Способ получения производных бета-лактама
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ
РЕСПУБЛИН
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Н ПАТЕНТУ трет.бутилфенил;
Х вЂ” группа формулы: сн, СН1 ипи
R$ п и х
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И OTHPblTHRM
ПРИ ГННТ СССР
1 (21) 4613926/04 (22) 12.04.89 (31) 8808701.0 (32) )3.04.88 (33) .GB (46) 23.07.92, Бюл. « 27 (71) Фармиталиа Карло Эрба С.р.л.. (IT) (72) Пьерлуиджи Биссолино, Марко
Альпеджани, Этторе Перроне, Пьерджузеппе Орецци и Джованни Франчески (IT) . (56) Патент США « 443970, кл, 424 - 114, опуЬлик. 1984.
Европейский патент « 207447, кл. С 07 0 501/00, опублик. 1987. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ
bETA-ЛАКТйМА (57) ИзоЬретение касается гетероциклических веществ, в частности способа получения производных Р-лактама цефемового или пенамового ряда, оЬлаИзобретение относится к спосоЬу получения новых производных бета-лактама формулы где В.1 — хлор или метоксигруппа;
A - С<-С -алкил, фенил или
„., SU „„1750430 А3 (Я)S С 07 и 499/86, 01/02//
//A b1 K 31/43, 31/545
2 дающих свойством ингибировать эластазу человеческих лейкоцитов, что может найти применение в медицине.. Цель создание новых веществ указанного класса с повышенной стабйльностью.
Синтез ведут обработкой в органическом растворителе ба-метокси- или бсСхлорпенициллановой кислоты или 7о метокси- или 7 -хлор-3-метил-3-цеффем-4-карбоновой кислоты сначала гало идирующим агентом, затем реактивом
Гриньяра в присутствии Cu I или AICI при (-75) - (-50) О С (замещение карбоксила на ацил). Серу в цикле окисляют до сульфонила надкислотой с последующим возможным превращением 3метильной группы Р-лактама цефемового ряда. в необходимую замещенную группу.
Соединения по ингибирующему действию по отношению к эластазе человеческих лейкоцитов превышают известные в 2 раза по химической стабильности (19 ч) в 6 раз. где R< — метил, Ьромметил, ацетокси метил, метокСиметил, (1-метил-1,2,3,4-тетразол-5-ил) 1750430 тиометил или (2-метил-5оксо-б-гидрокси-2,5-дигидро-
1,2,4-триазин-3-ил)тиометил, которые оЬладают свойством ингибировать эластазу человеческих лейкоцитов и могут найти применение в медицине.
Известны производные бета-лактама, обладающие свойством ингибировать
1-лактамазу или эластазу.
Цель изобретения — получение новых производных бета-лактама, обладающих свойством ингибировать эластазу человеческих лейкоцитов с повышенной стабильностью.
Цель достигается тем, что согласно многостадийному способу получения производных бета-лактама формулы (I), заключающемуся в том, что соединение формулы
R) н, Е.,Х
3())H где R1 — имеет указанные для Х значения при условии, что R<— метил, обраЬатывают галоидирующим агентом в органическом растворителе, оЬразующееся соединение формулы
I где К, и X имеют указанные значения;
А — галоген, обрабатывают соединением формулы
AMgHal, (IV) где А имеет указанные значения;
На1 — галоген, в присутствии Cul или
AlCl в органическом растворителе при температуре от -78 до - 50 С, . окисляют оЬразующееся соединение obщей формулы
I где К, А и Х имеют указанные значения, надкислотой или ее солью при температуре от 0 С до комнатной и в случае необходимости целевой продукт в котором R - метил обрабатывают N-бромсукцинимидом в присутствии Q, Q азобис-изобутиронитрила в органическом
10 растворителе при температуре кипения с обратным холодильником и в случае необходимости образующийся целевой продукт, в котором, R < - бромметил, обраЬатывают уксусной кислотой или ее солью, метанолом или основанием и 5-меркапто-1-метил-1,2,3,4-тетразалом, или 3-меркапто-2-метил-5оксо-б-бензгидролокси-2,5-дигидро1,2,4-триазином и, при необходимости, удаляют Ьензгидрильную группу трифторуксусной кислотой в присутствии анизола с получением целевого продукта, где R -ацетоксиметил, метоксиметил (1-метил-1,2,3,4-тетразол5-ил)тиометил или (2-метил-5-оксо6-гидрокси-2,5-дигидро-1,2,4-триазин-3-ил)тиометил.
Пример 1. (7k) Хлор-4-этил30 карЬонил-3-метил-3-цефем-1 1-диоксид (соединение 33).
Раствор (7 )-хлор-3-метил-3-цефем-4-карбоновой кислоты (515 мг) в
30 мл .сухого беязола перемешивают о при 7 С в течение 45 мин в присутствии осалил хлорида (0,38 мл) °
После удаления летучих под вакуумом получают сырой 1 ® -хлор-4-хлоркарбонил-3-метил-3-цефем.
MK (I
45 мида этилмагния (1,5 мл). Через
5 мин реакционную смесь выливают в ледяную воду и последовательно промыли водным раствором NaHCO и крепким раствором соли. Органический слой
50 сушат Na
Указанную смесь растворяют в
55 смеси 0,05 и рН 7 фосфатного буфера и. этилацетата 1:2, общий объем 9 мл и обрабатывают при 0 — 5 С м-хлоро надбензойной кислотой (385 мг).
50430
10!
-20
25 . (0,15 мл) и ацетата серебра (1TG мг).
Реакционную смесь смешивают с
3 5":E1:ÎAñ и последовательно промывают водным раствором NaHCOq и насыщенным раствором соли. После осушивания с помощью Na2SO и удаления растворителя с последующей хроматографией
40 на силикагеле получают указанное в назвайии соединение (45 мг) в виде о белого порошка, Т.пл. 134 С.
Ик (КВг) 1 „„с. 1780, 1732
1687 см
SIMP (200 МГц, С1!С1 )Р: 1,28 (9H, S), 2,08 (ÇH,S), 3,57 (ЗН,S), 3;83 (1H,d I = 18,5 Гц), 4,00 (1H dd,I
18,5 и 1,5 Гц), 4,43 (2Н, ABq„ рас.щепление внутренних линий = 1,9 Гц), 50 4,73 (1Н,И,1 = 1,9 и 1,5 Гц),5,20 (1Н,dd,I = 1,9 Гц) млн.долей.
МС(ГД) 359 м/ (М+)
Пример 5. 4-трет-Бутилкарбонил-(7Ы)-хлор-3- метил-З-цефем-1,155 диоксид (соединение 1).
Раствор (7<4)-хлор-4-хлоркатлонил3-метил-3-цефема (пример1,, 2,32 г),. в сухом ТГФ (80 мл) последовательно
I обрабатывают иодидом меди (1) 5 !7
После перемешивания при комнатной температуре в течение 1 ч реакционную смесь выливают в ледяную воду и последовательно промывают водным раствором метабисульфита натрия, водным раствором кислого карбоната натрия и крепким раствором соли. После осушивания с помощью Na ИК (CHC1> ) Макс 1780, I690 см ", Пример 2. 4-трет-бутилкарЬонил-(7ос)-метокси-З-метил-З-цефем-l,1диоксид (соединение 49). Раствор .(7 )-метокси-3-метил-3цефем-4"карбоновой кислоты (1,68 г)1 в сухом бензоле (100 мл) оЬрабатыва ют при 7 С сухим ДМФ (несколько капель) и оксалил хлоридом (1,26 мл). После перемешйвания в течение 45 мин, удаления летучих материалов под вакуумом получили сырой 4-хлоркарбонил-(7с )-метокси-З-метил-З-цефем. Этот материал смешивают с сухим ТГФ (50 мл) и обрабатывают при -70 С под атмосферой азота трихлоридом алюмийия (195 мг) и 1,43 М . 3 эфирным раствором хлоридом третбутилмагния (5,13 мл), После перемешивания в течение 15 мин при -50 С о реакционную смесь выливают в ледяную воду, последовательно промывают водным раствором NaHCO и крепким раствором соли и выпаривают досуха,. в результате чего получают сырой 4-трет-бутилкарбонил-(7<)-метокси-3-метил-цефем. Часть (300 мг) этого материала растворяют в этилацетате (70 мп) и.. обрабатывают при комнатной температуре м-хлорнадбензойной кислотой (570 мг). Через 1,5 ч реакционную смесь последовательно промывают водным раствором NaHSO>, водным раствором NaHCO> и крепким раствором соли. После осушивания с помощью Ма 304, удаления растворителя и хроматогра- фии на силикагеле остатка получают чистое целевое соединение (114 мг) в виде белого порошка, Т.пл. 128 С. ИК (СНС1 ) рдкс . 1785, 1685 см SIMP (200 Мгц, СВС1,) 3: 1,26 (9Н, S9)р 1у,70 (ЗН,S), 3,51, 3,93 (2Н, каждый d,I = 17 Гц), 3,56 (ЗН,В) 4,66 и 5,16 (каждый 1Н, d= 1,b Гц) млн.долей. MC (FD) 301 мlz (М"), 6 Пример 3. 3-Бромметил-4-третбутилкарбонил-(7 )"метокси-3"цефем1,1-диоксид (соединение 50). Раствор 4-трет-бутилкарбонил(7К)-метокси-З-метил-3-цефем-1,1диоксида (пример 2,130 мг), N-бромсукцинимида (NBS 100 мг) и о, х азо-бис-изобутиронитрила (AIBN, 5мг) в четыреххлористом углероде (20 мл) и дихлорметане (15 мл) кипятят в течение 2 ч. После удалейия растворителя и хроматографии на силикагеле получают указанное соединение (1. 0 мг) в виде белого порошка, ИК (CHC1> ) 1 щд „ . 17с!О, 1b90 см ЯМР (200 МГц,.С С1 )3: 1,31(9Н„ S), 3,56 (ЗН,S), 3,58 (1H, d, 1= 14,6 Гц), 3,79 и 3,91 (2Н,каждый d, I = 11,4 Гц), 4,28 (1Н,dd,I = 14,6 и 1,4 Гц), 4;76 (1Н,dd,I = 1,9 и 1,4 Гц), 5,20 (1Н, d,I = 1,9 Гц) МС (FD) 379 м/z (M ) . Пример 4. 3-Ацетоксиметил4-трет-Ьутилкарбонил-(7g)-метоксиЗ-цефем-1,1-диоксид (соединение 51). . Раствор 3-бромметйл-4-трет-Ьутилкарбонил-(7сс)-метокси-3-цефем-1,1— диоксида (пример 3,М мг ) в сухом ацетонитриле (5 мл) перемешивают при : комнатной температуре в течение 1 ч .::"в присутствии уксусной кислоты 1750430 (2,076 г) и 2М эфирным раствором . третбутилмагний хлорида {4,59 мл) при -70 С под атмосферой азота. Реакционную смесь оставляют при -50 С, затем выливают в ледяную воду. Через 10 мин перемешивания, экстракции этилацетатом, промывания органического слоя водным раствором NaHCOg, высушивания с помощью Ja Этот материал пропускают через короткую колонку с силикагелем, а затем обрабатывают м-хлорнадбензойной кислотой (2,5 г) в этилацетате при 10с C в течение ночи. Реакционную смесь разбавляют этилацетатом, последовательно промывают водным раствором NaHO>, водным раствором NaHCO>, водным раствором NaC1, осушивают (Na ИК (KBr )1 мс33с . 1773, 1687 см ЯМР (200 МГц, CDC1)) о : 1,26 (9Н S), 1 72 (3Н, ), 3 60 (1H d, I=18,1 Гц), 3,96 (1H,dd,I =-18,1 и 1,3 Гц), 4,76 (1H,dd, I=1,3 и 1,7 Гц), 5,32 (1Н,d,I=1,7 Гц) млн.долей. Пример 6. 3-Бромметил-4трет-бутилкарбонил-(7{3 )-хлор-3цефем-1,1-диоксид (соединение 2). Раствор 4-трет-бутилкарбонил(7с ) -хлор 3-метил-3-цефем -1, 1-диоксида (пример 5, 150 мг) в четыреххлористом углероде (40 мл) кипятят в течение 4 ч в присутствии NBS (114 мг) и AIBN (2 мг). После удаления растворителя и хроматографии получают указанное соединение (112 мг, плюс 40 мг исходного материала) в виде белого порошка. Т,пл. 155 С. ИК {КВ ) макс: 1795, 1690 см МС (FD) 383 м/ (М+). ЯМР (200 МГц, CDC1g): 1,31 (9H,S), 3,65 (1Н,d,I=18,1 Гц), 3,85 (2Н,АЪц,1=11,4 Гц), 4,32 (1Н,dd,1= 11,4 и 1,3 Гц), 4,88 {1H,dd,I=1,8 и 1,3 Гц), 5,37 (1Н,с1,1=1, Гц)млн. долей. U р и м е р 7. (6{3{,)-Бром-3-этилкарбонилпенам-l,!-диоксид (соединение 146), Раствор 6,6-дибромпенициллиновой кислоты (7,18 г) в дихлорметане обрабатывают при -20 С 2-пиридилдисульфидом (4,41 г) и трифенилфосфином (5,24 г), Реакционную смесь нагревают до комнатной температуры, растворитель удаляют под вакуумом и остаток (состоящий из сырого сложного эфира 2-пиридила исходного материала) используют для взаимодействия 15 при 75 С с 2М эфирным раствором бромида этилмагния (15,5 мл) в ТГФ (110 мл). Через 35 мин реакцию обрабатывают с помощью насыщенного водного раствора NH4C1 и экстрагируют 20 смесью 1:2 этилацетат/изопропиловый эфир. Органические экстракты дважды промывают водой, осушают Иа ВО и концентрируют. После хроматографии на силикагеле получают (Ы)-бром-3 этилкарбонилпенам (1,3 г) в виде белого порошка, Т.пл. 89 - 69 С. ИК (СНС1.,) „, : 1780, 1710 cM . ЯМР (90 МГц, CDCly)8: 1,10 (3Н, r I=7,5 Гц), 1,37 и 1,70 (каждый 3Н, Ь), 2,62 и 2,67 (2Н, каждый q,I= 7,5 Гц), 4,40 (1Н,S), 4,85 и 5,41 (каждый 1М,d I=2 Гц) млн, долей. Этот материал (100 мг) B дихлорметане (5 мл) перемешивают в течение 35 5 ч при 25 С в присутствии м-хлор,,о надбензойной кислоты (293 мг), Реакционную смесь последовательно промывают водным раствором NaHSO> и водным раствором NaHCOg . После удаления растворителя под вакуумом и флэш-хроматографии получают указанное соединение s виде желтоватого продукта (80 мг). Т.пл. 117 - 118 С. ИК (KBr)9»3< . l793, 1712 см . ЯМР {90 МГц, CDCljg: 7,{0 {3H,с, = 7,5 Гц), l,38 и 1,62 (каждый ЗН,Я), 2,70 (2H,q,I=7,5 Гц), 4,20 (1H,S), 4,70 и 5,21 (каждый 1H,d,I =1 7 Гц) млн.долей ° Пример 8. (6g)-Хлор-3-этилкарбонилпенам-1,!-диоксид (соедине-. ние 11Д. Раствор (бх)-хлорпенам-3-карбоксилата натрия (543 мг) в сухом ТГФ используют для осуществления реакции при -5 С в течение 1 ч с оксалил -o хлоридом (0,18 мл) в присутствии! 750"3 9 ДМФ (1 капля). Реакционную смесь выпаривают досуха, обрабатывают сухим ТГФ (10 мл), охлаждают под атмосфе" рой азота до -78 С и обрабатывают 5 иодидом меди (1) (402 мг) и 2М эфирным раствором бромида этилмагния (1,06 мл). После перемешивания в течение 15 мин реакционную смесь выливают в ледяную воду и зкстрагируют эфиром. Экстракты промывают водным "раствором NaHCO, осушают и выпаривают. После хроматографии на сйликагеле: получают (6М)-хлор-3-этилкарбонилпенам !5 (50 мг) в виде сиропа. ИК (CHC1>)1м c . 1778; 1705 см ЯмР (200 мГц, сВС1 ) 3 ; -1,05 (Зн, t,I=7,1Гц),1,41 и 1,62 (каждый ЗН, s), 2,58 и 2,62 (2Н, каждый q, I= 20 7,1 Гц), 4,36 (1H,S) 4,77 .и 5,29 (каждый 1,Й,Т=1,3 Гц) млн.долей. Полученный материал (20,иГ) растворяют в этилацетате (1 мл)" и осуществляют взаимодействие с. .м-хлорнад- 25 бензойной кислотой (8! мг) :Ъ течение 6 ч при комнатной температуре. После промывания 1М водным раствором МаНБО., насыщенным водным :раствором NaHCOy и соленым растворои"после-. 30 дующего удаления растворителя и хроматографии на силикагеле получают:указанное соединение в виде пенистого материала (17 мг). ИК (СНС1,) „,: 1 05, 1715 с;". З5 ЯМР (200 МГц, сос1 ) 8 : 1,08 (ÇH, t., I=7, 1 Гц), 1,39 и. 1, 62 (каждый 3H)S), 2,66 и 2,71 (2Й, каждый q, I= 7, 1 Гц), 4, 19 (1Н,S), 4,65 и 5, 19 (каждый 1Н,d, I=1,7 Гц) млн. 40 долей. П р и м е- р 9. 4-Этилкарбойил-70метокси-З-метил-З-цефем-1,1-диоксид (соединение 147). Раствор 7 4-метокси-3-метил-3цефем-4-карбонилхлорида (0,7 r), полученного по примеру 2, в сухом перегнанном этиловом эфире (20 мл) обрабатывают при -70 С под атмосферой азота йодидом меди (I) (0,54 г),50 Через 10 мин перемешивания в .реакционную смесь добавляют 2М эфирный раствор бромида этилмагния (2 мл). Реакционную смесь оставляют стоять до повышения температуры до -50 С, а затем выливают в ледяную о воду. После экстракции этилацетатом, промывания водным раствором NaHCO> и удаления растворителей остается остаток, который очищают методом флэш-хроматографии (S10, ЕсОАс/ /гексан), а затем обрабатывают мхлорнадбензойной кислотой (1,5 г) в холодном /О C/ этилацетате. Реакционную смесь перемешивают при 10 15 С в течение 1 ч, затем последовательно промывают водным раствором NaHC0g, водными растворами NaHC()-и NaC1. После осушйвания, Ил ВО и удаления растворителя и последующей Флэш-хроматографии получают ука занное в названии соединение (150 мг) в виде бледно-желтого масла, ИК (CHCl )) gyp . 1780, 1685 см -! ЯМР (200 МГц, .CDCly)8: 1,13 (3H,г, I=7 1 Гц), 1,96 (3H S), 2,66 и 2,90 (2Н, каждыйс1 1,1=18 и 7,1 Гц), 3,59 (3H,S), 3,60 (1Н,d, I= 17,6 Гц), 3,85 (1Н,dс, I=17,6 и 1,2 Гц), 4,65 (1Н,d,d,I=1,4 и 1,2. Гц), 5,14 (1Н,(3 I, =1,4 Гц) млй,долей. Пример 1О, 4-Трет-бутилкарбонил-/М-хлор-3-(1-метил-1,2,3,4тетраэол-5-ил)тиометил-3-цефем-1,1диоксйд (соединение 150), Раствор 3-бромметил-4-трет-бутилкарбонил-jig-хлор-З-цефем-1,1-диоксида (65 йг), полученного по примеру 6, в сухом. ацетонирпиле (5 мл) обрабатывают триэтиламином (0,025 мл) и 5-меркапто- 1 -метил -1,2,3,4-тетразолом (26 мг). Имеет место немедленная реакция (ТСХ койтроль). Растворитель удаляют под вакуумом и остаток очищают методом Флэш-хроматографии, в результате чего получают укаэанное в названии соединение в виде белого порошка (35 мг). Т.пл. 162 - 164 С. MK (KBr))eo c: 1790, 1690 см RHP (200 мгц, свс1,)h; 1,26 (9н, S) 3,76 и 4,08 (2Н, каждый d,I= 14,3 Гц), 3,93 (ÇH,S), 4,01 (1H,d, I=17,9 Гц), 4,26 (1H,dd,I=17,9 и 0,9 Гц), 4,85 (1Н,сЫ,I=1,7 и 0,9 Гц), 5,33 (1Н, 1,?=1,7 Гц) мл. ндолей. Пример 11. 4-Трет-бутилкарбонил-(7+)-метокси-3-(1-метил-1,2, 3,4-тетразол-5-ил) тиометил-3-цефем1,1-диоксид (соединение 151). Раствор 3-бромметил-4-трет-бутил карбонил-(704 -метокси-З-цефем-1,1диоксида (52 мг), полученный по примеру 3, в диметилформамиде (1 мл) обрабатывают 1 метил-1,2,3,4-тетоа- 1/50430 золил-5-меркаптидом натрия (ЗЬ мг) ° Через 10 мин реакционную смесь разбавляют этилацетатом и промывают крепким раствором соли. После удаления растворителя и флэш-хроматографии получают указанное соединение (30 мг) в виде белого порошка. Т.пл. 60 — 62 С. ИК (КВг) мс,кс: 1790, 1690 см ЯМР (200 Р1Гц, СПС1 ) : 1,2 (9Н, S) 3,78 и 4,05 (2Н, каждый d,I= 14,2 Гц) Х,56 (ÇH,S), 3,92 (1Н,d, 1= 17,8 Гц), 4,20 (1й,d,I=17,8 Гц), 75 (1H,br,S) 5, l7 (lH,d I.= 1,7 Гц) млн. долей. Пример 12. 4-Трет-бутилкарбонил-(7g) — метокси-3-(2-метил-5оксо-б-окси-2,5-дигидро-l 2,4-триазин-З-ил)тиометил-З-цефем-1,l-раохсид (соединение 153).. Раствор 3-бромметил-4-трет-бутилкарбонил-(7g)-метокси-З-цефем-l,lдиоксида (230 мг), полученного по примеру 3, в сухом ацетонитриле (50 мл) обрабатывают триэтиламином (О, 1 мл) и 3-меркапто-2-метил-5оксо-б-бензгидрилокси-2,5-дигидро1,2,4-триазином (2,75 мг). Через 20 мин растворитель удаляют и защищенное соединение очищают на хроматографической колонке с силикагелем. Его растворяют в дихлорметане (2 мл), а затем доЬавляют анизол (0,025 мл) и трифторуксусную кислоту (1 мл). Через l5 мин ТФА полностью удаляют под вакуумом и остаток обрабатывают дихлорметаном (1 мл). После добавления изопропилового простого эфира получают указанное соединение (175 мг) в виде белого порошка. Т.пл. 148 - 150 С.. ИК (KBr))ìàêc l790, 1690, 1640 (широкая см ) ЯМР (200 МГц, CDCl g) 1,28 (9Н, S), 3,63 и 4,19 (2Н, каждый d, I= 14,1 Гц), 3,56 (ЗН), 3,74 (ЗН), 3,83 (1H,d,1=17,8 Гц), 4,09 (1Й,d 178 Гц), 476 (1HbrS), 4,17 (1Н,d I= 17 Гц) млн.долей. Пример 13. 4-Трет-Ьутилкарбонил-(/g)-хлор-3-метоксиметил-3цефем-l,l-диоксид (соединение 6). Исходя из 1,l-двуокиси 3-бромметил-4-(трет-бутилкарбонил)-(7 )хлор-З-цефема, полученной в примере 6 и осуществляя нагревание в метанольном растворе, получают целевой продукт в виде белого порошка ИК (KBr) )Moke . 1788, 1690 см ", RMP (200 Мгц, CDC) )E : 1 26 (9H 5 с,)ф 3 28 (ЗН с,)» 3 75 (2Н с„,), 3,81 (1н,д.,т.=18,2 Гц), 4,04 дд.,I= 1 и 18,2 Гц), 4 82 (1Н м ) 5,35 (1H,д., I=1,8 Гц), Пример "4 4-(4-Трет-бутилфе10 нил) каРбонил-(7 ) -метокси-3-метил-3ц Фем-1,1-диоксид (соединение 169) Следуя процедуре, описанной в примере 2, и, используя 4-трет-бутилфенил-магнийхлорид в качестве реагента Гриньяра, получают целевое соединение в виде белого порошка. ИК (KBr), : 1780, 1675, к ЯМР (200 МГц, CDClg) Р: 1,34 (9Hó 20 с.), 1,66 (ÇH,с.), 3,53 (ЗН,c.), 3,58 (IHýд,I=18 Гц), 3,99 (1H, дм., 1= 18 Гц), 4,80 (1Н,м), 5,19 (1Н, д.,I = 1,7 Гц), 7 50 и 8,86 (4Н, два д.,1 = 8,6 Гц) . Пример 15. 7-Метокси-3-(1метил-1,2,3,4-тетразол-5-ил)тиолметил-4- фенилкарЬонил-З-цефем-l,l-диоксид. 30 Следуя процедуре, описанной в примерах 2,3 и 11, и, используя фенилмагнийхлорид в качестве реактива Гриньяра, получают целевой продукт в виде белого порошка. 35 ИК (KBr) „с: 1798, 1665 см ЯмР (200 мГц, свс1 )Й 3,49 (Зн, с.,) 3,80 (1H,ä.,I=14,4 Гц), 3,85 (ЗН, с.), 3,97 (1Н,д.,I=18,1 Гц), 4,09 (1н,д.,I=14,4 Гц), 4,38 (1Н, 40 дд.,I=1,3 и f8,1 Гц), 4,88 (1Н,м.), 5,17 (1Н,Л.,I=1,7 Гц), 7,4 - 7,9 (5Н,м). Потенциальные возможности лечеб45 ного деиствия ингибитора протеазы при лечении заболеваний; связанных с разрушением соединительных тканей, в последнее время привлекают все 50 более широкое внимание. Значительное число работ посвящено изучению ингибиторов эластазы человеческих лейкоцитов (НЬЕ), которая является основным деструктивным агентом при эмфиS5 земе легких и, вероятно участвует У . 1 в процессах, протекающих при ревматоидных артритах. Оказалось, что низкомолекулярные ингибиторы обладают целым рядом пре13 1750430 14 имуществ по сравнению с природными высокомолекулярными ингибиторами протеазы растительного или животного происхождения: их можно получить в достаточных количествах, им можно придать рациональную или оптимальную структуру, они не обладают антиген! ным действием и их можно применять орально или в аэрозолях. Многие из 10 установленных низкомолекулярных ингибиторов эластазы содержат реакционноспособные функциональные группы (хлорметилкетоны, изоцианаты), они могут взаимодействовать с функ- 15 циональными группами протеинов и поэтому могут быть довольно токсичными. В этом отнОшении потенциальный интерес представляют соединения Р-лактама, потому что будучи реакционно- 20 способными по отношению к протеазе серина„ они не токсичны при очень высоких концентрациях,. Предлагаемые соединения способа 25 отличаются высоким ингибирующим действием по отношению к HLE:. При испытании in virrv они обладают преимуществами по сравнению с известными ингибиторами на основе ° ° -лактамов. Кроме того, они обладают 30 нЕожиданно хорошей химической стабильностью при физиологических значениях рН, что дает дополнительные преимущества при испытаниях в условиях in vivu. Таким образом, например, соединение 51 (пример 4) превосходит при сравнении соответствую. щий сложный цефалоспорановый эфир (эталон) по улучшенной химической стабильности (1/2), более высокой 40 скорости образования комплекса HLL (Кр„), более низкой скорости диссо-циации (К ц ) и лучшей "эффективности" (меньшая константа кажущейся диссоциации комплекса HLE-ингиби45 тор в стационарном состоянии, К, ).. о Химическую стабильность при 37 С, 0,05 М фосфатного буфера рН 7,4 (5Ф ДМСО в качестве солюбилизирующе- 5 50 го средства) определяют по временной зависимости расхода исходного материала (кинетика псевдобыстрого по рядка, 10 мМ исходная конц.) методом ГПЖХ (стационарная фаза W, àrònn Parcisphere С18, 110 4,7 мм вн д., подвижная фаза А, рН 2,5 0,1 М фосФатный буфер, подвижная фаза В, Ь0 :40 фаза A/ÌåÑN, УФ-детектирование при Я = 2)4 нМ)„ Кинетические параметры Ш,Е (Са1— В ос!lelll. Iie)ñ 702738) определяют при 37 С, 0,027 M рН 7,4 фосфатный byфер, 1i ДМСО, li MerN, NnC1 (1 0,25), по выделению 7-амино-4-метилкумарина (флуоресцентное детектирование) из N-метоксисукцинилаланилпропил-валил-7-амидо-4-метилкумарина s качестве субстрата в соответствии со следующими уравнениями <и l > (k<) Kgn Г11 К=К + — — е — — — — —— QH 1+I Sj/Ê„, E+(S)/К 1, 5 о 1+tSJ/К +(1)К 55 C где (VJ, (Ij, (Б) — концентрации продукта, ингибитора и субстрата; V - скорость в стационарном состоянии; V - скорость в нулеZ вой момент времени; .V - скорость при (1) =0; К - константа Йихаэлиса для пары Wl энзим-субстрат (независимо определенная в тех же экспериментальных условиях)., Благодаря своей высокой ингибирующей активности по отношению к эластазе и ничтожной токсичности предлагаемые соединения могут Ьыть использованы для лечения воспалительных и дегенеративных заболеваний, вызванных протеолитическими энзимами у млекопитающих, включая человека. Соединенйя данного изоЬретения могут быть использованы для получения препаратов, применяемых для предотвращения или прекращения распространения заболеваний, вызванных протеолитическим распадомлегких и соединительных тканей, для снижения воспаления и жара и снятия болей. Такими заболеваниями эмфизема, синдром острого респираторного заболевания, воспаление Ьронхов, ревматоидный эртрит, остеоартрит, инфекционный артрит, ревматическая 15 1750430 ;лихорадка, спиндилез, подагра, волчанка, псориаз. R) p N POAI () 0 ЪФ н 6 5 H.) % 4 н ре Я, Х сн СН или где „, А и X имеют указанные значения, надкислотой или ее солью при темперао туре от 0 С до комнатной и в случае необходимости целевой продукт, в котором R< - метил, обрабатывают N-! бромсукцинимидом в присутствии oC,о (I азо-бис-изобутиронитрила в органическом растворителе при температуре кипения с обратным холодильником и в случае необходимости образующийся целевой продукт, в котором и - бромметил, обрабатывают уксусной кислотой или ее солью, метанолом или основанием и 5-меркапто-1-метил1,2 3,4-тетразолом, или 3-меркапто2"метил-5-оксо-6-бензгидрилокси2,5-дигидро-1,2,4-триазином и, если необходимо, удаляют бензгидрильную группу с помощью трифторуксусной кислоты в присутствии анизола с получением целевого продукта, в котором К -ацетоксиметил метоксиметил (1-метил-1,2,3,4-тетразол-5ил)тиометил или (2-метил-5-оксо6-гидрокси"2,5-дигидро-1,2,4-триазин-3-ил) -тиометил. 40 формула изобретения Способ получения производных beта-лактама общей формулы где R < - хлор или метоКсцгруппа; А — С -С алкил, фенил или 4трет. бутилфенил; X - -группа формулы где R - метил, бромметил, ацетоксиметил, метоксиметил (1— метил-1,2,3 4-тетразол5-ил)тиометил или (2-метил5-оксо-б-гидрокси-2,5-дигидро-1,2,4-триазин-3-ил)тио- 3$ метил, отличающийся тем, что соединение общей формулы где R имеет „указанные значения l X — имеет приведенные для X значения при условии, что R ä - 50 метил, обрабатывают галоидирующим агентом в органическом растворителе, образующееся соединение общей формулы д < и X имеют указанные значения; reR Х А1 - галоген, обрабатывают соединением формулы AMgHa 1 где А имеет указанные значения; Ha I - галоген, в присутствии CllI или AICI в органи о гаическом растворителе при температуре от -78 до -50 С, окисляют образующееся соединение общей формулы 1750430 Соединение Соединение 51 . (хсвязь) 2,6 2,0 19,3 18,4 Эталон (X=-0-) 0,9 3,2 Составитель З.Латыпова ТехредМ.МоргенталКорректор п.Керецмам Редактор С.Патрушева Заказ 2606 Тираж Подписное ЙНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", r.Óæãoðîä, ул. Гагарина,101 0 О СН1О $ ,ХХ,З осопк, 0 Х- гпреп . СЧНц Химическая стабильность (а) с 1/2, ч Кинетические параметры ингиби- . рования Н!.E (s) (10 -М S ) (10 . S ) (» ) оН К;
