Способ дифференциальной диагностики хронического обструктивного бронхита и аллергической бронхиальной астмы

 

Изобретение относится к медицине, в частности к аллергологии и пульмонологии. Для повышения точности и снижения травматичности способа окрашивают 1-анилинона$талин-8-сульфонатом лимфоциты крови больного, измеряют поляризацию флуоресценции АНС и при значении этого показателя 0,167 и менее диагностируют хронический обструктивный бронхит, а при значении 0,170 и более - аллергическую бронхиальную астму; Способ прост в использовании, может быть использован при массовых обследованиях, точность диагностики 95%.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУЕЛИК (51)5 G 01 N 33/52 .

ГОСУДАРСТ8ЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

>

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ.(21) 4137568/14 (22) 16.10.86 (46) 15.02.92. Бюл. M 6 (71) Институт клинической иммунологии. СО

АМН СССР (72) С, Ю. Черкашин, И. Н. Нагорная и В, П.

Лозовой (53) 616.07(088.8) (56) Авторское свидетельство СССР

М 827032, кл. А 61 В 10/00.

{54) СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛ6НОЙ ДИАГНОСТИКИ ХРОНИЧЕСКОГО ОБСТРУКТИВНОГО БРОНХИТА И АЛЛЕРГИЧЕСКОЙ

БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМЫ

Изобретение относится к медицине, в частности к аллергологии и пульмонологии и может быть использовано для дифференциальной диагностики хронического обструктивного бронхита и аллергической бронхиальной астмы в период ремиссии заболевания.

Целью изобретения является повышение точности и снижение травматичности способа.

Способ осуществляют следующим образом.

Больного с бронхоспастическим синдромом обследуют в период клинической ремиссии. У больного производят забор 2 —,3 мл венозной крови в пробирку с гепарином (10 ед/мл крови). Наслаивают кровь на градиент смеси с иколл-верографина плотности l,078 г/см и центрифугируют в течение

40 мин при 400 g. Затем клетки собирают с интерфазного кольца и трижды отмывают в

>59 1?128?5 А1 (57) Изобретение относится к медицине, в частности к аллергологии и пульмонологии.

Для повышения точности и снижения травматичности способа окрашивают 1-анилинонафталин-8-сульфонатом лимфоциты крови больного, измеряют поляризацию флуоресценции АНС и при значении этого показателя 0,167 и менее диагностируют хронический обструктивный бронхит, а при значении 0,170 и более — аллергическую бронхиальную астму: Способ прост в использовании, может быть использован при массовых обследованиях, точность диагностики 95%. физрастворе с фосфатным буфером (рН 7.27,4) при 200 g 5 — 7 мин. Отмывают клетки раствором Хенкса и ресуспендируют в 0,20,4 мл раствора Хенкса (рН 7,4). Подсчитывают количество клеток s камере Горяева и доводят их концентрацию до(4 — 6) 10 кл,/мл. Чистота мононуклеаров при этом обычно составляет не менее 90 %, жизнеспособность клеток — 97-99%.

К 0,2 мл суспензии клеток при постоянном перемешивании добавляют 2 мкл 10 М раствора 1-анилинонафталин-8-сульфоната (АНС) в диметилформамиде. Конечная кон- центрация зонда в суспензии составляет l0 .

Пробу помещают в водяной микротермостат МТ-1,2 при 37 С, который располагают на магнитной мешалке MM-ЗМ, и перемешивают в течение 10 мин.

Затем клетки переносят в кварцевую кювету. Измерение интенсивности флуорес-. ценции параллельно и перпендикулярно по1712875 обструктивный бронхит с бронхоспастическим синдромом. При исследовании лимфоцитов крови значение РАНС равно 0,175, что свидетельствует об аллергической брон5

15 хиальной астме.

Больной проведено комплексное аллергологическое обследование. На основании полученных данных лабораторных и рентгенологических исследований, резко положительных результатов скарификационных проб с аллергеном домашней пыли серии N. l98, высокого содержания иммуноглобулина Е (830 МЕ/мл), обнаружения аллергоспецифических антител класса Е методом

РАСТ, данных спирографического исследования легких, выявившего состояние повышенной реактивности бронхов к ацетилхолину, положительной бронхолитической

cDормула изобретения

Способ дифференциальной диагностики хронического обструктивного бронхита и аллергической бронхиальной астмы путем исследования мембран лимфоцитов крови, отличающийся тем, что, с целью повышения точности и снижения травматичности, измеряют поляризацию флуоресценции зонда в суспензии лимфоцитов, при этом в качестве флуоресцентного занда используют 1-анилинонафталин-8-сульфонат, при значении этого показателя 0,167 и менее диагностируют хронический обструктивный бронхит, а при значенйи 0,170 и более — ал лергическую бронхиальную астму.

Составитель Н.Валеева

Техред М.Моргентал . Корректор Н.Король

Редактор А.Лежнина

Заказ 533 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-ЗЬ, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 ляризованного света проводят на флуориметре, например, MPF "Хитачи". Необходимую область возбуждения (400 нм) и флуоресценции(470 нм) выделяютс помощью монохроматоров. Угол между направлениями возбуждения и флуоресценции составляет

90О. Щели монохроматоров возбуждения и флоуресценции составляют 10 и.8 нм соответственно. Поляризатор возбуждающего света помещают в одном фиксированном положении перед кюветой. Поляризатор флуоресценции помещают после кюветы и фиксируют последовательно в положениях, соответствующих параллельно и перпендикулярно поляризованному свету флуоресценции (Рв и Fy); величину которого регистрируют на самописце, входящем в комплект прибора. Степень поляризации флуоресценции рассчитывают по формуле

Рц — Рг

Еп + Рг

Измерение флуоресценции для каждого больного проводят в дубле и рассчитывают среднеарифметический показатель, при его значении 0,167 и менее диагностируют хронический обструктивный бронхит, а- при значении 0,170 и более — аллергическую бронхиальную астму.

Пример 1,.Больная И,,41 год. Давность заболевания 2 года, обострение характеризуется затяжным течением и выраженным обструктивным синдромом с клиникой бронхиального удушья. Пробу крови больной исследовали предлагаемым способом.

В данном случае показатель поляризации флуоресценции составил 0,160, что свидетельствует о хроническом бронхите.

Больной проведен полный комплекс противорецидивного лечения бронхита и профилактических мероприятий, что.позволило избежать обострения заболевания в течение года и рецидива синдрома бронхиального удушья.

Повторные специальные аллергические исследования также не выявили сенсибилизации.

tl р и м е р 2. Больная Д., 42 года, обратилась с жалобами на периодичеСки возникающие приступы одышки с затрудненным выдохом, кашель.

Длительность заболевания 8 лет, лечится по 2-3 раза в год. Диагн.оз: хронический пробы и полной обратимости легочной обструкции при проведении фармакодинамического исследования, у больной диагностирована бронхиальная астма неинфекционно-аллергического генеза (БА А1-р), Данные

1 за хронический обструктивный бронхит отсутствуют.

Состояние больной улучшилось, приступы удушья прекратились после проведения курса специфической гипосенсибилизации аллергеном домашней пыли.

Применение предлагаемого сйособа в медицинской практике позволяет повысить точность дифференциальной диагностики до 95% и снизить его травматичность. Измерение РАНС занимает 5-7 мин на одного больного при массовом обследовании.