вакумом получают 4,9 r (выход; 984:} желаемого продукта, ЯИР-спектр (КСДС1 ) . 3,48 (3Н) с, 2,61 (2Н) м, 2,23 (6Н). с и

2,03 (6Н ). с.

1 ." p и .и e p 3. 2- Ацетил-8,8а-дез окси-8,8а-дигидро-4-оксоолеандомицин, В сухую колбу, снабженную магнитной -мешалкой и отверстием для по. дачи азота, содержащую 11,6 г й-хлор. сукцинимида, 750 мл толуола и 250 мл бейзола и охлажденную до -50C, добавляют 6,0 ип диметилсульфида и полученный раствор оставляют при перемешивании на 20 мин, Далее температуру понижают до -20 С и добавляют 25 г

2 -ацетил-8,8а-дезокси-8,8а-дигидро» олеандомицина. в 500 мл толуола.После перемешйвания в.течение 2 и при -20 С добавляют 11,4 мл триэтиламина и: реакционную смесь постепенно нагре- . вают до 0 С. Затем ее переливают в

1500 мл воды и рН доводят до 9,51 н. раствором гидроокиси натрия, Органический слой отделяют, обильно промйвают водой (трижды ) и насыщенным солевым раствором (однократно ) и сушат над сульфатом натрия. После удаления растворителя при пониженном дав. ленни получают пену, которая после перекристаляизации из диэтилового эфира дает 13 г (выход 52.2Ж ) чистого продукта, т.пл. 197-199 С.

Спектр ЯМР (СДС 1 ): 5, 11 . (1H ) м, 3,51 (ЗН) с, 2,25 (6Н ) с и 2,03 (3й) с.

Вычислено: С 60,8; Н 8,3; и 1,8, Р„О И

020004

Найдено: С .59,9; Н 8,2; И 2,0.

fl р и -м е р 4. 2-Пропионил-8 8а jg дезокси-8,8а-дигидро-4-дезокси-4-оксоолеандомицин.

К раствору 375 мл толуола и 125 мл бензола добавляют 5,8 r К-хлорсукцинимида и смесь оставляют на 15 мин при перемешивании при комнатной температуре. Реакционную смесь ох10 лаждают до -50C и добавляют 3,0 мл диметилсупьфида, продолжая перемешивание в течение .еще 20 мин, Темпе» ратуру понижают до -20 С,.сопровождая добавкой 12,8 г 2-пропионил-8,8а- >5 дезокси-8,8а-дигидроолеандомицина в:

250 мп толуола. Через 2 ч добавля- ют 5,7 мл диэтиламина и удаляют водяную баню. Когда температура реакции достигла 0 С, реакционную о

>0 смесь переливают в 750 мл воды. Устанавливают рН равным 9,5 lн.раствором гидроокиси натрия и отделяют органический слой. После отмывки водой (3 раза ) и насыщенным солевым раствором органический слой сушат и концентрируют при пониженном давлении и получают желаемый продукт, П р и м е .р 5, 11,2-Диацетил-8,8адезокси-.8,8а-метилен-4-дезокси-.4-ок-. .соолеандомицин.

К мутному. раствору 434 мг N-хлорсукцинимида в 15 мл толуола и 5 мл бензола, охлажденному до - 5 С до- . бавляют 0,327 -мл диметилсульфида.

После перемешивания в течение 20 мин

З5 при,0 С реакционную. смесь охлажлают до -25 С и добавляют 500 мг 11,2-диацетил-U,Ua-дезокси-Ь,8а-метилену" олеандомицина и 10 мл толуола. Перемешивание продолжают в течение 2 ч о

40 при -20 С с последующим введением

0,46 мл триэтиламина и 1 мл толуола.

Охлаждающую ванну удаляют и ре а кционную смесь нагревают до О С. Затем переливают в 50 мл воды и 50 мл этил4 ацетата, рН тщательно поддерживают в значении 9,5, органический слой отделяют, осушат и концентрируют досуха, Таким образом получают 520 мг (выход 1004 ) слегка .увлажненного же50 лаемого продукта в виде белой пены.

Спектр ЯМР (С1СДС1 ): 3,50 (3Н) с, 2,-30 (6Н) с, 2,06 (6Н ) с и 0,58 (4Н) и .

55 Пример 6. 4-Дезокси-4 - анино" олеандомицин.

Раствор 20 г 2-ацетил-4-дезокси-4-оксоолеандомицина в 125 мл метано1020004 ла после перемешивания при комнатной температуре в течение суток обрабаты-. вают 21,2 r ацетата аммония. Полученный раствор охлаждают на водяной бане и обрабатывают 1,26 г цианборогидри- 5 да натрия. Затем охлаждающую ванну удаляют и реакционную смесь оставляют при .перемешивании при комнатной температуре на 2 ч. Реакционную смесь переливают в 600 мл воды и 600 мл диэтилового эфира и устанавливают рН 8,3-7,5. Эфирный слой отделяют, а водный экстрагируют этилацетатом, Экстракты отбрасывают, а рН воды поддерживают равным 8,25. Экстракты диэтилового эфира и этилацетата, полученные при этом значении рН, также отбрасывают, и рН повышают до 9,9.

Полученные при этом рН экстракты диэтилового эфира и этилацетата объ- 20 единяют, промывают последовательно водой (1 раз ) и насыщенным солевым раствором и сушат над сульфатом натрия. Последние экстракты, полученные при рН 9,9, концентрируют до получения пены и хроматографируют на

160 г силикагеля, используя хлороформ в качестве заполняющего растворителя и начального элюата. После получения 11 фракций, объемом 12 мл каждая, 30 элюат заменяют смесью из 54 метанола и 951 хлороформа. При получении

370 фракций элюат заменяют смесью

101, метанола и 903 хлороформа, а после фракции 440 используют смесь иэ 15"ь метанола и 854 хлороформа. Фракции 85-260 объединяют и концентрируют в вакууме досуха. Получают 2,44 г желаемого продукта.

Спектр ЛИР (д СДС1 ): 5, 56 (1Н ) м, 40

3, 36 (ЗН? с, 2,9 (2Н) м и

2,26 (6Н ) с.

Пример 7, 4-Дезокси-4 - аминооле45 андомицин.

Раствор из 300 мг 2-aaeT > " Ae3o си-4-аминоолеандомицина в 25 мл метанола оставляют на ночь при перемешивании при комнатной температуре. Реак50 ционную смесь концентрируют в вакууме и получают 286 г желаемого продукта в виде белой пены.

Спектр ЯМР (с1СДС1. ): 5,6 (1Н) м, 3 86 (ЗН) с, 920 (2Н ) м и 2 26 (6Н)с, Новые произ воднь|е 4 дезокси-4 - аминоолеандомлцина, облада от акти вност ью

in vitro против различных граммположительных микроорганизмов, таких как

Staphylococcus. au reus u Streptococcus

pyogenes против некоторых граммотрицательных микроорганизмов, имеацих сферическую или эллипсоидную форму (кокки). Их активность легко продемонстрировать на тестах 1п vitro против различных микробов в среде сердечномоэговой вытяжки обычным методом серии двухкратного разбавления. Их активность in чitго делает их полезными для локального при :енения в виде мазей„ кремов и т.п. для целей стерилизации, например, предметов обихода в комнате больного, и в качестве промышленных антимикробных препаратов, например для обработки воды, контроля шлама и для предохранения картин и дерева.

Для использования in ч1 t ro т.е. при локальном применении, обычным часто бывает сочетание выбранного продукта с фармацевтически приемлемым носителем, таким как растительное или животное масло или смягчающий крем. Аналогично этому они могут быть растворены или диспергированы в жидких но ителях или раст ворителях, таких как вода, спирт, многоатомные спирты или их смеси или в других фармацевтически,приемлемых инертных средах, т.е. в среде, которая не воздействует отрицательно на активный ингредиент. Для этих целей может быть приемлемо применение концентраций активного ингредиента примерно 0,0 1-10 вес.4 от общей композиции, Иногие соединения формулы (1 ) являются активными против граммположительных и граммотрицательных микроорганизмов in vitro, таких как

Pascurzella multocida u Neisseriaэ1осса при введении через рот и/или парентеральном пути введения животным, включая человека. Их акти вност ь

in vitro является более ограниченной в отношении восприимчивых организмов и определяется обычными методами, включающими прививку мышам, имеющим одинаковый вес, испытываемый микроорганизм и введение им pe I as или подкожно испытываемое соединение.

На практике мышам в количестве

10 шт, прививали внутрибрюшинно соот ветствующим образом разбавленную культуральную жидкость, содержащую

1020004

Составитель Л. Никулина

Редактор Н. Рогулич Техред А.Ач Корректор О, билак

Заказ 3741/56 .. Тираж 387 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб,, д, 4/5 филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная„ 4 примерно I 10 кратной летальной до. зы микроорганизмов (наиболее низкая концентрация микроорганизмов, потребная для вызывания 1004-ной гибели животных), Одновременно проводили контрольные тесты, в которых мыши получали инокулят более низкого разбавления, как контроль за возможной вариацией вирулентности испытываемого микроорганизма. Исследуемые соединения вводили через полчаса пос ле прививки и повторяли через 4,24 и

48 ч. Выживших мышей держали в течение 4 дн. после последнего введения препарата и отмечали количестed -.выживания.

При использовании in vitro эти новые соединения могут быть введены че рез рот или парентерально, т.е. подкожной или внутримышечной инъекцией в дозе 1-200 мг/кг веса тела в сутки. Благоприятный интервал доз составляет 5-100 мг/кг веса тела в сутки и предпочтителей интервал доз5-50 мг/кг веса тела в сутки. Носителями, пригодными для парентераль-. ной инъекции, могут быть либо жидкости, такие как вода, изотонический раствор, изотоническая декстравЂ:за, раствор Рингерса, либо без1водные, такие как жирные масла растительного происхождения (хлопковое масло, арахисовое яасло, кукурузное масло, кунжутное масло ), диметилсуль

5 фоксид и другие безводные носители. которые не влияют на терапевтическую эффетивность препарата и нетоксична в применяемом объеме или соот» ношении (глицерин, пропиленгликоль, 1О сорбит ).Могут быть приготовлены импровизированные препараты в растворах перед введением . Такие полезные смеси могут включать жидкие разбавители, например пропиленгликоль, 1 диэтилкарбонат, глицерин,сорбит и т.д. буферные агенты, тиалуронидазу, местные анестезирующие средства и минеральные соли для придания жела.емых фармакологических свойств. Эти

20 соединения могут также сочетаться с. различными фармацевтически приемлемыми инертными носителями, включающими твердые разбавители, жидкие носи тели, нетоксичные органические ра2 створители в виде капсул, таблеток лепешек, сухой с аси суспензии, раствора, элексира и парентерального раствора или суспензии. Соединения используют s различных дозированных

ЗО формах в концентрациях 0 5-90 вес.Ф от общего веса состава.