Способ изучения транспорта веществ через синусоидальные мембраны гепатоцитов

Авторы патента:

СИНЕЛЬНИК ОЛЬГА ДМИТРИЕВНА

ЕСИПЕНКО БОРИС ЕВТИХИЕВИЧ

ЛЫСЕНКО ИРИНА ВИТАЛЬЕВНА

СИНЕЛЬНИК БОРИС ФЕДОРОВИЧ

G01N33/50 - химический анализ биологических материалов, например крови, мочи; испытания, основанные на способах связывания биоспецифических лигандов; иммунологические испытания (способы измерения или испытания с использованием ферментов или микроорганизмов иные, чем иммунологические, составы или индикаторная бумага для них, способы образования подобных составов, управление режимами микробиологических и ферментативных процессов C12Q)

Изобретение относится к биологии и медицине и может быть использовано в гепатологии . Цель - упрощение способа. У животных вызывают холестаз введением а- -нафтилизотиоцианата, который приводит к селективному нарушению структуры и транспортной функции мембран гепатоцитов. Структурная и функциональная целостность синусоидальных мембран позволяет регистрировать транспорт веществ через эти мембраны известными методами. Преимущество способа по сравнению с известным состоит в том, что не требуется предварительного выделения соответствующих мембранных фракций гепатоцитов.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (5!)5 G 01 N 33/50

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4798529/14 (22) 05.03.90 (46) 23,05,92. Бюл, ¹ 19 (71) Киевский государственный университет им. Т.Г.Шевченко (72) О.Д.Синельник, Б.Е.Есипенко, И.В.Лысенко и Б.Ф.Синельник (53) 615 475 (088,8) (56) Biol. Chem., 1984, v. 259, р. 5406-5408. (54) СПОСОБ ИЗУЧЕНИЯ ТРАНСПОРТА ВЕЩЕСТВ ЧЕРЕЗ СИНУСОИДАЛЬНЫЕ МЕМБРАНЫ ГЕПАТОЦИТОВ (57) Изобретение относится к биологии и медицине и может быть использовано в reИзобретение относится к биологии и медицине и может быть использовано a -епатологии.

Цель изобретения вЂ” упрощение способа, Способ осуществляют следующим образом.

У крыс вызывают экспериментальный холестаз путем перорального введения анафтилизотиоцианата в дозе 100 мг/кг массы тела в виде 2%-ного раствора в растительном масле. Через 2 дня получают тонкие срезы печени вЂ” около 300,и, которые инкубируют при температуре

1 С в течение 90 мин: 10 вЂ” 15 срезов в КребсРингер-фосфатном буфере и по 1 срезу в таком же растворе, содержащем 0,5% инулина. После инкубации определяют в срезах объем внеклеточного пространства по инулиновому методу и содержание натрия и калия, используя фотометрию пламени. Расчетным способом определяют внутриклеточное содержание воды, натрия и калия.

„„ „„1735780 А1 патологии. Цель вЂ” упрощение способа. У животных вызывают холестаз введением а-нафтилизотиоцианата, который приводит к селективному нарушению структуры и транспортной функции мембран гепатоцитов. Структурная и функциональная целостность синусоидальных мембран позволяет регистрировать транспорт веществ через эти мембран ы известными методами. П реимущество способа по сравнению с известным состоит в том, что не требуется предварительного выделения соответствующих мембранных фракций гепатоцитов.

Другую часть срезов, инкубированных без инулина, делят на 2 группы и переносят: одну в оксигенированную среду (Крес-Рингер-фосфатный буфер, содержащий 0,5% инулина), другую в такую же среду, содержащую строфантин К в концентрации 10 M u инкубируют при 38 С в течение 45 мин. При таких условиях инкубации в первой группе 64 срезов происходит частичное восстановле- U ние ионной асимметрии, нарушенное предварительной инкубацией на холоде, во Q( второй такому восстановлению препятству- С ет строфантин, После инкубации при 38 С в срезах определяют объем внеклеточного пространства и содержание натрия и калия, затем расчетным путем вЂ” внутриклеточное содержание воды, натрия и калия.

П р и. м е р. Крысам вводят перорально а-нафтилизотиоцианат в дозе 100 мг/кг массы тела в виде 2%-ного раствора в растительном масле. Через 2 дня получают срезы печени и исследуют их описанным выше способом.

1735780

Составитель А.Кашулина

Техред М.Моргентал Корректор М.Максимишинец

Редактор Е.Папп

Заказ 1813 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101

В таблице представлены результаты расчета интенсивности активного транспорта ионов натрия и калия (количество миллимолей натрия, транспортированнное из клеток за 45 мин инкубации при 38 С после предварительной инкубации на холоде), и калия, транспортированного в клетки за то же время, в расчете на единицу массы печени (ммоль/кг/45 мин) через мембраны клеток интактной и холестазной печени.

Как видно из таблицы, неповрежденные синусоидальные мембраны гепатоцитов холестазной печени сохраняют функциональную способность транспортировать ионы натрия и калия. Преимущество предлагаемого способа по сравнению с известным состоит в том, что не требуется предварительное выделение соответствующих мемб5 ранных фракций гипатоцитов.

Формула изобретения

Способ изучения транспорта веществ через синусоидальные мембраны гепатоцитов, отличающийся тем, что, с целью

10 упрощения способа, каналикулярные мембраны блокируют путем введения животным а - нафтилизотиоцианата, а транспорт изучают на срезах печени.

Изобретение относится к биохимии и физиологии растений

Способ определения активности оксидаз смешанной функции печени // 1734016

Способ определения адаптированности чабанов к холодовым нагрузкам в условиях отгонного животноводства // 1728805

Способ определения нарушений обмена фосфолипидов при заболеваниях легких у детей // 1727070

Способ диагностики нарушений свертывающей системы крови при беременности // 1711075

Изобретение относится к акушерству

Способ определения чистоты препаратов плазматических мембран клеток тканей лабораторных животных при отсутствии выраженной генетической патологии // 1709219

Изобретение относится к биохимии, в частности к способам определения чистоты мембранных препаратов

Способ определения адениловых нуклеотидов в биологическом материале // 1709218

Изобретение относится к области биохимии, медицинской биологии, медицины и сельского хозяйства и предназначено Для точного количественного определения адениловых нуклеотидов в биологических объектах, в том числе органах и тканях человека и животных

Способ диагностики склерозирования желчных протоков // 1707536

Изобретение относится к медицине, а именно к гастроэнтерологии и хирургии

Способ оценки перекисной резистентности эритроцитов // 1704083

Изобретение относится к биологии и медицине и может быть использовано для оценки состояния антиоксидантной системы организма

Способ прогнозирования развития острой почечной недостаточности при геморрагической лихорадке с почечным синдромом // 1704082

Изобретение относится к медицине и позволяет прогнозировать вероятность развития осложнений в ранние сроки

Способ определения галактозы в сыворотке крови // 2101705

Изобретение относится к биохимии и ветеринарии и касается способа определения гексоз, например галактозы, в сыворотке крови для ранней диагностики нарушений минерального обмена

Способ определения мочевины и креатинина в биологических жидкостях // 2101706

Изобретение относится к медицине и касается видов патологии или состояний организма, связанных с нарушениями азотистого обмена, особенно при различных видах почечной патологии, обширных хирургических ранах, ожогах

Способ прогнозирования течения ишемической болезни сердца // 2102756

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в кардиологии, терапии

Способ оценки состояния больного // 2103692

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической биохимии и может быть использовано для диагностики и прогнозирования состояния больного в послеоперационном периоде и при развитии острого воспалительного процесса

Способ прогнозирования продолжительности жизни онкологических больных четвертой стадии заболевания после диагностических хирургических вмешательств // 2104536

Изобретение относится к медицине, в частности к онкологии, и может быть использовано при проведении больным с неблагоприятным прогнозом адъювантных методов терапии

Способ диагностики сахарного диабета // 2104537

Изобретение относится к медицине, в частности к эндокринологии, и может быть использовано для проведения дифференицальной диагностики инсулинзависимого и инсулиннезависимого диабета, состояния их компенсации

Способ прогнозирования цирроза печени у больных с хроническими диффузными заболеваниями печени // 2104538

Изобретение относится к медицине, а именно гепатологии, и предназначено для прогнозирования цирроза печени у больных с хроническими диффузными поражениями органа

Способ оценки микросомальной системы печени при действии ксенобиотиков алкилирующего типа // 2104539

Изобретение относится к области исследования или анализа материалов особыми способами, а именно к способам исследования крови при действии ксенобиотиков, и может быть использовано для оценки микросомальной системы печени после воздействия малых доз иприта и люизита при реальных путях поступления ОВ (отравляющих веществ) в организм, а также при решении задач по уничтожению ХО (химического оружия) в районах военно-химических объектов, в частности по обследованию здоровья населения и обслуживающего персонала в местах по хранению и уничтожению ХО

Прибор для мониторинга параметров взвешенных частиц // 2106627

Изобретение относится к оптико-электронной промышленности и может быть использовано для комплексного исследования параметров взвеси частиц микронных и субмикронных размеров (10-8 - 10-4 м): распределения частиц по группам с определенными размерами, химического состава частиц, скоростей изменения этих характеристик

Способ лечения ишемической болезни сердца // 2107910

Изобретение относится к медицине, в частности, к кардиологии, и может быть использовано для лечения любых клинических вариантов ишемической болезни сердца