Способ получения комплексов полиеновый антибиотик - @ - циклодекстрин

 

Изобретение касается производных Сахаров, в частности способа получения комплексов полиенового антибиотика с у -циклодекстрином, обладающих биологической активностью, что может быть использовано в медицине. Цель изобретения - создание новых веществ указанного класса, обладающих большей растворимостью в воде при сохранении химической и биологической активности . Процесс ведут обработкой практически нерастворимого антибиотика , такого как флавофунгин, нистатин или амфотерицин Б с. помощью высушенного (1,5% воды) у -циклодекстрина при мольном соотношении 1: :(2,8-34,5) в водной или водно-спиртовой среде при соотношении 1,6- 409 мл на 1 ммоль антибиотика, перемешивании при 20-50 0. Новый комплекс , например, с флавофунгицэдом имеет растворимость в воде до 4%, содержание в нем активного вещества составляет 75% после 50-дневного нагревания до 60° С -при минимальной подавляющей концентрации в отношении различных дрожжей и грибов (5-50) мкг/мл. 5 табл. § СО Ци N5 X) N0 D Х

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК

А5 (19) (И) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К IlATEHTV

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР. ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3835600/23-04 (22) 28.1? 84 (31) 4508/83 (32) 29. 12.83 (33) HU (46) 30.09.88. Бюл. h 36 (71) Хиноин Дьедьсер еш Ведьесети

Термекек Дьяра PT (HU) (72) Йожеф Сейтли, Мариа Викмон, Агнеш Штадлер, Шандор Пиукович, Иштван Инцефи, Габор Кулчар, Миклош

Яраи и Габриелла Златош (HU) (53) 547.455.07(088.8) (56) Hammond S.M. Biological Activity

of Ро1уепе, — Antibiotics Progress in

Medical chemistry. т. 14. North—

Holland Publishing Company, 1977, р. 105. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КОМПЛЕКСОВ IIOЛИЕНОВЫЙ АНТИБИОТИК" ЦИКЛОДЕКСТРИН (57) Изобретение касается производных сахаров, в частности способа получения комплексов полиенового антибиоти(1) 4 С 07 Н 17/08 // А 61 К 31/70 ка с ) -циклодекстрином, обладающих биологической активностью, что может быть использовано в медицине. Цель изобретения — создание новых веществ указанного класса, обладающих боль- шей растворимостью в воде при сохранении химической и биологической активности, Процесс ведут обработкой практически нерастворимого антибиотика, такого как флавофунгин, нистатин или амфотерицин Б с. помощью высушенного (1,5% воды) -циклодекстрина при мольном собтношении 1:

:(2,8-34,5) в водной или водно-спиртовой среде при соотношении 1,6409 мл на 1 ммоль антибиотика, пере0 мешивании при 20-50 С. Новый комплекс, например, с флавофунгицидом имеет растворимость в воде до 4%, содержание в нем активного вещества составляет 75% после 50-дневного нагревания до 60 С при минимальной подавляющей концентрации в отношении различных дрожжей и грибов (5-50) мкг/мл.

5 табл.

t428208

Изобретение относится к способу получения новых водорастворимых и стабильных форм.полиеновых антибиотиков, а именно к способу получения комплексов пслиеновый антибиотик- -циклодекстрин (-ПД).

Цель изобретения — получение новых производных полиеновых антибиотиков, обладающих большей растворимо- 10 стью в воде при сохранении химической и биологической стабильности, по сравнению с исходным антибиотиком.

Способ осуществляют следующим образом. 15

Пример 1. Получение комплекса флавофунгина, с -циклодекстрином в гомогенной фазе.

22 г (-циклодекстрина (содержание волы 1,5X) при 30 C растворяют 20 в 500 мл дистиллированной воды и к раствору добавляют 2,5 r (3,85 ммоль) твердого флавофунгина. Раствор в течение 3 ч интенсивно перемешивают, затем отфильтровывают и полученный 25 интенсивно-желтого цвета фильтрат лиофилизуют. Получают 21 г продукта, спектрофотометрически измеренное содержание флавофунгина в котором составляет 9,37. Это соответству- 30 ет примерно 80Х. используемого количества флавофунгина. Комплекс пред.ставляет собой рыхлый желтый порошок.

100 мг комплекса растворяется в 2,5мл дистиллированной воды при 50 С мгно-, венно с образованием прозрачного раствора. Этот раствор содержит 3,5мг/мл флавофунгина и при хранении в течение 6 дней при комнатной температуре и на рассеянном свету не претерпе- 40 вает никаких обнаруживаемых химическим или физическим путем изменений.

Максимальная растворимость наступает при содержании It-ЦД, равном примерно 47 (концентрация флавофунгина 45

4 мг/мл), поэтому путем лиофилизации этого раствора получается комплекс самого предпочтительного состава (9-10 вес,X биологически активного вещества).

Термогравиметрические измерения, исследования с помощью дифференциально-сканирующего калориметра (ДСК) и термодеструктивного анализа (ТДА)— (Tmermal Evolution Analyse) показывают характерную разницу между флавофунгином, комплексом флавофунгина с

У-ЦЦ и смесями из флавофунгина и о

- ЦЦ. Флавофунгин при 100 С теряет

77. своей массы (на основании ТДА-криВоН выделяются органические вещества), о, выше 100 С он начинает разлагаться о и до 300 С теряет 24Х своей массы.

Лиофилиэированная проба иэ флавофунгина и -ЦД получается в виде комплекса вследствии того, что вплоть до 100 С не теряет никаких органических веществ и в ДСК-кривой между 100 о и 200 С не появляется характерное для окисления флавофунгина экзотермио ческое изменение, однако, при 263 С появляется характерный для экэотермического процесса пик, который указывает на окисление выделяющегося из комплекса флавофунгина.

Для исследования термостабильности комплекса флавофунгина с -ЦЦ вещества толщиной слоя 1 мм помещали на часовые стекла и, не защищая .от света воздуха, хранили при комнатной о температуре и при 60 С в сушильном шкафу. Пробы, отобранные в.различные моменты времени, анализировали спектрофотометрически.

На основании химических измерений найдено, что не включенный в комплекс о флавофунгин через 24 ч при 60 С претерпевает сильное разложение (это подтверждено также путем снятия полного УФ-спектра). Содержание биологически активного вещества в комплек- се флавофунгина с g --ЦЦ через 50 дней становится равным примерно 75Х. Содержащая 10Х флавофунгина, приготовленная с глюкозой физическая смесь теряет при 14-дневном хранении при комнатной температуре 50Х биологически активного вещества. Содержание биологически активного вещества в комплексе через 50 дней больше 95 . Храо нившаяся в закрытом сосуде при +4 С в течение 7 мес проба не показывала потерь биологически активного вещества.

Результаты измерений представлены в табл. 1 (термостойкость выраженная в процентах первоначального содержания биологически активного вещвства). °

Микробиологическое оценочное из» мерение также подтвердило, что флавофунгин в форме Р -ЦП-комплекса намного стабильнее. Комплекс флавофунгина с f-ЦП хранили при комнатной температуре и при 60 С. Противогрибковое . о действие было точно таким, как и первоначальное (М1С-значение хранившегося в атмосфере азота в холодильнике

Стабильность приготовленных из лиофилизированной пробы комплекса нистатина с f-ЦД растворов исследова" ли следующим образом.

Из содержащего 87. биологически активного вещества готовили водный раствор концентрации 5 мг/мл. Раствор хранили при комнатной темпера55 туре незащищенным от света. В pasличные моменты времени спектрофотометрически контролировали содержание биологически активного вещества в растворах..3 14282 пробы флавофунгина MlC=26 мкг/мл исследовались на тест-микроорганизмах.

s, cerevisial, с. albicans, с. pseudotropicals и с. orusei.

Пример 2. Получение комплекса флавофунгина с ) -ЦД, в гетерогенной фазе.

9 r )-циклодекстрина (содержание воды 1,57) гомогениэируют в фарфоро- 1ð вой ступке с 1 r флавофунгина при комнатной температуре.. Смесь суспендируют в 5 мл 507.-ного этанола. Суспензия через несколько минут перемешивания внезапно становится твердой, Пастообраэное вещество размазывают по ширине до тонкого слоя и в течение нескольких часов высушивают в вакуумном эксикаторе. Затем твердый комплекс измельчают в порошок. Получают 10 r продукта с 10 вес.7. биологически активного вещества °

Продукт изучают на термостойкость.

При этом находят, что комплекс как лиофилизированный комплекс обладает 25 повышенной термостойкостью и его противогрибковое действие не уменьшается.

На снимках рентгенодифракционного анализа превращенного в порошок комплекса проявляются характерные пики рефлекции при значительно отклоняющейся (20 ) величине угла в другом месте, чем в случае физической смеси подобного состава, что свидетель35 ствует о другой кристаллической решЕтке и подтверждает факт комплексообразования. Рентгенодифракционный снимок лиофилизированного комплекса флавофунгина с -ЦД указывает на аморфную структуру.

Пример 3. Получение комплекса нистатина с -ЦД в гомогенной фазе.

10 г f -ЦД (содержание воды 1,57.) 45 о при 50 С растворяют в 90 мл дистиллированной воды. К раствору добавляют

2 r (2,16 ммоль) нистатина (биологическая активность 5033 Е/мг). Раствор интенсивно перемешивают в течение

15 мин. После отфильтровывания осадка желтого цвета раствор лиофилизируют, Получают 10 г продукта, спектрофотометрически определенное .содержание нистатина в котором составляет 87..

Биологическая активность 399 Е/мг.

Комплекс нистатина с -ЦД представляет собой светло-желтый рыхлый порошок, который быстро растворяется в

08

4 воде при комнатной температуре с образованием прозрачного раствора.Концентрация нистатина в растворе 89 мг/мл,что соответствует примерно

100 мг комплекса на мл раствора, Биологическое оценочное определение комплекса показывает, что биологическая активность исходного нистатина сохраняется.

Термогравиметрические измерения, исследования с помощью дифференциально-сканирующего калориметра (ДСК) и термодеструктивного анализа (ТДА) показывают характерное различие между нистатином, комплексом .нистатина с $ --ЦЦ и смесью нистатина с (--ПД, Нистатин содержит 37. воды, которую о отдает вплоть до 100 С (TG-кривая), Разложение ве цества начинается при о

150 С с экзотермическим процессом (в ДСК вЂ крив пик при 165 С, при потере в весе 87 — TG кривая), затем протекает медленное разложение, и о при 350 С измерима массовая потеря

547, Хотя разложения нистатина и 0 -ЦД в отношении температуры совпадают, однако есть некоторые отклонения в термоциклических кривых комплекса в смеси, которые в лиофилизате делают вероятным наличие комплекса. В ТДА-кривой отсутствует острый пик при 160 С, который указы.вает на улетучивание органических веществ. В ДСК-кривой не проявляется характерного для разложения нистатина экзотермического пика (лишь при о температуре 200 С). В TG-кривой различие проявляется в том, что лиофилио зированная проба выше 250 С разлагается быстрее, чем физическая смесь.

Комплексообразование нистатина с

1

-ЦД также подтверждается ЯМР-исследованиями.

1428208

Время, дни Концентрация нистатина, мг/мл

0 5,0

1 4,8

2 4,75 5

5 4,70 б 4,6

7 4,55

8 4,5

10 4,5 10

12 4,5

21 4,1

Растворы на второй день начинают опалесцировать. Отбор проб осуществляли после встряхивания раствора.

Пробу разбавляли 400-кратным количеством этилового спирта и затем фотометрировали. Расчет осуществляли иэ имеющихся (кажущихся) при Ъ„

= 304+1 величин экстинкции.Послехранения в течение 3-х недель водного раствора еще имеется свыше 807. всего количества биологически активного вещества. Высоким значениям экстикции принадлежат высокие значения активности, Пример 4. Получение комплекса нистатина с 11-циклодекстрином в гетерогенной фазе.

9 r 1(-циклодекстрина (содержание 30 воды 1,5Х) и 1 г нистатина (биологическая активность 5033 Н/мг) гомогенизируют друг с другом в фарфоро1 вой ступке при комнатной температуре.

Полученную смесь суспендируют в 6 мл

507.-ного этанола. Через несколько минут суспензия внезапно становится твердой. Вещество размельчают и для удаления следов воды и растворителя сушат в эксикаторе над пентоксидом 40 фосфора. На следующий день твердый комплекс измельчают в порошок, Получают продукт с содержанием биологически активного вещества 10 вес,7 (биологическая активность 45 Е/мг). 45

Полученный комплекс при термоаналитических исследованиях по сравнению со смесью показывает такие же отклонения, как и приготовленный по примеру 3 путем лиофилизации комплекса.. Исследовали растворимость соответствующего количеству биологически активного вещества 10 мг/мл количества комплекса нистатина с -ЦД и основ55 ного нистатинового материала в 15 мл дистиллированной воды при 37 С, Ðàñтворы перемешивали с помощью магнитной мешалки, совершающей 150 оборотов в минуту. В различные моменты времени отбирали пробы, отфильтровывали и исследовали спектрофотометрически содержание в них биологически активного вещества, Комплекс нистатина с -ЦД, мг/мл

9 0

7,2

7,8

7,4

7,2

6,0

Время, мин

5

Спектр отобранных из водной суспенэии основного нистатинового материала проб не оценивали. Спектр отобранной в течение первых 5 мин пробы идентичен спектру нистатина, позднее наблюдается прогрессирующее расложение, Сначала деформировался максимум около 290 нм и затем полностью исчез, и в области меньших длин волн появился новый максимум, что позволяет сделать вывод о повреждении конъюгированной аморфной системы.

Пример ° Получение комплекса нистатина с (-ЦЦ в гетерсй енной фазе путем лиофилизации.

8 г It -ЦД (содержание воды 1, 57) о при 40 С растворяют в 80 мл воды и к раствору добавляют 2 г (1,16 ммоль) нистатина. Суспенэию перемешивают о в течение 24 ч при 40 С, затем смесь обезвоживают путем лиофилизации. Получают в виде желтого рыклого порошка 10 г продукта, спектрометрически измеренное содержание биологически активного вещества в котором состав ляет 207. Биологическая активность

950 Е/мг.

B продукте мольное соотношение между нистатином и II --ЦД составляет

1:3. Согласно рентгенодифрактометрическим исследованиям комплекс имеет аморфную структуру. Обработанное таким же образом, но без $-Ug, основное вещество сохраняет свой кристаллический характер, его рентгенодифрактограмма полностью идентична таковой основного вещества, а биологическая активность значительно хуже.

Если получают описанным образом комплекс с более высоким содержанием биологически активного вещества, то рентгенодифрактограмма показывает характерный для кристаллического нистатина пик.

1428208

Для исследования растворимости комплекса 500 мг его перемешивают в течение 5 мин в 10 мл воды при комнатной температуре ° В фильтре спек трофотометрически обнаружена концентрация нистатина 4,5 мг/мл.

Пример 6. Получение комплекса амфотерицина Б с -ЦД.

10 r )-циклодекстрина (содержание воды 1,57) растворяют в 90 мл дистиллированной воды Нри 37 С. К

О раствору добавляют 200 мг амфотерицина Б. Смесь интенсивно перемешивают 2 ч, затем отфильтровывают осадок желтого цвета, фильтрат лиофилизируют.Получают 10r продукта, спектрофотометрически измеренное содержание амфотерицина Б в котором составляет 0,6-0,8 вес.X. Комплекс представляет собой желтый рыхлый порошок, который в воде быстро растворяется с образованием прозрачного раствора. Полученный раствор имеет концентрацию 0,6-0,8 мг/мл 25 амфотерицина Б и может неограниченно разбавляться водой или физиологическим раствором хлорида натрия без выпадения в осадок твердого вещества или помутнения раствора.Раствор хранят при комнатной температуре в течение 6 дней и спектроскопически исследуют: содержание в нем биологически активного вещества неизмененное. . Пример 7. Определение проти35 вогрибкового действия полученных комплексов как тотчас после получения, так и после хранения в условиях, при которых не .защищенное за счет комплексообразования биологически активное вещество претерпело уже значительные потери активности. а) Комплекс флавофунгина с ) -циклодекстрином.

Противогрибковое действие водного раствора этого комплекса исследоI вались на 6 бактериях и 13 гифомицетах, Результаты представлены в табл. 2.

В расчете на флавофунгин минимальная подавляющая концентрация в каждом случае была 10-25 скг/мл, что соответствует активности не связанного комплексно биологически активного вещества. Особенно нужно отметить, что вещество активно также против фитопатогенных грибков, т,е. применение

Ф против грибковых поражений растений обосновано. Комплексносвязаннае биологически активное вещество действует в такой же концентрации, как и флавофунгин. Исследования осуществляли методом диффузии на агаре. Комплекс имеет то преимущество, что для приготовления растворов не требуется никаких энергетических растворителей (3МФ или ЧМСО). Эти растворители действуют именно подавляюще на некоторые грибы, поэтому при измерениях нужно уменьшать концентрацию растворителя путем рабавления водой до значения, не действующего уже подавляющее. На практике, например, допустйма концентрация ДМСО ниже 1Х. Некоторые полиены, склонны к осаждению при такого рода разбавления, т.е. при приготов-. лении необходиьап: для исследований растворов часто сталкиваются с препятствиями. Рекомендуется вещество превращать в порошок и приготовление раствора, а также его разбавление воцой осуществлять всегда непоср дственно перед измерением.

Концентрация флавофунгина в каждом случае составляет 10-25 мкг/мл.

Появляющиеся при приготовлении раствора из флавофунгина проблемы беспредметны при применении комплекса. б) Комплекс нистатина с g ПД.

Биологическое оценочное измерение осуществляли с помощью агар-диффузионного метода при применении

Candida albicanв в качестве тесторганизма. Компл ксы растворяли только в воде, нистатин — в содержащем хлорид кальция метаноле.

Растворы разбавляли водой, Спектрофотометрически измеренное содержание биолсгически активного вещества и биологическая активность некоторых комплексов показаны э табл. 3.

Используемое для комппексообразования основное нистатиновое вещество имело биологическую активность

5033 Е/мг. в) Комплекс амфотерицина Б с -ЦД.

Противогрибковую активность этого комплекса исследовали с помощью агар-диффузионного метода и СапйЫа

albicans в качестве тест-организма.

По отношению к амфотерицину Б минимальная подавляющая концентрация была меньше 5 мкм/мл, что соответствует активности не связанного ком142820.8

10 плексно биологически активного вещества.

Пример 8. Изучение поглощения (всасывания) комплексов полиено5 вых антибиотиков с циклодекстрином. а) Поглощение (всасываемость) ниг статина из применяемого перорально комплекса Нистатина с J --ЦД, Всасывание биологически активного вещества исследовали на мышах, на модели сепсиса, вызванного путем внутривенного введения суспензии Candida

albicans. Сепсис в течение 2-3-х дней вызывал 100Х-ную смертность. Подопыт- 15 ные животные получали перорально приготовленный по примеру 3, содержащий

S нистатина комплекс. В параллельном опыте нистатин вводили внутривенно. Для обеих групп определяли в расчете на необработанный контроль удлинение продолжительности жизни (см.табл.4).

Если сравнивать применяемые в виде комплекса перорально дозы нистатина с вводимыми внутривенно дозами нистатина, которые вызывают примерно равное удлинение продолжительности жизни (табл. 4), последний столбец, 30 то можно сделать вывод, что из комплекса в среднем в кровеносное русло попадает 6,27. биологически активного вещества. В случае более высоких доэ (внутривенно 1,56 мг/кг, перорально

25 мг/кг) уменьшение продолжительности жизни сводится к слабой токсичности нистатина, б) Всасывание нистатина из подкожно вводимого комплекса нистатина с 40 -ЦД.

Самок СГЕ-крыс со средним весом

180 r обрабатывают нистатином, комплексом нистатина с ) -ЦЦ (содержание биологически активного вещества 87) и -ПД. Для этого из исследуемых веществ с помощью содержащего Твин 80 физиологического раствора хлорида натрия готовят суспензию и вводят ее подкожно. Связь между дозами и смертностью представлена в табл. 5.

Из обработанных комплексом животных при дозе 20 мг/кг 90Х погибает в течение 48 ч, из обработанных свободным нистатином животных при дозе

150 мг/кг в течение недели наблюдения не погибает ни одного. Для контроля 10 животным подкожно вводили столько (--ПД, чтобы получить погибающую на 907 группу с помощью комплекса (302 мг/кг). В течение недели наблюдения не погибло ни одного животного.

Из табл, 5 видно, что из комплекса нистатина с f-IQ при подкожном введении поглощается токсическая доза, в то время как свободный нистатин при подкожном введении вообще не поглощается или всасывается только в допустимой незначительной мере.

Всасываемость исследовали также путем измерения уровня его в крови, так как поглощенный, попавший в кровеносное русло, нистатин обнаруживается в УФ-спектре сыворотки крови.

При подкожном введении свободного нистатина дозой 200 мг/кг в крови ничего не обнаружено, в то время как комплекс уже при дозе 20 мг/кг дает хорошо измеряемый уровень в крови через: 2-4 ч после введения в крови было обнаружено 6-10 мкг/мл.

Пример 9. Снижение гемолиэирующего действия полиеновых антибиотиков путем комплексеобразования с (-ЦЦ, а) Комплекс нистатина с )-ЦД.

Гемолитическое действие нистатина, комплекса нистатина с )-ЦД (содержание биологически активного вещества S ) и )-ЦД исследовали на приготовленных из человеческой крови суспенэиях красных кровяных телец по методу Т. Tru и др. (J. Pharm Dyn 6, !

408-114, 1983). Результаты указываются в форме относящихся к 507-ному гемолиэу концентраций (ЕН о). Полученное для свободного нистатина значение (ЕН о = 57 мкг/мл) показывает совпадение с известным значением EH о = 50 мкг/мл (J, Antibiotus, 22, 1080-1081, 1979), Для комплекса нисиатина с g -ЦЦ, в расчете на биологически активное вещество найдено значение ЕН = 115 мкг/мл, т,е. ком-, so плекс снижает гемолиэирующее действие нистатина наполовину. При исследовании концентрированной зависимо" сти гемолитического действия обнаруживается, что комплекс нистатина с

1 -ЦД вплоть до концентрации 70мкг/мл нистатина практически не действует гемолитически, в то время как свободный нистатин в этой концентрации вызывает уже 70Х-ный гемолиз, Также

1428208

Получение содержащих комплексы полиенового антибиотика и "-циклодекстрина лекарственных препаратов и средств защиты растений.

250 кг комплекса нистатина с — циклодекстрином дополняют тальком до 1 r (комплекс имеет биологическую активность 400 Е/мг).

Формула изобретения

Способ получения комплексов полиеновый антибиотик — -циклодекстрин, о т л и ч а к шийся тем, что практически нерастворимый в воде полиеновый антибиотик такой,как флавофунгин, нистатин или амфотерицин Б подвергают взаимодействию с высушенным (1,5Х воды) (-циклодекстрином при молярном соотношений 1:(2,8-34,5) соответственно в водной или водноспиртовой среде, причем количество воды лежит в пределе 1, 6-409 мл/1 ммоль антибиотика при перемешивании при 2050 С.

Таблица 1

Термостойкость,%

Время, дни о при 60 С при комнатной температуре флавофунгина комплекса флавофунгина с -ЦД

Остающееся активное вещество, Ж

100

100

100

100

43,8

100

100

99,5

99,5

96

96

94,8

85,4

95,0

70,5

95,0

79,2

94,9

78,7

94,8

75,0

94,5 исследовали гемолитическое действие соответствующего связанному в комплекс количеству -ЦЦ количества 1— циклодейстрина. При этом найдено, что 11-ЦД при совпадении с известными данными, вплоть до концентрации

1600 мкг/мл не вызывает никакого гемолиза. б) Комплекс иэ Амфотерицина и (-ЦД.

Гемолитическое дейс вие этого комплекса (получен согласно примеру 5, содержание биологически активного вещества О, 6X) исследовали указанным в п.а.) образом. Для свободного амфотерицина Б дается значение ЕН „

= 4,8 мкг/мл, которое совпадает с известными данными (ЕН z = 5 мкг/мл) °

Комплекс из амфотерицина и -ЦД вызывает в рассчитанной на биологически активное вещество концентрации

25 скг/мл только 2-,6Х-ный гемолиз, в то время как свободный амфотерицин в этой концентрации вызывает 92,4Х- 25 ный гемолиэ. смеси из флаво- комплекса флавофунгина и глюко- фунгина с -ЦД зы

1428208

Таблица 2

М1С, мкг/мл

Тест-органиэм

Дрожжи и дрожжеобразные грибы

78/К-16

ОК-1 1282

CBS 562

CBS 430

79/K 47

Cryptococo neoform

Sacchao cerevisiae

Candida albicans

Candida tropical

Candida crusce

25

10-25

5-10

Candida pseud tr.

Грибы

Cryptococe Asperg niger

СВБ 12648

Sacchar cerevisiae

Asperg fumigatus

CBS 11326

CBS 31948

CBS 19646

Патогенные грибы

CBS 34035

CBS 30338

Penicillium digitatum

Penicillium chrysogen

25-50

Sporotr, Schenku

Trichoph. rubrum

25

Trichoph. mentagroph CBS 50148

Trichoph (keratomyc ajelloi OK/

Epiderm.f1oññosïm

Microsp, gypseum

Microsp. persic

0KI, IV, CBS 10064

10-25

0KI

Патогенные в отношении растений грибы

Fusarium moniliform

DSN-ЕМВ-11778 10-25

DSN-INB 10975 10-25

Pusarium oxysporum

Минимальные подавляющие концентрации (М1С) комплекса флавофунгина с (-ЦЦ ин витро

1428208

Таблица 3

Биологическая активность, Е/Мг

Комплекс

351

7,5

362

7,6

399

8,0

450

8,4

Таблица 4

Нистатин, перорально, мг/кг

Нистатин, внутривенно,мг/кг длинение проолжительности изни Ж

6,09

33,2

30, 12

30,2

0,19

6,24

43,5

6,25

43,5

0,39

6,24

12,5

63,0

62,7

0,78

6,24

1,56

38,9

34,6

Таблица 5

Комплекс Нистатина с -ЦД

Нистатин

Доза мг/кг

Доза мг/к

Число животных

Число животных погибло через

I исследо- .погибло через

24 ч 48 ч 7дн. исследовано

24 ч 48 ч 7 дн.

10

0 0 0

0 0 0

0 0 0

° 0 0 . 0

20

ВНИИПИ Заказ 4870/59 Тираж 348 Подписное

Произв.-полигр. пр-тие, r. Ужгород, ул. Проектная, 4

10 10

20 10

100 5

150 5

Удлинение продолжительности жизни,Ж

Содержание биологически активного вещества (Уф-спектрофотометрическн),X

Поглощенный нистатин внутривенно (перорально в дозах 100X)