Способ определения степени тяжести травмы у детей

 

Способ определения степени тяжести трэамы у детей. Изобретение относится к области медицины , касается преимущественно травматологии. Цель изобретения -упрощение и ускорение способа. Оценку тяжести травмы у детей осуществляют на основании анализа цифровых значений концентрации дофамина. Содержание его Б крови в границах 0,1-3 иг/мл или в моче 10-70 нг/мл указывает на наличие легкой-травмы, повышение концентрации дофаминэ в крови до 8-17 нг/мл или в моче до 140-380 нг/мл характеризует тяжелую (пограничную с шокогенной) травму.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (5!) s 6 01 Й 3/48

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

3,уii

«l

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4645061/14 (22) 13,02,89 (46) 07.09.91. Бюл. М 33 (71) Ростовский медицинский институ (72) В.Г.Овсянников, С.A,Eðeìèíà, КМ.Абдирасилова, Т.В.Кондрух и А, Е.Бойченко (53) 615.475(088.8) (56) Авторское свидетельство СССР

М 997659, 1983. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕ«1ЕНИЯ СТЕПЕНИ

ТЯЖЕСТИ TPABMbl У ДЕТЕЙ (57) Способ определения степени тяжести травмы у детей. Изобретение относится к области ме-, Изобретение относится к медицине, касается и реимуществен но тра вматологии.

Целью изобретения является упрощение и ускорение способа.

У больного, получившего травму, забирают 5 мл крови или 1 мл из разовой мочи и определяют в этих биологических жидкостях содержание дофамина по следующей схеме.

Первичная обработка.

Для крови — получение беэбелкового фильтрата путем добавления к 5-10 мл цельной, взятой с ЗДТА крови 5 — 10 мл 20%ТХУ, и последующего центрифугирования гомогената при 3000-4000 об/мин и температуре не выше+4 С.

Для мочи — к 1 мл профильтрованной мочи добавляют 9 мл бидистиллированной воды.

Хроматографическая очистка и выделение дофамина.

Полученный безбелковый фильтрат крови или разведенную мочу, доведенные 1

„„Ы0;;„1675766 А1

1 дицины, касается преимущественно травматологии. Цель изобретения — упрощение и ускорение способа. Оценку тяжести травмы у детей осуществляют на основании анализа цифровых значений концентрации дофамина. Содержание его в крови в границах 0,1 — 3 нгlмл или в моче. 10-70 нг/мл указывает на наличие легкой травмы, повышение концентрации дофамина в крови до 8-17 нгlмл или в моче до 140 — 380 нг/мл характеризует тяжелую (пограничную с шокогенной) травму. н.раствором аммиака до рН 8,2 — 8,5, пропускают через колонку с окисью алюминия со скоростью истечения 1 — 2 мл/мин, при этом катехоламины и, в частности, дофамин, адсорбируется на окиси алюминия.

После промывания колонки 10 мл бидистиллированной воды (рН 8,2) дофамин элюирует 5 мл 0,25 н.раствором уксусной кислоты.

Дополнительная очистка элюата (применяется только.в случае исследования крови).

2 мл полученного с колонки элюата обрабатывают 10 мл бутанола. К бутанольной фракции добавляют 20 мл гептана и из этой органической смеси экстрагируют дофамин

2 мл 0,1 н.раствором соляной кислоты.

Окисление и спектрофлюориметрию дофамина, содержащегося в исследуемой пробе, проводят в двух параллельных пробирках: контрольной и опытной — в следующем порядке:

16757Р8

Контроль

0,5 1 мл

Опыт

0,5 мл

1 t4Jl

0.1 мл

2 мин

2 мин

0,5 мл

Зкспоэиция

Экспозиция

0,5 мл

0,1мл (А — а)х20хЧэл, ( — b xV

3."

Рва генты

Фосфатйый буфер 0,1 М (pH 6,2-6,4)

Уксуснокислый злюат мочи или солянокислый злюат крови

0,1 н.раствор йода в зтаноле

2,5%-ный раствор сульфида натрия (безводного) в 5Н МаОН

10 н.уксусная кислота

0,1 н.раствор йода в зтаноле, После нагревания проб в водяной бане при 100 С в течение 10 мин и последующего охлаждения проводят сг.ектрафлюоримет-рический анализ дафамина при длине волны возбуждающего света 330 нм и эмиссии

375 нм, Параллельно исследуемым пробам обрабатывают стандартный раствор дофамина, концентрации 20 нг/мл.

Расчет концентрации дофамина в исследуемой пробе крови или мочи проводят по следующей формуле: где (А-а) — величи ча флюоресценции исследуемой пробы за вычетам ее неспецифической флюоресценции (контроля а); (В-b) — величина флюоресценции стандартного раствора дафамина за вычетом контроля на реактивы (а);

20 — концентрация стандарта дофамина, нг/мл; .. V — объем крови (5) или мочи (1 мл), взятйй для исследования;

V>n. — объем уксуснокислого злюата, полученного с колонки (5 мл).

Результаты биохимического исследования уровня эндогенного дофамина в крови и моче практически здоровых детей и детей с легкими и тяжелыми травмами представлены в таблице, В скобках указаны границы индивидуальных колебаний концентрации дафамина в крови и моче детей в различных обследованных группах.

Результаты сопоставительного анализа исследований показывают, что определение метанефрина и норметанефрина в крови составляет 120 мин (известный), а в предлагаемом способе определение для дофамина в крови необходимо 70 мин, в моче

35 мин, Для исследования в крови биохимических метаболитав требуется 20 мл веноэной крови (известный), а в предлагаемом cnocoGe лишь 5-10 мл и разовая порция мочи 1 мл.

Как следует из изложенного изобретение более эффективно в плане клиника-лабораторной практики, поскольку дает: вазможность использовать в целях диагностики различные биологические жидкости: кровь или мочу.

Точность метода определения дофамича в крови составляет около 10%, в моче

2,1%, (предлагаемый1 в та время, как ошибка метода определения метанефрина в крови составляет 12,1%, норметанефрина

",3,5% (известный), Как показывает проведенный анализ метод определения дофамина является более очным, причем точность метода резко увеличивается при использовании в качестве исследуемого материала мочи вследствие высоких концентраций дофамина в этой биологической жидкости.. Формула изобретения

Способ определения степени тяжести травмы у детей, включающий биохимическое исследование биологической жидкости, отличающийся тем, что, с целью упрощения и ускорения способа, в крови или в разовой порции мочи определяют концентрацин дофамина и при содержании его в крови в пределах 0,1-3,0 нгlмл или в моче

1,0-70,0 нг!мл определяют легкую травму, а при концентрации его в пределах 8,0-17,0 нг/мл в крови или 140-380 нг/мл в моче определяют тяжелую (паграничную с шокогеннай) «равму.

1675766

Составитель Н. Маркова

Техред М.Моргентал Корректор О. Кундрик

Редактор М. Бланар

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул. Гагарина, 101

Заказ 2998 Тираж 389 Подписное

ВНИИПИ Государственного комйтета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб.; 4/5