Способ диагностики поллиноза

 

Изобретение относится к медицине, в частности к аллергологии, и может быть использовано для диагностики пыльцевой аллергии. Цель изобретения - повышение точности способа диагностики поллинозов. Для этого проводится спектрофотометрическое исследование слюны с помощью 9-канального спектрофотометра, соединенного с персональным компьютером, до и через 5 мин после добавления к слюне экстрактов пыльцы растений. Результат считается положительным, если коэффициент пропускания инфракрасного излучения длиной волны 1302-1468 см^-1 в опытной пробе слюны снижается на 10% и более по сравнению с контрольной пробой до добавления к слюне предполагаемого аллергена. Способ оригинален, легко воспроизводим, безопасен для пациентов, позволяет одновременно проводить тестирование большого числа предполагаемых аллергенов.

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической аллергологии, и предназначено для диагностики поллинозов.

Цель изобретения - повышение точности способа диагностики поллинозов путем выявления аллергенов.

Поллинозы - это аллергические заболевания, вызываемые пыльцой растений. Наиболее эффективным способом лечения поллиноза является устранение контакта пациента с аллергенами (пыльцой растений, вызвавшей сенсибилизацию пациентов). Диагностика поллинозов путем выявления растений, к пыльце которых возникла сенсибилизация, позволяет пациентам избегать мест произрастания этих растений во время их цветения, что в свою очередь предупреждает появление клинических признаков заболевания.

Существуют различные способы диагностики поллинозов. Наиболее близкими к заявляемому способу является диагностика пыльцевой аллергии путем постановки внутрикожных проб с аллергенами (разведениями экстракта пыльцы растений), а также различных провокационных проб (назальной, конъюктивальной, бронхиальной) [1, 3]. Перечисленные способы являются достаточно информативными, однако существенным недостатком всех перечисленных аллергологических проб с экстрактами пыльцы растений является тот момент, что они проводятся in vivo, поэтому их постановка сопровождается неприятными субъективными ощущениями пациентов, а также риском развития осложнений. Вместе с тем аллергологические пробы являются достаточно трудоемкими, требуют специального обучения медицинского персонала, их проведение возможно только в условиях специализированного аллергологического кабинета.

В качестве прототипа заявляемого способа известен способ выявления аллергенов при поллинозе путем постановки антиген-индуцированной (в качестве аллергенов используются экстракты пыльцы растений) реакции дегрануляции базофилов in vitro [2]. При этом определяют число дегранулированных базофилов в лейкоцитарной взвеси, окрашенной 0,3% спиртовым раствором нейтрального красного, до и после инкубации с аллергенами. Положительным результатом реакции является увеличение числа дегранулированных базофилов на 15% по сравнению с контролем. Недостатком этого способа является его недостаточная точность, значительная трудоемкость и необходимость работы с кровью пациентов.

Авторы предлагают оригинальный способ диагностики поллинозов путем проведения спектрофотометрического исследования слюны пациентов. Преимуществом предложенного способа по сравнению с существующими является его достаточная точность, которая достигается определением коэффициента пропускания инфракрасного излучения слюной до и после инкубации слюны с экстрактами пыльцы растений. Достоинством способа являются: простота и быстрота выполнения исследования (в среднем 5 минут на 1 пробу); небольшое количество биологического материала (0,1 мл слюны) для постановки одной пробы; возможность проведения исследования с любым числом аллергенов; объектом исследования является слюна, что обеспечивает легкость ее забора пациентами самостоятельно без участия медицинских работников; постановка реакции с аллергеном осуществляется in vitro, что делает метод безопасным для больных.

Способ осуществляется следующим образом. Пациентом утром натощак в стерильные флаконы осуществляется забор слюны в объеме 3-5 мл. Спектрофотометрическое исследование слюны осуществляется с помощью 9-канального спектрофотометра, соединенного с персональным компьютером. Вначале проводится постановка контрольной пробы. С этой целью 0,1 мл слюны помещается в специальную микрокювету; определение пропускания слюной инфракрасного излучения длиной волны 1302-1468 см^-1 проводится в динамике в течение 60 секунд (с интервалом в 6 секунд), результаты определения фиксируются в персональном компьютере. Для постановки опытной пробы к 0,1 мл слюны добавляют 0,01 мл раствора экстракта пыльцы растений в концентрации 10^-7 - 10^-10 и повторно проводят определение пропускания слюной инфракрасного излучения длиной волны 1302-1468 см^-1. Для каждой пробы вычисляют коэффициент пропускания инфракрасного излучения длиной волны 1302-1468 см^-1, сравнивают результаты опытных и контрольных проб.

Положительной считается реакция, при которой коэффициент пропускания инфракрасного излучения длиной волны 1302-1468 см^-1 слюной при добавлении экстракта пыльцы или других предполагаемых аллергенов снижается на 10% и более по сравнению с контролем.

Пример 1. Пациентка М., 34 года проходила обследование в аллергологическом кабинете поликлиники N 1 городской больницы N 4. г. Твери с диагнозом: поллиноз, риноконъюнктивит. В процессе постановки внутрикожных аллергологических проб у пациентки была выявлена сенсибилизация к пыльце луговых трав. Спектрофотометрическое исследование слюны показало, что в контрольной пробе коэффициент пропускания инфракрасного излучения длиной волны 1302-1468 см^-1 был равен 53,4; после добавления к слюне экстрактов пыльцы растений в опытных пробах коэффициент пропускания инфракрасного излучения составил: для пыльцы полыни, одуванчика и подсолнечника - 51,4; для пыльцы березы, ольхи, орешника - 57,3; для пыльцы луговых трав - 35,4. На основании анализа полученных данных было выявлено, что при добавлении к слюне экстракта пыльцы луговых трав коэффициент пропускания инфракрасного излучения длиной волны 1302-1468 см^-1 снизился более чем на 10%, в остальных опытных пробах этого не отмечалось. Результаты спектрофотометрического исследования слюны подтвердили наличие сенсибилизации к пыльце луговых трав.

Пример 2. Пациент Ш., 26 лет проходил обследование в аллергическом кабинете поликлиники N 1 городской больницы N 4. г. Твери с диагнозом: бронхиальная астма, средней тяжести, ремиссия. В процессе постановки внутрикожных аллергологических проб у пациента была выявлена сенсибилизация к пыльце луговых трав и домашней пыли. Спектрофотометрическое исследование слюны показало, что в контрольной пробе коэффициент пропускания инфракрасного излучения длиной волны 1302-1468 см^-1 был равен 42,8; после добавления к слюне экстрактов пыльцы растений в опытных пробах коэффициент пропускания инфракрасного излучения составил: для пыльцы полыни, одуванчика и подсолнечника - 44,7; для пыльцы березы, ольхи, орешника - 49,3; для пыльцы луговых трав - 32,2. На основании анализа полученных данных было выявлено, что при добавлении к слюне экстракта пыльцы луговых трав коэффициент пропускания инфракрасного излучения длиной волны 1302-1468 см^-1 снизился более чем на 10%. Результаты спектрофотометрического исследования слюны подтвердили наличие сенсибилизации к пыльце луговых трав. Дополнительная постановка пробы с экстрактом домашней пыли также показала снижение коэффициента пропускания слюной инфракрасного излучения до 36,7 (более чем на 10%), что подтвердило сенсибилизацию к домашней пыли.

Список литературы 1. Зисельсон А.Д. Поллиноз у детей. - М., 1989,159 с.

2. Новиков Д.К., Доценко Э.А., Жаков Г.Я. Применение прямого теста дегрануляции базофилов для диагностики аллергии // Лабораторное дело, 1990, N 9, с. 58-61.

3. Пыцкий В.И., Адрианова Н.В., Артомасова А.В. Аллергические заболевания. - М., 1991, с. 197-207.

Формула изобретения

Способ диагностики поллиноза, включающий проведение аллергологической пробы in vitro, отличающийся тем, что проводят определение коэффициента пропускания инфракрасного излучения длиной волны 1302 - 1468 см^-1 в течение 60 с с интервалом в 6 с в контрольной пробе 0,1 мл слюны и в опытной пробе через 5 мин после добавления к слюне экстракта пыльцы растений, наличие сенсибилизации к исследуемому веществу определяют при снижении коэффициента пропускания инфракрасного излучения для опытной пробы слюны по сравнению с контрольной на 10% и более.