Способ определения нарушения активности фибриногена плазмы крови

 

Изобретение относится к гематологии . Цель изобретения - ускорение и повып ение точности способа. Плазму крови смешивают с 1%-ным раствором протаминсульфата в соотношении

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК (19) SU(li) (5D4 G 01 N 33-50

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н А ВТОРСНОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4196707/28-14 (22) 19 ° 02.87 (46) 15.02.89. Бюл. М 6. (71) Московский медицинский стоматологический институт им. Н.А. Семашко (72) В.Н. Александров, Л.Ф. Кармолина, Г.Н.Будякова и И.Г. Бобринская (53) 612 ° 015(088.8) (56) Раби К. В кн.: Локализованная и рассеянная внутрисосудистая коагу-. ляция. M. Медицина, 1974, с. 95.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для диагностики свертывающей системы в фазе несвертываемости крови при диссеминированном внутрисосудистом свертывании крови в акушерской, педиатрической, хирургической и прежде всего реанимационной практике.

Цель изобретения — ускорение и повышение точности способа.

Исследуемую плазму несвертывающейся крови больного смешивают с 17.-ным раствором коммерческого препарата протаминсульфата в соотношении 10-5:1 непосредственно в кювете прибора тромбоэластографа и по величине максимальной амплитуды тромбоэластограммы определяют сохранность функциональной активности фибриногена: при

Ф значениях больше 30 мм как сохранную (54) CIIOCOB ОПРЕДЕЛЕНИЯ НАРУШЕНИЯ

АКТИВНОСТИ ФИБРИНОГЕНА ПЛАЗМЫ КРОВИ (57) Изобретение относится к гематологии. Цепь изобретения — ускорение и повышение точности способа, Плазму крови смешивают с 17-ным раствором протаминсульфата в соотношении (10-5):1. 11о величине максимальной амплитуды тромбоэластограммы определяют сохранность функциональной активности фибриногена. Если эта величина равна 30 мм, то состояние больного расценивают как критическое, требующее немедленной коррекции.

4 табл. функциональную активность фибриногена, а при максимальной амплитуде менее 30 мм — нарушение или полную утрату функциональной активности фибриногена, т.е. диагностируют нарушения в собственно свертывающейся системе крови.

Выбор оптимальной рабочей дозы протаминсульфата (B условиях несвер тывающейся крови) представлен в табл. 1.

Различия между величинами макси. мальной амплитуды при разведениях плазмы к раствору протаминсульфата не существенны и статистически доказаны, а именно P больше 0,05.

Результаты контроля к оптимальной дозе протаминсульфата по нормальной плазме представлены в табл. 2, 14588

ДоЬавление раствора протаминсульфата в условиях нормокоагуляции плазмы не влияет на ее максимальную амплитуду при соотношении 10-5:1.

Способ осуществляют следующим образом.

Кровь у больного забирают путем пункции вены силиконированной иглой в силиконированную пробирку в 3,8%ный раствор цитрата натрия в соотношении 9:1 для тромбоэластографии и во вторую пробирку без стабилизатора для определения времени спонтанного общего свертывания крови. Одно- !5 временно с определением времени общего свертывания крови и/или тромбоэластографии крови из цитратной крови получают плазму центрифугированием в течение 10 мин в режиме 1500 об/мин. 20

Тромбоэластографию предпочтительнее проводить на плазме, а не на кровИ.

В связи с тем, что величины,гематокрита крови влияют на величины максимальной амплитуды, результаты ве- 25 личин, максимальной амплитуды, получаемые при тромбоэластографии плазмы, однозначны по сравнению с результата— ми крови. 11ри получении данных, показывающих удлинение процесса сверты- . 30 вания крови по показателю времени общего свертывания крови и/или тром боэластограмме до 30 мин и вплоть до полной несвертываемости крови, требуется проведение специального, предлагаемого тромбоэластографического исследования. При этом непосредственно в кювету прибора тромбоэластографа вносят 0,27 мл плазмы несвертывающейся крови больного и 4О

0,03 мл 1%-ного коммерческого раствора протаминсульфата, т.е. получают соотношение 9:1. Далее проводят тромбоэластографию такой смеси, рекальцифицируя ее 1,29X — ным раствором 45 хлористого кальция в количестве

0,06 мл. При получении графической

1 записи процесса коагуляции смеси по ее тромбоэластограмме проводят ка чественно †количественн оценку вели- 5р чины максимальной амплитуды, измеряемую в мм. При этом максимальная амплитуда, равная 30 мм и более, указывает на функциональную активность и сохранность фибриногена, а величины менее 30 мм до 0 указывают на нарушение или полную утрату функциональной активности фибриногена, т.е ° диагностируют нарушения в собственно

24

4 свертывающейся системе крови. Если в дозе 10:1 коагуляция отсутствует, дозу протаминсульфата увеличивают до

5:1 и проводят тромбоэластографию, а именно к 0,25 мл плазмы добавляют

0 05 мл 17-ного раствора протаминсульфата непосредственно в кювете прибора, проводят тромбоэластографию такой смеси, рекальцифицируя ее

1,29%-ным раствором хлористого кальция в количестве 0,06 мл.

Согласно известному способу проведено 60 исследований, при этом только в 18Х случаев удалось диагностировать нарушения свертывающей сис-. темы, которые оценивались как потенциальная гиперкоагуляция, Согласно предлагаемому способу проведено 23 исследования. Во всех случаях провецена диагностика нарушений свертывающей системы.. При этом выявлены состояния сохранности функциональной ак-. тивности фибриногена в 68,4Х, а снижение.или полная утрата функциональной активности в 31,6%.

Сравнительный анализ результатов параллельных исследований цитратнои плазмы несвертывающейся крови больных двумя способами представлен в табл. 3.

Данные, приведенные в таблице, проверены на содержание фибриногена в плазме и показывают колебания его в.широких пределах от 0,8 г/л до

6,! г/л в пробах 1-7, определенные по Рутберг и/или высаливанием .

Диагностическая информативность двух способов представлена в табл, 4.

Пример 1. Больной К., 30 лет.

Диагноз: Черепно-мозговая травма.

Перелом свода и основания черепа. ушиб мозга. Поражение ствола мозга.

Кома I-II степени. Состояние больного крайней степени тяжести, требующее проведения искусственной вентиляции легких и других реанимационных мероприятий. Для исследования свертывающей системы кровь у больного забирают путем пункции вены силиконированной иглой в силиконированную пробирку в 3,8%-ный раствор цитрата натрия в соотношении 9:1, а также во вторую пробирку,для определения времени спонтанного общего свертывания крови. Центрифугированием в режиме 1500 об/мин в течение 10 -мин из крови получают плазму. По показателю

5 1458824 времени общего свертывания крови и по тромбоэластографическому исследованию выявляется несвертываемость крови н течение 30 мин от момента забора крови. Проводят тромбоэластографическое исследование согласно известному способу, при этом обнаружено P больше P т.е.. смеси здорового потенциальной гиперкоагуляции не выявлено.

Далее тромбоэластографию проводят согласно предлагаемому способу. Непосредственно в кювету прибора тромбоэластографа Hellige (ФРГ) вносят

0,27 мл плазмы неснертывающейся крови больного и 0,03 мл 17-ного раствора коммерческого препарата протаминсульфата, что соотносится как

9:l. Проводят тромбоэластографию, рекальцифицируя смесь добавлением

1,291-ного раствора хлористого кальция в количестве 0,06 мл. В результате проведения этих приемов получают тромбоэластограмму. Величина измеренной максимальной амплитуды

40 мм. По данным предлагаемого способа сделано заключение: функциональная активность фибриногена сохранена; несвертываемость обусловлена избытком физиологического гепарина.

По данным известного способа такого заключения сделать не удается, так как он не выявляет этих комплексны1с нарушений. Даны соответствующие рекомендации к проведению корригирующей терапии выявленных нарушений °

Исход заболевания — больной переведен в профильное отделение.

Пример 2. Больной Г., 39 лет, Диагноз: Сепсис, Гнойный менингит, Цирроз печени. Состояние больного тяжелое, требующее проведения реанимационных мероприятий и интенсивной терапии. Для исследования свертывающей системы кровь у больного забирают путем пункции вены силикбнированной иглой в силиконированную ripoбирку н 3,8 .-ный раствор цитрата натрия в .соотношении 9:1, а также во вторую пробирку для определения времени общего свертывания крови.

Центрифугиронанием н режиме 1500 об/

/мин в течение 10 мин из крови получают плазму. По показателю времени общего свертывания крови и по тромбоэластографии выявляется несвертываемость крови н течение 30 мин от момента забора крови. 11роводя r тромбоэластографическое исследование согласно известному способу,. при этом оказывается P больше P смеси здорового т.е. потенциальной гиперкоагуляции не выявлено. Далее тромбоэластографию проводят по предлагаемому способу: непосредственно н кювету прибора тромбоэластографа Hellige (ФРГ) вносят 0,27 мл плазмы неснертывающейся крови больного и 0,03 мл 1 -ного раствора коммерческого препарата протаминсульфата, что соотносится как 9:1. Проводят тромбоэластографию, рекальцифицируя смесь добавлением

1,29 -ного раствора хлористого кальция в количестве 0,06 мл. В результате проведения этих приемов графической записи не получено. Дозу протаминсульфата увеличивают, а именно: вновь непосредственно в кювету прибора тромбоэластографа вносят 0,25 мл плазмы неснертынающейся крови больного и 0,05 мл 17.-ного раствора препарата протаминсульфата, что соотносится как 5:1. Проводят тромбоэластографию, рекальцифицируя смесь добавлением 1,297 †но раствора хлористого кальция в количестве 0,06 мл. В результате проведения этих приемов графическую запись не получают. Заключение: полная утрата функциональной активности фибриногена, т.е. нарушения в собственно снертынающей системе крови. По известному способу такого заключения сделать нельзя.

Даны соответствующие рекомендации к коррекции выявленных нарушений. Исход заболевания — больной погиб на 9 сутки пребывания н реанимационном отделении, 5

ПримерЗ. Больной П., 24ã.

Диагноз: Открытая черепно-мозговая травма. Ушиб мозга. Состояние больного тяжелое, требующее проведения реанимационных мероприятий и интенсивной терапии. Для исследования свертынающей системы кровь у больного забирают путем пункции вены силиконированной иглой н силиконированную пробирку н 3,8 .-ный раствор цитрата натрия в соотношении 9:1, а также но вторую пробирку для опреде ления времени спонтанного общего свертывания крови. Центрифугиронани ем в режиме 1500 o6/мин в течение

10 мин из крови получают плазму. Од7 1458824 8

Таблица 1

Проба Показатель, мм

Соотношение цитратной плазмы к 1%-ному раствору протаминсульфата

15:1 10:1 7:1 5:1 2:1

1 Максимальная

50 50 48 12 амплитуда

Максимальная амплитуда

60 59 57 09

65 64 59

14 новременно с центрифугированием определяют время общего свертывания цельной крови и проводят тромбоэластографию крови. Выявляют несвертыв емость крови в течение 30 мин от мо5 мента забора крови по показателю времени общего свертывания крови и по тромбоэластограмме. Проводят исследование согласно известному способу, при этом "Р" больше "P" смеси здорового т.е. потенциальная гиперокоагуляция не выявляется,.

Далее тромбоэластографию проводят согласно предлагаемому способу: непосредственно в кювету прибора тромбоэластографа Hellige (ФРГ) вносят

0,27 мл плазмы несвертывающейся крови больного и 0,03 мл 1%-ного раствора коммерческого препарата протаминсульфата, что соотносится как

9:1 ° Проводят тромбоэластографию, рекальцифицируя смесь плазмы и протаминсульфата добавлением 1,29%-ного раствора хлористого кальция в количестве 0,06 мл. В результате проведения этих приемов графическую запись не получают. Дозу протаминсульфата увеличивают, а именно вновь непосредственно в кювету прибора 30 тромбоэластографа вносят 0,25 мл плазмы больного и 0,05 мл 1%-ного раствора протаминсульфата, что соотносится как 5:1. Проводят тромбоэластографию, рекальцифицируя смесь 35

1,29%-ным раствором хлористого кальция в количестве О, Об мл. Проведение этих приемов позволяет получить тромбоэластограмму. Величина измеренной максимальной амплитуды равна 70 мм.. 40

По результатам предлагаемого способа сделано заключение: функциональная активность фибриногена сохранена, несвертываемость обусловлена избытком физиологического гепарина. Известный способ такого заключения не дает, Даны рекомендации к проведению корригирующей терапии нарушений в свертывающей системе. Исход з аболевания — больной переведен в профильное отделение.

Пример 4. Больная В., 74 r.

Диагноз: Открытая черепно- мозговая травма. Перелом основания черепа.

Состояние тяжелое, требующее интенсивной терапии. Для исследования свертывающей системы крови кровь забирается путем пункции вены. По предварительным данным времени свертывания крови и тромбаэластографии кровь не свертывается в течение 30 мин от момента взятия. Исследования согласно известному способу не выявляет потенциальной гиперкоагуляции, Исследования согласно предлагаемому способу позволяет получить тромбоэластографическую запись, Величина измеренной максимальной амплитуды 30 мм. 3аключение: состояние критическое, требующее немедленной коррекции. Исход болезни — больная переведена в npol фильное отделение.

Ф

Формула изобретения

Способ определения нарушения активности фибриногена плазмы крови путем тромбоэластографии центральной плазмы, о тличающийся тем, что, с целью ускорения и повышения точности способа, исследуемую плазму смешивают с 1%-ным раствором протаминсульфата в соотношении (10-5)

:1 и измеряют величину максимальной амплитуды тромбоэластограммы и при значениях ее менее 30 мм определяют нарушение активности.

1458824

Продолжение табл.1

Пр ношение цнтратной плавуны к IX-ному раствору протаминсульфата

asa

ИИ

2:1

70 69 65 . 55 55 53 07

0 60i5,5 59+6 56+8 10,6+3, 2

М м

Таблица 2

Величины максимальной ампли% туды тромбоэластограммы

Проба

С рабочими разведениями протаминсульфата,мм

Без протаминсульфата, мм

53 53 50

50 48 48

54.

Таблица 3

Проба Известный способ

Предлагаемый способ

Отношение времени "Р" Показатель тромбоэластограммы, мм

"P" смеси больше "P" Максимальная амплитуда = 70 здорового

2 "P" смеси больше "P"

Максимальная амплитуда = 65 здорового и

32

= 07

6 — 0

1 °

7 "P" смеси меньше "P" Максимальная амплитуда = 62 здорового

1458824

Таблица 4

Количество исслеВыявляемость коагуляционной активности фнбриногена плазмы, U%

Способ дований

Иэвестный

18

Предлагаемыи

68,4

Составитель А. Потемкин

Редактор К. Волощук Техред Л.Сердюкова Корректор Н. Король

Заказ 367/51 Тираж 788 Подписное

ВНИИНИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

313035, Москва, Ж-35, Раушская иаб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, r. Ужгород, ул. Проектная, 4