Штамм бактерий lертоsрirа inтеrrоgаns var. canicola, используемый для получения гипериммунной агглютинирующей сыворотки

 

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для получения гипериммунных сывороток, необходимых в диагностической и противоэпидемической работе. Цель изобретения - получение штамма ZEPTOSPIRA INTERROGANS VAR. CANICOLA "Собака Логинова", обладающего выраженными антигенными свойствами, пригодного для приготовления диагностических препаратов с высоким содержанием специфических антител. Штамм выделен из мочи собаки, больной лептоспирозом. Полученная в результате иммунизации кроликов предлагаемым штаммом сыворотка содержит специфические антитела в высокой концентрации (1:100000 - 200000 в реакции микроагглютинации). Штамм депонирован в коллекции микроорганизмов Института эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф.Гамалеи (НИИЭМ им. Гамалеи) N 461.

СС ОЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК фф

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

H А ОТОРСИО 4У СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4737444/13 (22) 13.09.89 (46) 23.08.91. Бюл. !» 31 (71) Ленинградский научно †исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Пастера (72) Н.А.Стоянова, В.H.Семенович и А.Б.Дайтер (53) 576.8 .093(088.8) (56) Терских В.И. Лептоспирозы людей и животных. М., 1945. (54) IIITAMH HAKTEPHA LEPTOSP IRA

INTERR0GANS VAR. CANIC0LA, ИСПОЛВЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЧ ГИПЕРИ?1МУННОЙ АГГЛЮТИНИРУЮЩЕЙ СЫВОРОТКИ (57) Изобретение относится к медицине и может быть использовано для получения гипериммунных сывороток, необхоИзобретение относится к медицине и может быть использовано для при— готовления диагностических препаратов.

Цель изобретения — получение штамма Leptospira interrogans var. canicola "Собака Логинова", обладающего выраженными антигенными свойствами и пригодного для приготовления диагностических препаратов с высоким содержанием специфических антител.

Штамм L.interrogans var. canicola

"Собака Логинова" выделен из мочи собаки, больной лептоспирозом. Штамм депонирован в коллекции микроорганизмов Института эпидемиологии и микробиологии им. Гамалеи АМН СССР под

I» - 461.

„„Я0„„1671686 (gI)g С 12 N 1/20, А б! К 39/40 димых в диагностической и противоэпидемической работе. Цель изобретен»»ч получение штамма Leptospi »nTerrogans var. canicola "Собака Лог»»нова", обладающего выраженными ант»»ге»»нь»ь»и свойствами, пригодного для приготовления диагностических препаратов с вы— соким содержанием специфических анти— тел. Штамм выделен из мочи собаки, больной лептоспирозом. Полученная в результате иммуниза»»»»и кроликов предлагаемым штаммом сыворотка содержит специфические антитела в высокой концентрации (1:100000-200000 в реакции микроагглютинации). Штамм депонирован в коллекции микроорганизмов

Института эпидемиологии и микробиологии им. акад. H.Ô.Ãàìàëåè (НИИЭМ им. Гамалеи) Ф 461.

Характеристика штамма. Cb

Морфология и культуральные свой- 3 ства. Грамотрицательные спирохеты с характерной морфологией и подвиж— С, Ь ностью, спор и капсул не образуют, QO

Относятся к хемморганотрофам и гидрофи- ©) лам и культивируются на жидкой питательной среде Терских с добавлением

57. сыворотки кролика при +28 С.

Лаг-фаза длится двое суток, экспотенциальная фаза характеризуется продолжительностью в 4 сут, время генерации 14,5 сут. В стационарной фазе наибольшая концентрация составляет (1,0+0,3) 1Оо лептоспир в 1 мл.

Патогенные свойства. На экспериментальных моделях штамм отнесен к

1671686

Формула из обр ет ения

Штамм бактерий Leptospira interrogans var. canicola 1ПЯЭМ Р 461, используемый для получения гипериммунной агглютинирующей сыворотки.

Составитель Г. Соболева

Техред М.Дидык Корр ект ор "1. Па тай

Редактор И.Дербак

Заках 2803 Тираж 369 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r.Ужгород, ул. Гагарина, 101 умеренно «цру. с нтному: !! 1 которую

50 определяют внутрибрюшинном заражением морских свинок массой 100,0-150,0 r, составляет 2,7 ° 10 микробных клеток.

Клиническое проявление характеризует— ся появлением v морских свинок лихорадки, желтухи, геморрагий.

Антпгенная активность штамма выражена: в ответ на однократное внутри- 10 венное введение кроликам 5 мл живой

7 культуры лептоспир, содержащей 3 10 микробных клеток в 1 мп, уже на первой неделе после иммунизации появляются антитела в высоких титрах (1: 15

:12800), что является отличительной особенностью штамма. Через 10 дн.после иммунизации концентрация антител достигает максимальной величины (1: .:100000-1:200000) и сохраняется на та-20 ком уровне в течение 6 нед.

Пример. Чля получений гипериммунных сывороток живую культуру штамма L interrogans var. canicola НИИЭМ 25

У 461, выращенного на среде Терских, в количестве 2,3 и 5 мл (с концентрацией лептоспир 3 ° 10 микробных клеток

7 в 1 мл) последовательно с интервалом .в 3 дня вводят внутривенно кроликам 3р массой 3 — 3,5 кг. Через 7 дн.после последней иммунизации получают гипериммунную сыворотку. Титр гомологичных антител полученной таким образом сыворотки в реакции микроагглютинации составляет 1: 100000-1: 200000. Титр гетерологичных антител не превышает

1: 16 титра гомологичных антител . Сыворотка, сохраняемая в "., 1мороженном о состоянии при -20 С, не теряет своей активности на протяжении 3 лет.

Сыворотки с высоко"» концентрацией специ Ьических антител можно получить и при однократном внутривенном введении 5 мл живой культуры лептоспир, содержащей 3 ° 107 микробных клеток в 1 мп, что на неделю сокращает сроки и уменьшает расходы на содержание животных.

Средний геометрический титр антител в сыворотках кроликов, иммунизированных лептоспирами известного штамма "Каширский" по обычной схеме (трехкратное введение живой культуры, содержащей 3 107 микробных клеток в

1 мл, в дозе 2,3 и 5 мп с интервалом в 3 дня), равен 1:32768.

Таким образом, штамм бактерий

Leptospira interrogans var. canicola

НИИЭМ Р 461 может бьгть использован для получения гипериммунной агглютинирующей сыв4ротки.