Способ определения активности антитромбина 111

 

Изобретение относится к медицине . Цель изобретения - ускорение и повышение точности способа. В пробирки с исследуемой контрольной и t опытной плазмами добавляют раствор тромбина. Смесь инкубируют и на первой минуте инкубации встряхивают несколько раз. Сгусток фибрина не удаляют . На 3, 7, 11 и 15 мин инкубации смеси пипеткой берут образовавшуюся сыворотку и добавляют в пробирку с раствором фибриногена. По секундомеру регистрируют время свертывания фибриногена остаточным тромбином сы-i воротки. Pac4ev активности антитромбина Ш производят по калибровочной кривой. с

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (19) (11) А1 (51)4 G 01 N 33/86

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ

К А ВТОРСНОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21 ) 3694601 /28-,1 4 (22) 13.01.84 (46) 07.11.86. Бюл. Р 41, (71 ) Белорусский государственный институт усовершенствования врачей (72) E. П. Иванов и П. А. Бизюк (53) 616.07(088,8) (56) Austen D. Е. 7., Rhymes I.

А laboratory manual of blood coagulation. Oxford — опйоп. 1975, р.109, (54) СПОСОБ ОПРЕДКЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ

АНТИТРОМБИНА 1П (57) Изобретение относится к медицине. Цель изобретения — ускорение и повышение точности способа. В пробирки с исследуемой контрольной и опытной плазмами добавляют раствор тромбина. Смесь инкубируют и на первой минуте ннкубации встряхивают несколько раз. Сгусток фибрина не удаляют. На 3, 7, 11 и 15 мин инкубации смеси пипеткой берут образовавшуюся сыворотку и добавляют в пробирку с раствором фибриногена. По секундомеру регистрируют время свертывания фибриногена остаточным тромбином сы- воротки. Расче. активности антитромбина И производят по калибровочной кривой.

1269024

Формула и э о б р е т е н и я

Составитель И. Емельяненко

Редактор О. Голонач Техред .Л.Сердюкова

Корректор Е. Рошко

Заказ 6028/46 Тираж 778

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Подписно е

Производственно-полиграфическое предприятие, r. Ужгород, ул. Проектная, 4

Изобретение относится к медицине и касается определения активности основного ингибитора системы свертывания крови.Цель изобретения — ускорение и повышение точности способа эа счет учета действия антитромбина I, проведение исследования на натинной плазме и определение остаточной активности тромбина в динамике в течение 15 3 мин.

Способ осуществляется следующим образом.

В силиконовые пробирки с 0,5 мл

107. исследуемой контрольной и опытной плазмами добавляют 0,5 мл раствора тромбина. Смесь инкубируют на водяной бане при 37 С и на первой минуте инкубации встряхивают несколько раз для образования малообъемного сгустка фибрина, который не удаляют.

На 3, 7, 11 и 15 мин инкубации С„щ смеси, О,l..мл образовавшейся сыворотки берут пипеткой и добавляют в пробирку с 0,1 мл раствором фибриногена. По секундомеру регистрируют время свертывания t, фибриногена остаточным тромбином сыворотки.

Расчет активности антитромбина 111 производят по калибровочной кривой.

Для построения кривых скорости инактивации тромбина антитромбином III

4 . плазмы на миллиметровой бумаге из и полученный в секундных значениях 1 с извлекают десятичный логарифм 1g t

Кривые скорости инактивацни тромбина антитромбином III строят для контрольного и опытного образцов плазмы

B координатах 1д 1, (на оси ординат), инк (на оси абсц

Любую точку на кривой скорости инактивации тромбина антитромбином

Ш контрольного образца плазмы принимают за 1002 активности антитромбина III . Такая точка взята на 10 мин инкубации смеси. К ней соотносят скорости инактивации тромбнна антитромбином 1П опытного образца плазмы и получают значения этой актив-: ности в процентах. Пределы нормальных колебаний активности антитромбина III, определенные для донорской

5 группы, составляют 10012»ОХ.

Пример 1 . У пациента 1 исследовали кровь предлагаемым способом, при этом было установлено, что н динамике (t =3; 7, 11 и 15 мин), tc=28» 62; 138, 306 мин, а значения

1 tc= l 447; l 792; 2,139 и 2,486, соответственно.

При совмещении построенной по полученным точкам кривой опытного об15 раэца плазмы с контрольной оказалось, что активность антитромбина Ш у ис- следуемого пациента равна 1177., т.е. значительно выше нормы, 20

Пример 2. У пациента 2 иследовали кровь, как описано в примере М 1. Было установлено, что дина(Ннк -3» 7» 11 H 15 MHB) t

26» 40 и 62 мин, à 1g tc — 1,230;

l,415; 1,602 и 1,792 соответственно.

При совмещении построенной по полученным точкам кривой опытного образца плазмы с контрольной оказалось, что активность антитромбина Ш у исследуемого пациента 657., что значительно ниже нормы.

35 Способ определения активности антитромбина III путем смешивания исследуемой и нормальной плазм с раствором тромбина, определения остаточной активности тромбина но время

40 свертывания фибрнногена и сравнения ее с нормальной, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью ускорения способа и повышения точности эа счет учета действия антитромбнна I uc45 следования проводят на нативной плазме, а остаточную активность тромбина определяют н динамике н течение

1543 мин.