Способ получения полициклических ароматических производных алканола или их солей
Изобретение касается производных оксиаминов, в частности способа получения полициклических ароматических производных алканола общей формулы I: - Y, где X 6-хризеиил; У - CR.,.- ОН; R,C ,- Cj- алкил, замещенная гидроксигруппа; . R.2 С -С-f алкил, при условии, что R и R , взятые вместе, содержат не более пяти атомов углерода, или их солей, обладающих биоцидной активноствю, которые могут быть использованыв медицине в качестве противоопухолевых соединений. Цель - создание вещества с активностью, не характерной для данного класса. Синтез целевых соединений ведут восстановлением соединений общей формулы II: X - C(0)-NH-Y, где X и Y - см. вьппе, гидридом металла в инертном растворителе . Целевой продукт выделяют в свободном виде или в виде его .соли. Новые соединения обладают активностью в отношении Лимфоцитной лейкемии Р388/0 и , Меланотической Меланомы В16, Саркомы Н 5076, Карциномы Колон 38, Карциномы Легких Льюиса, а также в отношении Candida albicans, Mycoplasma smegmatis. Streptococcus pyogenes; Trichomonas vaginalis, Nippostrongylus brasiliensis, Eime- ria tenella при токсичности 85-250 МГ/КГ. i CO С йь 4 N J5 4
СОЮЗ СОВЕТСНИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ
РЕСПУ БЛИН
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К flATEHTY
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР
ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3982431/23-04 (62) 3744951/23-04 (22) 02. 12. 85 (23) 16.05.84 (31) 8313571 (32) 17.05.83 (33) СВ (46) 23.12.88. Бюл. У 47 (71) Дзе Велкам Фаундейшн Лимитед (ОВ) (72) Кеннет Вальтер Бейр (US) (53) 547.555.07 (088 ° 8) (56) Бюлер,.К., Пирсон Д. Органические синтезы. — M.: Мир, 1973, ч.1, с.480-481 ° (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПОЛИЦИКЛИЧЕСКИХ АРОМАТИЧЕСКИХ ПРОИЗВОДН!!Х АЛКАНОЛА ИЛИ ИХ СОЛЕЙ (57) Изобретение касается производных оксиаминов, в частности способа получения полициклических ароматических производных алканола общей формулы Х: Х-СН -NH — Y где Х = 6-хризенил, У вЂ” CR R -CH ОН, R Ñ Сзалкил, замещенная гидроксигруппа;
„„SU „„1447277 А 3 (51)4 С 07 С 91/18//А 61 К 31/13
R. = С,-С вЂ” алкил, при условии, что
R и К, взятые вместе, содержат не более пяти атомов углерода, ипи их солей, обладающих биоцндной активноствю, которые могут быть использованы в медицине в качестве противоопухолевых соединений. Цель — создание вещества с активностью, не характерной для данного класса. Синтез целевых соединений ведут восстановлением соединений общей формулы II:
Х вЂ” С(О)-NH-Y где Х и Y - см. вышее, гидридом металла в инертном растворителе. Целевой продукт выделяют в свободном виде или в виде его ..соли.
Новые соединения обладают активностью в отношении Лимфоцитной лейкемии
Р388/О и L=1210, Меланотической Меланомы В16, Саркомы M 5076, Карциноьы .
Колон 38, Карциномы Легких Льюиса, а также в отношении Candida albicans, Mycoplasma smegmatis, Streptococcus
pyogenes; Trichomonas vaginalis, Nippostrongylus brasiliensis, Eimeria tenella при токсичности LDg<
= 85-250 мг/кг.
1447277
Изобретение относится к способу получения новых биологически активных химических соединений, конкретно к способу получения полицикличес5 ких ароматических производных алканола или их солей, обладающих биоцидной активностью, что предполагает возможность применения этих соединений в медицине в качестве противо- 10 опухолевых соединений.
Цель изобретения — получение новых полициклических ароматических производных алканола, проявляющих новый вид активности для данного ря- 15 да соединений.
Все используемые растворители обладают необходимой сортностью и применяются без дополнительной очистки, но со следующими дополнительны- 20 ми обработками. Тетрагидрофуран подвергают сушке путем дистилляции над сплавом Na/Ê в атмосфере азота и после этого немедленно используют. Толуол подвергают дистилляции над СаН 25 в атмосфере азота и хранят над молекулярным ситом ЗА. Используемые химикаты обладают требуемой сортностью и используются без дополнительной очиетки если нет специаль- ЗО ной оговорки.
Препаративное жидкостное хроматографирование при высоком давлении осуществляют с помощью устройства
Haters Prep LC/System 500 А с использованием двух колонок, заполненных каждая по 500 г селикагеля (Si0 ).
Вставками иэ SLO» использовавшимися длЯ очистки, ЯвлЯются вставки, изго- 40 товленные из силикагеля, для импульсной хроматографии (Е.Nerck, селикагель 60, сито N 230-400, т.е. 0,062-
0,037 мм). Воронку, заполненную спеченным стеклом и имекщую соответст- 45 вующий объем, заполняют примерно на
3/4 SiO< а на нижнюю часть воронки надевают кран. Кусок фильтровальной бумаги затем помеща|от сверху БхО и раствор материала, подвергаемого очистке, вводят на эту верхнюю часть.
За счет осторожного просасывания через фильтр происходит перемещение порции элюирующего растворителя через вставку из селикагеля. Фракции соответствукщего объема объединяют по мере необходимости и далее подвергают обработке. Удовлетворительные данные элементного анализа получены для всех указанных ниже в качестве примеров соединений.
Пример 1. А.Хризен-б-карбоновая кислота.
В круглодонную колбу, снабженную холодильником, барботером для гропускания азота и магнитной мешалкой, вводят хризен-6-карбальдегид (10,0 г, 39 ммоль) и ледяную уксусную кислоту (1000 мл). Реакционную смесь нагревают. до 50 С. В полученный раствор вводят по ка м раствор Br2(6,2 гэ
39 ммоль, 2,0 мл) в 10 мл ледяной уксусной кислоты. Реакционную смесь нагревают до 80 С в течение одного часа, обрабатывают Н О (1 мп) и охлаждают. Образующееся твердое вещество фильтруют и промывают водой. Твердое вещество перекристаллизовывают двукратно из смеси тетрагидрофурантолуол в соотношении 1: 1, затем двукратно иэ тетрагидрофурана и в результате после сушки получают 3,3 г хризен-6-карбоновой кислоты с т.пл.
305ОС
В.Хризеноилхлорид.
В круглодонную колбу, снабженную холодильником, барботером для про пускания азота и магнитной мешалкой, вводят хриэен-6-карбоновую кислоту (2А, 3,3 г, 13 ммоль) и SOClq (и быток, 100 мп). После медленного подогрева реакционную смесь нагревают с обратным холодильником с флегмообразованием в течение двух часов, охлаждают и избыток ЯОС1 удаляют.
Сырой твердый продукт двукратно суспендируют в толуоле (200 мл) и раст» воритель удаляют во вращакщемся Bbl» парном аппарате. Данный сырой продукт (3,5 г) далее используют без дополнительной очистки.
С. N-j2-(1,3-Диокси-2-метил)пропил 1-хриэенкарбоксамид.
В круглодонную колбу, снабженную холодильником, барботером для пропускания азота и магнитной мешалкой, вводят 6-хризеноилхлорид (3,50 г, 12 ммоль), 2-амино-2-метил-1,3-пропандиол (2,53 г, 24 ммонь) и обезвоженный тетрагидрофуран (200 мл).
Смесь нагревают с обратным холодильником в течение четырех часов. В течение этого времени образуется белое твердое вещество. Реакционную смесь выливают в воду (500 мя) и фильтруют. Твердое вещество растворяют в. этилацетате (700 мл), про3 144 мывают водой (3 х 500 мл,) насыц".иным раствором NaC1 (2 х 500 мл), abrсушивают (Na Я04) и концентрируют, в результате чего получают 4,12 г сырого белого твердого вещества. Это твердое вещество растворяют в этилацетате (500 мл), фильтруют через воронку со средой спекшейся стекломассы и концентрируют до объема
200 мл. Горячий раствор разбавляют до 400 мл гексаном. Образующиеся кристаллы фильтруют и снова перекристаллизовывают из смеси этилацетат/ гексан, фильтруют и высушивают в вакуумной печи, в результате получают
2,06 r (47,8 Х) N-(2-(1,3-диокси-2"метил)пропил)-хризенкарбоксамида с т.пл. 170-171 С.
D. 2- t(6-Хризенилметил) амино 32метил-1, Ç-пропандиол-метансульфонат.
В круглодонную колбу, снабженную холодильником, барботером для пропускания азота и магнитной мешалкой, вводят N-(2-(1,3-диокси-2-метил)пропил )-хризенкарбоксамид (1,0 г, 2,8 ммоль) и обезвоженный .тетрагидрофуран (100 мл). В кобу вводят твердый Li А1Н4(0,53 г, 14 ммоль) в виде нескольких порций. Реакционная смесь быстро темнеет до получения густо коричневого цвета с выделением газа.
Реакционную смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре, затем нагревают с обратным холодильником с флегмообразованием в течение
14 ч. Реакционную смесь резко охлаждают путем добавления насыщенного раствора Ба БО (10 мл), а затем воды (50 мп). Эту реакционную смесь экст рагируют этилацетатом (Зх200 мл).
Слои этилацетата соединяют, промывают водой (200 мл), насьпценным
NaC1 (3 х 200 мп), высушивают (над
К С0 Р фильтруют и концентрируют, в результате чего получают твердое вещество рыжевато-коричневого цвета, представляющее собой 2- ((6-хризенилметил) амино j-2-метил-1, Ç-пропандиол, т.пл. 200-202 С. Это твердое вещество растворяют в абсолютном этиловом спирте Et0H (25 мл) и в CH S0)H (0,5 мл), нагревают и фильтруют.
Твердое вещество разбавляют гекса-: ном до объема 500 мп, фильтруют и перекристаллизовывают, получая 0 ° 21 г (16,9 Х) указанного соединения, т.пл.
° 227-228 С.
7277
Пример 2, 2- ((6-Хризенилметил)амино)-2-метил-1,3-пропандиол обрабатывают газообразным HCl в этаноле, получая (+-) †(2R+, 3R )-2-((6хризенил)метил брамино-2-метил- 1,3бутандиол гидрохлорид с т.пл. 236,0237,5 С (разлож.), СНЭОН/Et 0.
Пример 3. 2- ((6-Хризенилметил)амино3-2-метил-1,3-пропандиол лактат.
Смесь 2-((6-хризенилметил)амино)2-метил-1,3-пропандиола (3,45 r, 10 ммоль) и 851-ной молочной кислоты (1,04 г, 10 ммоль) в метаноле (500 мл) доводят до дефлегмирования и фильтруют через воронку с пористой стеклянной плавтинкой. Растворитель удаляют с использованием роторного испарителя, в результате чего получают более твердое вещество. Его кристаллизуют (смесь СНэОН/ЕС О) три раза, в результате чего получают 1,84 r (42,27Г) лактата 2-((6-хриэенилметил) аминб)-2-метил-1,3-пропандиола, т.пл.
163-164 С.
Пример 4„2 ((6-Хризенилметил) амино)-2-метил-1,3-пропандиол цитрат.
Смесь 2- ((6-хризенилметил)амино)2-метил-1,3-пропандиола (3,45 г, 10 ммоль) и лимонной кислоты (1,92 г, 100 юдоль) в метаноле (500 мл) нагревают до тех пор, пока она не растворится, затем смесь фильтруют через воронку с пористой стеклянной пластинкой. Далее растворитель удаляют, в результате чего получают неочищенный продукт — белое твердое вещество. Его доводят до кипения в абсолютном этиловом спирте (2x300 мп) и фильтруют, в результате чего получают белое твердое вещество. Затем его подвергают перекристаллизации дважды (смесь СН ОН/Et 0), фильтруют, сушат в течение ночи в вакуумной печи, в результате чего получают 1,24 г цитрата 2- ((6-хризенилметил)аминоj2-метил-1,3-пропандиола, т.пл. 146с
151. С. Для оценки противоопухолевой активности новых производньцс алканола используют методы, которые предложены в списке для опухолей в программе развития терапевтических исследоваы и (Отделение лечения рака, Национальный институт рака).
Испытания против Лимфоцитной Лейкемии P388/О.
В этом испытании используют мьппей
CD2-Р„ одного и того же пола, вес ао
5 144 которых составлял 20+3 г. Контрольным и испытуемым животным в день 0 внутрибрвшинным способом вводят
10 живых клеток опухоли Р388/О.
В каждом испытании используют несколько уровней доз с тем, чтобы оценить также величину LD 80, либо в дистиллированной воде, содержащей 5% декстрозы, и вводят животным внутрибрюшинным способом на 1, 5- и 9-й день имплантации опухоли. Дозы определяют в мг/кг, в зависимости от веса тела каждого животного. Фиксируют день гибели для каждого животного, определяют среднее значение,цля каждой группы и вычисляют отношение среднего времени жизни для обработанной (Т) к контрольной (С) группе. Критерием активности является значение Т/С х х 100 ) 120%. При оптимальной дозировке 45— 600 мг/кг Т/С х 100% (исключая оставшихся в живых на 20-й день) составляет (+130)-(+300) . Лимфоцитная лейкемия L 1210, Процедура проведения этого испытания идентична для Р 388/О за тем исключением, что число клеток L 1210, имплантированных в день О, составляет 10 /мышь. В испытании используют штаммы мыши CD2-Р,, а в качестве критерия активности используют величину Т-С х 100 125 %. При оптимальной дозировке 110 — 150 Mr/êr Т/С х х 100%., исключая оставшихся в живых на 30-й день, составляет (+194)(+252) ° Меланотическая Меланома В16. В этом испытании используют мышей В6СОЗ-F одного и того же пола, имеющих вес 20+3 г. Суспенэию клеток В16 готовят иэ некротической части твердой ткани опухоли, полученной из мьши-донора. Один грамм опухоли подвергают гомогениэации в 9 мл соляного раствора Ирла, охлаждаемого льдом, и фильтруют через сито в 100 меш (О, 149 мм) с целью удаления остатков ткани, 0,5 мл полученной в результате жидкости вводят внутрибрюшинным методом каждому животному. Дозировку осуществляют также, как в испытаниях 72 7 7 6 Р388/О и L 1210. Фиксируют день гибели животного на протяжении 60 дней, а затем вычисляют отношение Т/С, как в испытаниях P388/О и L 1210. При оптимальной дозировке 30-100 мг/кг Т/Сх, х 100%, исключая оставшихся в живых на 30-й день, составляет (+143)-(+200) . 1п Испытание против Саркомы М5076. Этот тип саркомы имеет вид твердой опухоли, появляющейся у мышей штамма C57B1/6 в яичниках, и в дальнейшем ее перерабатывают в асцитную 15 ð для Внутрибрюшинного использования. Процедура этого испытания идентична тойи, что применялась для P388/О, при этом используют штамм мыши В6СЗ-Ff, а критерием активности 2D служит величина Т/С х 100 125%. При оптимальной дозировке 85— 105 MF/кг Т/С х 100%, исключая оставшихся в живых на 30-й день, составляет (+162)-(+168) ° 25 Испытание против Карциномы Колон 38. Эту опухоль вызывают у мышей штамма С57В1/6 химическим способом, а затем поддерживают в виде твердой 30 опухоли. Выращенную твердую опухоль затем вырезают в асептических условиях у мыши-донора и помещают в стерильный соляной раствор. Опухоль освобождают от некротических и соединительных тканей, затем РазРезают на кубики размером 2-3 мм. Каждый кубик имплантируют подкожным способом в брюшную торакальную область в стерильных условиях в день О. В каждом испытании применяют несколько доз с тем, чтобы оценить величину LD go для каждого соединения. В группе для каждой дозы используют десять животных, а в необработанной контрольной группе 30 животных ° Испытуемые соединения готовят либо в физиологическом соляном растворе, содержащем 0,05% соединения Твин 80, либо в дистиллированной воде, содержащей 5% декстрозы, а затем их вводят внут рибрюшинно способом на 1-, 5- и 9-й день после имплантации опухоли. Дозы определяют на основе мг/кг в соответствии с весом каждого животного. На 20-й день животных усыпляют и при помощи мерной вилки Верниера измеряют наибольшие (L) и наименьшие размеры (W) каждой опухоли. Rec опухоли рассчитывают из формулы L (W) 2/2". Кри1447277 55 Ф о р м у л а и з о б- р е т е н и я терием активности является значение Т/С х 100 (42%. При оптимальной дозировке 65— 150 кг/кг Т/С х 1001 составляет 2338. Испытание против Карциномы Легких Льюиса. Эта опухоль возникает спонтанно в легких мышей С57В1/6 и ее поддер- 10 жйвают при помощи трансплантации под кожу в данном штамме. Твердую опухоль вырезают в асептических условиях и помещают в стерильный соляной раствор. Кусочки живой ткани опухоли тон- 15 ко измельчают при помощи ножниц и продавливают через сито из нержавеющей стали в 200 меш (0,074 мм) с тем, чтобы можно было получить из клеток ткани опухоли суспензию. 10 живых 20 клеток вводят внутривенным способом в хвостовую вену мьппам BD-F. одного и того же пола весом 20+3 r. В каждом испытании используют несколько доз с тем, чтобы оценить величину 25 LD< для каждого соединения. В группу для каждой дозы входит десять животных и 20 животных в необработанной контрольной группе. Испытуемые соединения готовят и применяют в 30 соответствии с процедурой для Р388/О. Фиксируют день гибели для каждого животного, определяют среднее значение для каждой группы и вычисляют отношение среднего времени жизни для 35 обработанной (Т) к контрольной (С) группе. Критерием активности служит значение Т/С х 100 7 140 . При оптимальной дозировке 85 — 105 мг/кг Т/С х 100Х составляет (+191)-(+222) . Испытания против Candida albicans. Противогрибковое испытание против Candida albicans (CN 1863) осуществляют с небольшими изменениями с использованием комбинации анализов с разбавлением бульона и агара. ИИК составляет 30-100 мг/л. Антибактериальное испытание. Антибактериальное испытание против Mycoplasma smegmatis(S3264) и Streptococcus pyogenes (CN 10) осуществляют с небольшими изменениями с использованием стандартных анализов, связанных с разбавлением агара. ИИК С10 мг/л. Испытания против Mycoplasmer Smegmatis. Результат антнбактериального испытания против Mycoplasma Smegmatis (53264): MHK составляет от < 5 до 10 мг/л. Испытание против простейших Frichomonas vaginalis осуществляют с использованием методов, описанных P.М.Михаелсом. Результаты активности против простейших Frichomonas vaginalis (в лабораторных условиях) Доза, мг/л Результат 40 -4 40 -4 (Среда Стентона или модифицированная среда Диамонда). Оценка испытания: 0 — ингибирование не отмечено; (-1) — ингибирование составляет 1-25 .; (-2)- ингибирование составляет 26-50X; (-3)ингибирование составляет 51-75Х; (-4)- ингибирование составляет 76100Х ° Испытание против Nippostrongylus brasiliensis ° Активность против червей Nippos» trongylus brasiliensis анализируют с использованием методов, описанных Д.С.Дженкинсом и др. Результаты активности против червей Nippostrongylus brasiliensis (зрелые стадии развития): МИК составляет Ъ 50 мг/л. Испытание против Eimeria tenella. Активность против простейших Eimeria tenella анализируют с использованием методов., описанных В.С.Латтером и Д.уилсоном. Результаты испытания против простейших Eimeria tenella в лабораторных условиях: Доза, мг/л Результат 0,31 -4 1,25 -4 Оценка испытания: 0 — ингибирование отсутствует; (-1) — ингибирование составляет 25%; (-2) — ингибирование составляет 26-50X- (-3) ; ингибирование составляет 51 - 75X; (-4) — ингибирование составляет 76100 . LD, для данных соединений (одной дозой; -0D — 1 самец мьппи) составляет 85-250 мг/кг. Способ получения полициклических ароматических проиэводньм алканола общей формулы 1447277 10 или их солей, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что соединение общей формулы I где R, è R< имеют указанные значе HHR э подвергают восстановлению гидридом металла в инертном растворителе, и целевой продукт выделяют в свободном вфде или в виде его соли. углерода, Техред М.Ходанич Корректор Э.Лончакова Редактор И.16улла Заказ 6756/58 Тираж 370 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 Â1 CHgNH С. R2 СН2 ОН где R,— С,-С - алкип, замещенный гидрокси; R -С -С - алкил, при условии, что R,è R взятые вместе содержат не более пяти атомов С ОМН-С-Я г СН2-ОН
