Способ диагностики тромбинемии

 

Изобретение относится к медицине, а именно к коагулологии, и касается способа диагностики тромбинемии. Целью изобретения является повышение специфичности способа диагностики тромбинемии. Для этого определяют наличие растворимых комплексов мономеров фибрина в плазме путем осаждения B-нафтолом, или этанолом, или протаминсульфатом и определяют содержание фибриногена, результаты определения выражают в виде показателя, вычисленного как отношение экстинций растворов соответствующего паракоагулянта и фибриногена, и, если вычисленные таким образом показатели превышают максимальный средний уровень у здоровых доноров, диагностируют тромбинемию.

СОЮЗ СОВГТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (si)s G 01 N 33/86

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ I

Ф с

° » О

0с

ЬЭ

Cd

Ю зом.

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4489083/14 (22) 03.10.88 (46) 23.08.91. Бюл. N 31 (71) Белорусский государственный институт усовершенствования врачей (72) Е.П.Иванов, Д,Г,Цвирко и В.Е,Иванов (53) 616.003.213 (088,8) (56) Иванов Е.П. Диагностика нарушений гемостаза. Минск, 1983, с. 163-165. (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ТРОМБИНЕМИИ (57) Изобретение относится к медицине, а именно к коагулологии. и касается способа диагностики тромбинемии. Целью изобреИзобретение относится к медицине, а именно к гемокоагулологии и касается способа диагностики тромбинемии, Цель изобретения — повышение специфичности способа диагностики тромбинемии за счет определения наличия растворимых комплексов мономеров фибрина в плазме путем осаждения их В-нафтолом или этанолом, или протаминсул ьфатом и определения в плазме содержания фибриногена.

Результат определения выражают в виде показателя, вычисленного как отношение экстинций растворов соответствующего паракоагулянта и фибриногена, и, если вычисленные таким образом показатели превышают максимальный средний уровень у здоровых доноров, диагностируют тромбинемию.

Способ осуществляют следующие обра. Ж „„1672372 А1 тения является повышение специфичности способа диагноcòèêè тромбинемии, Для этого определяют наличие растворимых комплексов мономеров фибрина в плазме путем осаждения В-нафтолом, или этанолом, или протаминсульфатом и определяют содержание фибриногена. Результаты определения выражают в виде показателя, вычисленного как отношение экстинций растворов соответствующего паракоагулянта и фибриногена, и, если вычисленные таким образом показатели превышают максимальный средний уровень у здоровых доноров, диагностируют тромбинемию. 3 табл.

Растворимые комплексы мономеров фибрина (PKM) плазмы осаждают соответственно В-нафтолом, этанолом и протаминсульфатом, полученный осадок растворяют в уксусной кислоте и определяют экстинции раствора на спектрофотометре. Аналогично определяют содержание фибриногена в плазме. Для каждого из тестов вычисляется показатель как соотношение экстинций растворов соответствующего паракоагулянта и фибриногена. Таким образом устраняется зависимость результатов тестов от уровня фибриногена.

Определение производят в центрифужных пробирках. Смешивают соответственно

0,2 мл плазмы и 0,06 мл 2%-ного раствора

В-нафтола, 0,4 плазмы и 0,12 мл 50%-ного зтанола, 0,2 мл плазмы и 0,16 мл 1%-ного протамина. Содержимое пробирок встряхивают и оставляют при комнатной темпера1672372 туре на 10 мин. Затем пробирки центрифугируют 20 мин и ри 3000 об/мин. Надосадочную жидкость удаляют пипеткой, ее остатки осторожно смывают 1 мл дистиллированной воды, пробирки переворачивают на фильтровальную бумагу, затем осушают их стенки, а осадок растворяют в 10 мл (B-нафтоловый) и в 5 мл (этаноловый и протаминосульфатный тесты) 1,57, уксусной кислоты, Определяют экстинцию растворов при 280 и 320 нм на спектрофотометре (СФ16, СФ-26), Параллельно в исследуемой плазме определяют содержание фибриногена по Белицеру, Для каждого из тестов (E28n — Езго п вычисляют показатель Р.= - 80 Е 320)ф усат.ед, где (е280 - ез20)п — разность экстинций при 280 и 320 ныл в соответствующем паракоагуляционном тесте, а (Е280-E820)ct> -- аналогичная величина при определении фибриногена в исследуемой плазме. Для плазмы доноров найдены следующие средние значения (Х < S,,): P> = 3,58 «0,21 усл.ед., P» = 0,86+ 0,06 уел.зд., P

Таким образовал повышение в исследуемой плазме показателей В-нафголового, этанолового и протамикосульфатного тестов выше 4,21 усл.ед., 1,04 усл,ед.; и 1,02 усл.ед. соответственно (Х + 38х) свидетельствует о превышении нормального уровня РКЧФ и, следовательно, о патологической тромбинемии.

Пример. Больной T., диагноз: ДВСсиндром, гипокоагуляционно-геморрагическая форма. Для В-нафтолового теста (E28o-Ез о) = 1,0 для этанолового — 0,107 для протиминосульфатного 0,126, для фибриногена — 0,09 (1,52 г/л). Показатсли паракоагуляционныхтестов составили соответственно

Р,,= 11.11 усл,ед., P» = 1,19 усл,ед., Pn = 1.4 усл,ед., что превышает приведенные нормальные значения.

В табл, 1 показано содержание фибри5 ногена. РКМФ, ПДФ/Фг и время коалинактивированного эуглобулинового лиэиса в плазме больного; в табл. 2 — сочетание повышения содержания РКМФ с дополнительными признаками дессиминированно10 го внутреннего свертывания крови (ДВС); в табл. 3 — сравнение частоты положительных паракоагуляционных тестов, не сопровождающихся дополнительными признаками ДВС.

Предлагаемый способ имеет преиму15 щество перед известным использованием В-нафтолового, этанолового и протаминсульфатного тестов, так как устраняет зависимость результатов от уровня фибриногена и отражает лишь содержание

20 P KH Ф в исследуемой плазме. Способ и рост и доступен для широкого применения в клинической лабораторной практике.

Формула изобретения

Способ диагностики тромбинемии пу25 тем осаждения растворимых комплексов мономеров фибрина в плазме В-нафтолом, этанолом и протаминсульфатом, растворения полученного осадка в уксусной кислоте и определения экстинции растворов, о т л и30 ч а ю шийся тем, что, с целью повышения специфичности способа. одновременно определяют содержание фибриногена, осажденного тромбином, рассчитывают показатель отношения экстинций раство35 ров соответствующего паракоагулянта и фибриногена и если полученный показатель превышает максимальный среднии уровень у здоровых доноров диагностируют тромбинеми ю.

3672372

Ф

d е х

4 . х

e x л

В С.

Ы о

3

J х

E о о, 3 о

Ц о

СЪ.

4 Ъ

ГГ Ю

Ch о

tl сЧ л

C 4

О г

Са4 СЧ

Э л

С 4

В о

ОЪ ф

СГ

О о

-т о о

Ю +I

° Ф Г"Ъ

О О

В о о

О ф

Л СГ

СЧ

» о о

an мЪ

О\

О О Ъ

ОЪ С4 о о ю о о с»

dl о

Ю

См

ЧЪ

О О

СО о

O +Г

СГ ф

Ф л о и

С"Ъ С4 с — с

Ф о

Ц о

Id с

С»Ъ л о

Оъ

В

t са

° р

ДС г

С4 О о о

СЧ С 4

» ОЪ

Са4 с о о

И СО о

С4 о о л

Ю о о о

1 с С х

cJ

ГО и

Ю о л

Р» О л съ

° и

QQ о О сО и

О СО

И СО

СО СЧ и о

Г \

° со и

Г Ъ л

3 о

Ц о х

1 сО

СЧ О

» о

t ф

44

Т СЧ

О Ю

СЪ о о о о о и л

О СО,О

О СО CQ о о

С4

О1 Г

CQ O o

o o

СО Ch

О о + 1

CO Ф м о

С 4

Оъ CO

О

С Ъ

»

С 4 М о

Л мЪ

О О

И М О О С 4 Ф о и о

СЧ х

СГ

С о х х

О

ГО в

Ф о а Гб х х

СГ

O С. о

6 а

СС Ю х

Фв а

О, О 44 с х и о со о о о о î .Ф СО л со и а о о о

С 4 an

С 4 Оа о о о о о о л

1 х

Б мЪ а о х о

Ж л л

CO CQ л л

СО ф л л

СО со г л г

CQ CQ СО

ОЪ

o o

Oa Crl

o o о о о о с 4 Г Ъ т гЪ

С 4 СЧ СЧ СЧ

СО О сЧ

c л

Ф

-т М О О СО Ю О - O сч И -с — t O И л о о О

И an мЪ сЪ сп и и и сч

1 .4 О

1 о о о х

J О.

x e х х в х х о

Ф о о

13

Ф

ГО О

О

Д

5 Id х

cJ X ох а

1 Г» Го о х,х

1. В

Х IJ

ФОФ

Ф X O

ОФа

1 g, g dI

1 l ltl O кс-z

l1eàë х J х х ( х о

ЪС х с г х

t И. а о

44 III

4 ° «о а

xRt ! с. -в о Фр

1 х аа. ! ВССФ

I -.ì 1

ОССХ х Ф

С.а2

СГ О

Сй Г

1 2 о 5ф

1 а х

1 И Х

cd

1 Cf—

ekx х k

ЕХСИФ Оаа

I ! ГС

1672372

,о

С 4 О1 л л

C»j ф

С 4 С»Ъ

С»Ъ

С»1

Г \

М

OO В.Р о о л

В

L» o и м о сч со и сч ао о

С 1 СЧ СО с 1 0 о

Clj ю со л сч со сч о р.о

Ю °

1 :)» сч о о о л и о о л о ф о q

8 о

C»o C»o o Cc o oCCo О л о о а а о

00 о (J m

Р х

Г » о м э

»- (4

4 в х е м х М х э х

m X ф с э о а а х х х х х х

Cjj

X о

t(5 ф о

Х

Cd х м а х

»

Cd о э а

Й эх

Qj хэ

Е»

Cd ф

Х о

И

CJ х х

CU н о

И! х х

»

Cd о х э а ф

И э э

f э х

М о

L э х э

B ф о

И ф о и о х

1 х

m Ф о х а э (» о х х о х а э ю х

Я х э

m x о э

Q o х

Cd Х

CU Ю х

» е х х ф х о э а Г»

» о х х х о о. (» Ю э х

Р

» х х о е а х

Cd О - х э а

» 1О х

m -в

Cd Х

K а 1 э эо

Ц Р

o xc х

1 э î m х х о о э t(х

Н вЂ” е о% а

Е» Р» Х

X X X Е х х х х х х х э э э cjj ц о ц о

g» g

u CJ О х х л х л Й

Ц 2 о х хв х о ое, эа

Cd сх хк

О Х J Cd

ox oa

4 m 0 э

Ql x э ц а .г о

Р3 И C0 J н

;О ь н ." I

Г \ и

Ю

Г»Ъ и л

° О

ГЧ

-и

Г \

Ф и

Г

° О и н

Г\ м н м

Г 1 ф н м

t4 м м

Ю м

Ю

Г 1 н

CO л

Г 1 ф

В4

Г 4

Г 4 о м

Г 4 х л х

5 о

Ю

Ф о х Io х о а о ю о х о

1672372

I о

1X al

Э I» c и ю х а

Г\ Х Ь а о

O5Iх ю х

Ф > >

Х Г

td Г 1

44 О а

Ц И Ю д CO

w o. Р) о е о

Г» И I»

I о

1Х Э

Э l

Ц

44 g X щ х о

Г) Х о Ь z с к о ю г, - х

О Ь: Ю Ф

X Г» У Г х 4 л О

e o x а ы о х л ГГ а

m а во

o e o x

С= Е Г-