Способ получения водного раствора простациклина или его соли

 

ОП ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕН Ия

И ПАТЕНТУ

Саюэ Сов етскни

Соцналнстнческнк

Рес у

< 1978715 (61) Дополнительный к патенту (22) Заявлено 16 05 79 (21) 2772851/28-13 (51) N. Кл.

А 61 К 31/557 (23) Приоритет — (32) 17. 05. 78

Геаударстеелный кемитет (31) 20175/78 (33) Великобритания

СССР

Опубликовано 30.11.82. Бюллетень¹ 44 ло делам иэобретени» и открытий (53) УДК616,151. .5(088.8) Дата опубликования описания 30. 11.82

Иностранцы

Ян Сеймур Воттс и Питер Хью Иарсден (Великобритания)

;1 (72) Авторы изобретения

Иностранная фирма

"Дзе Велкам фаундейшн Лимитед"

{Великобритания) (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ. ВОДНОГО РАСТВОРА ПРОСТАЦИКЛИНА ИЛИ ЕГО СОЛИ

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и каса:ется получения лекарственных препаратов.

Известен способ получения водного 5 раствора простациклина или его соли смешением с фармацевтически приемле- . мым буфером Г1 3, Однако известный способ не позволяет получить стабильный целевой то продукт.

Цель изобретения - повышение стабильности целевого продукта.

Указанная цель достигается согласно способу получения водного раство- ть ра простациклина или его соли смешением с фармацевтически приемлемым буфером, при котором в качестве буфера используют несеросодержащую с -аминокислоту с концентрацией аминокислоты го

0,02-0,03 M и рН композиции 9,0-11,6.

Аминокислота, используемая и качестве буфера, должна быть свободна от серы, наиболее предпочтителен гли2 цин, но могут быть использованы и другие аминокислоты, такие как валин, аланин и аргинин.

Общая концентрация аминокислоты должна быть более низкой - 0,020,03 И, предпочтительно 0,025 И, Ами" нокислота должна быть достаточно раст воримой, чтобы обеспечить необходимую буферную емкость.

В растворе буфера может присутствовать хлористый натрий, но количество его не должно быть таким, чтобы раствор становился фармацевтически неприемлемым. Иолярная концентрация хлористого натрия должна быть такая же, как и концентрация аминокислоты.

Большое количество хлористого натрия увеличивает ионную силу раствора, свя ванного активного соединения и буфера, что нежелательно для стабильности соединения, s буфере может присутствовать и хлористый калий.

3 978 рН буфера должно находиться в диапазоне 10,2-11,6, предпочтительно

10,5 °

Способ осуществляют следующим образом.

Готовят раствор глицина в воде, содержащий некоторое количество хлористого натрия. К этому раствору до" бавляют сначала гидроокись натрия в качестве основания для того, чтобы увеличить рН до необходимого уровня, и затем простациклин.

В качестве основания можно использовать любое основание, которое является достаточно сильным, чтобы получить буферный раствор с необходимым рН. Основание должно быть таким, чтобы оно приводило к получению фармацевтически приемлемого раствора, т. е. раствора, который, не вреден реципиенту; Количество используе.,мой аминокислоты, например глицина, и основания, например гидроокиси натрия, должно быть минимально необ ходимым для стабйлизации активного соединения в течение необходимого времени. Использование избытка аминокислоты или основания, или обоих этих компонентов приводит к удержанию воды в продукте высушивания при замораживании, которая вызывает разрушение активного соединения. В определении фармацевтической приемлемости важным фактором является рН раствора. Если раствор. простациклина должен быть введен в прибор, например искусственную почку, то рН может иметь значение до 12 и даже более, но если раствор должен быть вве ден в большом объеме в вену, например в сердечно"легочную искусственную систему, то рН при выходе в вену должна составлять преимущественно

8,4-9,0, для этого рН раствора может быть понижена непосредственно перед использованием, Другие агенты могут присутствовать в буферном растворе, но их количество не должно значительно уменьшать стабильность активного соединения в растворе. Например, могут присутствовать некоторые карбонаты, сопутствующие простациклину, например натрий-простациклин может содержать до

5 вес.3 карбоната натрия.

Когда активное соединение является очень активным фармакологически, то необходимое количество его очень мало; например только несколько мил71,5 ф лиграмм требуется для часового вливания в пациента весом 70 кг. Количество активного соединения, присутст- вующего в данном буферном растворе перед высушиванием при замораживании, зависит от применения этого материала после восстановления. Восстановление можно делать буферным раствором, свободным от активного соеди10 нения, так что, отношение активного соединения к буферным составным частям может быть больше, чем в используемом растворе для введения.

Если раствор, содержащий только

13 буферные агенты, активное соединение и хлористый натрий, высушивают замораживанием, то физическая прочность и внешний вид полученного высушенного при замораживании образца не осо3р бенно удовлетворительны. Поэтому перед высушиванием предпочтительно включать в буферный раствор индифферентную составную часть лекарства. Пред почтительный индифферентный компонент лекарства, - маннитол, концентрия кото рого 25-50 мг/мл буферного раствора.

Если используют менее чем 25 мг/мл маннитола, то прочность и внешний вид препарата недостаточно хороши. Если

3О используют более 50 мг/мл, то улучшеwe незначительно или совсем не наблю. дается и стабильность активного соединения низкая. Индифферентная составная часть обеспечивает в образце, 3S высушенном замораживанием, поддерживающую матрицу и улучшает физическую прочность и внешний вид образца. Не все индифферентные составные части могут быть использованы, йапример, следует избегать- тех веществ, которые проявляют избыточное пенообразо-. вание восстановленного материала, на. пример ноливинилпирролидон. Также не могут быть использованы вещества

° 5 влияющие на рН. буферного раствора, например, глицин.

Буферный раствор может содержать кроме активного соединения другие терапевтические компоненты. Высушенный замораживанием продукт также может содержать другие терапевтические вещества или эти вещества могут быть добавлены к восстановленному буферному раствору. Такие терапевтические вещества могут частично или полностью заменить индифферентные составные части лекарства.

Растворителем, используемым для приготовления буферного раствора, 5 978715 4 является предпочтительно вода для да его применяют к человеку, может инъекций (Eurapeun pharmacopeice) быть в несколько раэ более сильнодейили другая вода, пригодная для ис- ствующим, чем для других млекопитаюпользования во вливаниях или инъек- щих. циях. Когда высушенное замораживани- Для человека и ветеринарного исем вещество восстанавливают для ис- пользования отбирают по крайней мер пользования, оно может быть вновь из двух сосудов (например, в виде растворено в воде для инъекций, име- многокомпонентной упаковки),один из ющей рН 5,5-7, предпочтительно 7, или которых является пузырьком или ампув аминокислотном буферном растворе, 10 лой и содержит высушенный заморажиимеющем рН 9, предпочтительно 10,5, ванием образец (лиофилизованный) из или некоторое количество буферного активного соединения с буфером, а раствора может быть добавлено к раст- другой - пузырьком или ампулой, и вору в воде для инъекций. Восстанов- содержит дополнительное количество ление высушенного замораживанием ма- 1s буфера в водном растворе или высушентериала можно также проводить с помо- ного замораживанием, который не со-" щью растворения его в физиологичес- держит активного соединения. Высу ком растворе, пригодном для вливания. шенный замораживанием продукт может

Для Этой цели используют глюкозу. . быть далее восстановлен водным раст,Высушивание замораживанием буфер- 2е вором буфера или раствором из второного раствора может быть выполнено го сосуда. Восстановленный материал любым известным способом, причем со- может быть в последующем разбавлен, держание воды должно быть пониженным,,чтобы обеспечить целевую дозу непопоскольку это необходимо для последу- средственно перед введением. Таким ющей стабильности активного соедине- 2$ образом, высушенный препарат, напринйя. мер 0,5 мг простациклина при рН 11, 5

Количество простациклина, требуе- может быть разбавлен 50 или 500 мл мое для терапевтического эффекта, за- водного раствора декстрозы или соле;висит от способа введения. Доза для . вого раствора, .имеющего рН такое, млекопитающих находится в диапазоне 311 чтобы получить раствор с рН 10,00,01-200 мг на 1 кг живого веса, луч- 10,5

I ше 0,01-10 мг на 1 кг живого веса, П р и и е р 1. Стерильные растпредпочтительно 0,2-0,5 мг/кг. воры, содержащие простациклин (0,2

Количество простациклина, присут- и 0,4 мг/мл) и маннитол (50 мг/мл), ствующего в ампуле для введения вли- у готовят в следующих буферах: гливанием,находится в диапазоне 0,1- цине, аргинине, валине, аланине, 1,5 мг/кг, предпочтительно 0,5- карбонате и трис-буфере. Концентра 0 мг/кг. Активное соединение, ког- сии буферных компонентов составляют:

Аминокислотный буфер: 0,025 M аминокислоты, 0,25 хлористого натрия и гидроокись йатрия при рН 10,5;

Карбонатный буфер: 448 мг/л бикарбоната натрия и 1614 мг/л, карбоната натрия;

Трис-буфер: 6054 мг/л трис-основания и. 2,5 мл

0,1 гидроокиси натрия.на литр.

Порции на 5 мл каждого иэ этих Параметры колонки 25 см х 4,2 мм. растворов затем высушивают заморажи- Колонку набивают с использованием ме:ванием при -40 C под вакуумом и про- тода Webber а и Mekerrbl à, в качестводят первую стадию сушки при О С и ве жидкой среды применяют четырехвторую при 20 С. Запечатывание пузырь- в хлористый углерод. ков проводят в атмосфере азота. Далее фазу колонки приготавливают следувысушенные продукты подвергают испы- ющим образом. танию на хранение. После испытания . 10 r набивки высушивают под вакуанализируют на содержание простацик- умом при 80 С в течение двух с пололина методом жидкостной хроматографий. виной часов во вращающейся испарительХроматографию осуществляют на высушен- ной колбе емкостью 250 мл. Добавляют ных препаратах, восстановленных в 10 мл октадецилтрихлорсилана и 100 мл

1О мл 0,0254-ного раствора гидрокси", =yxoro толуола и раствор кипятят с тетриметиламмония. обратным холодильником в течение трех

9787 часов с перемешиванием лопастной мешалкой и применением обратного холодильника, снабженного предохранительной .трубкой с хлористым кальцием;

Смесь охлаждают и затем отфильтровывают через фильтр 0,5 мкм. Окись крем» ния на фильтре промывают 250 мл горячего ацетона и сушат при 80 С в вакууме в течение двух часов. Продукт. (11 г) обрабатывают триметилхлорси- 14 ланом (10 мл) как указано выше, кипя-, чение с обратным холодильником в течение 45 мин приводит к образованию целевого продукта.

В качестве подвижной фазы исполь- 15 зуют воду (1200 мл), в которой растворяют 5 г борной кислоты и 7,6 г бинатрий тетрабората и затем добавляют метанол (8800 мл). Температура колонки комнатная (около 25-30 С), поток 20 подвижной фазы составляет 3,6 мл/мин при давлении 20 МПа. Детектирование продуктов выполняют с использованием

Руе Unichem L13 при длине волны 205 нм с полной шкалой в 0,16 абсорбционных 25 единиц для 0-100 мг/мл, раствора.

Количество присутствующего простациклина рассчитывают по измерениям высоты пика и сравнению с эталонным .образцом известной концентрации.

Пример 2. Высушенная замораживанием инъекция простациклина содержит следующие ингредиенты, мг:

Простациклин 1000.

Ианнитол 50000

Хлористый натрий (О,i@5 И) 2932

Глицин (0,025 M) 3760

Гидроокись натрия Количество, соответству

1 ющее рН 10,5

Аналогично примеру 1 1 мл инъекции простациклина высушивают замораживанием с получением вещества, содер. жащего до 5 вес.4 воды.

Пример 3. Перемешиваемый раствор простагландина PLF g метил ,сложного эфира (50 мг) в эфире (1 мл), обрабатывают бикарбонатом натрия и затем по каплям в течение 2 ч добавляют водный раствор трийодида калия.

После перемешивания в течение ночи реакционную смесь встряхивают с эфиром и водным раствором тиосульфата

55 натрия. Эфирную фазу отделяют, промывают водой, сушат над сульфатом магния и выпаривают до получения желтой смолы 5 g -иодо-9-деокси-6,9d.-эпок15 8 сипростагландин F< „метил сложного эфира.

Раствор 5f-иода-9-деокси-6$,9с -эпоксипростагландин F< метилового сложного эфира в метанольном растворе метоксида натрия, полученного из натрия и сухого метанола, оставляют в атмосфере сухого азота в течение

5 ч и затем растворитель отгоняют в высоком вакууме. Оставшееся

,твердое аморфное вещество промывают бензолом, оставляют в атмосфере воздуха на ночь и затем перемешивают с водным раствором гидроокиси натрия с. получением суспензии тонких бесцветных игл. Кристаллы отбирают, промывают несколькими каплями водного раствора гидроокиси натрия и сушат на воздухе с получением натриевой соли

9-деокси-6;9с1-эпокси А -простагландина F . Ингибирование арахидоновой кислоты, индуцированной агрегацией тромбоцитов человека при концентрации 0,2 нг/мл этой солью, и ее нестабильность при рН кислой среды вместе с последующим доказательством, позволяют заключить, что она совместна с конфигурацией (52)-5,5-дидегидро-9-деокси-6,9Ы;эпокси-простагландином Fqg.

13

ЯМР спектры высокого разрешения

С раствора кристаллов в диметилсульфоксиде-d g показали соответствующие 20 радикалов, химические сдвиги которых полностью соответствуют химической структуре, установленной для простациклина. Пиков примеси не обнаружено.

Пример 4. 5$-иодо-9-деокси-6$,9(-эпоксипростагландин Fqg метиловый сложный эфир перемешивают с метанольным раствором метоксида натрия, приготовленного из натрия в атмосфере азота при комнатной температуре в течение ночи; 1 н.водный раствор гидроокиси натрия добавляют к желтому реакционному раствору для гидролиза эфирной части и после 2 ч метанол испаряют под вакуумом при комнатной температуре. В остаточном водном растворе спонтанно кристаллизуются бесцветные тонкие иглы натрие вой соли, которую охлаждают (до О С) отбирают, промывают осторожно 1 н. водным раствором гидроокиси натрия,,сушат на воздухе и хранят в закрытой . трубке. Эта соль имеет 4 „(K8r диск). см-" 1692 (О-С=С) и двадцать

1резонансов С наблюдают при .182,7

97871 5 формула изобретения

Составитель С. Иалютина

Редактор А, Лежнина Техре Е.Харитончик Корректор С. Шекмар .

Тираж 714 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Иосква, Ж-35,,Раушская наб., д. 4/5, Заказ 9248/78 филиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул, Проектная, 4

9 (С-1); 158,2 (C-6); 140,0 и 134,3 (С-13,14); 100,7 (C-5); 87,5 (C-15);

80,6 и 75,5 (С-9,11); 58,0 (С-12);

49,0, 45,8, 42,4, 41,9, 37,5, 35, 8 (С-18); 31,6, 29,9, 29,3, 26,7 (С-.19) 1.8 4 (С-20) ч./MllH, из TMS в диметилсульфоксиде-d6. Продуктом является натрий (5Z)-5,6-дидегидро1 9"деокси-6,9сЕ-эпоксипростагландин

%L

F (синтетический натрий простациклин).

Пример 5. 5 -иодо-9-деокси-6f,9 -эпоксипростагландин F метиловый сложный эфир обрабатывают 1,5-диаэобицикло-5-ноненом(ДБН) при ком- 1 .натной температуре в отсутствии растворителя в течение нескольких ча,сов. ДБН и иодистый водород удаляют путем адсорбции на колонке с окисью

/ кремния. ИК-спектроскопия - тонкая планка), ) яиц 17 8 (СО Ие) и

1696 см " (-О-С=С), ЯИР-спектроскопия 1 W в C60g - Et N, 19:1 - (4,22 триплет триплетов 12, 3 6,9 и 1 0 Гц (С-5 виниловый протон),и ЯИР-спектро скопия С в CODS - Et>N, 19 1 - (от личительными характеристиками были резонансы при 159,8 (С-1); 155,8 (С-l); 155,8 (С-6); 137,2 и 130,6 (С-13,14); 95,3 (С-5); 84,1 (С-15); 36

77,3 и 72,2 (С-9,11) и 51,1 (Ие сложный эфир) ч./млн. из TMS).;

Виниловый эфир (5 )-5,6-дидегидро-9-деокси-6,9д-эпоксипростагландин метиловый сложный эфир Гидролиэуют 35 водным раствором гидроокиси натрия .с получением синтетического натрий о простациклина.

Пример 6. (5Р, 6Р)-5-иодо-PLJ метиловый эфир (?3,375 г, со- е держащий СА (2Ф 5 SS, 6 S-иэомера) готовят в виде раствора в метанольном растворе метоксида натрия (иэ натрия и метанола при комнатной .температуре в атмосфере азота и ста.вят при комнатной температуре на ночь. Получающийся, желтый раствор . обрабатывают 1 й. водным раствором гидроокиси натрия, отфильтровывают от осадка, оставляют при комнатной температуре в течение 2 и и отгоняют метанол на испарителе Buchi в вакууме при комнатной температуре ° Остаточный сироп обрабатывают водой и 1 н. водным раствором гидроокиси натрия, причем имеет место спонтанная кристаллизация с получением массы кристаллов.

После охлаждения до О С твердое вещество отбирают, промывают 1 н.раствором гидроокиси натрия со льдом до тех пор, пока промывные воды не ста.нут бесцветными, и сушат на воздухе до постоянного веса (2 дня), получая

10,15 г, T„„ = 164-166 С (последую-, щая сушка при 100 С бесцветной натриевой соли простациклина.

Пример 7. Стерильный раэбавитель для инъекции простациклина:

Глицин (0,025 М) 94,0 мг

Хлористый натрий (0,025 И) 73,3 мг

Гидроокись натрия До рН 10,5

Вода для инъекции До 50 мл

Аналогично примеру 1 уКаэанные ингредиенты используют в растворе в качестве раэбавителя.

Предлагаемый способ позволяет повысить стабильность целевого продукта.

Способ получения водного раствора простациклина или его соли смешением с фармацевтически приемлемым буфером, отличающийся тем, что, с целью повышения стабильности целевого продукта, в качестве буфера используют несеросодержащую at аминокислоту с концентрацией аминокислоты

0,02-0,03 И и рН композиции 9,0-11,6.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Простагландины. Под ред.

И.С. Ажгихина. И., 1976, с. 13 и далее.