Способ прогнозирования эффективности лекарственных препаратов при мочекаменной болезни

 

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической фармакологии. Целью изобретения является упрощение за счет проведения исследования in vitro. Для этого определяют суммарную активность АТФаз эритроцитов in vitro в присутствии терапевтических доз препаратов и сохранение или увеличение исходной суммарной активности АТФаз расценивают как благоприятный эффект от лечения этим препаратом , снижение исходной активности АТФаз свидетельствует о нецелесообразности применения препарата для лечения нарушенного клеточного гомеостаза кальция у данного больного. 6 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (sI)s G 01 и 33/86

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4477522/14 (22) 16.08.88 (46) 30.09.91. Бюл. М 36 (71) Московский научно-исследовательский институт педиатрии и детской хирургии (72) Ю.Е,Вельтищев, В,M.Äåðæàâèí, Э.А.Юрьева, Л,В.Симанина, Н.В.Алексеева, И.В. Казанская, Х.И.Абдурахманов и Востовская В.В. (53) 577.156.6 (088.8) (56) Вельтищев Ю.Е., Юрьева Э.А. Дизметаболические нефропатии. В кн.: Детская нефрология./Под ред. М.С.Игнатовой, Ю,Е.Вельтищева. Л., 1989, с. 276 — 292. (54) СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ЭФФЕКТИВНОСТИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕИзобретение относится к медицине, а именно к клинической фармакологии, и может быть использовано для прогнозирования индивидуальной эффективности лекарственных препаратов при заболеваниях с нарушением гомеостаза кальция в клет-ках.

Целью изобретения является упрощение за счет проведения исследования In

vitro.

Это достигается определением суммарной активности АТФаз эритроцитов ин витро в присутствии терапевтических доз препаратов, сохранение или увеличение исходной суммарной активности АТФаз расценивают как благоприятный эффект от лечения этим препаратом, снижение исходной активности АТФаэ свидетельствует о

„„ ДЗ „„1681269 А1

ПАРАТОВ ПРИ МОЧЕКАМЕННОЙ БОЛЕЗНИ (57) Изобретение относится к медицине, а именно к клинической фармакологии.

Целью изобретения является упрощение за . счет проведения исследования in vitro. Для этого определяют суммарную активность

АТФаз эритроцитов in vitro в присутствии терапевтических доз препаратов и сохранение или увеличение исходной суммарной активности АТФаз расценивают как благоприятный эффект от лечения этим препаратом, снижение исходной активности

АТФаз свидетельствует о нецелесообразности применения препарата для лечения нарушенного клеточного гомеостаза кальция у данного больного, 6 табл. нецелесообразности применения препарата для лечения нарушенного клеточного гомеостаза кальция у данного больного.

Способ осуществляется следующим образом.

Для определения суммарной активности АТФаз эритроциты подготавливают по методу А,Т.Казенкова и далее определяют активность АТФаз в системе, содержащей

100 мМ хлорида натрия, 10 мМ хлорида калия, 3 мМ хлорида магния, 50 мМ трис-HCI, 2 мМ раствора АТФ, 1 мМ раствора ЭДТА (рН = 7,0) (метод: Казенков А.Т., Маслова

M.Н., Шалобадов А.Д. Исследования активности К-Ма-АТФазы в эритроцитах млекопитающих. Биохимия, 1984, т, 49, вып. 7, с.

1089-1096). Активность АТФаз эритроцитов определяюту каждого больного при условии

1681269 сравнения этой активности без добавления и в присутствии в инкубационной среде терапевтических доэ изучаемых препаратов.

Примеры исследования действия лазикса на активность АТФаз ин витра и ин виво.

Пример 1. Ира О., 8 лет, поступила

1,09,88 в уронефрологическое отделение с жалобами на частые позывы на мочеипускание, неудержание мочи днем. Клинико-лабораторным обследованием выставлен диагноз: двухсторонний ПМР iV степени, гиперрефлекторный неадаптированный мочевой пузырь, хронический пиелонефрит.

Активность АТФаз при поступлении 2,5 мкм л с, Реакция на лазикс ин витро характеризовалась снижением активности АТФаз до 1,15 мкм л с, т.е, íà 604 . Проведен курс лечения фуросемидом в течение 10 дней по 0,025 мг 1 раз в день. По окончании курса лечения активность АТФаз снизилась до 1,1 мкм л с (на 66 ). Клинически не отмечено улучшения, сохранялись проявления гиперрефлекторной дисфункции, но уменьшилась частота позывов на мочеиспускание, остается низким эффективный объем мочевого пузыря. Сделан вывод о нецелесообразности дальнейшего применения фуросемида.

Пример 2. Лучия С., 11 лет, поступила

8.09.88 с жалобами на периодическое дневное неудержание и ночное недержание мочи, изменения в анализах мочи (лейкоцитурия). Клиническими, лабораторными и специальными методами обследования выставлен диагноз: двухсторонний пузырно-мочеточниковый рефлюкс (ПМР), незаторможенный гиперрефлекторный мочевой пузырь, хронический пиелонефрит, Активность АТФаэ при поступлении 2,3 мкм л с, реакция на лазикс ин витро — снижение активности АТФаздо 1,15мкм л с, т.е. на 50, После недельного (семидневного) курса лечения фуросемидом по 0,025 мг 1 раз в день отмечено снижение активности

АТФаэ до 0,95 Фкм л c . Клинически не получено положительного эффекта, в связи с чем применение лазикса в комплексе лечения прекращено.

Пример 3. Лена С., 9 лет, поступила

9.11.88. Больна с февраля 1986 r. когда была выявлена стойкая лейкоцитурия в моче. Клинико-лабораторными методами обследования выставлен диагноз; левосторонний

ПМР !!! степени, гипоплаэия левой почки, хронический пиелонефрит (рецидивирующее течение), гиперрефлекторный незаторможенный мочевой пузырь. Активность

АТФаз и ри поступлении 1,5 мкм л с, реакция на лазикс ин витро проявилась повышением активности АТФаз до 2,15 мкм л с,т.е. на

60, После семидневного курса лечения фуросемидом по 0,025 мг 1 раз в день отмечено повышение активности АТФаз до 2,0 мкм л с (25 ), Клинически отмечалось выра5 женное уменьшение проявлений гиперрефлекторной дисфункции мочевого пузыря, уменьшение внутрипуэырного давления в фазе наполнения, купирование обострения пиелонефрита. Сделан вывод о целесооб10 разности дальнейшего использования лазикса в комплексном лечении данной больной.

Примеры исследования влияния ксидифона на активность АТФаз ин витро и ин

15 виво.

Пример 4. Лена С., 10 лет, поступила

9.11.88, больна с февраля 1986 r. Диагноз; левосторонний ПМР III степени, гипоплазия левой почки, хронический пиелонефрит (ре20 цидивирующее течение), гиперрефлекторный незаторможенный мочевой пузырь.

Активность АТФаз при поступлении 1,5 мкм л с, реакция на ксидифон ин витро характеризовалась повышением АТФазной ак25 тивности до 1,8 мкм л с, т.е, на 20 . После семидневного курса лечения 2 -ным раствором ксидифина (прием внутрь) по одной десертной ложке 3 раза в день установлено повышение активности АТФаз до 2,15 мкм

30 л "c, т.е. на 33 . Сделан вывод о целесообразности применения ксидифона в дальнейшем лечении больной.

Пример 5. Мария С., 10 лет, поступила

6.12.88. Больна с марта 1985 r. Обследова35 нием выставлен диагноз: двусторонний

ПМР, неэаторможенный мочевой пузырь, хронический пиелонефрит. Активность при поступлении 2,3 мкм л с, ин витро реакция на ксидифон проявилась уменьшением

40 активности АТФаз до 1,5 мкм л м с . После семидневного курса лечения отмвчено снижение активности АТФаз до 1,15 мкм л с, т.е. на 50 . Клинически не отмечалось положительного эффекта, в связи с чем сделан

45 вывод о нецелесообразности дальнейшего применения ксидифона у данной больной.

Изобретение позволяет упростить за счет определения in vitro прогнозирование визуальной эффективности лекарственных

50 препаратов при мочекаменной болезни.

Способ может быть воспроизведен в любой биохимической лаборатории, занимающейся диагностической и лечебной работой.

Формула изобретения

Способ прогнозирования эффективности лекарственных препаратов при мочекаменной болезни путем забора крови, 1Щ12/!() разделения крови на фракции и определения активности ферментов, о т л и ч а ю щ и Й с я тем, что, с целью упрощения за счет проведения исследования Ir) vitro, эритроциты инкубируют с лекарственным препаратом, Таблица l

Ивмеяекие активности АТФав под вовлелствием ракп|<чньс< препаратов в терапевтических Ловах в услокнкх нн вино . н нк внтро как показатель клинического аффекта препарата (нкп л с ) Больные ии впво ло инку- по бадим ни балин ч нн в|<тро совплленнл поаывеина, снниенне) вве- после

|п|л авеле ннл

Певеке

Вова Б,, 5 л., и/б

67<3 а,едии, левая почка, негауретер ° нс . 1 1. 10.88

Ира 0., B л., и/б

673!а, ПНР, иссл.

15.09.88.

Олл М. ° 10 л., 1,5

2,8 1,5

90 (+) 2,5

2 ° S 115 25

95>2 (-) н/б 6925а, !ПIР, иссл. 15.09.88.

Сава С. ° 15 л., и/б 6165а, ПИР, нссл. 15.09.88.

Лена Н. ° 7 л., н/б 6833а, ПНР> мегауретер, нссл, 16.09.88.

Лева С., 5 л. ° и/d 8681 °, ПИР, искл. 6.12.88.

0,7 1,! 0,7

89 (+) 1,3

2 ° 3

89 (-) 1>15 2,3

0,95

2,15 84 (-)

2 ° 3

1,8 2 ° 3

93 (+) 1 ° 5 2,15 1>5

2,0

Л а Н., 11 n., и/б 10069а, ХЛН> иссл. 10.!0.88.

11 115 11

100 (-) 1,15

8. Олег K. 11 л., .и/б 1705а ПИР, 1,65 1,3 1 65 исси. 22.12.88, Паврув Р., 10 л. °

ОГДП (реаиин.), иссл. 15.09.88.

Олесл K., 5 л. ° н/б 2434а, 10IP, нссл. 6.12.88.

87 (-) 1,5.9

79 (-) 1 ° 81,,6 1,8

I 2! ° 8

1,5 2,0 1>5

Хсиднфон

90 (+) Серена Г., 9 л, ° и/б 7007а, негауретер, иссл.

85 (-) 1,7 2>65 2,0

2,65.

I,Э 3,0 1,3 2,5 83 (+) .

91 (+) 2,0 1,65 2,2

28.12.88.

Рафик С., !О л., и/б 8986а, IIKH, 1,65

1>65

86 (+) 2,65 1,65 2,3 не<о<. 5.12.88.

Глеб. Р,, 12 л, н/б 8413а, ИКБ>

2,15 1>3

2,00 93 (ь) нссл. 26.11.88.

Олег Н., 11 л.> н/б 9022а, ПИР, исси. 6.12.88

Иана С. ° 10 л., 1,3

2,8

64 (-) . 1,15

2,8

1 ° В

a/б 1601а, ПИР, иссл. 6.12.88

В, Л. С., 10 л„ 1,5 2,3 . 1 15 77 (-) 2,3

1 ° 5 и/б 861 lа, !ШР, нссл. 6. 12. 88.!! в г,!5 в4 (+) Алена Н,; 8 л„

x/б 811ба, ЛИР> исси. 6.12.88.

1,5 1> lf

83 (+) 1,8

1 ° 15

Нана С., 10 n. ° н/б 1601а, ЛНР, нссл. 6.12,88.

1,5 1 ° 3

100 (+) 1,3

1,5

5

28.12.88.

Натана H. 8 л. ° и/б 4004а, мега" урутер> нссл.

28.09.88.

Нина Т., 10 л,> и/б 7419, мегауретер, нссл, определяют в зритроцитах активн(н:rh А i III;I и при снижении ее от исходного уровнп у(ra навливают нецелесообразность применения препарата для лечения нарушенного клеточ

5 ного гомеостаза кальция у данного больного.

1(Яме

Таблица

Изменение активности АТФаз эритроцитов под воздействием различных доз препаратов ин витро (MKM л с ) Активность АТФаз эритропитов

1 I (Показатели

1,92

+0,25

0,014 0,05

2,2

"0,2

3,1 (0,01

1,2

+ 0,05

1,8 (0,05

1,9

+0,48

1) — активность АТФаз без добавления препаратов, 2) — активность

АТФаз + ксидифон 0,016 мкм/мл, 3) — активность АТФаз + финоптин в дозе 36 мкг/м, 4) — активность АТФаз + лаэикс н дозе 14 мкм/мл, 5) — активность АТФаз + адреналин в дозе 14 мкг/мп.

Т а б л и ц а 3

Влияние различных концентраций ксидифона и финоптина на активность клеточных АТФаз (мкм л с ) Группы и активность АТФаз эритроцитов

Показатели

Ксидифон Финоптин

1 2 . 3 4 5 6 7 8

0,09

1) — активность АТФаз без воздействия ксидифона и финоптина (контроль), 2) — активность АТФаэ + 0,016 мкм/мл ксидифона, 3) — активность АТФаз + 0,08 мкм/мл ксидифона, 4) — активность

АТФаз + О, 16 мкм/мп ксидифона, 5) — активность АТФаз +0,21 мкм/мл ксидифона, 6) — активность АТФаз + 0,28 мкм/мл ксидифона, 7) — активность АТФаз + 10 мкл финоптина, 8) — активность АТФаз +

+ 20 мкл финоптина (доза, в 2 раза превыша(х(ая терапевтическую).

Т а б л и ц а 4

Влияние эссенциале на содержание фосфолипидов в эритроцитах больного мочекаменной болезнью ин витро

Период исследования

Показатели

До воэдейст- Через 30 мин вия эссенциале ерее 1 ч осле воздейтвия

Фосфолипиды эритроцитов, е мкм 4,5 10 сэр. 52, 1 + 5,4 (10) 84,0 4,8 101,2+11,5 ()

Р(0,01, P c0,001

2) M м

Т

М 1,9 м +0,49

Т

1,92

+О, 25

0,014 (0,05

0,83

+0,28

10,02 (0,01

1,8 — λ 1-

1,0

Z 0,05

О, 3

+0,04

105,0 (0,001

0 1,8

«+О, 13

1э0 (0,05

0,41

+0,02 .4,3 (0,01

1681269

Таблица5

Изменение активности клеточных АТФаз и количества фосфолипидов в мембране зритроцитов при воздействии эссенциале

Показатели

Период исследования

До воздей; После возствия, действия

Активность

АТФаз, мкм л1с (10) 1 4+О 1

Фо сфолипиды эритроцитов, f2 мкм 4,5 10 эр. (10) 2,2 + 0,01

<0,01

52, 115,4 101,24+11,5 (0,001

Таблица 6

Сравнительная оценка определения sAAezтивности ксидифона при лечении мочекаменной болезни

Показатели

Предлагаемый способ

Прототип

95+2X

311 ч

Нет

Составитель Т.Ковалева

Редактор Л.Павлова Техред М.Моргентал Корректор М.Шароши

Заказ 3311 Тираж Подписное

ВКИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035. Москва, Ж-35, Раушская наб„4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул.Гагарина, 101

Чувствительность

Сроки наблюдения

Возможные осложнения

Неопределенная

14-180 сут.

Снижение синтеза

1 25-ОН-Дз