Способ определения иммунных нарушений при ревматоидном артрите

 

Использование: изобретение относится к области медицины, в частности к иммунологии и внутренним болезням, и может быть использовано в оценке иммунологических нарушений при ревматоидном артрите. Целью изобретения является повышение точности определения. Поставленная цель достигается исследованием реактивности нейтрофилов в индуцированном НСТ-тесте с использованием в качестве стимуляторов иммунодепрессантов и иммуномодуляторов. По характеру стимуляции оценивается состояние иммунитета. Высокая активация клеток только иммунодепрессантами свидетельствует о гиперактивации В-лимфоцитов, недифференцированная высокая активация клеток иммунодепрессантами и модуляторами иммунитета свидетельствует о гипоактивном типе нарушения.

союз советских

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)з G 01 N 33/53

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

flO ИЗОБРЕТЕНИЯМ И. ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4789546/14; 4789683/14 (22) 08.02,90 . (46) 07.07.92. Бюл. М 25 (71) Казанский медицинский институт им.

С.В.Курашова (72) А.И.Рахматуллина и И.Г.Салихов (53) 615.375 (088.8) (56) Клиническая иммунология и аллергология. Т, 2, М.: Медицина, 1986, с. 358-359. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ MMMYHHblX

НАРУШЕНИЙ ПРИ РЕВМАТОИДНОМ АРТРИТЕ (57) Использование: изобретение относится к области медицины, в частности к иммунологии и внутренним болезням, и может быть

Изобретение относится к области медицины, в частности к иммунологии и внутренним болезням, в именно к способам диагностики иммунных нарушений при ревматоидном артрите (PA).

Целью изобретения является повышение точности определения.

Поставленная цель достигается применением Н СТ-теста восстановления нитросинеготетраэолия нейтрофилами с использованием индифферентного стимулятора — зимоэана в лекарственных препаратах, используемых в терапии заболевания: иммунодепрессанта проспидина и иммуномодулятора диуцифона.

Предлагаемый способ реализуется следующим образом.

В индуцированном НСТ-тесте исследуемая реактивность клеток фагоцитарной системы в ответ на стимуляцию препаратами, имеющими разнонаправленное действие на

„„, Ц.„„1746316 А1 использовано в оценке иммунологических нарушений при ревматоидном артрите.

Целью изобретения является повышение точности определения. Поставленная цель достигается исследованием реактивности нейтрофилов в индуцированном НСТ-тесте с использованием в качестве стимуляторов иммунодепрессантов и иммуномодуляторов. По характеру стимуляции оценивается состояние иммунитета. Высокая активация клеток только иммунодепрессантами свидетельствует о гиперактивации В-лимфоцитов, недифференцированная высокая активация клеток иммунодепрессантами и модуляторами иммунитета свидетельствует о гипоактивном типе нарушения. иммунную систему; иммунодепрессант про- . спидин и иммуностимулятор диуцифон., Реактивы: renapw 100 ед/мл в фосфатном буфере, фосфатный буфер рН 7,0-7.2, стимуляторы: зимозан 10 г/мл, проспидин

10 г/мл, диуцифан 10 г/мл,0,27 раствор нитросиний тетразолий (НСТ), метанол, 2% раствор метилового зеленого.

Ход реакции: стенки лунок смачивают гепарином. Для опыта (спонтанная реакция) е первую лунку заливают 0,1 мл крови, 0,05 мл буфера и 0.05 мл НСТ.

Стимулированная реакция: вторую лунку наполняют 0,05 мл зимозана, третью

0,05 мл проспидина, четвертую 0.5 мл диуцифона в указанных концентрациях и по

0,05 мл КСТ в каждую лунку. Далее планшет помещают в термостат на 30 мин при 37 С.

Через 30 мин из каждой лунки готовят мазки по общепринятой методике и красят их метиленовым зеленым 15 мин, Считают в каждом мазке процент клеток, восстановивших

1746316

НСТ в диформазан, который в виде синих глыбок откладывается в цитоплазме нейтрофилов, ядра которых окрашены в бледно-зеленый цвет. Вычисляют индекс активации по соотношению количества клеток, восстановивших НСТ в индуцированном и спон- . танном тестах.

У 22 больных наблюдалась высокая активность процесса, высокий титр ревматоидндго фактора,.ЦИК, tg, внесуставные проявления заболевания, что было оценено как состояние патологической активации Влимфоцитов, требующее иммунодепрессивной терапии, У этой же группы больных в предлагаемом тесте ИА нейтрофилов составили: 7,3 — 2,2 на проспидин и 2,8-0,3 на диуцифон, В 10 таких случаях терапия проспидином была проведена со значительным клиническим эффектом.

Пример 1. Больная M.H., 48 лет.

Поступила в клинику с жалобами на боли во всех суставах, невозможность передвигать.ся из-за опухоли коленных суставов, утреннюю скованность в течЕние дня, похудание на 6 кг за месяц. Считает себя больной в течение 3 лет, когда после переохлаждения появились боли и припухлость в мелких суставах кистей. Лечилась стационарно, установлен диагноз PA. Постоянно принимает

НПВП, периодически физиолечение, Последнее ухудшение состояния связывает с простудой.

Обьективно: состояние средней тяжести, больная не ходит самостоятельно, питание пониженное, кожа и слизистые бледные, иктеричные. Отмечается незначительная дефигурация суставов кистей и коленных суставов за счет экссудативных явлений. Ограничены движения в локтевых и плечевых суставах из-за болей, Увеличены подчелюстные и подмышечные л/узлы до размера 1,5-1,5 см, мягкие, безболезненные, подвижные. Изменений со стороны внутренних органов не обнаружено.

Лабораторные данные; СОЭ 42 мм/ч;

Нв 8 6; Л 7000 мм и 4; с 56; л 27; м 13; СРБ

++; ДРФ++; lgA 2Б; IgM 4,0; IgG 16,1.

Рентгенологическая стадия Ш, Индекс активации в НСТ-тесте: 1,6; 0,3;

2,8 на зимозан, диуцифон и проспидин соответственно. ГиперреактивМый тип нарушения, Диагноз: РА с системными проявлениями, серопозитивный, активность Itl, медленно прогрессирующий, 1! стадия, ФН11.

Проведено лучение проспидином по схеме, НПВП, фйэиолечение, ЛФК. Состояние улучшилось, исчезли боли в суставах, утренняя скованность, сохраняются незначительное экссудативные явления в коленных суставах, Лабораторные данные: СОЭ

34; СРБ+; ДРФ+; IgA 0,1; IgM 1,0: IgG 8,1.

У 10 больных с невысокой активностью

5 процесса, нормальными или чуть измененными иммунологическими показателями на фоне длительной терапии НПВП и глюкокортикоидами, ИА в индуцированном

НСТ-тесте были одинаково высоки как на

10 иммунодепрессанты, так и на стимуляторы иммунитета и составили; 7,5 + 4,5; 2 + 7,7;

7 8+ 2,8 нэ диуцифон, проспидин и зимозан соответственно. Такой недифференцированный ответ клеток на эти препараты сви15 детельствует об утрате функциональной пластичности нейтрофилами на фоне длительного подавления синтеза эндогенного кортизола у больных и указывает на необходимость проведения иммуностимуля20 ции. В пяти таких случаях терапия диуцифоном дала значительный клинический эффект.

Пример 2. Больная Ч.А., 45 лет.

Поступила в клинику с жалобами на боли в

25 мелких суставах рук, локтевых суставах, чувство утренней скованности в течение 1,5 ч.

Считает себя больной 4 года. Заболела после перенесенной ангины, когда появились боли в мелких суставах рук. Лечилась стаци30 онарно, поставлен диагноз: РА. Принимала

НПВП и физиотерапию.

Объективно: состояние удовлетворительное, кожа и слизистые розовые, чистые, дефигурация суставов не отмечается, не35 сколько затруднены движения в локтевых суставах из-за болей, Изменений внутренних органов не ббнэружено.

Лабораторные данные СОЭ 33; Нв 10,7;

Л 6700 мм; и 4; с 58; л 28; м 16; э 4; СРБ++;

40 ДРФ++; ЦИК 0,038; IgA 2, 6; IgM 1,0; IgG

11,1.

Рентгенологически определяется И стадия заболевания.

Диагноз: РА, суставная форма, серопо45 зитивный, активность II, медленно прогрессирующее течение, t стадия, ФНО.

Индекс активации в НСТ-тесте составил: 12,0; 5 и 12,5 на эимозан, проспидин и диуцифон соответственно, Гипореактив50 ный тип нарушения. Проведено лечение

НПВП, физиотерапия, ЛФК, диуцифон, по схеме.

После лечения состояние улучшилось, исчезла утренняя скованность, боли в суста.

55 вах, восстановилась функция локтевых суставов, Лабораторные данные: СОЭ 24 мм/ч;

СРБ-; ДРФ+; ЦИК 0,03.

Таким образом, способ позволяет более целенаправленно определять тип нарушения и проводить лечение.

1746316

Составитель И,Башкаев

Техред М.Моргентал Корректор:Н.Король

Редактор Н.Бобкова

Заказ 2392 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул,Гагарина, 101

Формула изобретения

Способ определения иммунных нарушений при ревматоидном артрите путем исследования иммуннокомпетентных клеток крови, отличающийся тем, что, с целью повышения точности. способа, исследуют влияние диуцифона и проспидина на нейтрофилы крови в НСТ-тесте и при выявлении активации нейтрофилов только на действие проспидина определяют гиперактивный тип нарушения, а при равноценном результате

5 реакции клеток на проспидин и диуцифон определяют гипореактивный тип нарушения.