Способ размножения ягодных растений в культуре ткани

 

Изобретение относится к сельскому хозяйству , а именно к размножению ягодных растений в культуре тканей. Целью изобретения является повышение приживаемости 2 апексов, увеличение коэффициента размножения при одновременном улучшении качества адвентивных побегов. Цель достигается путем вычленения апексов, посадкой их на питательную среду для культивирования до получения первичных побегов. Побеги пересаживают на питательную среду для микроразмножения и культивируют на ней до получения адвентивных побегов, которые разделяют и культивируют до получения растений - регенерантов. При этом в процессе культивирования апексов и первичных побегов осуществляют воздействие на них электростатическим полем напряженностью 5-10 кВ/м. Способ позволяет увеличить приживаемость апексов , улучшить рост и количество адвентивных побегов. 2 табл. (Л С

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)ю А 01 H 4/00

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ 4 3

М

6д

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

1 (21) 4748338/13 (22) 13.07.89 (46) 30.03.92. Бюл. 1Ф 12 (71) Московская сельскохозяйственная академия им. К.А.Тимирязева и Республиканская плодопитомниководческая станция, (72) Н.Н.Третьяков, К.И.Каменская, Л.И.Гаврикова, Н.А.Голик и П.М.Малыхин (53) 581.143,6(088.8) (56) Методические указания по клональному микроразмножению красной и черной смородины. — М.. 1986; с.8 — 12. (54) СПОСОБ РАЗМНОЖЕНИЯ ЯГОДНЫХ

РАСТЕНИЙ В КУЛЬТУРЕ ТКАНИ (57) Изобретение относится к сельскому хозяйству, а. именно к размножению ягодных растений в культуре тканей. Целью изобретения является повышение приживаемости

Изобретение относится к сельскому нозяйству, а именно к способам размножения ягодных растений в культуре тканей, Известны способы улучшения жизнедеятельности растений путем электростимулирования, В указанных решениях улучшение жизнедеятельности достигается путем пропускания токов через растения, электростимуляция осуществляется контактным способом. Работу проводят с растени-. ями, выращиваемыми в открытом и закрытом грунте, таких как подсолнечник, томаты, огурцы, Известен также способ регуляции роста каллуса табака (в стерильных условиях) пу.тем пропускания слабых токов. Для осуществления способа используют две системы,, Ы,„1722317 А1 апексов, увеличение коэффициента размножения при одновременном улучшении качества адвентивных побегов. Цель достигается путем вычленения апексов, посадкой их на питательную среду для культивирования до получения первичных побегов. Побеги пересаживают на питательную среду для микроразмножения и культивируют на ней до получения адвентивных побегов, которые разделяют и культивируют до получения растений — регенерантов. При этом в процессе культивирования апексов и первичных побегов осуществляют воздействие на них электростатическим полем напряженностью 5-10 кВ/м, Способ Б позволяет увеличить приживаемость апексов, улучшить рост и количество адвентивных побегов. 2 табл, проводников, с одной из которых связан положительный электрод, а с другой — отрицательный. Первая система проводников находится в контакте с питательным субстратом, вторая соединена с каллусом. Контакт осуществляется с помощью тонких . серебряных наконечников, предварительно простерилизованных в автоклаве. Токи п ропускают величиной 1 и 2 мкА между средой и каллусом табака, что способствует заложеwe побегов в каллусе и усиливает его рост.

Стимуляция роста каллуса составляет 5007ь, а заложение побегов несущественно, Недостатками способа являются его до. роговизна, поскольку наконечники выполнены иэ драгоценных металлов, и большая трудоемкость (необходимость введения электродов в каждую пробирку).

1722317

Наиболее близок к предлагаемому способ ускоренного размножения черной и красной смородины..

Недостатками прототипа являются на этапе введения в культуру меньшая приживаемость апексов и слабое развитие регенерантов: на этапе микроразмножения— образование меньшего количества адвентивных почек и побегов и плохое их качество.

Цель изобретения — повышение приживаемости апексов, увеличение коэффициента размножения при одновременном улучшении качества адвентивных побегов.

Поставленная цель достигается тем, что регенерация побегов из апексов и размно-. жение микропобегов ягодных растений, находящихся на питательной среде, содержащей цитокинины, проводится в электростатическом поле напряженностью

5 — 10 кВ/м в стерильных условиях бесконтактным способом. Под действием электростатического поля увеличиваются аксиальные градиенты побегов. что приводит к улучшению их функционального состояния, и следовательно, к интенсификации роста и развития.

Пример 1. Апексы смородины, взятые с одревесневших побегов в зимне-осенний период, сортов Минай Шмырев, Сеянец Голубки помещают на среду в пробирки на среду Мурасиге-Скуга с добавками по 0,5 мг/л тиамина, пиридоксина, никотиновой кислоты,1,0 мг/л аскорбиновой кислоты, 100 мг/л мезоинозита, 1,0мг/л БАП,,30 г/л сахарозы и 6 г/л агар-агара, Пробирки ставят в электростатическое поле. Экспериментально выяснено, что максимальный стимулирующий эффект достигается при напря>кенности электростатического поля 5 кВ/м на этапе введения в культуру и 10 кВ/м на этапе микроразмножения. При этом отрицательный полюс источника питания соединяют с металлической сеткой, находящейся над растительным объектом, на высоте 25 — 30 см. Положительный полюс подсоединяют к алюминиевой пластинке, находящейся под растительным объектом, Растительные объекты находятся в пробирках или колбах.

Для осуществления способа необходима следующая аппаратура: генератор высокого напряжения В-5-24, алюминиевая пластинка, токопроводящая сетка с ячейками 2х2 мм и провода.

Воздействие электростатического поля на растительные объекты осуществляют на протяжении всего пассажа {в течение 30 дней). Это приводит к увеличению приживаемости апексов и улучшению качества pereнерантов, что проявляется в образовании большего количества листьев и увеличении

10 высоты микропобегов (см. табл.1).

Особенно сильное стимулирующее влияние электростатического поля проявляется на этапе микроразмножения, Пример 2. Регенеранты сортов смородины Зеленая дымка, Минай Шмырев и М

3 — 36-69, полученные на этапе введения в

15 культуру, были высажены на свежеприготовлен ную среду Мурасиге-Скуга, содержа25 ствуют в течение 30 дней, в результате усиливается рост и развитие микропобегов и увеличивается дополнительчая пролиферация пазушных почек (см. табл.2).

Предлагаемый способ позволяет повысить приживаемость апексов, увеличить коэффициент размножения при одновременном улучшении качества адвентивных побегов.

Формула изобретения

35 Способ размножения ягодных растений в культуре ткани, включающий вычленение апексов, посадку их на питательную среду для культивирования до получения первичных побегов, пересадку их на питательную

40 среду для микроразмно>кения и культивирование до получения адвентивных побегов, разделение адвентивных побегов и последующее культивирование их до получения растений-регенерантов, отличающийся

45 тем, что, с целью повышения приживаемости апексов, увеличения коэффициента размножения при одновременном улучшении качества адвентивных побегов, при культивировании апексов и первичных побегов

50 осуществляют воздействие на них электростатическим полем напряженностью 5 — 10 к В/м.

20 щую те же добавки, что и в примере 1.

Содержание БАП составляет до 3 мг/л. Пробирки с регенерантами помещают в электростатическое поле. Электростатическим полем на этапе микроразмножения воздей1722317

Таблица 1

Влияние электростатического поля напряженностью 5 кВ/м на развитие апексов смородины ($ к контролю)

Табл ица 2

Влияние электростатического поля напряженностью 10 кВ/м на рост и развитие побегов смородины в стерильной культуре (ф, к контролю)

Составитель Л.Гаврикова

Редактор Л.Пчолинская Техред М.Моргентал Корректор Н,Ревская

Заказ 1002 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР . 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул.Гагарина, 101