Способ определения состояния обменных процессов в организме

 

ОП ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советскик

Соцмалмстмческмк

Республик ()938156

* г (6 I ) Допол н н тел ьное к а вт. с вид- ву(22) Завале"о 11 ° 11 ° 79 (21) 2839064/28-13 с присоединением заявки №(23) Приоритет (51)М. Кл.

0 01 М 33/48

ЭВуАератвеккый камнтет

СССР ао йелак нзебретеккй и открытей

Опубликоваио23. 06.82 Бюлл- нь №23

Дата опубликования описания 23 06.82 (аз) уй К 615" 092 ° . 254 (088 Я) I

В.Е.Скляр, А.П.Левицкий, Т.И.Генесина и Л.Г.Меэинова (72) Авторы изобретения

Одесский научно-исследовательский институт стоматологии (71) Заявители и Всесоюзный ордена Ленина и ордена Трудового Красного

Знамени селекционно-генетический институт (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОСТОЯНИЯ ОБМЕННЫХ

ПРОЦЕССОВ В ОРГАНИЗМЕ

Изобретение относится к аналитической биохимии, а именно к способам определения состояния обменных процессов в организме путем введения меченых аминокислот в организм.

Известен способ определения состояния обменных процессов в организме путем введения в организм меченой аминокислоты с последующей гомогениэацией исследуемой ткани, неоднократ-1о

HoH llpoMblBKN гомогената, высушивания его и подсчета радиоактивности белковой фракции гомогената (1).

Однако известный способ не обеспечивает высокой точности, требует значительных затрат времени и использования большего количества реактивов.

Цель изобретения - упрощение и повышение точности способа ° го

Это достигается тем, что согласно способу определения состояния обмен ных процессов в организме путем введения в организм меченой аминокислоты с последующей гомогенизацией исследуемой ткани, неоднократной промывки гомогената, высушивания его и подсчета радиоактивности белковой фракции гомогената, ткань пе" ред измельчением предварительно высушивают, а промывку гомогената проводят последовательно смесью спирта и эфира, затем дистиллированной водой.

° Сущность способа заключается в том, что белки не осаждаются трихлоруксусной кислотой, а ткань сразу подвергают сушке при 100-115 С в течение IÎ-12 ч. При этом происходит денатурация белков, сопровождающаяся потерей их растворимости. После высушивания ткани легче растираются в ступке до однородного состояния, а затем подвергают одноразовой экстракции жирорастворителем (например, спирт: эфир 1:1, однократной экстрак,ции дистиллированной водой. Оптималь. ное соотношение ткани и экстрагента

93о156

Формула изобретения

Составитель Р.Катосова

Редактор А,Козориз Техред А, Ач Корректор И.Шароши

Заказ 4451/67 Тираж 887 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4

l:50. Остаток (белка высушивают и используют для подсчета радиоактивности, Пример 1. Навески тканей в 50-100 мг помещают в сушильный шкаф при 105-115 С на 6-24 ч. Высушенные ткани растирают в порошок, переносят в центрифужные пробирки, заливают жирорастворителями-смесью спирт:эфир (1:1 ) и оставляют на 30 мин. Затем центрифугируют, осадок заливают ди- 39 стиллированной водой и ставят в водя ную баню при 60-70 С. После этого вновь центрифугируют, осадок высушивают. В 10 мг его подсчитывают радиоактивность, 1$

Пример 2. Слизистую оболочку полости рта высушивают при 110 С в течение l2 ч.После высушивания ткань растирают до порошкообразного состояния в ступке. Порошок обраба- рв тывают спиртом и эфиром в разведении

1:1, На 100 мг порошка добавляют 5 мл смеси жирорастворителя, оставляют на

30 мин, затем центрифугируют, К осадку приливают 5 мл дистиллированной 2s воды, нагревают в водяной бане при

70 С в течение 10 мин. Вновь центрифугируют. Осадок высушивают в течение 3 ч при 110 С растирают, затем навеску порошка используют для подсчета радиоактивности.

Пример 3. Печень высушивают при:100 С в течение 10 ч. Затем исследования проводят аналогично приме ру

Предлагаемый способ по сравнению с известным имеет в 2 раза меньше операций, получение конечного результата требует в 3 раза меньше времени, позволяет более точно определить включение меченых аминокислот в белки, поскольку достигается более высокая степень очистки белковой

Фракции.

Способ определения состояния обменных процессов в организме путем введения меченых аминокислот в организм с последующей гомогенизацией исследуемой ткани, неоднократной промывки гомогената, высушивания его и подсчета радиоактивности белко вой фракции гомогената, о т л и ч а ю шийся тем, что, с целью упрощения и повышения точности способа, ткань перед измельчением предварительно высушивают, а промывку гомогената проводят последовательно смесью спирта и эфира, а затем дистиллированной водой.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

l. Брагинская Л.И., Суканова В.А.

Включение радиактивного метионина в белки различных отделов желудочно-кишечного тракта." Балл.экспери( мент. биологии и медицины, 1964, И 9, т.58, с. 69-71.