Штамм бактерий мусовас @ -44-продуцент каротиноидов

 

ае (и). 1 н ® С 12 Я 15/ОО, С 12 I",1/20//";, СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕО(ИХ

РЕСПУБЛИН

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ,. "

К АВТОРСИОМУ СИДЮ"ЕЛЬСТВЪ(ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3502934/28-13 (22) 30 ° 08.82 (46) 07 ° 02.84. Бюл. 9 5 (72) Г.Я. Дараселия и Л.П.Даушвили (71). Институт биохимии растений

AH Грузинской CCP (53) бб8.14(088.8) (56) 1.. Авторское свидетельство СССР

)) 451743, кл. С 12 Р 23/00, 1Я73, 2. Авторское .свидетельство СССР

В 531844, кл. С 12 Р 23/00, 1975.!

;(54) ШУМА БАКТЕРИЙ МХСОВАС1ЕИЕУМ

ВОВВ0М-44-5P0gYQEBT КАРО1ИНОИДОВ. (7) й)таиМ бактерий МусоЬасСег1um

rubrum-44- (коллекцНя Центрального

)4уэея нровыюенник инкроорганиэиоэ

"ВЯИИГенетика", коллекционный но» мер ЦИПИ В-2226 J- нродуцент каротй» нондОв„

1071636

25 тику.

Морфологические признаки. Величина клеток двухсуточной культуры на обычном сусле-агаре 8-10 )Ф,М..

Клетки палочковидные, полиморфные, разной величины, часто искривленные ветвящиеся палочки, с возрастом укорачивающиеся и измельчающиеся до кок» ковидной формы, неподвижные. 55

Колонии интенсивно оранжевого цвета, пуговицеподобные, матовые, комковатой консистенции. Вокруг колоний имеется узкий ободок в виде ресничек, состоящий из цепочек, врас"6О тающих в питательный агар. Диаметр колоний 0,8-1,0 см.

Физиологические признаки. Мясопептонный бульон (МПБ). Рост наблюдается,как на поверхности (в виде

Изобретение относится к микробиологической промпаленности и касается нового штамма бактерий, используемого для получения коротиноидных пигментов, применяемых в животноводстве, медицине и пищевой промышлен- 5 ности

Известно, что каротиноидные пигменты синтезируют некоторые бактерии дрожжи, микроскопические водоросли и грибы. Однако практически нет !О рентабельного штамма микроорганизма, который можно было использовать в микробиологической промышленности дпя получения каротиноидов.

Известные штаммы микроорганизмов 5 либо имеют нйзкое содержание каро" тиноидов в абсолютно сухой биомассе, либо являются продуцентом только

Я -каротина, торулина и торулородина, либо являются нетехнологическими.

Известен штамм дрожжей Rhadotoru1а glutinis Б-71-продуцент каротиноидов С11.

Однако данный штамм не обеспечивает высокого выхода каротинов.

Наиболее близким к изобретению по технической сущности и достигаемому эффекту является штамм дрожжей

Rhodotorula plutinis-214, синтезирующий каротиноиды Г21.

Недостатком данного штамма явля- ЗО ется очень низкий уровень биосинтеза большого количества каротиноидов (819 мкг/r). Кроме того, в пигментном комплексе у прототипа содержится только три компонента, а 35 именно: р -каротин, торулородин и торулин.

Цель изобретения — получение штамма бактерии с высоким содержанием каротиноидов как в количест.- 4О венном, так и в качественном отношении{д-каротин, р -каротин, g -каротин, ауроксантин, лютеин, криптоксантин, виолаксантин, зеаксантин, антераксантин, торулин, ликопин, 45 рубиксантин, лепротеин, неоксантин) .

Штамм имеет следующую характериспленок ), так и на дне пробирки. В целом рост обильный. Образует плотный осадок, который при вэбалтывании слегка взмучивается и быстро оседает. МПБ не мутнеет, биомасса выпадает в виде хлопьев. Пигментация желто-оранжевая. Оптимальная температура 28-30 С. Мясопептонный желатин (МПЖ)). Среду не разжижает. В верхней части среды наблюдается обильный рост.

Отношение к углеводам: усваивает глюкозу, фруктозу, сахарозу, галактозу, лактозу, Отношение к спиртам: усваивает этиЛовый, бутиловый, метиловый, горбит, маннит.

Отношение к органическим кислотам: усваивает фумаровую, молочную и лимонную.

Штамм бактерии Nycobacterium rubrum-44 получен путем воздействия различными химическими мутагенами: я-нитрозометилмочевина (НММ), и -нитрозодиметилмочевина (НДММ), Й -нитрозоэтилмочевина (НЭМ) и методом ступенчатого мутагенеза по следукщей схеме:

Mycobacterium rubrum исходная форма II

Воздействие 0,07% HNM (экспозиция б ч)

Выделили штамм Р 21

Воздействие 0,05В НЭМ (экспозиция 8 ч)

Выделили штамм Р 1

Воздействие О,ЗЪ НДММ (экспозиция 24 ч ) 1

Выделили штамм Р 44

На оптимальной среде содержание каротиноидов достигает 7050 мкг/г сухих клеток.

Штамм хранится в коллекции Инсти-. тута биохимии растений AH ГССР и депонирован в Центральном Музее промышленных микроорганизмов, коллекционный номер ЦМПМ В-2226.

Пример. Штамм бактерий Mycobacterium rubrum-44 получен методом ступенчатого мутагенеза и селекции. . Культивирование штамма проводили на жидкой питательной среде следующего состава, г/л:

Кукурузный экстракт 25,0

Мела оса 85,0

Питательную среду разливали в качалочные колбы емкостью 750 мл по.200 мл.

1071636

Общее количество каротиноидов

Качественный состав каротиноидов

Микроорганизм (штамм ) мкг/г с . - Каротин, р -каротин, g -каротин, ауроксантин, лютеин, криптоксантин, виолаксантин, зеаксантин, антераксантин, ликопин, рубиксантин, лепротеин, неоксантин

Штамм бактерии

Мус.rubrum-44 (предлагаемый) 860

7050

Штамм дрожжей

Rhodotorula glutinis-214 (прототип) р- Каротин торулородин, торулин

100

Составитель И. Ларина

Редактор М. Товтин ТехредЛ.Микещ: Корректор А, Ильин а.-с.

Заказ 45/20 Тираж 522 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 Выращивание культур проводили на круговой качалке при 180-200 об/мин в течение 96 ч при 28 С.

Посевным материалом служила культура, которун выращивали глубинным способом в течение 48 ч на среде следующего состава, r/ë:

Кукурузный экстракт 5,0

Иеласса 20,0 при 28sC на качалке (180-200 об/мин)

После окончания культивирования продуцента определяли количество биомассы методом центрифугирования с последующим взвешиванием. Количественный и качественный анализ 15 пигментов проводили по известной ме тодике.

В таблице приведены сравнительные данные по биосинтезу каротиноидов предлагаемого штамма бактерии и известного штамма дрожжей.

Как видно из таблицы, новый штамм бактерии Nycobacterium rubrum-44."синтезирует на 860%, больше об» щего количества каротиноидов, чем известный.(прототип штамм дрожжей

:Rhodotorula glutinis-214. Кроме того, предлагаемий штамм бактерий

;синтезирует 14 различных каротиноид" ных пигментов, а известный штамм 3.