Способ дифференциальной диагностики тиреотоксикоза

 

СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ ТИРЕОТОКСИКОЗА путем биохимического исследования в крови ферментов, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности и ускорения способа, в лейкоцитах и эритроцитах определяют активность пируватдегидрогеназы (ПДГ) и лактатдегидрогеназы (ДЦГ) и при снижении активности ПДГ в лейкоцитах на 35-37% и в эритроцитах на 13-14%, ЛДГ в лейкоцитах на 2630% и повьшении активности ЛДГ в эритроцитах на 36-92% по сравнению с нормой диагностируют тиреотоксикоз 1 степени, а при снижении в лейкоцитах активности ПДГ «а 56-58%, ЛДГ на 57-60%, в эритроцитах ПДГ на 33-35%, ЛДГ на 40-46% - тиреотоксикоз II-III степени.

сОюз ссеетсних

ONN

РЕСПУБЛИК

3l5D А 6 В 10 00 госудАРстеенный комитет сссР по делАм изОБРетений и отнРытий (21) 3544572/28-13 (22) 13.12.82 (46) 15.06.84. Бюл. и - 22 (72) К.В. Седенко, -В.И. Шепотинов" ский и З.И. Мнкашинович (71) Ростовский ордена Дружбы народов медицинский институт (53) 616.07(088.8) (56) 1. Проблемы эндокринологии, 1970

У 1, с. 28-31.

2. Патент Франции 9 2146816, кл. А 61 В 35/00 (прототип). (54)(57) СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ

ДИАГНОСТИКИ ТИРЕОТОКСИКОЗА путем биохимического исследования в крови ферментов, отличающийся

„,SUÄÄ 1()97282 А тем, что, с целью повьппения чувствительности и ускорения способа, в лейкоцитах и эритроцитах определяют активность пируватдегидрогеназы (ПДГ) и лактатдегидрогенаэы (ЛДГ) и при снижении активности ПДГ в лейкоцитах на 35-37Х и в эритроцитах на 13-14Х, ЛДГ в лейкоцитах на 26ЗОХ и повьппении активности ЛДГ в эритроцитах на 36-92Х. по сравнению

I с нормой - диагностируют тиреотокснкоз 1 степени, а при снижении в лейкоцитах активности ПДГ на 56-58Х, ЛДГ на 57-60Х, в эритроцитах ПДГ на 33-35Х, ЛДГ на 40-46X — тиреотоксикоз II-III степени.!

25

4 1О

Изобретение относится к медицине, преимущественно для совершенствова» ния метода диагностики нарушений функции щитовидной железы.

Известен способ диагностики тиреотоксикоза путем биохимического исследования крови, в частности изучения гликопротеидного обмена Е 3.

Известен также способ диагностики нарушений функции щитовидной железы на основе определения активнос- ти сывороточных глютамикоаланиновой и глютамикоаспарагиновой трансаминаз L23, Недостатком известных способов является отсутствие специфичности и невозможность выявления начальных стадий тиреотоксикоза.

Цель изобретения — повышение чувствительности и ускорение способа диагностики тиреотоксикоза.

Указанная цель достигается тем, что согласно способу дифференциальной диагностики тиреотоксикоза путем биохимического исследования в крови ферментов в лейкоцитах и эритроцитах ,определяют активность пируватдегидрогеназы (ПДГ) и лактатдегидрогеназы (ЛДГ) и при снижении активности ПДГ .в лейкоцитах на 35-37 и в эритроцитах на !3-14 ., ЛДГ в лейкоцитах на

26-30Х и повышении активности ЛДГ в эритроцитах на 36-92Х по сравнению с нормой диагностируют тиреотоксикоз

I степени, а при снижении в лейкоцитах активности ПДГ на 56-58, ЛДГ на

57-60Х, в эритроцитах ПДГ на 33-35, ЛДГ на 40-46 — тиреотоксикоз II-III степени.

Способ осуществляется следующим образом.

У больного забирают из вены 5 мл крови в пробирку, содержащую 0,04 мл гепарина и 1,5 мл физиологического раствора. Путем центрифугирования или отстаивания при комнатной температуре в течение 10-20 мин отделяют плазму, из которой центрифугированием при 1000 об/мим в течение 10-12 мин выделяют фракцию лейкоцитов. Лейкоциты освобождают от примеси эритроцитов с добавлением хлористого аммония и последующим центрифугированием.

Лейкоциты промывают физиологическим раствором и осаждают центрифугированием при указанных выше параметрах.

Эритроциты очищают от примеси других форменных элементов путем 2-3кратного отмывания физиологическим

97282 1 раствором с последующим центрифугированием. После последнего центрифугирования приготавливают лиэат лейкоцитов в 1,5 мл дистиллированной воды и гемолизат эритроцитов в разведении

1: 20.

Активность ПДГ и ЛДГ определяют с помощью тетразолиевого метода.

Для этого 0,4 мл лизата или гемолизата инкубируют в среде, содержащей пируват (для определения ПДГ) или лактат (для ЛДГ) и активаторы: магний, АТФ, фосфатный буфер с рН 7,4 и 1 мл

0„1 -ного тетразолиевого синего.

Спектрофотометрически при длине волны 570 нм смотрят изменение плотности против воды. Результаты выражают в ед./мл. Для определения ЛДГ в инкубационную среду помимо активаторов добавляют 0,02И НАД.

Установлено, что у больных с первой степенью тяжести тиреотоксикоза активность ЛДГ в лейкоцитах выявляется в пределах 108-116 ед/мл, а в эритроцитах 566-630 ед./мл, в то время как у практически здоровых людей эти предельные границы .активности фермента в лейкоцитах и эритроцитах 155-158 и 416-482 ед./мл соответственно. Активность ПДГ в лейкоцитах у больных с первой степенью .тиреотоксикоза выявляется в пределах 2733 ед./мл и в эритроцитах 232-245 ед./мл, в то время как для практически здоровых людей эти предельные границы активности фермента в лейкоцитах и эритро.цитах 43-51 и 269-285 ед./мл. соответственно.

Таким образом, при снижении активности ПДГ в лейкоцитах иа 35-37 и в эритроцитах на 13-14ХО ЛДГ в лейкоцитах на 26-30 и повышение ЛДГ в эритроцитах на 36-92 по сравнению с нормой ставят диагноз: тиреотоксикоз I степени, а при снижении в лейкоцитах активности ПДГ на 56-58Х, ЛДà — на 57-60Х, в эритроцитах ПДГ на 33-35Х, ЛДГ на 40-46Х ставят диагноз: тиреотоксикоз II-,III степени.

Пример 1. Больная Г. 36 лет, поступила в эндокринологическое отд»ление с жалобами на общую слабость, сердцебиение, раздражительность, потливость, бессоницу. Боли ноющего характера в области сердца. В течение последнего года стали появляться несколько раз в неделю приступы учащен- ного сердцебиения.

Составитель И. Емельяненко

Редактор H. Товтин Техред Л.Мартяшова

Корректор А. Ференц

Заказ 4086/4 Тираж 688

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Подписное

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4

3 1097

Объективно: кожа влажная, щитовидная железа внешне не изменена, незначительный блеск глаз, пульс 96 уд./мин, АД 110/60 мм рт. ст. В связи с подозрением на тиреотоксикоз из локтевой вены взято 5 мл крови для определения в лейкоцитах и эритроцитах активности ПДГ и ЛДГ. Результаты исследований: активность ПДГ в лейкоцитах

28,2 ед./мл, т.е. на 357 ниже, чем у здоровых людей, в эритроцитах

232,4 ед./мл, что на 137. ниже; активность ЛДГ в лейкоцитах 110,3 ед./мл, что на 267 ниже, чем у здоровых людей, тогда как в эритроцитах активность

ЛДГ повышена до 566,2 ед./мл, что на, 367. превышает данные, характерные для группы здоровых людей. Выявленный характер изменения активности ферментов в клетках крови в сочетании с данными клинического обследования позволил поставить диагноз нарушения функции щитовидной железы с тиреотоксиг козом I степени.

Пример 2. Больная И. 36 лет. 25

Поступила в эндокринологическое отделение с жалобами на раздражительность, потливость, утомляемость, го282 4 ловные боли, сердцебиение. Похудела за последний год на 10 кг. Считает себя больной 3 года.

Данные обследования: на ЭКГ диффузные изменения в миокарде, пульс

100 уд./мин. АД 140/80 мм рт. ст.

Лабораторное обследование: активность

ПДГ и 3ЩГ в лейкоцитах соответственно 19 и 65 ед./мл, что на 59,67 и

58,47. ниже, чем у здоровых людей, в эритроцитах эти величины соответствуют 187 ед./мл и 250 ед./мл, что ниже на 33 и 407., чем у здоровых людей.

На основании лабораторных данных поставлен диагноз: тиреотоксикоз II-III степени.

Предлагаемый способ диагностики тиреотоксикоза в 7 раз более чувствителен, чем известный, и позволяет выявлять нарушения функции щитовидной железы на несколько месяцев ранее, в зависимости от индивидуального течения и тяжести развития заболевания у каждого больного (в среднем от 5 до 12 мес). Это дает возможность своевременного начала правильного лечения и предупреждения перехода заболевания во II u III стадии.