Способ изготовления терапевтического энзима

 

М 42911

Класс ЗОЛ, 8

ПАТЕНТ HA ИЗОБРЕТЕНИЕ

ОПИСАНИЕ способа изготовленля терапевтического энзима.

К патенту нн-ца Эрнста Теодора Кребс (Е. Т. Krebs), в г. Сан-Франциско, CIIIA, заявленному 30 апреля 1933 года (спр. о перв. № 128036).

О выдаче патента опубликовано 30 апреля 1933 тода. действие патента распространяется на 15 лет от 30 апреля 1933 года. (1213

Предметом изобретения является вновь открытый автором способ приготовления

-активного терапевтического энзима, обладающего избирательным свойством разрушать протеины злокачественных опухолей (например раковых), а именно разлагать молекулярные группы протеина, заставлять злокачественную опухоль растворяться и размягчаться и вызывать более или менее полное рассасывание опухоли. При этом энзим не вызывает каких-либо вредных эффектов, например, образования новых злокачественных клеток, и т. п.

Согласно изобретению тамии продуктом, обладающим указанным избирательным действием на протеин и клетки злокачественных ойухолей, является комплекс энзимов, называемый эмульсином, в частности же тот комплекс энзимов, который получается из костоЧек плода prunus armeniaca.

Раствор энзима впрыскивают в любую часть тела больного, страдающего злокачественной опухолью; лучше всего вводить энзим непосредственно в кровеносную систему (интравенозно).

Специфическое действие энзима зависит, главным образом, от того, в какой степени стереохимнческое строение энзима соответствует строению вступающего с иим в реакцию соединения, т. е., в данном случае, строению злокаЧественного протеина. Чем ближе структурный стереохимический изоиеризм между энзимом и замещающим его субстратом (злокачественным протеином), тем сильнее должно быть его специфическое действие.

В настоящее время наиболее специфическое действие на злокачественный протеин оказывает комплекс энзимов, получаемых из косточек плода prunus аггпен1аса.

Эмульсии, получаемый из косточек плода ргпппз,;аппешасз, представляет собою комплекс энзимов, содержащий по меньшей мере шесть энзимов, и от.личается от исследованных заявителем эмульсинов, извлеченных из других.источников. Рассматриваемый эмульсин содержит следующие энзимы: амигдалазу, пруназу, оксинитридазу, каталазу, пероксидазу и один из протеолитйческих энзимов. Можно также йредполагать присутствие изомальтозы и одной, а может быть я нескольких липаз.

Предлагаемый энзим может быть извлечен обыкновенным методом, применяющимся при экстракции эмульсинов, однако, лучше извлекать его следующим, способом. Мелко размолотый материал обрабатывают эфиром для удаления масел и жиров. Остаток высушивают на воздухе, превращают в порошок, извлекают из последнего 80% этиловым спиртом растворимйе полисахариды, дисахариды и другие естественные составные части, промывают эфиром и вновь высушивают на воздухе. Растерев материал

s сoтTу rпrrкrеe, производят экстракцию слабым раствором щелочи (1: 5000 до 1: 10000) при низкой температуре и быстро фильтруют в сосуд, охлаждаемый льдом. После этого быстро осаждают при помощи этилового алкоголя, взятого в объеме, равном половине объема фильтрата, и, уда.лив находящуюся над осадком жидкость, прибавляют к осадку равное количество этилового спирта и центрофугируют. Промыв осадок эфиром на белой фильтровальной бумаге, рассыпают его на листе белой пропускной бумаги, высушивают при 50, растирают в мелкий порошок в стерильной ступке Веджвуда и упаковывают в плотно закупоренные бутылки из специального материала (amber bottles).

К применяемому раствору щелочи (гидрату окиси калия или натрия) можно прибавлять в качестве буфера кислый фосфорнокнслый калий или фосфорнокислый натрий.

В виде примера приводится нижеследующий прием выполнения предлагаемого способа, дающий очищенный комплекс энзимов, отличающийся высокими канцер олитическими свойствами, иэ которого удалены камеди, альбумины и, может быть, вредные посторонние эпзимы.

Растворяют 40 z сырого комплекса энзиМов в 400 см 1: 5000 раствора гидрата окиси натрия или калия, тщательно растирая в ступке Веджвуда до тех пор, пока вся масса не растворится. Тщательно перемешивают этот раствор вместе со 160 слР хлороформа, после чего при. бавляют 560 см 95 / -го этилозого спирта, снова тщательно йеремешивают, прибавляют 300 см эфира и опять тщательно перемешивают, после чего дают отстояться, причем хлороформ оседает на дно вместе с очищенным энзимом. Находящуюся сверху жидкость полностью сцеживают, а состоящий из хлороформа и энзима осадок переносят в выпаривательную чашку, где хлороформ отгоняют прн помощи сжатого воздуха.

Остаток обрабатывают десятикратным объемом этилового спирта и полученную массу раскладывают на белой стерильной фильтровальной бумаге. Когда спирт отфильтруется, остаток промывают алкоголем, фильтровальную бумагу кладут на белую пропускную бумагу и высушивают при 50 . Хорошо просушенную массу превращают в порошок в стерильной ступке Веджвуда и хранят в хорошо закупоренных бутылках из специального материала (amber bottles) до момента использования.

Стандартный раствор приготовляют путем растворения энзима в пропорции одна сотая (0,01) грамма энзима на один куб. см. стерильной дважды перегнанной воды.

Энзим можно применять также в вгде альбумозы, соединяя его с кровяной сывороткой нли другими альбуминами, однако, повидимому, следует предпочесть чистый, приготовленный по описанному выше способу экстракции при помощи хлороформа энзим.

Предмет патента.

1. Способ изготовления терапевтического энзима, отличающийся тем, что сырой комплексный энзим, полученный из косточек плода prunus armeniaca, растворяют в растворе гидрата окиси натрия или калия, обрабатывают хлороформом, этиловым спиртом и эфиром, после выделения энзима из хлороформного слоя выпаривают продуванием воздуха и остатки влаги удаляют этиловым алкоголем и действием температуры, не превышающей 50 .

2. Прием выполнения способа по п. 1, отличающийся применением для раство-. ра энзима в растворе гидрата окиси калия или натрия в качестве буфера кислого фосфорнокислого калия и фосфорнокислого натрия.

Эксперт Э. Д. Берннттейн

Редактор ф. Н. Тавилдаров

Тип.,йромнолшграр". Тамбовекаа, 12. Зак. 5301