Средство антибактериальное на основе экстракта мха сфагнума

Авторы патента:

A61P29/00 - Анальгетики нецентрального действия, жаропонижающие или противовоспалительные средства, например противоревматические средства; нестероидные противовоспалительные средства (НПВС)

A61P17/02 - для обработки ран, язв, ожогов, шрамов, келоидов или подобных заболеваний

A61K36/10 - Лекарства и медикаменты для терапевтических, стоматологических или гигиенических целей (изготовление специальных лекарственных форм A61J; химические аспекты или использование материалов для дезодорации воздуха, для дезинфекции или стерилизации или для бандажей, перевязочных средств, впитывающих прокладок или хирургических приспособлений A61L; соединения как таковые C01, C07,C08,C12N; мыла C11D; микроорганизмы как таковые C12N)

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к средству антибактериальному на основе экстракта мха сфагнума. Средство, обладающее антибактериальным действием, представляет собой экстракт мха сфагнума, полученный экстракцией мха сфагнума бензиловым спиртом по Босину в трех перколяторах при настаивании сырья в каждом перколяторе в течение 12 ч. Вышеописанное средство обладает выраженным антибактериальным действием. 4 табл.

Изделие (экстракт) относится к области медицины, а именно к лекарственным средствам, обладающим антибактериальным действием.

Лечение и рациональная антибактериальная терапия раневых поражений определяется назначением различных лекарственных средств с антимикробным действием. На сегодняшний день фармацевтическая промышленность выпускает большое количество антибактериальных и противогрибковых средств в форме мазей, гелей, порошков (метилурациловая мазь, нистатин, сангвиритрин и т.д.), многие из которых обладают побочными эффектами в виде желудочно-кишечных и аллергических реакций [1]. Поэтому разработка нетоксичных препаратов растительного происхождения, позволяющих мягко обеспечить антибактериальный эффект, не оказывая токсического воздействия, является приоритетной задачей.

Известно использование сфагнового мха в народной медицине в основном качестве перевязочного средства, кроме того, в настоящее время проводятся научные исследования по использованию экстрактов мха сфагнума в качестве ранозаживляющего средства.

Наиболее близким к предлагаемому является средство, полученное в лаборатории ГОУ ВПО СибГМУ РОСЗДРАВА, представляющее 20% водно-этанольный экстракт Sphagnum fuscum. Средство получали методом реперколяции по Н.А. Чулкову. Различают два периода: в пусковой период ежедневно загружают по одному перколятору и слива готового продукта не производят.В каждый перколятор загружают равное количество сырья, которое предварительно заливают равным количеством чистого экстрагента (для 1-го перколятора) или извлечением, полученным из предыдущего перколятора (для 2-го и всех последующих перколяторов). Набухшее сырье загружают в первый перколятор, заливают экстрагентом до «зеркала» и оставляют на сутки. На следующий день из первого перколятора сливают извлечения в два приема: первое извлечение - в объеме, равном массе сырья, загруженного в перколятор, используемое для замачивания сырья для второго перколятора, и второе извлечение - в двойном объеме по отношению к массе сырья, используемое для настаивания сырья во втором перколяторе. В это время в первый перколятор подают свежий экстрагент в количестве, равном сумме извлечений. На третий день из второго перколятора собирают также два извлечения: для работы с сырьем, предназначенным для загрузки в третий перколятор. Во второй перколятор подают вытяжки из первого перколятора, а в него снова подают свежий экстрагент. Далее процесс проводится аналогично. Через сутки после загрузки последнего перколятора начинается рабочий период. В это время из последнего перколятора сливают первую порцию готового продукта в объеме, равном массе сырья в этом перколяторе. Одновременно из первого перколятора сливают все вытяжки и подают их во второй перколятор. Сырье в первом перколяторе полностью истощено. Свежий экстрагент подают во второй перколятор, который теперь становится хвостовым. Первый перколятор становится головным. Сбор готового продукта производится ежедневно из головного перколятора, которым является каждый, вновь загруженный сырьем [2].

Прототип имеет следующие недостатки:

• метод, используемый для экстракции более продолжителен, чем метод реперколяции по Босину;

• этиловый спирт является более дорогостоящим экстрагентом растительного сырья по сравнению с бензиловым спиртом.

Новая техническая задача - расширить ассортимент средств на основе растительного сырья, обладающих антибактериальным действием.

Поставленная задача решена следующим образом - антибактериальное средство на основе сфагнового мха, содержащее большое количество бензойной кислоты и ее эфиров, обладающих антисептическим действием.

Средство получали методом реперколяции по Босину. Экстракцию проводили методом реперколяции в 3 перколяторах. Для этого измельченное сырье помещают в перколятор 1, заливают бензиловым спиртом и оставляют на 12 ч. После 12 часов настаивания из перколятора 1 сливают извлечение и заливают им готовое сырье в перколяторе 2 с одновременной подачей в перколятор 1 свежего экстрагента. После 12 часов настаивания из перколяторов 1 и 2 сливают извлечения. При этом перколятор 1 пополняется свежим экстрагентом, а перколятор 2 - извлечением из перколятора 1, перколятор 3 - извлечением из перколятора 2. После 12 часов сливают готовое извлечение из последнего перколятора и объединяют с извлечениями, полученными в рабочий период. Готовый жидкий экстракт фильтруют через бумажный фильтр.

Качественный состав продукта исследовался на газовом хроматографе с масс-спектрометрическим и пламенно-ионизационным детекторами MSClarus 500. Газохроматографический анализ выполняли на капиллярной колонке длиной 60 м внутренним диаметром 0,32 мм SGE-Wax в режиме программирования температуры, газ-носитель гелий. Управление прибором осуществлялось с использованием программы TurboMass. Идентификацию спектров проводили с помощью библиотеки масс-спектров NIST'14.

Информация, характеризующая химический состав сфагнового экстракта мха, полученная в результате исследования представлена в таблице.

Оценку роста микроорганизмов производили с помощью двух методов: диско-диффузионный и фотометрический. В экспериментах использовались штаммы микроорганизмов: S. aureus АТСС 25923, P. Aeruginosa 27853 АТСС, S. Enteritidis 495, С.Albicans 24433 АТСС.

Диско-диффузионный метод заключался в следующем: в стерильные чашки Петри диаметром 10 см наливали по 20 мл расплавленного питательного агара. Для получения равномерного бактериального газона на поверхность агара в чашку добавляли по 0,2 мл взвеси испытуемой культуры. Жидкость равномерно распределяли по поверхности чашки. Избыток жидкости отсасывали пастеровской пипеткой, затем подсушивали агар в термостате при закрытой чашке.

На поверхность засеянного агара на расстоянии 2 см от края чашки и на ровном расстоянии друг от друга раскладывали пинцетом по одному бумажные диски, пропитанные экстрактом. На дне чашки подписывали название экстракта, которым пропитан диск. Чашки помещали в термостат на 24 часа. Для учета результатов определяли диаметр зоны задержки роста микроорганизма вокруг дисков, используя миллиметровую линейку, циркуль, миллиметровую бумагу, или же специальный измеритель [3].

Отсутствие задержки роста указывают на резистентность исследуемого микроорганизма к данному экстракту. Зоны, диаметр которых не превышают 15 мм, свидетельствуют о слабой чувствительности к экстракту. Зоны от 15 до 25 мм встречаются у чувствительных микроорганизмов.

В результате проведенного эксперимента выявлено, что бензиловый экстракт сфагнового мха, наиболее чувствителен к S. aureus диаметр задержки роста составил 21 мм и С.albicans 23 мм.

Для выявления антилизоцимной активности (АЛА) микроорганизмов использовали фотометрический метод О.В. Бухарина. Биомассу исследуемых культур стандартной бактериологической петлей засевали в 3 мл жидкой питательной среды. Посевы факультативных анаэробов культивировали в термостате при 37°С в течении 24 часов. Затем производили измерения оптической плотности (Do) бульонной культуры против бульона (Y) на фотометре Multiskan FC, длина волны 450 нм. Супернатант отделяли от микробных клеток центрифугированием при 3000 об/мин в течение 15 минут. В качестве тест-штамма для определения АЛА, использовали ацетонированную агарную культуру Micrococcus luteus АТСС 158307. Культуру растворяли в физиологическом растворе, доводили до оптической плотности тест-штамма до 0,300 (0,28-0,32). На 1/5 М фосфатном буфере (рН=6,2) готовили раствор лизоцима с концентрацией 20 мкг/мл.

Супернатант исследуемых микроорганизмов объемом 0,9 мл смешивали с 0,1 мл приготовленного раствора лизоцима и инкубировали 60-120 мин при 37°С. Затем 50 мкл смеси супернатанта с лизоцимом помещали в полистеролловый планшет по вертикальным рядам. Верхняя и нижняя лунки - контроли: смесь питательного бульона и лизоцима. В лунки каждого ряда планшета вносили по 200 мкл суспензии микрококка многоканальной пипеткой. Замер оптической плотности проводи через 30 и 150 секунд после внесения в лунки микрококка [4, 5].

Из представленных данных, экстракт сфагнового мха способствует увеличению АЛА у S. aureus, из этого следует что, несмотря на подавление роста микроорганизма данный экстракт нельзя применять по отношению к нему, так как он повышает устойчивость микроорганизма к одному из факторов местной защиты организма человека и животных. По отношению к P. aeruginosa и С. albicans экстракт способствует снижению АЛА на 1,08 мкг/мл*OD и 1,39 мкг/мл*OD.

Экспериментальные исследования гемолитической активности микроорганизмов проводились с использованием стандартного штамма: S. aureus АТСС 25923, P. Aeruginosa 27853 АТСС, S. Enteritidis 495, С. Albicans 24433 АТСС. Исходный уровень гемолитической активности (ГА) определяли фотоэлектроколориметрически по способности супернатантов, изучаемых микроорганизмов лизировать эритроциты человека 0 (I) группы Rh (+) [6]. Все растворы и питательные среды готовили на деионизированной воде. Изучение влияния экстракта мха на ГА бактерий проводили на Шедлер бульоне.

Бактерии для эксперимента выращивали в течение 24 ч на скошенном мясопептонном агаре при 37°С, смывали физиологическим раствором, полученную микробную взвесь титровали до оптической плотности 0,500-0,510 опт. ед.

В 2 мл стерильного бульона Шедлер вносили 0,2 мл экстракта, 0,2 мл 5% взвеси эритроцитов человека 0 (I) группы Rh (+) в физиологическом растворе и 0,1 мл микробной взвеси. В контрольные пробирки вместо микробной взвеси вносили 0,1 мл стерильного физиологического раствора. Посевы культивировали при 37°С в течение 2 часов и центрифугировали 15 мин при 3000 g. Оптическую плотность над осадочной жидкости измеряли относительно воды (λ=543 нм). ГА выражали в %.

Снижение гемолитической активности наблюдается у S. aureus на 6,4%; у P. aeruginosa 3,9%. На гемолитическую активность по отношению к S. enteritidis, экстракт не влияет.

Источники информации

1. Галимзянов Ф.В. Местное лечение и рациональная антибактериальная терапия инфицированных ран. Учебное пособие. - Екатеринбург, 2013. - 75 с.

2. Пономарев В.Д. Экстрагирование лекарственного сырья. - М.: Медицина, 1976. - 202 с.

3. МУК 4.2.1890-04 Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам.

4. Бухарин О.В., Валышев А.В., Елагина Н.Н. и др. Фотометрическое определение антилизоцимной активности микроорганизмов // ЖМЭИ. - 1997. - №4. - С. 117-120.

5. Бухарин О.В., Васильев Н.В. Лизоцим и его роль в биологии и медицине. - Томск: Изд-во Томского университета, 1974. - С. 207.

6. Бухарин О.В., Стадников А.А., Усвяцов Б.Я., Ханина Е.А. Особенности взаимодействия бактерий с эритроцитами и их роль в развитии инфекционной анемии // Журн. микробиол. 2006. №4. - С. 25-28.

Средство, обладающее антибактериальным действием, характеризующееся тем, что представляет собой экстракт мха сфагнума, полученный экстракцией мха сфагнума бензиловым спиртом по Босину в трех перколяторах при настаивании сырья в каждом перколяторе в течение 12 ч.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу выделения суммы фурокумаринов из травы болиголова пятнистого. Способ выделения суммы фурокумаринов из травы болиголова пятнистого (Conium maculatum L., сем.

Способ получения средства, обладающего стресспротективной, антигипоксической и анксиолитической активностью // 2705582

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения средства, обладающего стресспротективной, антигипоксической и анксиолитической активностью.

Способ получения концентрата биологически активных веществ из пантов // 2705572

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения концентрата биологически активных веществ из пантов. Способ получения концентрата биологически активных веществ из пантов, согласно которому: производят отделение с пантов кожного и волосяного покрова и измельчают полученное сырье до размера 1-4 мм; проводят экстракцию сырья 70%-ным этиловым спиртом, подкисленным уксусной кислотой до рН 4,7-5,5, при соотношении между сырьем и этиловым спиртом 1÷4, при нагреве до температуры 52-62°С в течение 5-6 часов; после первой экстракции производят повторную экстракцию 35%-ным этиловым спиртом, подкисленным уксусной кислотой до рН 4,7-5,5, при соотношении между сырьем и этиловым спиртом 1÷3, при нагреве до температуры 78-80°С в течение 5-6 часов; после каждой экстракции полученную жидкость сливают и охлаждают; полученный после экстракции жмых промывают от остатков спирта, подвергают ферментации в водном растворе с папаином 0,1-0,2% к весу измельченного сырья, при соотношении между жмыхом и водным раствором 1÷5, при температуре 36-37°С в течение 7-8 часов; производят инактивирование ферментов в смеси при температуре 80-82°С в течение 1 часа и охлаждают смесь до температуры 37-39°С; отделяют от смеси жидкий гидролизат путем фильтрования и сепарирования; полученные экстракт и гидролизат смешивают, выпаривают и подвергают лиофильной сушке и затем полученный концентрат размалывают.

Способ получения пористого коллагенового материала // 2704248

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно способу получения коллагенового материала. Способ получения коллагенового материала включает перекисно-щелочную обработку шкур пресноводных рыб, выбранных из толстолобика, карпа, белого амура, сазана, для чего шкуры заливают смесью пероксида водорода и гидроксида натрия, выдерживают, затем обработанные таким образом шкуры промывают в проточной воде, промытые шкуры заливают раствором уксусной кислоты и выдерживают, полученную массу гомогенизируют и отправляют на сушку, которую проводят в вакуум-сублимационной машине, высушенные листы нарезаются на пластинки и герметично упаковываются при определенных условиях.

Экстрактор с вибрационной насадкой // 2702581

Изобретение относится к колонным массообменным аппаратам непрерывного действия и может быть использовано для экстрагирования (выщелачивания) в системе твердое тело - жидкость в пищевой, химической, фармацевтической и других отраслях промышленности.

Композиция на основе хвойной зелени и способ её получения // 2701562

Изобретение относится к фармацевтической, парфюмерно-косметической и пищевой промышленности, а именно к композиции на основе водной фракции углекислотного экстракта хвойной зелени.

Способ выделения эуглобалей ацилфлороглюцинол-монотерпенового ряда из листьев эвкалипта прутовидного // 2700699

Настоящее изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу выделения эуглобалей ряда ацилфлороглюцинол-монотерпенов из листьев эвкалипта прутовидного.

Способ получения плодово-ягодных экстрактов // 2699656

Изобретение относится к пищевой и фармацевтической промышленности, а именно к способу получения плодово-ягодного экстракта, обладающего антиоксидантной активностью.

Экстрактор // 2699630

Изобретение относится к устройствам, которые используют при сепарации, например, при выделении растворителя из гранулированного материала, пропитанного этим растворителем.

Экстрактор // 2699630

Биологически активное вещество (биоцидная композиция) и способ его получения // 2706114

Группа изобретений относится к области медицины, в частности к способу получения биоцидной композиции. Для этого растительное сырье, в качестве которого используют вызревшие опавшие листья высших растений поздней зрелости, высушивают, измельчают, экстрагируют водой при воздействии УФ-диапазона и ультразвука, при давлении 750-780 мм рт.ст., при температуре 22±2°С, при импульсном воздействии ультразвуком при частоте заполнения 40-69 кГц и мощности до 100 Вт и в оптическом ультрафиолетовом диапазоне 254-340 нм, после чего экстракт выпаривают при пониженном давлении, а в стадии получения экстракта, содержащего биологически активные вещества, в процессе ротационного выпаривания добавляют диоксид титана TiO2 в форме рутила при размере частиц 80 нм в таком количестве на один килограмм массы вещества, чтобы соотношение двух фаз минералов диоксида титана анатаз/рутил ≥6,0, что соответствует содержанию рутила 30±1,5 мг на килограмм массы вещества.

Способ получения биологически активного антисептического препарата и антисептический препарат на его основе // 2700163

Изобретение относится способу получения биологически активного антисептического препарата, включающего антисептик - стимулятор Дорогова второй фракции, пыльцу, пергу, прополис, личинки трутней, подмор, с последующим проведением растворения в кислой фракции электрохимически активированной воды (аналит) рН 2,0, гомогенизации в течение 4-5 мин и настаивания в течение 14 дней, стерилизации автоклавированием, затем полученный стерильный препарат разливают по флаконам и укупоривают, при следующем соотношении компонентов в мас.%: антисептик - стимулятор Дорогова второй фракции 2,5, пыльца 2,0, перга 5,0, прополис 10,0, личинки трутней 0,5, подмор 25,0, кислая фракция электрохимически активированной воды (аналит) рН 2,0 - остальное.

Способ получения комплексного препарата для профилактики нарушений обмена веществ, повышения резистентности организма и лечения актинобациллеза у крупного рогатого скота // 2699363

Изобретение относится к животноводству и представляет собой способ получения комплексного препарата для профилактики нарушений обмена веществ, повышения резистентности организма и лечения актинобациллеза у крупного рогатого скота, включающий использование растворимых в воде неорганических солей металлов в виде сульфатов меди, кобальта, марганца и хлорида цинка с натриевой солью жирной кислоты, йода и растворителя, отличающийся тем, что дополнительно используют сульфат хрома, в качестве растворителя - растительное масло и используют водный раствор натрия стеарата, который при температуре +20°C смешивают с растворимыми в воде неорганическими солями металлов в виде сульфатов меди, кобальта, марганца, хрома и хлорида цинка, затем из образовавшегося осадка удаляют воду и растворяют его в растительном масле при температуре 90-95°С, после остывания полученного масляного раствора в нем растворяют тонко измельченный кристаллический йод при следующем соотношении компонентов, мас.

Фармацевтическая композиция, содержащая нитрофурал, в форме шипучих таблеток (варианты) // 2697829

Изобретение относится к области фармацевтики и медицины, а именно к противомикробной фармацевтической композиции в форме шипучих таблеток, содержащих нитрофурал. Композиция содержит в качестве активного вещества нитрофурал, в качестве вспомогательных веществ натрия хлорид, газообразующую смесь, регулятор кислотности и связующее вещество, в указанных в формуле изобретения количествах.

Фармацевтическая композиция, содержащая нитрофурал, в форме шипучих таблеток (варианты) // 2696568

Изобретение относится к области фармацевтики и медицины, а именно к противомикробной фармацевтической композиции в форме шипучих таблеток, содержащих нитрофурал. Фармацевтическая композиция содержит в качестве активного вещества нитрофурал, вспомогательные вещества - натрия хлорид, газообразующую смесь и связующее вещество в указанных в формуле изобретения количествах.

Солюбилизация хлоргексидина основания, антисептическая и дезинфицирующая композиции // 2696259

Группа изобретений относится к области медицины и фармацевтической промышленности, а именно к антисептике и дезинфекции, и предназначена для получения солюбилизированной формы хлоргексидина основания и использования указанной формы в антисептических и дезинфицирующих композициях.

Состав и способ получения быстрорастворимого противомикробного лекарственного препарата на основе нитрофурала // 2692772

Группа изобретений относится к фармацевтической промышленности, в частности к противомикробному лекарственному препарату в виде быстрорастворимых таблеток и саше.

Вакцина против дизентерии свиней // 2692647

Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой штамм Brachyspira hyodysenteriae, депонированный в национальной коллекции культур микроорганизмов (Collection Nationale de Cultures de Microorganismes (CNCM)), в институте Пастера, с регистрационным номером CNCM I-4720, для применения в качестве вакцины против дизентерии свиней, где дизентерия свиней вызвана Brachyspira hyodysenteriae, и композицию вакцины против дизентерии свиней, вызванной Brachyspira hyodysenteriae, включающую штамм по п.

Средство для лечения кожных ран у животных и способ его применения // 2691113

Группа изобретений относится к ветеринарии и может быть использована для лечения ран у животных. Предложено средство, содержащее водный раствор кластерного серебра при следующем соотношении компонентов в масс.

Способы лечения местных микробных инфекций // 2675360

Группа изобретений относится к медицине и предназначена для предотвращения или лечения местной микробной инфекции у субъекта. Используют терапевтически эффективное количество композиции, содержащей полиэфирный ионофор, выбранный из наразина, салиномицина, лазалоцида, моненсина, семдурамицина, мадурамицина и лаидломицина, или его терапевтически приемлемую соль, и хелатирующий агент.

Способ получения нанокапсул сухого экстракта босвеллии // 2705987

Изобретение относится к области нанотехнологии, в частности к способу получения нанокапсул, и описывает способ получения нанокапсул сухого экстракта босвеллии в оболочке из каппа-каррагинана.