Ингибитор вируса лихорадки ласса и вируса пичинде
Изобретение относится к вирусологии. Целью изобретения является поиск лекарственных препаратов, эффективных в отношении аренавирусов Ласса и Пичинде. Цель достигается использованием 5-фторурацила (2,4-Диоксо-5-фторпиримидинг), добавленного в поддерживающую рост культур клеток среду, для подавления размножения вируса лихорадки Ласса, вируса Пичинде (модель, взятая первично для установления противовирусного действия препарата в отношении аренавирусов) в культуре клеток Vero в концентрациях 400, 200, 100, 50 мкг/мл на 72 ч. Инкубация проводилась при температуре 37°С. В отобранных пробах культурной жидкости определяли инфекционную активность исследуемого вируса методом редукции бляшек под агаровыМ покрытием. 5-фторурацил обладает выраженным противоареновирусным действием . Химиотерапевтический индекс препарата равен 8. 1 табл.
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК (я)э А 61 К 31/505
ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ
ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
00 сЭ
ЬЭ
V 4
О (21) 4123929/14 (22) 27.06.86 (46) 23.06.93. Бюл, М 23 (71) Белорусский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии (72) В.И.Вотяков, А.С.Петкевич, Н.Л.Барановская, В.M.Ñàáûíèí, Е,И.Бореко и
Л, В.Коробченко (56) А.С.Петкевич и др. Вопросы вирусологии. 1981 М 2, с. 244-245. (54) ИНГИБИТОР ВИРУСА ЛИХОРАДКИ
ЛАССА И ВИРУСА ПИЧИНДЕ (57) Изобретение относится к вирусологии.
Целью изобретения является поиск лекарственных препаратов, эффективных в отношении аренавирусов Ласса и Пичинде. Цель достигается использованием 5-фторурациИзобретение относится к вирусологии и может быть использовано как эффективное средство в отношении арена вирусов в химиотерапии.
Цель изобретения — поиск лекарственных препаратов, эффективных в отношении аренавирусов Ласса и Пичинде.
Цель достигается применением 5-фторурацила (2,4-Диоксо-5-фторпиримидина), добавленного в поддерживающую рост культур клеток среду, для подавления размножения вируса лихорадки Ласса, вируса
Пичинде (модель, взятая первично для установления противовирусного действия flp6парата в отношении аренавирусов) в культуре клеток Vего.
Предложенный препарат 5-фторурацил (2,4-Диоксо-5-фторпиримидин) по фармако. Ы „, 1822779 А1 ла (2,4-Диоксо-5-фторпиримидинг), добавленного в поддерживающую рост культур клеток среду, для подавления размножения вируса лихорадки Ласса, вируса Пичинде (модель, взятая первично для установления противовирусного действия препарата в отношении аренавирусов) в культуре клеток
Чего в концентрациях 400, 200, 100, 50 мкг/мл на 72 ч. Инкубация проводилась при температуре 37 С. В отобранных пробах культурной жидкости определяли инфекционную активность исследуемого вируса методом редукции бляшек под агаровыМ покрытием. 5-фторурацил обладает выраженным противоареновирусным действием. Химиотерапевтический индекс препарата равен 8. 1 табл. логической значимости относится к антиметаболитам, в медицинской практике используется для лечения некоторых злокачественных опухолей. 5-фторурацил мало растворим в воде, слабо — в спирте.
Водный раствор бесцветен и прозрачен, в клинической практике используется в виде
5 -ного раствора натриевой соли.
Пример 1. Использовали двух- и трехсуточную культуру клеток Чего, в качество модели для исследований взяты аренавирусы Ласса и Пичинде (штамм
Сьерра-Леоне и AN-3739 соответственно), полученные из музея вирусов Института вирусологии им. Д.И.Ивановского АМН СССР.
В качестве среды поддержки использовали
2,57ь гемогидролизат (производство БелНИИЭМ) с добавлением 27.-ной эмбрио1822779
Характеристика противовирусного действия 5-фторурацила нальной сыворотки телят, 100 ед/мл гентэмицина, 7,5 раствор йаНСоз для доведения рН среды 7,2.
Токсическое действие препарата изучали при гитровэнии его на культуре клеток
Vего. Соединение брали в разведениях 800, 400, 200, 100, 50, 25 мкг/мл и вносили во флаконы, объемом 10 мл с культурой клеток.
На каждое разведение использовали по 4 флакона. После 96 ч инкубации в термостате при 37 С учитывали максимально переносимую дозу соединения. Цитодеструктивные изменения культур клеток фиксировали по
4-крестовой системе. Максимально переносимой концентрацией считали 1/2 толерантной переносимой дозы, при которой отсутствовал цитотоксический эффект.
При изучении ингибирующего действия препарата последний вносили в заданной концентрации в культуральную среду после
1,5-часовой адсорбции вируса. Контрольные и опытные культуры инкубировэли при
37 С в течение 72 ч, в отобранных пробах определяли инфекционную активность методом редукции бляшек под агаровым покрытием.
Об антивирусной активности 5-фторурацилина судили по снижению инфекционного татра вируса в культурах, обработанных препаратом, в сравнении с контрольной культурой, где 5-фторурацил отсутствовал. Максимально переносимую концентрацию (МПК) препарата определяли в диапазоне 400 млг/мл, свидетельствует о
35 невысокой токсичности препарата в культуре клеток Чего, Максимально активной концентрацией (МАК) считали такую, при которой снижение инфекционного титра вируса было 1,5-1,7 Ig БОЕ/мл. Мак равна 50 мкг/мл, В таблице представлены результаты излучения ингибирующего действия препарата в отношении эренавирусов Ласса и
Пичинде. ХТИ при обеих инфекциях равен 8.
Пример 2. Двухсуточную монослойную культуру клеток Чего заражали вирусом
Ласса. Множественность инфекции составляла 0,1-0,01 БОЕ/кл. После адсорбции вируса (1,5 ч) вносили поддерживающую рост культур клеток среду, в состав которой добавляли 5-фторурацил в концентрации 400, 200, 100, 50 мкг/мл. пробы инкубировэли 72 с при 37 С, затем отбирали и определяли инфекционную активность вируса методом редукции бляшек. В качестве контролей использовали зараженные культуры клеток и инкубированные без 5-фторурацила, ХТИ препарата при данной инфекции равен 8.
Таким образом было установлено, что
5-фторурацил обладает выраженным противовирусным действием в отношении патогенного вируса ласса и Пичинде, химиотерапевтический индекс которого равен 8.
Формула изобретения
Применение 5-фторурэцила в качестве ингибитора вируса лихорадки Ласса и вируса Пичинде.
