Способ получения 4-дезокси-4-амино-эритромицина а

 

Сова Советских

Социалистических

Республик

ОП ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕН ИЯ к п тент щ886749 (61)дополнительный к патенту (51) М. Кл.

C 07 H 17/08

A 61 K 31/71 (22) Заявлено 1806.79 (2! ) 2573754/

/2776608/23-04 (23) Приоритет 03.02.78 (32) 04,02. 77

Государствеиный комитет

СССР оо делам изобретений и открытий (31) 765480 (33) США

Опубликовано 30.1 1.81. Бюллетень № 44

Дата опубликования описания 30.1 1.81 (53) УДК 547..455 .07(088.8) Иностранец

Фрэнк Кристиан Сиаволино (США) (72) Автор изобретения

Иностранная фирма

"Пфайзер Инк" (США) (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 4 -ДЕЗОКСИ-4 -АИИНО-ЭРИТРОВ1ЦИНА А соединение формулы

Ь АсЬ м(се 1, Н0

НО

ЕО

НО

<0 i< мн

=0 Нэ

Изобретение относится к способу получения новых производных эритромицина А, обладающих ценными фармакологическими свойствами.

Известен синтез производных эритромицина А, основанный на реакции каталитического восстановления оксимов (1) .

Цель изобретения - получение новых, полезных соединений, расширяющих арсенал средств воздействия на живой организм, Поставленная цель достигается тем, что в способе получения 4л -дезоксиИ

-4 -амино-эритромицина A формулы

О

КО

iiОii, -ойЮэ

О э

1о Re Ac - ацетил, подвергают каталитическому восстановлению в присутствии никеля Ренея в изопропаноле с последующим гидролизом в присутст ви и мет анола.

Исходное соединение формулы l! может быть получено путем взаимодействия соединения формулы

3 88 с диметилсульфоксидом или трифторуксусным ангидридом с последующим контактированием реакционной смеси с триэтиламином, или с N-хлорсукцинимидом и диметилсульфидом с последующим контактированием реакционной смеси с триэтиламином.

Продукт выделяют путем отфильтровывания отработанного катализатора и удаления растворителя в вакууме. Остаток последовательно обрабатывают водой и основной продукт отделяют от неосновных путем экстракции из воды, изменяя величину рН.

Катализатор (ни кель Ренея) можно использовать в различных количествах, в зависимости от быстроты проведения реакции, например 10-200 вес. 3 от веса исходного соединения I I., На скорость реакции также влияет давление газообразного водорода в реакторе гидрирования. Для обеспечения обычного времени протекания реакции предпочтительно давление 7,03 кг/см

Кроме того, восстановление удобнее проводить при температуре окружающей среды.

Время реакции зависит от многочисленных факторов: температуры давле" ния, концентрации и характеристических вязкостей реагентов. При проведении в указанных выше условиях, реакция завершается в течение 12-24 ч.

6749

Гидролиз 2 -ацетильнбй группы из сост вет ст вующе ro произ водного 2 — аце(II (( тил-4 -дезокси-4 -амино-эритромицина

A можно осуществить, если оставит ь раствор указанного соединения в метаноле выстаиваться при комнатной температуре в течение ночи °

При выделении целевого 4 -дезокси((1(-амино-эритромицина А из неосновных, побочных продуктов или исходных соединений необходимо учитывать основную природу конечного продукта. Водный раствор продукта экстрагируют в интервале постепенно возрастающих величин рН, так что нейтральные или неосновные продукты экстрагируются при более низких значениях рН, а целевой продукт - при значениях рН, превышающих 5. Растворитель для экстракции (хлороформ) промывают солью и водой и сушат над сульфатом натрия. После удаления растворителя получают целевой продукт. В случае необходимости проводят дополнительную очистку с помощью колоночной хроматографии на

5 (о

15 ю и

25 зо

4О

55 силикагеле в соответствии с известными методиками.

Амины формулы I обычно разделяют с помощью селективной кристаллизации из диэтилового эфира. Стереохимия исходных материалов, приводящих к получению антибактериального агента, такая же, как и у природных материалов.

Окисление 4"-гидроксильных групп в кетоны и последующее превращение пос ледних в 4-амины позволяет произво((» дить стереохимическое изменение 4-заместителя по сравнению с природным . продуктом. Когда же соединение формулы II превращают в амины по вышеописанной методике, возможно образование двух эпимерных аминов. Оказывается, что оба эпимерных амина присутствуют в конечном продукте в различных соотношениях, которые зависят от выбранного способа синтеза. Бсли выделенный продукт содержит преимущественно один из эпимеров, то этот эпимер можно очистить путем повторной перекристаллизации из подходящего растворителя до постоянной точки плавления.

Хотя указанную смесь эпимеров можно разделить с помощью известных способов, выгоднее использовать ее в том виде, в котором ее выделили из реакции. Однако часто предпочтительнее очистить смесь эпимеров с помощью по крайней мере одной перекристаллизации из соответствующего растворителя, а затем - с помощью колоночной хроматографии высокого давления, распределения между растворителями или

IðàcTèðàíèÿ в соответствующем растворителе.

Указанная очистка, если нет необходимости в разделении эпимеров, приводит к удалению исходных соединений и побочных нежелательных продуктов.

Оба эпимера указанного соединения обладают одййм и тем же типом активности, т. е. акти вност ью в- качест ве антибактериальных агентов.

И 1(Предлагаемый 4 -дезокси-4 -амино-эритромицин А демонстрирует in vitro активность против различных грамположительных микроорганизмов, например

StorphyIococcus anreus u Streptococcus anreus, и против некоторых грамотрицательных микроорганизмов, например сферической или эллипсоидальной формы (кокки) . Его активность подтверждается при in vitго испытаниях против различных микроорганизмов в сердечно-мозговой вытяжке в качестве

86749 Ь

- е

IS ь2D

25 эо

35 о

43

SO

5 8 среды с помощью обычной методики двукратного серийного разбавления.

Активность in vitro делает его полезным при наружном применении в ви— де мазей, кремов и т.п., при стерилизации, например предметов в комнате бол ьного, и в качест ве промышленных антимикробных препаратов, например при обработке воды, слизистых поверхностей, для предохранения красок и де рева.

При использовании in у1tro, например, для наружного применения желательно соединять выбранный продукт с т аким фар маце вти че ски приемлемым носителем, как растительное или минерал ное масло или мягчительные кремы, Его можно также растворить или диспергировать в жидких носителях или растворителях, таких, как вода, спирт, гликоли или их смеси, или в других фармацевтически приемлемых инертных средах, т.е. таких, которые не оказывают вредного воздействия на активные ингредиенты. Для этого используют концентрации активных ингредио ентов в пределах от 0,01 до около

10 вес.3 в расчете на всю композицию.

Кроме того, предлагаемое соединение я вляет ся акти вным против грамположительных и некоторых грамотрицательных микроорганизмов, например

Pasteurel lu mul tocielo u Neisserioз1 сса i n v i чо, при орал ьном и/или парэнтеральном. приеме или при вве.дении животным и человеку, Их i n

vivo активность более ограничена с точки зрения чувствительности организмов и ее определяют с помощью обычном методики, включающей инфицирование мышей одинакового веса тестовым организмом и соответственную обработку их при оральном или подкожном введении тестовых соединений.

Например десяти мышам делают внутрибрюшинные прививки подходящих разбавленных культур, содержащих приблизительно от одной до десяти ЛД „, (низшая концентрация организмов, приводящая к 1003-ному летальному исходу) . Одновременно проводят контрольные тесты, в которых мышам делают прививки более сильно разбавленных культур как проверку на возможные вариации в вирулентности тестовых организмов. Тестовое соединение вводят через полчаса после инокуляции и повторяют спустя 4, 24 и 48 ч. Выживших мышей выдерживают еще в течение четырех дней после последней обработки и подсчитывают число выживших особей.

При применении 1л vivo предлагаемое соединение можно принимать орально или парэнтерально, например, при подкожных и внутримышечных инъекциях в дозах от около 1 до около 200 мг/кг живого веса в день, желательно от около 5 до около 100 мг/кг, но предпочтительно от около 5 до около

50 мг/кг живого веса в день.

Растворителями, пригодными для парэнтеральных- инъекций, RsJlRIOTcR такие водные среды, как вода, изотонический солевой раствор, изотоническая декстроза, раствор Рингера, или такие неводные среды,как жирные масла растительного происхождения (хлоп" ковое, зеиляного ореха, кукурузное кунжутное), диметилсульфоксид и другие неводные растворители, которые не влияют на терапевтическую эффективность препаратов и не оказывают токсическое действие в используемых объемах или пропорциях (глицерол, пррпиленгли коль, сорбитол) . Кроме того, с их помощью могут быть приготовлены композиции для иипровизированного приготовления растворов перед применением. Такие р аст вор ители мо гут включат ь жидкие разбавители, например пропиленгли кол ь, диэтил карбон ат, глиц ерол, сорбитол и т.д., буферные агенты, гиалуронидазу, местные анестезирующие средст в а и неор гани че с ки е соли для того, чтобы получить желательные фармацевтические свойства. Предлагаемое соединение можно также соединять с различными фармацевтически приемлемыми инертными носителями, включая твердые разбавители, водные среды, нетоксичные органические растворители в форме капсул, таблеток, сухих смесей, суспензий, растворов, эликсиров и парэнтеральных растворов или суспензий. Его используют в различных дозировках, причем уровень концентраций меняется от 0,05 до около 903 по весу от всей композиции, Пример 1. А. 2 -Ацетил-4 -дезокси-4"-амино-эритромицин А.

Смесь из 14,0 г 2 -ацетил-4" -де1I зокси-4 -окси-эритромицин А о-ацетилоксима и 60 г промытого изопропанолом никеля Ренея в 400 мл изопропанола перемешивают в атмосфере водорода при первоначальном давлении 1000 фунтов на кв. дюйм (примерно 70,3атм) в течение ночи при комнатной темпера886749 го слоя доводят до 5 и хлороформовый слой отделяют. рН водной фазы последо вательно доводят до 5, 5, 6, 7, 8 и 9, и проводят экстракцию после каждого доведения рН с помощью 100 мл свежего хлороформа, Хлороформовые экстракты при рН 6, 7 и 8 смешивают, последовательно промывают водой и насыщенным солевым раствордм и высушивают над сульфатом натрия. Удаление раЧтворителя под пониженным давлением дает 2,9 г эпимерной смеси 4 -дезокси

ft

-4 -амино-эритромицина А. Образец смеси в количестве 1,9 r растирают с диэтиловым эфиром, вызывая кристаллизацию части нерастворенной пены. Твердое вещество отфильтровывают и высушивают, получая 67 мг единственного эпимера 4 -дезокси-4 -эритромицина

И

А с точкой плавления 140-147 С. формула изобретения

НО О i

И(С Из)

Ас0 0

О /iI ,0Енз туре. Катализатор отфильтровывают и фильтрат концентрируют до белой пены.

Остаток повторно растворяют в 400 мл изопропанола и смешивают с 50 r промытого изопропанолом свежего никеля

Ренея.

Гидрогенизацию проводят в течение ночи при комнатной температуре- и при первоначальном давлении водорода

1000 фунтов на кв. дюйм. Катализатор ro отфильтровывают и фильтрат концентрируют под вакуумом досуха. Получают

8,1 г целевого продукта.

B. 4 -Дезокси-4 -амино-эритроми

Раствор 2,17 г 2 -ацетил-4"-дезокси-4 -амино-эритромицина А в 50 мл метанола оставляют перемешиваться при комнатной температуре в течение ночи.

Растворитель отгоняют под пониженным давлением и остаточную пену обрабатывают смесью из 50 мл хлороформа и

50 мл воды. рН водного слоя доводят до 9,5 и отделяют органический слой.

Хлороформовый слой обрабатывают свежей 5 водой и рН доводят до 4,0. рН кислотного водного слоя, содержаще го продукт, постепенно доводят до 5, 6, 7, 8 и 9 путем добавления основания, причем при каждом значении рН проводят

30 экстракцию свежим хлороформом. Экстракты при рН 6 и 7 содержат основную часть продукта, их смешивают и обрабатывают свежей водой при рН 4. Водный слой снова доводят до рН 5, 6 и

7, причем при каждом значении рН про35 водят экстракцию свежим хлороформом.

Хлороформовый экстракт при рН 6 высушивают над сульфатом натрия и концентрируют, получая 249 мг целевого продукта в виде эпимерной смеси. 0

ЯМР-спектр (о СОС1 ) . "(1Н) S 3,30, (2H) S 3,26, (6Н) S 2, 30 и (3H) S 1, 46, . П р и и е р 2. 4" -Дезокси-4к -амино-эритромицин А (единственный эпимер) .

Раствор 10,0 r эпимерной смеси ! .И

2 -ацетил-4 -дезокси-4 -амино-эритромицина А в 150 мл метанола оставляют перемешиваться при комнатной температуре в атмосфере азота в течение

72 ч. Растворитель отгоняют под вакуумом и остаток растворяют в перемешиваемой смеси из 150 мл воды и 200 мл хлороформа. Водный слой сливают и добавляют 150 мл свежей воды. рН водноВНИИПИ Заказ 10607/89

Способ получения 4 -дезокси-4ц 1!

-амино-эритромицина А формулы I (Снз) g

110

И

Обкз отли чающий ся тем, что соединение формулы I I где Ас — ацетил, подвергают каталитическому восстановлению в среде изопропанола в присутствии никеля Ренея с последующим гидролизом в присутствии метанола.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Каррер П. Курс органической химии. Л., 1960, с. 161.

Тираж 400 Подписное

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул.Проектная, 4