Способ диагностики пищевой аллергии
Изобретение относится к медицине. 1J частности к аллергологии. Целью изобретения является повышение точности способа за счет определения типа аллергии. Цель достигается путем постановки реакции спонтанного розеткообразования с выявлением Т- и В-лимфоцитов с последующим определением коэффициента синтетической активности а для Т- и В-лимфоцитов при окрашивании фиксированных клеток акридиновым оранжевым. И при ат больше 0,28 аллергию определяют как протекающую преимущественно по замедленному типу, а при Ов больше 0.33 - преимущественно по немедленному типу.
СОЮ СОВЕТСКИХ
СОЦИ АЛИС ТИЧЕ СКИХ
РЕСПУБЛИК (я)з G 01 N 33/533
ГОСУДЛРСТВЕ ННЫЙ КОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ
ПРИ ГКНТ CCCP
1! Ф
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4672427/14 (22) 03.04.89 (46) 07.01.92. Бюл. Рв 1 (71) Рязанский медицинский институт им. акад. И.П.Павлова (72) А.М. Ногаллер. В.А. Юдин, А,А. Низов и С.И.Гладких (53) 615.375(088,8) (56) Авторское свидетельство СССР
N 1197640, 15.08.85. (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ПИЩЕВОЙ
АЛЛЕРГИИ (57} Изобретение относится к медицине,Ф частности к anneðãonoãèè. Целью изобретеИзобретение относится к медицине, в частности к и .1муноло ии и аллергологии, Целью изобретения является повышение точности способа путем определения типа аллергии.
Способ осуществляется следующим образом.
Лимфоциты периферической крови больного выделяют на фиколлверографиновом градиенте плотностью 1,077, затем два кды отмывают средой 199. Для получения Е-РОК 0,1 мл взвеси. содержа цей 2 10 б лимфоцитов, смен ивают с О,l мл 0.5%-ной взвеси эритроцитов барана и выдерживают
5 мин при 37 С и 60 мин при 4-8 С. Для получения ЕАС-PCv, взвесь ли лфоцитов смешивают с эритроцитами барана, нагруженными антитела ли и комплементом. Розетки фиксируют глутаровым альдггидом в конечной концентрации 0,6%. Обычным
» . Ж 1704089 А1 ния является повышение точности способа эа счет определения типа аллергии.: Цель достигается путем постановки реакции спонтанного розеткообразования с выявлением Т- и В-лимфоцитов с последующим определением коэффициента синтетической активности а для Т- и В-лимфоцитов при окрашивании фиксированных клеток акридиновым оранжевым. И при ат больше
0.28 аллергию определяют как протекающую преимущественно по замедленному типу. а при A больше 0.33 — преимущественно по немедленному типу. способом на стекле приготавливают мазки, которые красят акридиновым оранжевым по Карнаухову В.Н. (1978);10 мин — фиксатор Карнуа, 3 мин — 96%-ный этиловый спирт, 3 мин — 70%-ный этиловый спирт, 1,5 мин — 30%-ный этиловый спирт. 4 мин цитратно-фосфатный буфер (рН 4,2), 10 мин— акридиновый оранжевый 0.003%-ной концентрации, 2 мин — дистиллированная вода. Мазки просматривают с водной иммерсией в люминесцентном цитофлуориметре с последующей регистрацией фототока на цифровом вольтметре с каждого лимфоцита в красном (640 нм) и зегеном (530 нм) спектрах (всего 100 лимфоцитов в мазке). Эталоны 0 красном и зеленом спектрах вводят по регистрации тока фотолюминесценции с эталонного уранового стекла согласно инструкции пользования люминесцентным микроскопом. Коэффициент синтетической активности а рассчиты1704089
Составитель P.Гуме нюк
Техред M.Моргентал Корректор С.Шевкун
Редактор Н,Бобкова экаэ 60 Тираж Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
113035. Москва. Ж-35. Раушская наб., 4/5
Производственно-издательский комбинат Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина. 101 вают по соотношению показаний красной люминесценции к зеленой для каждого мазка. И при повышении а Т-лимфоцитов больше 0,28 считают, что пищевая аллергия протекает по замедленному типу. а при а
В-лимфоцитов более 0,33 — преимущественно по немедленному типу. что является существенным при выборе адекватного лечения.
Пример 1. Больная Н.. 34 года.
Диагноз, пищевая аллергия по типу бронхоспазма, вазомоторного ринита, Хронический гастрит с сохраненной секрецией.
После приема 50 г земляничного варенья через 10 мин сердцебиение, головная боль, через 20 мин одышка, эаложенность носа, Через сутки Т-лимфоциты 527ь, В-лимфоциты 34%, ат -0,28, а -0,65, Ig Е-350 МЕ. В соответствии с определением типа аллергии была назначена терапия, подавляющая аллергические реакции немедленного типа.
После лечения состояние улучшилось, бронхоспазм исчез, эаложенность носа уменьшилась, Т-лимфоциты 527ь, В-лимфоциты
287ь, а, -0,28, а, -0,22. IgE — 300 МЕ. Клинико-лабораторные данные — снижение а, в три раза, эффект от лечения — у больной пищевая аллергия протекает по немедленному типу.
Пример 2. Больная В. 62 года, Диагноз: пищевая аллергия по типу аллергического дерматита. Хронический колит, Состояние удовлетворительное, на коже рук, лица, передней брюшной стенки папулеэные высыпания, Т-лимфоциты 597ь, Влимфоциты 15, ат 0,99, ае 0,44, lgE 150
МЕ. После лечения эллюминационная диета, курс иглорефлексотерапии. которое более эффективно при аллергических реакциях замедленного типа, высыпания на коже значительно уменьшились и побледнели.
5 Т-лимфоциты 577ь, В-лимфоциты 147ь, a 0,48, ав -0,43, Ig Е-150 МЕ. Клинико-лабораторные данные — уменьшение а> в два раза, эффект от соответствующей терапии— пищевая аллергия протекает по замедленному типу.
Таким образом предлагаемый способ позволяет за короткий периоддиагностировать тип пищевой аллергии, что важно при назначении адекватного лечения. Способ
15 прост в исполнении и не требует сложной аппаратуры.
Формула изобретения
Способ диагностики пищевой аллергии путем цитометрии лимфоцитов с
20 помощью флуоресцентного красителя. отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа путем определения типа аллергии, перед цитометривй осуществляют дифференцирование
25 Т- и В-лимфоцитов в реакции роэеткообраэования, при этом розеткй фиксируют глуторовым альдегидом, а окрашивают акридиновым оранжевым в концентрации
0,003, измеряют флуоресценцию в зеленом и красном спектрах, считают коэффициент а синтетической активности как отношение показаний красной и зеленой флуоресценции отдельно для Т- и В-лимфоцитов и при ат больше 0,28 диагностируют пищевую аллергию. протекающую по замедленному типу, а при ае больше 0.33— по немедленному типу.
