Способ определения тетрациклинов с помощью пьезоэлектрического сенсора

Изобретение относится к области аналитической химии и может быть рекомендовано для селективного суммарного определения тетрациклинов в пищевых продуктах и комбинированных препаратах с помощью пьезоэлектрического иммуносенсора. Раскрыт способ суммарного определения антибиотиков тетрациклинового ряда с помощью пьезоэлектрического иммуносенсора, характеризующийся тем, что на поверхности сенсора нанесена подложка на основе самоорганизующихся монослоев тиолов 11-меркаптоундеканола и 2-амино-5-меркапто-1,3,4 - триазола, на которую иммобилизуют тетрациклин-белковый конъюгат, к пробе добавляют фиксированное количество поликлональных антител к тетрациклинам и выдерживают в течение 2-3 мин до образования иммунокомплекса, вводят в ячейку для детектирования в фосфатном буферном растворе с рН 7,1-7,2 и регистрируют изменение частоты колебания сенсора в результате взаимодействия несвязавшихся антител с тетрациклин-белковым конъюгатом на поверхности электродов сенсора, аналитический сигнал обратно пропорционален суммарной концентрации тетрациклинов в анализируемой пробе, концентрацию определяют по градуировочному графику, регенерацию рецепторного покрытия осуществляют нанесением на поверхность 0,1 М раствор гидрохлорида диэтиламина. Изобретение обеспечивает снижение предела обнаружения тетрациклинов и увеличение чувствительности определения с высокой достоверностью результатов, уменьшение времени анализа, расширение диапазона линейного определения, и проведение измерений с возможностью регенерации сенсора в течение 30 циклов измерения. 1 табл., 8 пр.

 

Изобретение относится к области аналитической химии и может быть рекомендовано для селективного суммарного определения тетрациклинов в пищевых продуктах и комбинированных препаратах с помощью пьезоэлектрического иммуносенсора.

В настоящее время для определения группы тетрациклина применяют методы: микробиологические [Fagbamila I. Antimicrobial screening of commercial eggs and determination of tetracycline residue using two microbiological methods / I. Fagbamila, J. Kabir, P. Abdu, G. Omeiza, P. Ankeli, S. Ngulukun, M. Muhammad, J. Umoh // International Journal of Poultry Science. - 2010. - V. 9 (10). - P. 959-962; Khismatoullin R. Modification of microbiological detection of tetracycline in honey / R. Khismatoullin, R. Kuzyaev, Ya. Lyapunov, E. Elovikova // APIACTA. - 2003. - V. 38. - P. 246-248; Kirbis A. Microbiological screening method for detection of aminoglycosides, b-lactames, macrolides, tetracyclines and quinolones in meat samples / A. Kirbis // Slov Vet Res. - 2007. - V. 44 (1/2). - P. 8-11], недостатком таких методов является невысокая чувствительность (предел обнаружения равен 30-40 мкг/кг), хотя эти тесты считаются быстрыми, они занимают 3-24 часа для работы в инкубаторе, бактериальные штаммы, должны постоянно контролироваться, чтобы убедиться, что они не стали устойчивыми к тетрациклинам, интерпретация результатов теста весьма субъективна и может привести к ложным отрицательным или положительным результатам; высоко-эффективной жидкостной хроматографии [Ahmadi F. Determination of tetracyclines in meat using two phases freezing extraction method and HPLC-DAD / Ahmadi F., Shahbazi Y., Karami N. // Food Analytical Methods. - 2015. - Volume 8, Issue 7, pp 1883-1891; Moats W.A. Rapid HPLC Determination of Tetracycline Antibiotics in Milk / W.A. Moats, R. Harik-Khan // J. Agric. Food Chem. - 1995. - V. 43 (4). - P. 931-934; Zhou J. Multiresidue determination of tetracycline antibiotics in propolis by using HPLC-UV detection with ultrasonic-assisted extraction and twostep solid phase extraction / J. Zhou, X. Xue, Yi Li, J. Zhang, F. Chen, L. Wu, L. Chen, J. Zhao // Food Chemistry. - 2009. - V. 115. - Is. 3. - P. 1074-1080; Moats W.A. Determination of tetracycline antibiotics in beef and pork tissues using ion-paired liguid chromatography / W.A. Moats // J. Agric Food Chem. - 2000. - V. 48(6). - P. 2244-2248; Pena A. Determination of tetracycline antibiotic residues in edible swine tissues by liguid chromatography with spectrofluorometric detection and confirmation by mass spectrometry / A. Pena, CM. Lino, R. Alonso, D.

Barcelo // J. Agric. Food Chem. - 2007. - V. 55 (13). - P. 4973-4979; A.R. Shalaby Validation of HPLC method for determination of tetracycline residues in chicken meat and liver / A.R. Shalaby, Nadia A. Salama, S.H. Abou-Raya, Wafaa H. Emam, F.M. Mehaya // Food Chemistry. - V. 124, I. 4, 2011, P. 1660-1666], имеющие достаточно сложную процедуру пробоподготовки с применением твердофазной экстракции и степень извлечения продуктов порядка 80%.

Наиболее близким по технике выполнения, является метод [F. Conzuelo, М. Gamella, S. Campuzano, A.J. Reviejo, and J.M. Pingarron. Disposable amperometric magneto-immunosensor for direct detection of tetracyclines antibiotics residues in milk. Analytica Chimica Acta 2012; 737, 29-36.] основанный на амперометрическом иммуносенсоре. Метод экспрессен, селективен, однако чувствительность данного метода не высока, пределы обнаружения составили 8,9 мкг/л для тетрациклина, 1,2 мкг/л для окситетрациклина, 66,8 мкг/л для хлортетрациклина.

Задачами настоящего изобретения являются возможность снижения предела обнаружения тетрациклинов и увеличение чувствительности определения с высокой достоверностью результатов, уменьшение времени анализа, расширение диапазона линейного определения, проведение измерений с возможностью регенерации сенсора в течение 30 циклов измерения.

Поставленные задачи решается тем, что анализ проводят в конкурентном режиме анализа с помощью пьезоэлектрических иммуносенсоров, имеющих на своей поверхности специально подготовленную подложку на основе самоорганизующихся монослоев тиолов.

Для определения наноконцентраций тетрациклиновых антибиотиков (тетрациклин, окситетрациклин, тетрациклина гидрохлорид, хлортетрациклин) на поверхности электрода сенсора формировали высокоаффинное наноструктурированное распознающее покрытие на основе 11-меркаптоундеканола и 2-амино-5-меркапто-1,3,4 - триазола, затем иммобилизовали конъюгат бычьего сывороточного альбумина с тетрациклином, а в пробу, содержащую определяемые тетрациклины, вводили заранее установленное количество антител, соответствующее 50%-ному связыванию и выдерживали в течение 3 мин до завершения образования гомогенного иммунного комплекса определяемого соединения (тетрациклина) с антителами. Затем пробу вводили в поток раствора-носителя, и после попадания ее в ячейку детектирования, измеряли аналитический сигнал сенсора в результате взаимодействия несвязавшихся антител с тетрациклин-белковым конъюгатом на поверхности электродов

сенсора. Аналитический сигнал сенсора обратно пропорционален содержанию тетрациклинов в анализируемой пробе. После каждого измерения осуществляют регенерацию покрытия рецепторного покрытия, нанося на поверхность 0,1 М раствор гидрохлорида диэтиламина.

Отличительными признаками предложенного способа являются:

- Высокая чувствительность способа, позволяющая осуществить определение суммарного количества тетрациклинов в пищевых продуктах в интервале концентраций 0,7-60,0 нг/мл, при этом предел обнаружения равен 0,21 нг/мл;

- Многократное (более 30 раз) использование иммуносенсора вследствие устойчивого покрытия, образованного методом самоорганизованных монослоев, а также регенерации биорецепторного покрытия после каждого цикла измерения;

- Высокая селективность определения тетрациклинов в сложных по составу смесях, в том числе, в присутствии антибиотиков, применяемых совместно с тетрациклинами (ПР%<5,00%);

- Относительно невысокая продолжительность анализа (15-20 мин).

Все это позволяет проводить определение антибиотиков группы тетрациклина в диапазоне концентраций 0,7-60,0 нг/мл в пищевых продуктах с помощью пьезоэлектрического иммуносенсора на основе самоорганизующихся монослоев тиолов. Высокая селективность обеспечивается использованием групп-специфичных иммунореагентов - поликлональных антител к тетрациклинам (ПР% 87-95%) и соединениям родственного строения (ПР%<5,00%). Многократное (более 30 раз) использование иммуносенсора после регенерации биорецепторного покрытия обеспечивает снижение затрат на осуществление анализа.

Способ осуществляется следующим образом:

Для создания иммуносенсора используется пьезоэлектрический массчувствительный резонатор АТ-среза с золотыми электродами диаметром 8 мм и собственной частотой колебаний (8-10 МГц)±1 Гц.

После тщательной очистки и обезжиривания ацетоном поверхность электрода обрабатывают 10 мкл смеси 0,06% и 0,03%-ных растворов 11-меркаптоундеканола и 2-амино-5-меркапто-1,3,4-триазола, высушивают на воздухе и выдерживают 60 мин при 80°C. Затем наносят 5 мкл 5% свежеприготовленного раствора глутарового альдегида, через 15-20 мин сенсор промывают бидистилированной водой и закрепляют 5 мкл 0,05%-го раствора тетрациклин-белкового конъюгата, на поверхности резонатора

происходит прочное закрепление биослоя. Сенсор выдерживают 10-12 часов при 4°C во влажной камере.

Перед началом первого измерения пьезоэлектрический иммуносенсор выдерживают в фосфатным буферным растворе (рН=7,2) в течение 30 мин до стабилизации сигнала сенсора. В пробу для определения антибиотика вводили фиксированное количество антител (100 мкл) и выдерживали в течение 2-3 минут до завершения образования гомогенного иммунного комплекса определяемого соединения тетрациклинового ряда с соответствующими групп-специфичными антителами. Затем пробу вводили в поток раствора-носителя, и после попадания ее в ячейку детектирования, измеряли аналитический сигнал сенсора в результате взаимодействия несвязавшихся антител с тетрациклин-белковым конъюгатом на поверхности электродов сенсора.

После измерения аналитического сигнала сенсора осуществляли разрушение образовавшегося иммунокомплекса и регенерацию биослоя. Частота колебаний сенсора при этом возвращается к исходному значению. После предварительной проподготовки, описанной выше, определяли концентрацию тетрациклина в пробе по предварительно построенному градуировочному графику.

Для построения градуировочного графика к 50 мл анализируемого раствора с концентрацией тетрациклина 0,5; 0,7; 1,0; 10,0; 20,0; 30,0; 50,0; 60,0 нг/мл прибавляют раствор антител, соответствующий 50%-ному связыванию, смесь доводят фосфатным буферным раствором до 1 мл и выдерживают до завершения реакции.

Значение аналитического сигнала обратно пропорционально содержанию аналита в пробе.

Градуировочный график для определения тетрациклинов линеен в диапазоне концентраций 0,7-60,0 нг/мл: Δf=-17 с+1247, где Δf - аналитический сигнал, Гц; с - концентрация тетрациклина в пробе, нг/мл.

Пример 1. Пробу, содержащую раствор тетрациклина с концентрацией 0,5 нг/мл, объемом 200 мкл вводили в ячейку в фосфатном буферном растворе (рН=7,1-7,2) и регистрировали изменение аналитического сигнала, в результате образования комплекса. Предварительно к пробе добавляли фиксированное количество антител к группе тетрациклиновых антибиотиков и выдержали в течение 3 минут до образования иммунокомплекса. Аналитический отклик сенсора обратно пропорционален содержанию тетрациклинов в растворе.

Регенерацию биочувствительного покрытия пьезоэлектрического сенсора осуществляли нанесением на поверхность раствора 0,1 М

гидрохлорида диэтиламина. Определение концентрации тетрациклина осуществляли по градуировочному графику, построенному с применением стандартных образцов.

Аналитический сигнал Δf=1238,5 Гц.

Пример 2. Пробу, содержащую раствор тетрациклина с концентрацией 0,7 нг/мл, объемом 200 мкл вводили в ячейку в фосфатном буферном растворе (рН=7,1-7,2) и регистрировали изменение аналитического сигнала, в результате образования комплекса. Предварительно к пробе добавляли фиксированное количество антител к группе тетрациклиновых антибиотиков и выдержали в течение 3 минут до образования иммунокомплекса. Аналитический отклик сенсора обратно пропорционален содержанию тетрациклинов в растворе.

Регенерацию биочувствительного покрытия пьезоэлектрического сенсора осуществляли нанесением на поверхность раствора 0,1 М гидрохлорида диэтиламина. Определение концентрации тетрациклина осуществляли по градуировочному графику, построенному с применением стандартных образцов.

Аналитический сигнал Δf=1235,1 Гц.

Пример 3. Пробу, содержащую раствор тетрациклина с концентрацией 1,0 нг/мл, объемом 200 мкл вводили в ячейку в фосфатном буферном растворе (рН=7,1-7,2) и регистрировали изменение аналитического сигнала, в результате образования комплекса. Предварительно к пробе добавляли фиксированное количество антител к группе тетрациклиновых антибиотиков и выдержали в течение 3 минут до образования иммунокомплекса. Аналитический отклик сенсора обратно пропорционален содержанию тетрациклинов в растворе.

Регенерацию биочувствительного покрытия пьезокварцевого сенсора осуществляли нанесением на поверхность раствора 0,1 М гидрохлорида диэтиламина. Определение концентрации тетрациклина осуществляли по градуировочному графику, построенному с применением стандартных образцов.

Аналитический сигнал Δf=1230,0 Гц.

Пример 4. Пробу, содержащую раствор тетрациклина с концентрацией 10,0 нг/мл, объемом 200 мкл вводили в ячейку в фосфатном буферном растворе (рН=7,1-7,2) и регистрировали изменение аналитического сигнала, в результате образования комплекса. Предварительно к пробе добавляли фиксированное количество антител к группе тетрациклиновых антибиотиков и выдержали в течение 3 минут до образования иммунокомплекса.

Аналитический отклик сенсора обратно пропорционален содержанию тетрациклинов в растворе.

Регенерацию биочувствительного покрытия пьезокварцевого сенсора осуществляли нанесением на поверхность раствора 0,1 М гидрохлорида диэтиламина. Определение концентрации тетрациклина осуществляли по градуировочному графику, построенному с применением стандартных образцов.

Аналитический сигнал Δf=1077 Гц.

Пример 5. Пробу, содержащую раствор тетрациклина с концентрацией 20,0 нг/мл, объемом 200 мкл вводили в ячейку в фосфатном буферном растворе (рН=7,1-7,2) и регистрировали изменение аналитического сигнала, в результате образования комплекса. Предварительно к пробе добавляли фиксированное количество антител к группе тетрациклиновых антибиотиков и выдержали в течение 3 минут до образования иммунокомплекса. Аналитический отклик сенсора обратно пропорционален содержанию тетрациклинов в растворе.

Регенерацию биочувствительного покрытия пьезокварцевого сенсора осуществляли нанесением на поверхность раствора 0,1 М гидрохлорида диэтиламина. Определение концентрации тетрациклина осуществляли по градуировочному графику, построенному с применением стандартных образцов.

Аналитический сигнал Δf=907 Гц.

Пример 6. Пробу, содержащую раствор тетрациклина с концентрацией 30,0 нг/мл, объемом 200 мкл вводили в ячейку в фосфатном буферном растворе (рН=7,1-7,2) и регистрировали изменение аналитического сигнала, в результате образования комплекса. Предварительно к пробе добавляли фиксированное количество антител к группе тетрациклиновых антибиотиков и выдержали в течение 3 минут до образования иммунокомплекса. Аналитический отклик сенсора обратно пропорционален содержанию тетрациклинов в растворе.

Регенерацию биочувствительного покрытия пьезокварцевого сенсора осуществляли нанесением на поверхность раствора 0,1 М гидрохлорида диэтиламина. Определение концентрации тетрациклина осуществляли по градуировочному графику, построенному с применением стандартных образцов.

Аналитический сигнал Δf=737 Гц.

Пример 7. Пробу, содержащую раствор тетрациклина с концентрацией 50,0 нг/мл, объемом 200 мкл вводили в ячейку в фосфатном буферном растворе (рН=7,1-7,2) и регистрировали изменение аналитического сигнала, в

результате образования комплекса. Предварительно к пробе добавляли фиксированное количество антител к группе тетрациклиновых антибиотиков и выдержали в течение 3 минут до образования иммунокомплекса. Аналитический отклик сенсора обратно пропорционален содержанию тетрациклинов в растворе.

Регенерацию биочувствительного покрытия пьезокварцевого сенсора осуществляли нанесением на поверхность раствора 0,1 М гидрохлорида диэтиламина. Определение концентрации тетрациклина осуществляли по градуировочному графику, построенному с применением стандартных образцов.

Аналитический сигнал Δf=397 Гц.

Пример 8. Пробу, содержащую раствор тетрациклина с концентрацией 60,0 нг/мл, объемом 200 мкл вводили в ячейку в фосфатном буферном растворе (рН=7,1-7,2) и регистрировали изменение аналитического сигнала, в результате образования комплекса. Предварительно к пробе добавляли фиксированное количество антител к группе тетрациклиновых антибиотиков и выдержали в течение 3 минут до образования иммунокомплекса. Аналитический отклик сенсора обратно пропорционален содержанию тетрациклинов в растворе.

Регенерацию биочувствительного покрытия пьезокварцевого сенсора осуществляли нанесением на поверхность раствора 0,1 М гидрохлорида диэтиламина. Определение концентрации тетрациклина осуществляли по градуировочному графику, построенному с применением стандартных образцов.

Аналитический сигнал Δf=227 Гц.

Данный способ позволяет существенно увеличить чувствительность определения тетрациклинов в пищевых продуктах, а также обеспечивает многократное использование иммуносенсора после регенерации биорецепторного покрытия, что снижает затраты на осуществление анализа.

Сравнительная характеристика известного и предлагаемого способа определения тетрациклинов приведена в таблице.

Способ суммарного определения антибиотиков тетрациклинового ряда с помощью пьезоэлектрического иммуносенсора, отличающийся тем, что на поверхности сенсора нанесена подложка на основе самоорганизующихся монослоев тиолов 11-меркаптоундеканола и 2-амино-5-меркапто-1,3,4 - триазола, на которую иммобилизуют тетрациклин-белковый конъюгат, к пробе добавляют фиксированное количество поликлональных антител к тетрациклинам и выдерживают в течение 2-3 мин до образования иммунокомплекса, вводят в ячейку для детектирования в фосфатном буферном растворе с рН 7,1-7,2 и регистрируют изменение частоты колебания сенсора в результате взаимодействия несвязавшихся антител с тетрациклин-белковым конъюгатом на поверхности электродов сенсора, аналитический сигнал обратно пропорционален суммарной концентрации тетрациклинов в анализируемой пробе, концентрацию определяют по градуировочному графику, регенерацию рецепторного покрытия осуществляют нанесением на поверхность 0,1 М раствор гидрохлорида диэтиламина.



 

Похожие патенты:

Предложенная группа изобретений относится к области медицины. Предложены способы детекции присутствия в образце биологической жидкости основания ДНК, связанного с внеклеточной нуклеосомой, способ оценки животного субъекта или человека в отношении пригодности для терапевтического лечения, способ наблюдения лечения животного субъекта или человека и применение основания ДНК, связанного с внеклеточной нуклеосомой, в качестве биомаркера в образце биологической жидкости для диагностики рака, причем основание ДНК выбрано из 5-метилцитозина или 5-гидроксиметилцитозина.

Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ дифференциальной диагностики грибовидного микоза от хронических дерматозов, включающий проведение у больного конфокальной лазерной сканирующей микроскопии наиболее инфильтрированного участка кожи, выявление патоморфологических признаков и балльную оценку их степени выраженности, характеризующийся тем, что определяют F – суммарный диагностический индикатор указанных патоморфологических признаков по формуле , где p1 – эпидермальная деструкция (от 0 до 3 баллов); р2 – микроабсцессы Потрие (от 0 до 1 балла); р3 – присутствие атипичных лимфоцитов в эпидермисе (от 0 до 3 баллов); р4 – присутствие атипичных лимфоцитов в дермо-эпидермальном соединении (от 0 до 3 баллов); р5 – потеря контура сосочков (от 0 до 3 баллов); р6 – присутствие атипичных лимфоцитов в дерме (от 0 до 3 баллов); и при значении F<5,8 диагностируют хронический дерматоз, при значении 5,9≤F≤6,8 – диагноз не уточнен, а при значении F≥6,9 – грибовидный микоз.

Изобретение относится к технике исследования механических свойств материалов. Способ включает в себя подготовку стерильной плотной питательной среды (СППС, представляющей собой водный раствор с рН 7,2±0,3, содержащий 13-19 г/л агар-агара + 8-12 г/л сахарозы + 1,3-1,9 г/л NH4NO3 + 0,4-0,6 г/л KH2PO4 + 0,4-0,6 г/л NaH2PO4 + 0,6-0,8 г/л (NH4)2SO4 + 0,18-0,22 г/л Mg(NO3)2 + 0,05-0,07 г/л FeCl3 + 0,018-0,022 г/л CaCl2), подготовку плотной питательной среды с тестовыми микроорганизмами (МППС, состоящей из СППС с выращенной на ее поверхности сплошной колонией Rhodotorula sp.

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к иммунологии, и может быть использовано в медицине и диагностике состояний у млекопитающего, характеризующихся гиперчувствительностью к арахису или лесным орехам, которые содержат Ara h 1.

Изобретение относится к области биотехнологии. Описано получение рекомбинантного антигена вирусного капсида цирковируса свиней 2 (PCV-2) и его модификации путем экспрессии в прокариотической системе, очистки в мономерной форме, выделения вирусоподобных частиц (ВПЧ) и его применение в композициях вакцин, диагностических наборах и системе для количественной оценки антигена PCV-2 в партиях вакцин путем анализа с помощью (антиген)захватывающего ELISA.

Изобретение относится к биологии и токсикологической химии. Способ определения нифедипина в биологическом материале заключается в том, что биологический объект измельчают, двукратно по 30 минут обрабатывают порциями органического изолирующего агента, которым является ацетон, полученные органические извлечения объединяют, растворитель из объединенного извлечения испаряют в токе воздуха, остаток неоднократно обрабатывают ацетоном, ацетоновые извлечения отделяют, объединяют, упаривают в токе воздуха при температуре 18-22°С до полного удаления растворителя, остаток растворяют в смеси растворителей ацетон-вода в отношении 7:3 по объему, хроматографируют в макроколонке с сорбентом «Силасорб С-18» 30 μ, элюируя смесью растворителей ацетон-вода в отношении 7:3 по объему, фракции элюата, содержащие анализируемое вещество, объединяют, элюент испаряют, остаток растворяют в смеси растворителей ацетонитрил-фосфатный буферный раствор с рН 9 в отношении 5:5 по объему и проводят определение методом ВЭЖХ с применением подвижной фазы ацетонитрил-фосфатный буферный раствор с рН 9 в отношении 5:5 по объему, подаваемой со скоростью 1000 мкл/мин, и УФ-детектора, регистрирующего оптическую плотность при 250 нм.
Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, клинической лабораторной диагностике и гематологии. Способ определения резистентности к антиагрегантным препаратам у пациентов с ишемической болезнью сердца, принимающих лекарственные средства группы антиагрегантов не менее 6 месяцев, заключается во взятии крови в пробирку с 3,8% цитратом натрия в соотношении 9:1, разделении центрифугированием на плазму и эритроциты с получением богатой и бедной тромбоцитами плазмы, определении индивидуально пациенту значений светопропускания с графической регистрацией в течение 5 мин с постоянным перемешиванием и температурой 37°С, добавлении к суспензии тромбоцитов в соотношении 10:1 индуктора агрегации тромбоцитов коллагена однократно на 10 секунде регистрации агрегации тромбоцитов на лазерном агрегометре в концентрации 2 мкмоль/л, при этом дополнительно вносят к богатой тромбоцитами плазме индуктор коллаген в соотношении 2:1 по 2 мкмоль/л на 1, 2, 3 и 4 минутах исследования и при получении значений агрегации тромбоцитов в диапазоне от 45 до 100% определяют резистентность к антиагрегантным препаратам.

Изобретение относится к области медицины, в частности к молекулярной онкологии, и предназначено для прогнозирования развития метастазов в печени у больных раком толстой кишки.

Изобретение относится к наборам для иммунохимического анализа антител и антигенов в препаратах крови и может быть использовано в медицинской диагностике. Раскрыт набор для мультиплексного иммунохимического анализа антител и антигенов в препаратах крови, включающий устройство в виде гребенчатой подложки с набором дискретно нанесенных на поверхности зубцов подложки реагентов захвата маркеров инфекционных заболеваний и дополнительно блокированной неспецифическими природными или синтетическими полимерами; емкость для проведения анализа, содержащую несколько рядов изолированных ячеек, выполненных с возможностью введения каждого зубца подложки в отдельную ячейку ванны; растворы для разведения образца и отмывок; конъюгат для детекции; встроенные положительный контроль и отрицательный контроль.

Изобретение относится к области лабораторной диагностики, медицинской иммунологии и микробиологии и предназначено для определения общей антимикробной активности и совокупной активности антимикробных пептидов (АМП) в клинических образцах сыворотки крови.

Изобретение относится к наборам для иммунохимического анализа антител и антигенов в препаратах крови и может быть использовано в медицинской диагностике. Раскрыт набор для мультиплексного иммунохимического анализа антител и антигенов в препаратах крови, включающий устройство в виде гребенчатой подложки с набором дискретно нанесенных на поверхности зубцов подложки реагентов захвата маркеров инфекционных заболеваний и дополнительно блокированной неспецифическими природными или синтетическими полимерами; емкость для проведения анализа, содержащую несколько рядов изолированных ячеек, выполненных с возможностью введения каждого зубца подложки в отдельную ячейку ванны; растворы для разведения образца и отмывок; конъюгат для детекции; встроенные положительный контроль и отрицательный контроль.

Изобретение относится к наборам для иммунохимического анализа антител и антигенов в препаратах крови и может быть использовано в медицинской диагностике. Раскрыт набор для мультиплексного иммунохимического анализа антител и антигенов в препаратах крови, включающий устройство в виде гребенчатой подложки с набором дискретно нанесенных на поверхности зубцов подложки реагентов захвата маркеров инфекционных заболеваний и дополнительно блокированной неспецифическими природными или синтетическими полимерами; емкость для проведения анализа, содержащую несколько рядов изолированных ячеек, выполненных с возможностью введения каждого зубца подложки в отдельную ячейку ванны; растворы для разведения образца и отмывок; конъюгат для детекции; встроенные положительный контроль и отрицательный контроль.

Группа изобретений относится к устройству для диагностики in vitro и применению этого устройства для идентификации и определения групп крови. Раскрыто устройство (10) для диагностики in vitro для детекции по меньшей мере одной реакции между антигеном эритроцитарного фенотипа и антителом, содержащее подложку (12) и гидрофобную пористую мембрану (14) толщиной от 0,05 до 1,5 мм с диаметром пор от 2 до 30 мкм, причем указанная мембрана содержит по меньшей мере одну гидрофильную область реакции (16), предназначенную для получения указанного образца, и поверхность гидрофильной области реакции (16) меньше поверхности гидрофобной пористой мембраны (14).

Изобретение относится к области ветеринарии. Предложен способ определения специфических антител к вирусу гепатита утят типа I путем проведения ИФА, включающий получение антигена.

Изобретение относится к области ветеринарии. Предложен способ определения специфических антител к вирусу гепатита утят типа I путем проведения ИФА, включающий получение антигена.

Группа изобретений относится к биотехнологии, медицине и биохимии, в частности к аналитической биохимии и иммунохимическому анализу. Раскрыт биологический микрочип для обнаружения экзосом в сыворотке крови человека, представляющий собой массив трехмерных гидрогелевых элементов полусферической формы диаметром 100 мкм на поверхности стеклянного слайда, причем гидрогелевые элементы получены путем полимеризации смеси, содержащей гелеобразующие мономеры на основе метакриламида и моноклональные антитела CD81, CD147, А33, при этом биологический микрочип включает гидрогелевые элементы, в каждом из которых иммобилизовано индивидуальное антитело, а также пустые гидрогелевые элементы, не содержащие иммобилизованных молекулярных зондов, для контроля неспецифических взаимодействий.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению конъюгатов люминесцентных наночастиц диоксида кремния с антителами, и может быть использовано в диагностике для выявления гиперэкспрессирующегося на поверхности опухолевых клеток рецептора эпидермального фактора роста человека 2 (HER2/neu).

Изобретение относится к области медицины, молекулярной биологии и микробиологии. Предложен способ определения генетических детерминант резистентности возбудителя туберкулеза к бедаквилину и линезолиду, включающий мультиплексную амплификацию генов Rv0678, atpE, 23S рРНК, rplC, обеспечение олигонуклеотидного микрочипа для установления наличия/отсутствия точечных мутаций, инсерций, делеций в указанных генах, гибридизацию амплифицированных флуоресцентно-меченных продуктов на олигонуклеотидном микрочипе и регистрацию результатов гибридизации.

Изобретение относится к медицине и касается способа выявления продуктов протеолиза MUC-1, имеющих С-концевой лизин в жидкости, при котором приводят в контакт исследуемую жидкость с тест-системой для выявления продуктов протеолиза MUC-1, имеющих С-концевой лизин, которая включает по крайней мере выбранную одну из: полноразмерная молекула плазминогена, ее фрагмент, имеющий последовательность SEQ ID NO: 1-4, 6-20.

Группа изобретений относится к области техники, раскрывающей биологические или химические исследования. Биодатчик содержит основу устройства, имеющую матрицу светочувствительных датчиков и матрицу световодов.

Изобретение относится к области ветеринарной микробиологии и касается иммуноферментной тест-системы для серологической диагностики инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота и контроля напряженности поствакцинального иммунитета. Раскрыта иммуноферментная тест-система для определения специфических антител к бактериям Moraxella bovoculi в сыворотке крови крупного рогатого скота, которая содержит специфический антиген запатентованного штамма «СХ-Ч6 № - ДЕП» Moraxella bovoculi, полученный путем 3-кратного отмыва их 0,01 М фосфатно-буферным физиологическим раствором и последующим разрушением бактериальных клеток ультразвуком на дезинтеграторе «Bandelin GM3100» при частоте 20 kНz ± 500 Гц в течение 10 мин при 4°С, дальнейшим осаждением антигена Moraxella bovoculi трихлоруксусной кислотой при 5%-ном насыщении и диализом против водопроводной воды, представляющего собой специфический белок в концентрации 9-12 мкг/см3, адсорбированный на поверхности полистироловых лунок в карбонатно-бикарбонатном буфере. Тест-система также включает контрольную положительную сыворотку, полученную к антигену Moraxella bovoculi с титрами антител 1:6400-1:12800 в ИФА, контрольную отрицательную сыворотку, пероксидазный конъюгат против IgG быка, буферные растворы: фосфатно-буферный раствор рН 7,2-7,4 с Твином-20 (детергентом) для разведения контрольных, исследуемых сывороток и промывки панелей; фосфатно-буферный раствор рН 7,2-7,4 для разведения конъюгата; хромоген-субстратный раствор, включающий ортофенилендиамин и перекись водорода, стоп-реагент и панели для постановки реакции иммуноферментного анализа. Тест-система позволяет проводить диагностику инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота и определить напряженность поствакцинального иммунитета с высокой чувствительностью и специфичностью. 2 табл., 5 пр.

Изобретение относится к области аналитической химии и может быть рекомендовано для селективного суммарного определения тетрациклинов в пищевых продуктах и комбинированных препаратах с помощью пьезоэлектрического иммуносенсора. Раскрыт способ суммарного определения антибиотиков тетрациклинового ряда с помощью пьезоэлектрического иммуносенсора, характеризующийся тем, что на поверхности сенсора нанесена подложка на основе самоорганизующихся монослоев тиолов 11-меркаптоундеканола и 2-амино-5-меркапто-1,3,4 - триазола, на которую иммобилизуют тетрациклин-белковый конъюгат, к пробе добавляют фиксированное количество поликлональных антител к тетрациклинам и выдерживают в течение 2-3 мин до образования иммунокомплекса, вводят в ячейку для детектирования в фосфатном буферном растворе с рН 7,1-7,2 и регистрируют изменение частоты колебания сенсора в результате взаимодействия несвязавшихся антител с тетрациклин-белковым конъюгатом на поверхности электродов сенсора, аналитический сигнал обратно пропорционален суммарной концентрации тетрациклинов в анализируемой пробе, концентрацию определяют по градуировочному графику, регенерацию рецепторного покрытия осуществляют нанесением на поверхность 0,1 М раствор гидрохлорида диэтиламина. Изобретение обеспечивает снижение предела обнаружения тетрациклинов и увеличение чувствительности определения с высокой достоверностью результатов, уменьшение времени анализа, расширение диапазона линейного определения, и проведение измерений с возможностью регенерации сенсора в течение 30 циклов измерения. 1 табл., 8 пр.

Наверх