Патент ссср 271723
271723
ОП ИСАН И Е
ИЗОБРЕТЕН ИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
Союз Советскив
Соаиалистичвскив
Ресотблик
Зависимое от авт. свидетельства №
Заявлено 30.XI.1966 (№ 1114921/31-16) с присоединением заявки №
Приоритет
Опубликовано 26.Ч.1970. Бюллетень ¹ 18
Дата опубликования описания 8.IX.1970
Кл. 30h, 6
МПК А 61k 27/00
УДК 577.154.365 (088.8) Комитет оо делаю изооретеиий и CTKpblTHA ори Совете Министров
СССР яя!..й .т,» ЮМ я Л
Авторы изобретения
Е. М. Смирнова и Б. H. Грачев плтснтн0"
1 „,тяхнячхсхяя "
ЬКЬ. 1ЙОТЕК4
Заявитель
Ленинградский научно-исследовательский институт и сывороток »»»»а»»
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГИАЛУРОНИДАЗЪ|
Способ получения гпалуронидазы путем выращивания стрептококка на среде Конникова, отличающийся тем, что, с целью повышения
20 чистоты и обеспечения стерильности препарата, культуру стрептококка фильтруют через стерилизующую асбестовую пластинку, затем осаждают активное вещество из фильтратг сернокислым аммонием, растворяют осадок в
25 физиологическом растворе, очищают на колонке с сефадексом, фильтруют через асбестовую пластинку, обработанную донорской сывороткой, Н, иофилизу IoT.
Известны способы получения гиалуронидазы путем выращивания стрептококка на среде
Конникова.
Предлагаемый способ отличается от известных тем, что культуру стрептококка фильтруют через асбестовую пластину, затем осаждают активное вещество из фильтрата сернокнслым аммонием, растворяют осадок в физиологическом растворе, очищают на колонке с сефадексом, фильтруют через асбестовую пластинку, обработанную донорской сывороткой, и лиофилизуют.
Такая методика позволяет повысить чистоту и обеспечить стерильность препарата.
Для получения гиалуронидазы по предлагаемому способу культуру стрептококка, I3bI;)3щенную на среде Конникова, фильтруют через фильтр Сальникова, собранный со стерилизующей асбестовой пластинкой, в количесгве
5 л бульонной культуры через одну пластинку. Стерильный фильтр ат обрабатывают сер нокислым аммонием в количестве 450 г/л. После выдерживания в течение 12 — 16 час при 2 — 8 C образовавшийся осадок отделяют цептрифугированием, растворяют в минимальном количестве физиологического раствора и очищают пропусканием через колонку с сефадексом, предварительно замоченным в ф1гзиолоГическом растворе и стерилизованным паром при
100 С. Очищенный препарат фильтруют через стерилизующую асбестовую пластинку, обработанную донорской сывороткой (прокипячен5 ный в течение 10 л ин 10%-ный раствор сыворотки пропускают под вакуумом через асбестовую пластинку, после чего ее стерилизуют паром в течение 30 лин). Полученный препарат разливают в вакуумные ампулы, замора10 живают при минус 35 — 40 С и сушат в вакуумсушильном аппарате при остаточном давлении
100 — 150 л к и температуре не выше 30 С в течение 2 суток.
15 Предмет изобретения
