Способ определения степени дезинтеграции клеток
О П И С А Н И Е <»974271
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
Союз Советских
Социалистических
Республик (6l ) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 14. 04. 81 (21) 3277853/28 13 с присоединением заявки М (23) Приоритет (51)h%. Кд.
G 01 Н 33/48
3Ъеударстекиный квинтет
СССР по делан изо4ретеккй к открытий
Опубликовано 15.11.82. Бюллетень йе 42
Дата опубликования описания 15.11. (53) УДК 612. 014 (088. 8) С. М. Лихолетов, С. Ф. Жаркова, Н. В. Оруджева и 10.А. Голосеев (72) Авторы изобретения
Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт (71) Заявитель (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СТЕПЕНИ
ДЕЗИНТЕГРАЦИИ КЛЕТОК
Изобретение относится к медицине, а именно биологическим исследованиям.
Известен способ определения дезинтеграции клеток путем исследования суспензий клеток до и после их разрушения (1 ). 5
Однако известный способ трудоемок, длителен, утомителен для глаз исследователя, а точность подсчета составляет +15, Цель изобретения — ускорение спо" соба.
Цель достигается тем, что согласно способу определения степени дезинтеграции клеток путем исследования сус15 пензий клеток до и после их разруше" ния, измеряют электрическое сопротивление суспензий клеток и по его изменению после разрушения клеток определяют -степень их дезинтеграции.
Способ осуществляют следующим образом.
Готовят суспензию клеток микроорганизмов, помешают ее в камеру с элек2
1 тродами и измеряют электрическое со противление суспензии клеток до и после разрушения и по его изменению определяют степень дезинтеграции клеток.
Пример 1. Готовят суспензию гриба Hlstoplasma capsulatum или эритроцитов в 0 $4 ном растворе хлористого натрия (для предотвращения спонтанного лизиса). Определяют концентрацию целых клеток с помощью камеры
Горяева и затем измеряют сопротивление тока во взвеси. Для этого 2,0 мл взвеси гриба или эритроцитов помещают в лунку полистироловой пластины, куда вставляют два электрода на расстоянии 5 мм друг от друга. С помощью термометра-определяют температуру взвеси в камере. Электроды присоединяют к гнездам омметра для измерения сопротивления в омах или килоомах.
После разрушения на ультразвуковом дезинтеграторе измеряют повторно сопротивление тока, соблюдая исходные условия. О степени дезинтеграции cy.Формула изобретения. Составитель Ю. Алмазов
Редактор Н. Киштулинец ТехредЕ.ХаритончикКорректор Г. Огар
Заказ 8687/62
Тираж 887 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Н- 35, Раушская наб., д. 4/5
Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4
3 97427 дят по изменению сопротивления в исследуемой суспензии.
Пример 2.. Эритроциты человека суспендируют в 0,93-ном растворе
NaC1 (для предотвращения спонтанного лизиса) и после определения концент5 рации.их помещают в камеру для измерения сопротивления, После дезинтеграции на ультразвуковом деэинтеграторе измеряют повторно число клеток и сопротивление. Результаты позволяют сделать вывод о степени дезинтеграции по изменению сопротивления в суспензии.
Пример 3. Готовят суспензию гриба криптококка (Cryptococcus neoformans) в дистиллированной воде. Определяют концентрацию клеток и измеряют сопротивление взвеси, для чего
2,0 мл взвеси гриба помещают в лунку полистироловой пластины, куда вставzo лены два электрода на расстоянии 5 мм друг от друга. Определяют температуру взвеси и измеряют ее сопротивление.
После ультразвуковой дезинтеграции из25 меряют повторно сопротивление при тех ,же условиях и по изменению сопротив1 ф ления делают вывод о степени дезинтеграции клеток.
Предлагаемый способ позволяет в течение 2-5 мин объективно оценить степень дезинтеграции клеток, причем ñïoсоб не трудоемок, не требует сложной аппаратуры, что позволяет применять его в автоматизированных системах контроля дезинтеграции, особенно в промышленной микробиологии и в лабораторной практике.
Способ определения степени дезинтеграции клеток путем исследования суспензии клеток до и после их разрушения, отличающийся тем, что, с целью ускорения способа, измеряют электрическое сопротивление суспензии клеток и по его изменению после разрушения клеток определяют степень их дезинтеграции.
Источники информации, принятые во внимание при экспертизе
1. Справочник по клиническим и лабораторным методам исследования. М., i""Медицина", 1975, с. 30.
