Биофармацевтический препарат на основе живой культуры bacillus и способ лечения заболевания инфекционной природы

 

Изобретение относится к области медицины. Сущность его состоит в том, что создан препарат на основе живой культуры Bacillus, который содержит рекомбинантный штамм В. subtilis, продуцирующий α-2-интерферон человека и живую культуру В. licheniformis при их определенном содержании, и обычный наполнитель. Препарат позволяет лечить вирусные инфекции, такие как гепатит, герпес, энцефалит и т.п., и бактериальные, такие как энтерит, колит, хламидиоз, вагиноз и т.п., а также иммунодефицитные состояния. Изобретение расширяет арсенал средств борьбы с бактериальными, вирусными инфекциями и иммунодефицитными состояниями неинвазивными методами. 2 с. и 5 з.п. ф-лы, 4 табл.

Изобретение относится к области медицины, а именно к созданию препарата, обладающего антибактериальной и антивирусной активностью, а также способного лечить иммунодефицитные состояния.

Одним из основных современных подходов к терапии различных заболеваний является применение препаратов рекомбинантных интерферонов человека. В медицинской практике нашли широкое применение такие генно-инженерные препараты, как реаферон, роферон, берофор, интрон-А и др. Накоплен значительный клинический материал, подтверждающий терапевтическую эффективность инъекционных форм интерферонов. Однако препараты этой группы не лишены целого ряда недостатков: результат их действия зависит от формы инфекции, состояния организма, индивидуальной переносимости препарата; инъекции интерферонов часто вызывают побочные нежелательные реакции (гипертермию, головную и мышечную боль, тошноту, рвоту); в ряде случаев образуются антитела, нейтрализующие интерферон, что резко снижает терапевтическую эффективность и может приводить к аллергическим реакциям; использование инъекционных форм сопряжено с повышенным риском передачи вирусов гепатита и БИЧ; инъекционные формы интерферонов относительно дороги, поэтому в реальной клинической практике эти препараты имеют ограниченное применение.

Кроме того, ни один из препаратов интерферонов не обладает антибактериальным действием для лечения сопутствующих бактериальных инфекций (энтероколитов, дисбактериозов, пневмоний).

Альтернативная возможность доставки интерферона к органу-мишени - его продукция в желудочно-кишечном тракте (ЖКТ) сапрофитными штаммами бактерий (RU N 2084233). Такие штаммы-продуценты могут стать основой лечебных препаратов перорального применения. По нашему мнению, наибольшего внимания в качестве бактериального вектора заслуживают бактерии рода Bacillus, в частности, В. Subtilis (Смирнов В. В. и др. Спорообразующие аэробные бактерии - продуценты биологически активных веществ. Киев, "Наукова думка", 1982, 280 с. ). Этот микроорганизм, широко распространенный в окружающей среде, обладает рядом ценных свойств: является антагонистом патогенной и условно-патогенной флоры (стафилококков, стрептококков, сальмонелл, протея, дрожжей); продуцирует ферменты, удаляющие продукты гнилостного распада в кишечнике; синтезирует ряд аминокислот, витаминов и иммуномодуляторов; способствует регенерации эпителия; споры В. subtilis устойчивы к ферментативному протеолизу и кислой среде в желудке и могут поступать в кишечник в интактном состоянии, где образуют вегетативные формы.

Широкий спектр биологической активности наряду с полной безвредностью делают возможным применение живой культуры В.subtilis в качестве основы лечебно-профилактических препаратов в медицине. Зарегистрирован и успешно применяется целый ряд таких препаратов: бактисубтил (Хорватия), флонивин-БС (Югославия), биоспорин (Украина), SL-бактерин, споробактерин (Россия). Эти препараты используют для лечения дисбактериозов, диарей, энтеритов, колитов, гнойных ран, тонзиллитов, диатезов, экзем, аллергических заболеваний. Эубиотическая терапия сохраняет эффективность на фоне непереносимости антибиотиков и сульфаниламидов.

Наиболее близким к настоящему изобретению является препарат "Субалин". Препарат представляет собой композицию на основе живой культуры рекомбинантного штамма В. subtilis, способной продуцировать альфа-2-интерферон (RU N 2035185, опубл. 20.05.92 г.). Известный биопрепарат работает на основе биомассы В. subtilis в количестве 1·10⁹ КОЕ в 1 г препарата и предназначен для использования в области ветеринарии.

Задачей настоящего изобретения является создание биофармацевтического препарата на основе живой культуры рода Bacillus, который обладал бы одновременно антибактериальной и антивирусной активностью, при этом также мог бы быть использован в борьбе с иммунодефицитными состояниями. Поставленная цель решается тем, что в биопрепарате, содержащем рекомбинантный штамм Bacillus subtilis, продуцирующий альфа-2-интерферон человека, дополнительно содержится живая культура Bacillus licheniformis при следующем соотношении компонентов: B.subtilis 1·10⁶ - 1·10⁷ KOE/г B.licheniformis 1·10⁵- 1·10⁶ KOE/г наполнитель - остальное до 1 г Для создания препарата могут быть использованы различные рекомбинантные штаммы B. subtilis, способные продуцировать альфа-2-интерферон человека, в том числе зарегистрированный во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов, штамм N ВКПМ В-7289.

В качестве наполнителя могут быть использованы компоненты, обычно применяемые для формирования таблеток, такие как глюкоза, крахмал, гидроокись алюминия, стеарат кальция и т.п. в общепринятых в таких случаях соотношениях (для перорального применения). Агаровый и др. гели - для наружного использования.

Биофармацевтический препарат на основе селекционных штаммов рода Bacillus (в вегетативной и споровой форме) был использован в качестве вещества, обладающего антивирусной и антибактериальной активностью в практических клинических условиях, препарат получил условное название "Депрекан A".

Препарат показал высокую клиническую эффективность при лечении различных заболеваний инфекционной и неинфекционой природы: вирусных гепатитов A, B, C; инфекций, вызванных Herpes zoster и Н.simplex; вирусных энцефалитов; инфекций, вызванных вирусами папилломы человека; острых респираторных вирусных инфекций;
серозных менингитов;
медленных вирусных инфекций (в том числе рассеянного склероза);
энтеритов, колитов;
острых кишечных инфекций, в том числе у детей младшего возраста;
хламидиозов;
бактериального вагиноза;
интерферондефицитного синдрома.

"Депрекан-A" - эубиотический препарат нового поколения, на основе живой культуры Bacillus, содержащей ген альфа-2-интерферона человека. Применение "Депрекан-A" per os обеспечивает попадание бактерий в кишечник, где происходит их транзиторное размножение и продукция интерферона. Интерферон, поступая через эпителий, пейеровы бляшки, системы воротной вены, достигает паренхимы печени, пораженной гепатотропным вирусом. Тем самым реализуется принципиально иной, не инъекционный путь доставки активного лекарственного препарата к органам-мишеням.

Клинические испытания, проведенные на больных с вирусным гепатитом A, B и C, продемонстрировали следующее:
1. Наблюдается снижение уровня общего билирубина крови в 3-5 раз;
2. Происходит исчезновение вирусных антигенов из крови и наблюдается сероконверсия;
3. Значительно улучшается клиническое состояние больных, исчезает общая симптоматика, характерная для вирусного гепатита.

Ни в одном случае не получено проявления токсических, аллергических или иных побочных эффектов (повышения температуры, головной боли, болей в мышцах, животе, рвоте, диареи и т.д.)
Для лечения острого гепатита рекомендуется следующая схема применения "Депрекан-А": 4 раза в день по 2,5 г в промежутках между едой в течение 5 дней. После недельного перерыва курс можно повторить (при наличии показаний).

Изобретение поясняется следующими примерами
Пример 1. Испытания препарата "Депрекан-А" проводились в инфекционной больнице на 8 пациентах-добровольцах, больных вирусным гепатитом С различной степени тяжести. Результаты, полученные после 5 дней использования препарата, представлены в табл. 1. Из таблицы видна положительная динамика лечения гепатита Депреканом-А по биохимическим показателям (билирубин, аланинаминотрансфераза (АлАт) и т.п.

Пример 2. Лечение гепатита B после трансплантации почки у реципиента K. Депреканом A также дали положительный результат. Динамика содержания в крови маркеров и основных биохимических показателей приведена в табл. 2.

Пример 3. Лечение реципиента Л. после трансплантации почки, пораженного гепатитом B и C, дали положительные результаты при пероральном введении Депрекана-А. Динамика содержания в крови маркеров и основных биохимических показателей приведена в табл. 3.

Пример 4. Лечение реципиента М., пораженного гепатитом B и C, перенесшего трансплантацию почки, также привело к положительным результатам по ряду биохимических показателей.

Динамика содержания в крови маркеров и основных биохимических параметров приведена в табл. 4.

Помимо борьбы с вирусными гепатитами, Депрекан-А успешно может быть использован при лечении инфекций, вызванных вирусами Herpes simplex и Н. zoster, вирусного энцефалита, вирусной папилломы человека, острой респираторной вирусной инфекции, медленной вирусной инфекции (в том числе, рассеянного склероза), серозного менингита.

Следует заметить, что используемые бактерии рода Bacillus отличаются высокой устойчивостью к пищеварительным ферментам ЖКТ и способностью к быстрому заселению кишечника и угнетающему действию на патогенную и условно-патогенную флору. При приеме внутрь бактерии размножаются в ЖКТ в течение 2-х суток. Через двое суток они полностью выводятся из организма, не вызывая негативных последствий даже при передозировке. Поэтому "Депрекан-А" с успехом применяют для лечения не только основных, но и вторичных бактериальных кишечных инфекций.

Препарат принимается по 1-4 таблетке 3-5 раз в день с интервалом 4-12 часов в течение всего курса терапии (от 3-5 дней при лечении дисбактериозов до 6-12 месяцев при лечении хронических гепатитов). В целях более эффективного заселения спорами горла и ротовой полости препарат желательно не запивать и держать во рту до полного растворения. Для профилактики иммунодефицитных состояний препарат дают по таблетке 1-2 раза в сутки 5 дней подряд. Препарат не рекомендуется применять одновременно с пероральным введением антибиотиков и сульфаниламидов, которые подавляют жизнедеятельность используемых бактерий. В случае необходимости "Депрекан-А" можно применять в сочетании с инъекционными формами антибиотиков.

Серозные менингиты
Пример 5. Больной К., 49 лет, поступил в инфекционное отделение с диагнозом острая нейроинфекция неясной этиологии. Менингеальный синдром. В ликворе бактериальная флора не обнаружена. Методом ПЦР в ликворе и лимфоцитах периферической крови идентифицирована ДНК вируса Herpes simplex 1. Начато комплексное лечение ацикловиром и "Депреканом-А" (по 2 табл. 4 раза в день). На 4 день от начала лечения не обнаружена вирусная ДНК в лимфоцитах крови, однако в ликворе вирусная ДНК определялась. На 7 день ПЦР-анализ образцов ликвора дал отрицательный результат. Положительная клиническая динамика.

Острые респираторные вирусные инфекции
Пример 6. Под наблюдением находилось 25 амбулаторных больных в возрасте от 18 до 55 лет (11 мужчин и 14 женщин) с диагнозом ОРВИ в начальной стадии заболевания. Всем больным проводился курс "Депрекан-А" по 2 табл. 4 раза в день в течение 7 дней. На 3 день от начала приема в 23 случаях отмечена положительная клиническая динамика: температура снижалась до субфебрильных или нормальных значений, уменьшались проявления трахеита или трахеобронхита, астении, заложенности в горле. Реконвалесценция происходила на 5-6 день. В 2-х случаях острый период продолжался 4-5 дней, реконвалесценция наступила на 8-9 день.

Пример 7. Больной Т., 26 лет, почувствовал накануне сильное недомогание (головная боль, озноб, температура до 38^oC). Принимал "Депрекан-А" в течение 6 дней. Острые явления исчезли ко 2 дню. Температура нормализовалась на 3 день.

Пример 8. Больная О., 50 лет. Сухой кашель, заложенность носа, субфебрильная температура. Принимала "Депрекан-А" в течение 7 дней. Основные проявления инфекции купированы к 6 дню. Астеническое состояние сохранялось до 7-8 дня.

Урогенитальный хламидиоз
Пример 9. В исследуемую группу вошло 15 амбулаторных больных в возрасте от 25 до 40 лет (10 мужчин и 5 женщин) с дисфункциями урогенитальной сферы. Диагностику урогенитального хламидиоза проводили методом прямой иммунофлюоресценции или методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). В анамнезе всех больных - неэффективная антибиотикотерапия хламидиоза. После начала лечения "Депреканом-А" у 5 больных с хронизацией инфекции происходило обострение хламидиоза с последующей эффективной элиминацией хламидий в ходе антибиотикотерапии. У 9 больных с острым хламидиозом применение "Депрекана-А" с последующей антибиотикотерапией также закончилось клиническим выздоровлением, что подтвердилось отрицательными результатами ПЦР-анализа на хламидийную ДНК. В одном случае применение "Депрекана-А" полной элиминации хламидий антибиотикотерапией добиться не удалось, однако достигнуто значительное улучшение клинического состояния больного.

Пример 10. Больной П., 26 лет, наблюдался урологом в связи с хламидийным уретритом. Антибиотикотерапия (азитромицин) оказалась неэффективной. По окончании курса повторно выявлена Chlamydia trachomatis. Был проведен 10-дневный курс "Депреканом-А", после чего проведена терапия рулидом. Элиминация хламидий подтверждена отрицательным результатом ПЦР-анализа.

Пример 11. Больной О., 31 год, обратился к урологу по поводу бесплодия в браке в течение 5 лет. При лабораторном исследовании методом иммунофлюоресценции обнаружены хламидии в соскобе из уретры, в секрете простаты. Диагноз: урогенитальный хламидиоз, осложненный хроническим простатитом. Был проведен курс лечения сумамедом, по окончании которого вновь обнаружены хламидии. Больному назначен 10-дневный курс "Депрекана-А" с последующим курсом рулида. При контрольном исследовании соскоба из уретры и секрета простаты методом ПЦР хламидии не обнаружены.

Вторичные иммунодефицитные состояния, интерферондефицитный синдром
Пример 12. Под наблюдением находилось 19 амбулаторных и стационарных больных (10 мужчин и 9 женщин) в возрасте от 22 до 47 лет с различными формами вторичного иммунодефицитного состояния (включая интерферондефицитный синдром), осложненными хроническими респираторными инфекциями. Перед началом приема "Депрекана-А" у всех больных исследовали иммунный и интерфероновый статус. Исследование повторяли после 14-дневного курса приема препарата (по 2 табл. 3-4 раза в день). У всех пациентов наблюдали положительную динамику иммунологических показателей, улучшение самочувствия, нормализацию температуры, уменьшение кашля. У 9 из 10 амбулаторных больных зафиксирована стойкая ремиссия относительно острых респираторных инфекций на протяжении последующих 2 месяцев. Лабораторные исследования по окончании курса "Депрекана-А" продемонстрировали увеличение количества лейкоцитов в среднем на 22%, сегментоядерных нейтрофилов на 18%, лимфоцитов на 9%. Общее количество Т-лимфоцитов увеличилось на 8,1%, Т-киллеров-супрессоров на 32%, Т-индукторов-хелперов на 15%.

Пример 13. Больной Э., 39 лет, находился в стационаре в связи с хронической пневмонией, вызванной Streptococcus pneumoniae и вторичным иммунодефицитным синдромом. На 4 день от начала приема "Депрекана-А" отмечено возрастание концентрации интерферона в сыворотке крови до 32 МЕ/мл (при норме 4-8 МЕ/мл). Нормализовалась температура тела, уменьшилась астения, появился аппетит. Бактериологическое исследование мокроты на 10 день от начала терапии показало снижение количества Streptococcus pneumoniae на 2 порядка.

Пример 14. Больная Ч., 26 лет, амбулаторно наблюдалась у врача-иммунолога в связи с рецидивирующими острыми респираторными инфекциями на фоне вторичного иммунодефицитного синдрома с признаками интерферонового дефицита и с толерантностью к индукторам интерферона. После проведения курса "Депреканом-А" отмечена стойкая ремиссия в течение 2 месяцев, улучшилось самочувствие. Зарегистрирована митогенная и вирусная индукция интерферонов. Уровень сывороточного интерферона составил 64 МЕ/мл.

Пример 15. Больной Ф., 36 лет, амбулаторно наблюдался у врача-пульмонолога в связи с хронической пневмонией на фоне вторичного иммунодефицитного синдрома. У больного выявлены антитела классов lgG и lgM к антигенам Mycoplasma pneumoniae. По окончании 14-дневного курса "Депреканом-А" нормализовалась температура, уменьшилась астения, появился аппетит. Анализ сыворотки крови в последующие 3 месяца выявил значимое снижение титра микоплазменных антител.

Острые кишечные инфекции (ОКИ), энтериты, колиты
Пример 16. Исследуемая группа включала 32 стационарных больных в возрасте от 16 до 45 лет, из них 19 мужчин и 13 женщин. Курс "Депрекана-А" по схеме 1-2 табл. 3-4 раза в день продолжался от 5 до 7 дней. Всем больным проводили бактериологическое исследование фекалий до начала терапии и через 2-3 дня после ее завершения. На фоне применения "Депрекана-А" отмечалось более быстрое (по сравнению с больными, не принимавшими препарата) исчезновение спазма кишечника, прекращение болей в животе, нормализация стула, сокращение сроков репарации слизистой оболочки толстого кишечника, улучшение общего состояния. На фоне применения "Депрекана-А" отмечалось уменьшение бактериовыделения патогенной микрофлоры (в частности, шигелл, сальмонелл) в период ранней реконвалесценции, а также уменьшение частоты формирования затяжных и хронических форм дизентерии. В 94% случаев происходило восстановление микрофлоры кишечника с III-IV степенью дисбактериоза до нормы.

Пример 17. В исследуемую группу входило 10 детей в возрасте от 1,5 до 3 лет с диагнозом острый энтероколит, стафилококковая инфекция с поражением желудочно-кишечного тракта, дисбактериозы различной степени тяжести после перенесенной дизентерии и сальмонеллеза. "Депрекан-А" применяли в дозе 0,5-1 табл. 2 раза в день в течение 5-7 дней. У всех наблюдавшихся детей отмечалось улучшение общего состояния, сокращалось число дефекаций, исчезали патологические примеси в стуле. К 10-12 дню наблюдалось полное или частичное восстановление нормальной микрофлоры кишечника, элиминация патогенных микроорганизмов (в том числе шигелл, сальмонелл).

Пример 18. Больной С., 22 года, госпитализирован с диагнозом острая кишечная инфекция бактериальной этиологии. При бактериологическом анализе кала выделена культура Salmonella enteritidis, Proteus vulgaris, Citrobacter sp. Клиническая картина соответствовала острому энтериту средней тяжести. Проводилась терапия "Депрекан-А" в течение 5 дней по схеме 2 табл. 4 раза в день. Признаки интоксикации исчезли через 2 дня. К 5 дню частота дефекации уменьшилась до 2 раз. При повторном бактериологическом анализе Salmonella enteritidis и Proteus vulgaris не выявлены.

Пример 19. Больной З., 39 лет, поступил в клинику с диагнозом обострение хронического энтероколита. Состояние средней тяжести, гипертермия, отмечались болезненность и спазм сигмовидной кишки, неоформленный слизистый стул, кратность дефекаций достигала 15 в сутки. При бактериологическом анализе кала выделена культура Shigella sonnei. Применение "Депрекана-А" в течение 7 дней, по схеме 2 табл. 4 раза в день, способствовало нормализации стула, исчезновению признаков интоксикации и исчезновению кишечных болей. В кале при повторном исследовании Shigella sonnei не обнаружена, отмечается восстановление нормальной микрофлоры кишечника.

Пример 20. Больная Ф., 2 года, поступила в инфекционное отделение с диагнозом острый энтероколит в тяжелой форме. Состояние характеризовалось гипертермией, акроцианозом, болезненностью и спазмом сигмовидной кишки, многократным жидким стулом со слизью. При бактериологическом анализе стула выделена культура Salmonella infantis. Больной назначена инфузионная регидратационная терапия и "Депрекан-А" по 1 табл. 3 раза в день. На 2 день от начала лечения признаки интоксикации исчезли. К 5 дню состояние оценивали как удовлетворительное. К 3 дню частота дефекации уменьшилась до 2 раз, восстановилась нормальная консистенция кала, исчезла слизь. Повторное бактериологическое исследование на сальмонеллы (на 7 день от начала лечения) дало отрицательный результат.

Кроме инъекционных форм интерферонов, широкое распространение получили лечебные формы интерферонов для местного применения в виде мазей, гелей, аэрозолей, суппозиториев и т. д. Такие препараты как мазь "Эгиферон" (Венгрия), гель "Алферон Н Гель" (США), суппозиторий, мазь и гель "Виферон" (Россия), глазные капли "Берофор" (Австрия) используются в клинической практике для профилактики и лечения широкого спектра вирусных заболеваний. Недостатком данных препаратов является сравнительно узкий спектр клинического действия, довольно высокие требуемые концентрации, побочные эффекты в виде аллергических реакций и небольшие сроки хранения препаратов из-за инактивации интерферона. Ни один из препаратов интерферонов не обладает одновременным антибактериальным действием для лечения сопутствующих бактериальных и грибковых инфекций (хламидиозов, бактериальных дерматитов, энтероколитов, дисбактериозов, пневмоний, кандидозов и т. д.).

Аналогично оральной форме, в местной форме препарата могут быть использованы, различные рекомбинантные штаммы Bacillus subtilis, способные продуцировать альфа-2-интерферон человека (в том числе зарегистрированный во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов, штамм N ВКПМ В-7289). В качестве наполнителя для местной формы могут быть использованы ланолин, вазелин, агаровый и другие гели, вода, физиологический раствор и другие фармацевтически-приемлемые основы, не оказывающие отрицательного воздействия на бактерии и продукты их биосинтеза как в вегетативной, так и в споровой форме. Местная форма может быть в виде эмульсии, суспензии, лосьона, масла, крема, мази, геля, лака, аэрозоля, суппозитория, пудры и т. д. Местная форма может применяться эпидермально, интрабронхиально, интраназально, интравагинально, ректально и т. д.

Созданный нами препарат в форме геля для местного применения, обладающего антивирусной и антибактериальной активностью, был испытан в практических клинических условиях получил условное название "Депрекан-А Гель".

"Депрекан-А Гель" пробиотический препарат нового поколения на основе живой культуры Bacillus subtilis, содержащей ген альфа-2-интерферона человека. Применение "Депрекан-А Гель" местно приводит к тому, что споры имеющихся в геле бактерий, трансформируются в вегетативные формы, которые начинают вырабатывать ферменты (протеазы, трансферазы, гидролазы, амилазы, и др.), витамины (группы В и др.), аминокислоты, нуклеотиды, углеводы, а также интерферон. Вырабатываемые вещества обладают угнетающим действием по отношению к патогенной микрофлоре, находящейся на обрабатываемой поверхности, такой как стрептококки, стафилококки, сальмонеллы, различные виды шигелл, синегнойной палочке, а также другим видам бактерий, вирусов и грибков. Специфические протеазы разрезают поврежденные белки тканей и способствуют их удалению. Другие биологически активные вещества обеспечивают дополнительное питание имеющихся здоровых клеток, утилизацию поврежденных тканей и индукцию интерферона. Кроме того, за счет синтеза интерферона происходит местная стимуляция преимущественно клеточного иммунитета, приводящая к ускорению процессов элиминации патогенной микрофлоры и заживлению пораженных поверхностей. Препарат легко всасывается в ткани и образует защитную пленку на поверхности. Аналогично вышеуказанному случаю оральной формы, реализуется иной, не инъекционный путь доставки активного лекарственного препарата к органам-мишеням. Препарат наносится тонким слоем на пораженные места 1-4 раза в день в течение всего курса терапии.

Во многих случаях эффективной оказывалась не только оральная или местная форма препарата по отдельности, но и их комбинированное применение, как поясняется примерами ниже. Аналогично оральной форме, ни в одном случае не было получено проявления токсических, аллергических или иных побочных реакций (повышения температуры, головной боли, болей в мышцах, животе, кожных высыпаний и т.д.).

Инфекции, вызванные вирусом Herpes simplex и Herpes zoster
Пример 21. Наблюдали 26 поликлинических больных в возрасте от 19 до 50 лет (16 мужчин и 10 женщин) с различными проявлениями герпетической инфекции (Herpes genitalis, Herpes labialis, Herpes zoster) средней степени тяжести. Диагноз был подтвержден обнаружением вирусной ДНК в содержимом везикул (ПЦР-диагностика). У 9 больных имел место рецидивирующий генитальный герпес на фоне выраженного иммунодефицитного состояния, у 7 больных - опоясывающий лишай, у 10 больных - Herpes labialis. Все пациенты получали терапию ацикловиром, без существенного эффекта. У всех больных на фоне лечения "Депреканом-А" в сочетании с гелем "Депрекан-А Гель" наблюдали уменьшение или исчезновение кожных проявлений герпетической инфекции, положительную динамику показателей иммунологического и интерферонового статуса, повышение общей резистентности организма.

Пример 22. Больная Я., 37 лет, наблюдалась врачом-иммунологом в связи с рецидивирующим генитальным герпесом. В содержимом везикул методом ПЦР выявлена ДНК Herpes simplex II и в соскобах со слизистой цервикального канала - ДНК цитомегаловируса. Анализ иммунного статуса показал резкий дефицит B-клеточного звена со значительным снижением уровня сывороточных иммуноглобулинов; дефицитность интерфероновой системы 3-й степени. Терапия ацикловиром и реафероном клинического эффекта не дала. Последние 2 года рецидивы повторяются не менее 2 раз в месяц. Больной назначен "Депрекан-А" по 2 табл. 3 раза в день в течение 14 дней и местно - гель "Депрекан-А Гель" на пораженные участки. На 2 неделе от начала лечения высыпания исчезли. Стойкая ремиссия отмечена в течение всего срока наблюдения (2 месяца), на фоне нормализации показателей иммунного статуса.

Пример 23. Больной А., 28 лет, страдает рецидивирующим Herpes labialis со значительным по площади поражением кожного покрова вокруг рта и носа. Применение ацикловира было малоэффективно. Терапия "Депрекан-А" в сочетании с гелем "Депрекан-А Гель" способствовала значительному уменьшению тяжести инфекции и площади поражения к 4 дню и очищению кожи к 7 дню лечения. Стойкая ремиссия отмечена в течение всего срока наблюдения (6 месяцев).

Пример 24. Больная Т., 43 лет, наблюдалась у врача-дерматолога по поводу Herpes zoster. Массивные высыпания на коже спины. Упорное течение, плохо поддающееся лечению ацикловиром. Был назначен "Депрекан-А" по 2 табл. 3 раза в день в сочетании с гелем "Депрекан-А Гель". На 5 день от начала лечения везикулярная сыпь подсохла, на 12 день наблюдалось полное исчезновение кожных поражений.

Папилломатоз
Пример 25. Под наблюдением врача-дерматолога амбулаторно находилось 11 больных (7 мужчин и 4 женщины) в возрасте от 23 до 45 лет с диагнозом генитальный папилломатоз. В биоптатах папиллом больных определяли содержание ДНК вируса папилломы человека (HPV) методом ПЦР, а также проводили типирование вирусов. У всех наблюдавшихся больных папилломатоз носил рецидивирующий характер. Хирургическое удаление папиллом сопровождалось их рецидивами с различной частотой. Исследование иммунного статуса в 100% случаев выявило значимые отклонения от нормы. Лечение "Депрекан-А" (по 2 табл. 3 раза в день) в сочетании аппликациями геля "Депрекан-А Гель" проводили в течение 14 дней с последующим 5-дневным перерывом и повторным 14-дневным курсом. У 10 больных по окончании курса наблюдалась стойкая ремиссия на протяжении 6 месяцев (срок наблюдения), в одном случае отмечен рецидив через 3 месяца.

Пример 26. Больной Г., 23 года, страдает генитальным папилломатозом в течение последних двух лет с частыми рецидивами. Лечение "Депреканом-А" начал принимать сразу после удаления папиллом. В биоптате идентифицирована ДНК HPV 6 типа. Общий курс "Депрекан-А" составил 28 дней. Курс сочетался с местной аппликацией геля "Депрекан-А Гель". Стойкая ремиссия на протяжении 5 месяцев (срок наблюдения).

Пример 27. Больная Ю., 30 лет. Генитальный папилломатоз на протяжении 3 лет с частыми рецидивами. В биоптатах папиллом идентифицирована ДНК HPV 8-го типа. После проведения курса "Депреканом-А" в течение 28 дней в сочетании с гелем "Депрекан-А Гель" наблюдали ремиссию в течение 6 месяцев (срок наблюдения).

Бактериальный вагинит
Пример 28. Под наблюдением гинеколога амбулаторно находилось 19 женщин в возрасте от 20 до 45 лет с диагнозом бактериальный вагинит. У всех больных диагноз был подтвержден микроскопическим выявлением характерных для вагинита микроорганизмов: Gardnerella vaginalis, Mobiluncus spp., анаэробных кокков. Больным проводили курс лечения "Депреканом-А" в течение 5-7 дней (по 2 табл. 3 раза в день) в сочетании с местным применением геля "Депрекан-А Гель" в виде аппликаций на слизистую влагалища. Во всех случаях отмечалась положительная клиническая динамика (исчезновение выделений), сопровождавшаяся восстановлением нормальной микрофлоры влагалища.

Пример 29. Больная Т., 30 лет, обратилась к гинекологу с жалобами на вагинальные выделения с резким запахом. При микроскопии мазка со слизистой влагалища выявлена типичная картина дисбиоза (практически полное отсутствие лактобацилл, преобладание анаэробных кокков, ключевые клетки, адгезированные большим количеством Gardnerella vaginalis, дрожжи). Был проведен 5-дневный курс "Депреканом-А" в сочетании с аппликацией на слизистую влагалища геля "Депрекан-А Гель". По окончании курса выделения исчезли, при микроскопии влагалищного мазка отмечена нормализация микрофлоры (заселение слизистой лактобациллами, гарднереллы и дрожжи не обнаружены).

Пример 30. Больная И., 41 год, наблюдалась у гинеколога в связи с рецидивирующим бактериальным вагинитом. При последнем исследовании мазков со слизистой влагалища выявлены трихомонады, ключевые клетки, количество лактобацилл резко снижено. Проведен 7-дневный курс "Депрекан-А" в сочетании с гелем "Депрекан-А Гель". При повторном исследовании вагинальных мазков трихомонады и гарднереллы не выявлены, количество лактобацилл значительно увеличилось. Клинические признаки вагинита полностью исчезли.

Стафилококковая инфекция кожных покровов
Пример 31. Под наблюдением врача-иммунолога амбулаторно находилось 35 больных в возрасте от 16 до 30 лет (18 мужчин и 17 женщин) с диагнозом acne vulgaris. Поражения локализовались на лице, груди, спине. У всех больных при бактериологическом анализе гнойного содержимого выделены культуры Staphylococcus aureus. В группе сравнения (20 человек, 12 мужчин и 8 женщин) проводили терапию тималином, тактивином, человеческим иммуноглобулином, стафилококковой вакциной на основе штамма Staphylococcus aureus Wood 46. Местно применяли синтомициновую эмульсию. Наблюдали неполную ремиссию с уменьшением очагов поражения и снижением частоты рецидивов. Больные исследуемой группы (15 человек, 8 мужчин и 7 женщин) получали стафилококковую вакцину Wood 46 по 2 инъекции в неделю в течение 5 недель, "Депрекан-А" по 1 табл. 4 раза в день и местно - аппликации гелевой формы препарата ("Депрекан-А Гель"). К концу первой недели терапии отмечали исчезновение папул, подсыхание пустул. К концу пятой недели происходила полная ремиссия на всех пораженных участках кожи. Рецидивов не было в течение всего периода наблюдения (5 месяцев).

Пример 32. Больная З., 29 лет. Диагноз: acne vulgaris кожи лица и шеи. К концу первой недели после начала комплексного лечения "Депрекан-А", вакциной Wood 46 и местно гелем "Депрекан-А Гель" резко усилилась эффективность местного лечения; через 2 недели область поражения значительно сократилась; к концу пятой недели наблюдали полную ремиссию. Стойкое отсутствие рецидивов в течение четырех месяцев.

Пример 33. Больной X., 17 лет. Диагноз: acne vulgaris кожи спины и лица. Низкая эффективность тактивина и человеческого иммуноглобулина. Комплексная терапия "Депрекан-А" и вакциной Wood 46 с местным применением геля "Депрекан-А Гель" дала полную ремиссию в течение четырех недель. Рецидивы отсутствовали на протяжении трех месяцев (период наблюдения).

Формула изобретения

1. Биофармацевтический препарат на основе живой культуры Bacillus, содержащий рекомбинантный штамм Bacillus subtilis, продуцирующий альфа-2-интерферон человека, и наполнитель, отличающийся тем, что дополнительно содержит живую культуру Bacillus lichemformis при следующем соотношении компонентов: Bacillus subtilis - 10⁶ - 10⁷ КОЕ (колониеобразующая единица), Bacillus lichemformis - 10⁵ - 10⁶ КОЕ, наполнитель до 1000 мг, обладает антибактериальной, антивирусной и имменомодулирующей активностью.

2. Препарат по п.1, отличающийся тем, что содержит рекомбинантный штамм Bacillus subtilis ВКПМ-7289.

3. Препарат по пп.1 и 2, отличающийся тем, что он предназначен для лечения иммунодефицитного состояния.

4. Препарат по пп.1 - 3, отличающийся тем, что он предназначен для лечения интерферондефицитного синдрома.

5. Способ лечения заболевания инфекционной природы путем введения в организм препарата на основе живой культуры B.subtilis, отличающийся тем, что пациенту вводят биофармацевтический препарат по п.1 в эффективном количестве.

6. Способ по п.5, отличающийся тем, что инфекционное заболевание выбирают из группы бактериальных инфекций: энтерит, колит, острая кишечная инфекция (в том числе у детей младшего возраста), хламидиоз, бактериальный вагиноз, стафилококковая инфекция.

7. Способ лечения по п.5, отличающийся тем, что инфекционное заболевание выбирают из группы вирусных инфекций: вирусный гепатит A, B или C, инфекция, вызванная вирусом Herpes, вирусный энцефалит, инфекция, вызванная вирусом папилломы человека, острая респираторная вирусная инфекция, медленная вирусная инфекция (в том числе рассеянный склероз), серозный менингит.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4

MM4A - Досрочное прекращение действия патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 13.05.2007

Извещение опубликовано: 27.07.2008        БИ: 21/2008

---