Штамм вируса гиссар для получения диагностических препаратов

 

Изобретение относится к вирусологии и представляет собой новый вирус семейства Буньявириде, предназначенный для получения антигенов и специфических иммунных препаратов, которые могут быть использованы для идентификации вновь выделенных вирусов и изучения иммунитета при помощи серологических реакций (РСК, РН и т.д.). По месту первого выделения вирус назван Гиссар. Выделенный штамм не имеет себе аналогов среди семейства Буньявириде. Вирус Гиссар № 5595-тадж. является вирусом новым для науки. Штамм депонирован в Государственной коллекции вирусов под номером 795. 1 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИ4Е СКИХ

РЕСПУБЛИК (я)э С 12 N 7/00

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4794877/13

I (22) 26.02.90 (46) 30.01.92. Бюл. N 4 (71) Таджикский научно-исследовательский институт эпидемиологии и гигиены и Институт вирусологии им. Д.И.Ивановского (72) Д.К.Львов, M.À.Êîñòþêîâ, 3.Е,Гордеева, А.У.Куйма, Т,М.Скворцова, В.Л.Громашевский, В.П.Булычев, О,А.Данияров и Ю.П.Кадашников (53) 576.8.094.29(088,8) (54) ШТАММ ВИРУСА ГИССАР ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ДИАГНОСТИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ

Изобретение относится к вирусологии и представляет собой новый вирус семейства

Буньявириде, предназначенный для получения диагностических препара Toâ (антигенов и специфических иммунных сывороток), которые могут быть использованы при идентификации выделенных вирусов и изучении иммунитета в серологических реакциях (реакция связывания комплемента РСК, реакция нейтрализации PH и т.д.).

Вирус (штамм 5595-тадж.) изолирован от аргасовых клещей Argas vulgaris. По месту первого выделения в Гиссарской долине вирусу дано название Glssar. Штамм депонирован в Государственную коллекцию вирусов под № 795.

Идентификацию вируса проводили методом электронной микроскопии. Выявленные вирусные частицы имели диаметр 50—

100 мм. Частицы располагались в большинстве случаев в межклеточных пространствах, Они имели мембрану шириной!

Ж 1708837 А1 (57) Изобретение относится к вирусологии и представляет собой новый вирус семейства

Буньявириде, предназначенный для получения антигенов и специфических иммунных препаратов, которые могут быть использованы для идентификации вновь выделенных вирусов и изучения иммунитета при помощи серологических реакций (РСК, РН и т.д,). По месту первого выделения вирус назван Гиссар. Выделенный штамм не имеет себе аналогов среди семейства Буньявириде. Вирус

Гиссар ¹ 5595-тадж. является вирусом новым для науки. Штамм депонирован в

Государственной коллекции вирусов под номером 795. 1 табл.

10 — 12 нм, состоящую из 2 осмиофильных и

1 осмиофобного слоев. К внутренней поверхности мембраны прилегали злектронноплотные структуры. Вирусные частицы имели морфологические и морфогенетические свойства, характерные для представителей Буньявириде.

При серологической идентификации вируса аналогов среди представителей семейства Буньявириде не выявлено. Результаты идентификации в РСК представлены в таблице, Выделенный штамм вируса Гиссар № 5595-тадж, имеет следующие характеристики;

Морфологические признаки. Вирус Гиссар изолирован из клещей А.vulgarls и адаптирован к организму новорожденных белых мышей, Инкубационный период при первичном выделении составлял 12 дней, в последующих пассажах сократился до 5 дней.

Инфекционный титр возбудителя для ново1708837

Иммунные асцитические жидкости к висам

Род я группа

Буньявера, Батаи, Каири

Калифорния, Тягиня, Инка

Сиимбу, Акабане

Бвамба

Буш — буш

Махогани Хаммок

Патоис

Бакау

Кхаенг-Кхой

Неаполитанская лихорадка

Сицилийская лихорадка

КГЛ, Хазара, Хасан вера уньявирус

Калифорния

Сиимбу

Бвамба

Капим

"3 а ма

Патоис

Бакау н/группированные

Москитные лихорадки

Флебовирус

Крымская геморрагическая лихорадка н/груп пированные! аировирус

Вирус болезни овец

Най оби, гбе рожденных белых мышей составлял 5,6 19

Ы 50/0,02 мл.

Антигенные свойства. Штамм обладает антигенными свойствами — при введении . лабораторным животным (белым мышам) вызывает образование комплементсвязывающих антител в титре 1:512, преципитирующих 1:8. Штамм не имев; антигенного родства ни с одним вирусом.

Геммагглютинирующие свойства, Не агглютинирует эритроциты гуся.

Патогенные свойства. Вирус вызывает гибель новорожденных белых мышей и крыс при внутримозговом заражении.

Штамм М 5595-1адж. при заражении лабораторных животных внутрибрюшинно и подкожно (взрослые белые мыши, белые крысы, морские свинки, кролики) вызывает образование комплементсвязывающих и преципитирующих антител.

При экспериментальном заражении этим штаммом диких птиц — малых горлиц установлена вирусемия с последующим образованием комплементсвязывающих антител, Патогенность вируса Гиссар для человека не известна, но при изучении иммунострук-, ры населения выявлено наличие антител у 2.67, обследованных в титре 1:8—

1:б4, Полученные данные вирусологическлх, серологических и экспериментальных исследований позволяет сделать вывод, что заявляемый штамм вируса Гиссар является новым вирусом семейства Буньявириде.

Для получения диагностических препа5 ратов штамм М 5595 — тадж. размножают, например, путем внутримозгового заражения новорожденных белых мышей. В этом случае диагностический антиген готовят путем сахарозо-ацетоновой экстракции мозга

10 новорожденных белых мышей, взятого на высоте клинических проявлений заболевания.

Диагностическую иммунную сыворотку (иммуноасцитическую жидкость) готовят по

15 методу A.Н.Поляковой.

Пример. Лабораторным животнымвзрослым белым мышам-самкам проводится шес .икратная иммунизация с интервалом s 7 дней, способ введения

20 вируса внутрибрюшинный. Объем вводимой вируссодержащей суспензии 0,1 мл.

Суспензию перед введением смешивают с равным объемом полного адьюванта Фрейнда. Через сутки после 6-й иммунизации

25 внутрибрюшинно вводят асцит (Sarcoma18G Т С). Спустя 12 — 14 дней после введения асцита получаем ИАЖ, содержащую комплементсвязывающие антитела в титре

1:128-1:512 в РСК.

30 Формула, изобретения

Штамм вируса Гиссар ГКВ М 795 для получения диагностических препаратов.

1708837

Продолжение таблицы

П р и м е ч а н и е: В реакции связывания комплемента не было выявлено антигенных связей с перечисленными в таблице Буньявирусами, в то время как с гомологичной сывороткой исследуемый антиген работал в титре 1:256 — 1:512.

Составитель Т.Скворцова

Техред М.Моргентал Корректор M.Øàðîøè

Редактор А.Долинич

Заказ 403 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101