Средство для окраски катионного белка на гистологическом препарате

 

СРЕДСТВО ДЛЯ ОКРАСКИ КАТИОНН01Ч ) БЕЛКА НА ГИСТОЛОГИЧЕСКОМ ПРЕПАРАТЕ , содержащее спирт, пигмент зеленый прочный и буфер, отличаю|Щ е е с я тем, что, с целью повышения специфичности окраски оно дополнительно содержит эозин и формальдегид , а в качестве спирта - этиловый спирт и в качестве буфера - 0,12 0 ,15 М боратный буфер при следующем соотношении компонентов, вес.%: Пигмент зеленый 0,1-0,2 прочный ,0-70,0 Этиловый спирт Эозин 0.,1-0,15 Формальдегид 1 ,0-2,0 0,12-0,15 М Боратный буфер Остальное

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

tKuWg, РЕСПУБЛИК ае пи эаю 01 < 1/28

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ н летоескоМУ СниДКтихъетау

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТЮ (21) 3361793/28- 13 (22) 11.12.81 (46) 07.07.83. Бюл. It 25 (72) В.E. Пигаревский, I0.А. Иаэинг, :B.Н. Кокряков, Л.С. Колабская и В.Д. Попова (71) Ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательский институт экспериментальноймедицины АИНСССР и Всесоюзный научно-исследовательский ветеринарный институт птицевод ства . (53 ) 615. 475 (088. 8 } (56 ) 1. Авторское свидетельство СССР

It 552538, кл. G, 01 N 1/30, 28.04,77.

2.. Пигаревский В.Е. Лиэосомальнокатионный тест и перспективы его применения в патоморфологической и лабораторной диагностической практике. - "Архив патологии", 1979, 41, 5, 74-80. (54) (57) СРЕДСТВО ДЛЯ ОКРАСКИ КАТИОНН01 О БЕЛКА НА ГИСТОЛОГИЧЕСКОИ ПРЕПАРАТЕ, содержащее спирт, пигмент зеленый прочный и буфер, о т л и ч а ю,щ е е с я тем, что, с целью повышения специфичности окраски оно дополнительно содержит эозин и формальдегид, а в качестве спирта - этиловый спирт и в качестве буфера - 0,120,15 И боратный буфер при следующем соотношении компонентов, вес.3:

Пигмент зеленый прочный 0,1-0,2

Этиловый спирт 40,0-70,0

3GSHH 0,1-0, I 5

Формальдегид 1,0.-2, 0

0,12-0,15 И

Боратный буфер Остальное рия.

Пример 2. Состав красителя, г.

Пигмент зеленый прочный 0,2

Этанол 70,0

Эозин О, 15

Формальдегид 2,0

0,15 И боратный буфер 24,67.

В 14 мл дистиллированной воды растворяют 750 мл борной кислоты, затем добавляют 6,25 мл 1М Na0H.

Приливают 5 мл 1N HCR 73 мл 96 этилового спирта и 2 мл формальдегида.

50 В полученной смеси растворяют сначала 20 Ml пигмента зеленого прочного, а затем 100 мг эозина. Смесь тщательно перемешивают.

55 В препаратах, окрашенных предлага мым красителем, гранулы нейтрофилов и эозинофилов, содержащих ка тионные белки, окрашиваются в темно-зеленый

1 10275

Изобретение относится к медицине, а именно к цитохимическим исследованиям, и предназначено для лабораторного определения уровня содержания катионных белков в крови, как показателя неспецифической реэистентности организма.

Известно средство для окраски катионного белка 1 ),содержащее

0,13 раствор примулинового желтого 10 в 0,05Иборатномбуфере при РН= 8,2.

Однако известное средство не позволяет идентифицировать кагионные белки в клетке при световой микроскопии, так как краситель относится к флюорохромам и при люминисценции вызывает свечение всех белков в клетке.

Известно также средство g2) для окраски катионных белков на гистологическом препарате путем их обработки в красителе, содержащем 0,2i пигмент зеленый прочный, 504 метанол на

0,05 М трис НСР буфере при РН"-8,18,2.

Недостатком является то, что средство также не обладает высокой специфичностью к катионным белкам и неспецифически окрашивает также эритроциты крови. 30

Цель изобретения - повышение специфичности окраски.

Поставленная цель достигается тем, что средство дополнительно содержит эозин и формальдегид, а в качестве спирта - этиловыи спирт и в качестве

35 буфера 0,12-0,15 M боратный буфер при следующем соотношении компонентов, вес.Ф:

Пигмент зеленый прочный 0,1-0,2

Этиловый спирт 40,0-70,0

Эозин 0,1-0, 15

Формальдегид 1,0-2,0

0,12-0,15 И

Боратный буфер Остальное

Дополнительное введение в краситель эозина позволяет провести боле четкую окраску гранул в клетках, со держащих катионные белки за счет прокрашивания их в темного оттенка, цвета, что усиливает их контрастнос от окружающих структур. В то же вре мя введение в краситель формальдегида позволяет исключить неспецифическую окраску эритроцитов за счет одновременной фиксации препарата в момент проведения скрашивания. Свойства компонентов в красителе наиболее

69 ъ максимально выражены в растворе 0,120,15 И боратного буфера при РН =

= 8,1-8;2.

Средство для окраски катионных белков приготавливают следующим образом.

К боратному буферу добавляют этиловый спирт и формальдегид затем в полученной смеси растворяют пигмент зеленый прочный и эозин. Смесь тщательно перемешивают и через 2 ч определяют рН красителя, которое тестируется до нужного значения РН соляной кислотой или гидратом окиси натПример 1 . Состав красителя, Пигмент зеленый прочный 0,1

Этанол 41,5

Эозин 0,1

Формальдегид 4,0

О, 12 И боратный буфер 54,3

В 43,5 мл дистиллированной воды растворяют 750 мл боратной кислоты, затем добавляют 6,25 мл l N NqOH.

Приливают 5 мл 1 NHCR, добавляют

41,5 мл. 960 этилового спирта и мл 404 формальдегида. В полученной смеси сначала растворяют 100 мг пигмента зеленого прочного затем

100 мг эозина.

Смесь тщательно перемешивают. з 1027569 а

;цвет, остальные - в розовый. Зритро- розовая, ядра всех клеток крови не циты розовые1 тромбоциты красного .. окрашены, но четко дифференцируются цвета. Цитоплазма лимфоцитое бледно" на фоне цитоплазмы.

Ф . Составитель Л. Стебаева

Редактор Ю. Середа Техред M.Êoâòóðà Корректор О. Тигор

Заказ 4726/46 Тираж 873 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал llllfl "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная,