Способ определения скорости кровотока кости пародонта крысы в эксперименте

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для определения скорости кровотока кости пародонта крысы в эксперименте. Определяют скорость кровотока исследуемого участка пародонта методом лазерной допплеровской флоуметрии (ЛДФ) и методом ультразвуковой допплерографии (УЗДГ). Проводят пробу ацетилхолина хлорида (АХ) на исследуемом участке пародонта с экспозицией 1 мин. Затем определяют максимальное значение скорости кровотока пародонта методами ЛДФ и УЗДГ. Далее определяют скорость кровотока кости пародонта по формуле Uкости=U1-(U2-U1)×L1/(L2-L1), где Uкости – значение скорости кровотока кости пародонта, мл/с/см3; L1 – значение скорости кровотока пародонта до пробы с АХ, измеренное методом ЛДФ, перфузионные единицы; U1 – значение скорости кровотока пародонта до пробы с АХ, измеренное методом УЗДГ, мл/с/см3; L2 – максимальное значение скорости кровотока пародонта после пробы с АХ, измеренное методом ЛДФ, перфузионные единицы; U2 – максимальное значение скорости кровотока пародонта после пробы с АХ, измеренное методом УЗДГ, мл/с/см3. Способ обеспечивает неинвазивное проведение исследований по изучению динамики кровотока кости пародонта с нормальной и нарушенной микроциркуляцией путем определения скорости кровотока кости пародонта при помощи математического выражения. 2 ил.

 

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для определения скорости кровотока кости пародонта крысы в эксперименте.

Одним из ведущих звеньев патогенеза заболеваний пародонта является нарушение микроциркуляции крови в его тканях (Кречина Е.К., Мустафина Ф.К., Ефремова Н.В., Ефимович О.И., Маслова В.В. Особенности микроциркуляторных нарушений при воспалительных заболеваниях пародонта. Стоматология. 2014; 6: 28).

Известен способ определения функционального состояния сосудов тканей пародонта (патент RU 2161913, опубл. 20.01.2001), при котором определяют среднюю линейную и среднюю объемную скорости кровотока путем ультразвуковой допплерографии (УЗДГ).

Недостатком способа является определение скорости суммарного кровотока во всех слоях пародонта, включая слизистую, надкостницу и кость. Не представляется возможным выделить из суммарного определения скорость кровотока кости пародонта.

Известен способ определения скорости кровотока пародонта методом лазерной допплеровской флоуметрии (ЛДФ) с использованием красного лазера с длиной волны 550 нм, проникающего на глубину 0.1 мм, что соответствует слизистому слою пародонта (Кречина Е.К., Мустафина Ф.К., Ефремова Н.В., Ефимович О.И., Маслова В.В. Особенности микроциркуляторных нарушений при воспалительных заболеваниях пародонта. Стоматология. 2014; 6: 28).

Недостатком способа является невозможность определения скорости кровотока кости пародонта из-за малой глубины проникновения.

Необходимость определения скорости кровотока кости пародонта связана с различными заболеваниями пародонта, при которых страдает кровоток костной ткани пародонта, не всегда равномерно коррелирующий с кровотоком слизистой оболочки пародонта.

Техническим результатом изобретения является неинвазивное определение скорости кровотока кости пародонта, проведение исследований по изучению динамики кровотока кости пародонта с нормальной и нарушенной микроциркуляцией.

Указанный технический результат достигается в способе определения скорости кровотока кости пародонта крысы в эксперименте, в котором определяют скорость кровотока пародонта исследуемого участка методами ЛДФ и УЗДГ, проводят пробу ацетилхолина хлорида (АХ) на исследуемом участке пародонта с экспозицией 1 мин., затем определяют максимальное значение скорости кровотока пародонта методами ЛДФ и УЗДГ и определяют скорость кровотока кости пародонта по формуле:

Uкости=U1-(U2-U1)×L1/(L2-L1),

где:

Uкости - значение скорости кровотока кости пародонта, мл/с/см3;

L1 - значение скорости кровотока пародонта до пробы с АХ, измеренное

методом ЛДФ, перфузионные единицы;

U1 - значение скорости кровотока пародонта до пробы с АХ, измеренное методом УЗДГ, мл/с/см3;

L2 - максимальное значение скорости кровотока пародонта после пробы с АХ, измеренное методом ЛДФ, перфузионные единицы;

U2 - максимальное значение скорости кровотока пародонта после пробы с АХ, измеренное методом УЗДГ, мл/с/см3.

Для оценки реактивности сосудов микроциркуляторного русла использовали пробу с вазоактивным веществом - АХ. АХ позволяет оценить эндотелий-зависимую вазодилатацию, поскольку через воздействие АХ на мускариновые рецепторы эндотелия увеличивается образование вазодилататоров NO, PGI2, EDHF, информирующих о состоянии механизмов, определяющих как базальный тонус, так и расслабление гладкомышечных клеток сосудистой стенки (Newton DJ. еt al. Roleofendothelium-derivedhyperpolarisingfactorinacetylcholine-mediatedvasodilatationinskin. .IntAngiol. 2013 Jun; 32 (3): 312-8).

Известно также, что AX при аппликации на слизистую оболочку влияет на артериолы подслизистого слоя, что подтверждает глубину проникновения АХ до надкостницы, не включая ее (Власов Т.Д. Механизмы гуморальной регуляции сосудистого тонуса. Часть 2 // Регионарное кровообращение и микроциркуляция. 2002. №4. С. 68-73).

Таким образом, реакция сосудов на поверхностную аппликацию АХ возникает в сосудах слизистой оболочки и отсутствует в надкостничном и костном слоях пародонта.

Экспериментально установлено, что прирост скорости кровотока на воздействие АХ достигает максимального значения после аппликации АХ, затем снижается и достигает исходного уровня (фиг. 1, 2).

Разница в цифрах прироста кровотока на аппликацию АХ методом УЗДГ (фиг. 1) и методом ЛДФ (фиг. 2) связана с тем, что показатели кровотока, полученные с помощью УЗДГ, включают и кровоток в кости нижней челюсти, который не изменяется при аппликации АХ.

Измерение скорости кровотока пародонта методом ЛДФ сводится к измерению скорости кровотока в слизистом слое пародонта в условных перфузионных единицах.

Измерение скорости кровотока пародонта методом УЗДГ в соответствующих единицах измерения мл/с/см3 позволяет измерить суммарный показатель скорости кровотока во всех слоях пародонта, включая слизистую, надкостницу и часть кости. При этом скоростью кровотока в надкостничном слое можно пренебречь.

Так как изменение скорости кровотока пародонта на воздействие АХ происходит только в слое слизистой пародонта, то прирост скорости кровотока при измерении различными методами ЛДФ и УЗДГ один и тот же, но выражен в разных единицах измерения.

Таким образом, формула для оценки скорости кровотока кости пародонта основана на следующих положениях:

Скорость кровотока пародонта U1 является суммой кровотоков Uкости и Uслизистой до воздействия АХ:

Скорость кровотока пародонта U2 является суммой кровотоков Uкости и Uслизистой после воздействия АХ:

тогда:

Считаем, что ультразвук проникает в кость до и после воздействия АХ одинаково, а прироста кровотока в кости не появляется.

Относительным изменением скорости кровотока пародонта методом ЛДФ является отношение:

Относительным изменением скорости кровотока пародонта методом УЗДГ является отношение

Следовательно:

откуда

Подставляя выражение (4) в выражение (8), получаем выражение (9)

Из выражения (2) имеем:

Подставляя выражение (9) в выражение (10) получаем выражение (11)

Полученная математическая формула позволяет определить скорость кровотока в кости пародонта в единицах измерения УЗДГ.

Сущность способа иллюстрируется фиг. 1,2,

где:

на фиг. 1 - динамика показателей скорости кровотока в пародонте крыс без патологии микроциркуляции пародонта на воздействие АХ методом УЗДГ в процентах к исходному значению;

на фиг. 2 - динамика показателей скорости кровотока в пародонте крыс без патологии микроциркуляции пародонта на воздействие АХ методом ЛДФ в процентах к исходному значению.

Способ осуществляют, например, следующим образом.

Исследование кровотока в пародонте крысы проводят под анестезией, для чего вводят смесь: золетил 50 (VIRBAC, Франция) и ксилазин (Interchemiewerken «DeAdelaar B.V.», Нидерланды) в равных объемах в дозе 0,5 мл/кг. Сразу после засыпания крысу помещают на термостатируемый столик TCAT-2LV controller (Physitemp) с ректальным температурным датчиком. Температуру тела поддерживают в диапазоне 37,5±0,5°С.

Измеряют L1 методом ЛДФ. ЛДФ проводят с использованием лазерного флоуметра BLF21 фирмы «Transonic» (США) с иглообразным датчиком, тип N, длина волны λ=780 нм). Этот прибор позволяет исследовать кровоток в участке ткани, равном 1 мм3 на глубине исследуемого участка ткани до 1 мм. Датчик устанавливают перпендикулярно поверхности слизистой оболочки в области проекции бифуркации корней до соприкосновения без давления с помощью лабораторного штатива.

В виду анатомических особенностей крысы, таких как: мощная кортикальная пластинка с вестибулярной стороны, довольно узкая альвеолярная часть нижней челюсти, вытянутая в вестибуло-оральном направлении и полуэллипсовидной формы, хорошо развитая мышечная структура языка, для лучшей визуализации процессов, установки датчика и снятия данных используют стоматологические бинокуляры SANYO.

Измеряют U1 методом УЗДГ. УЗДГ проводят с помощью прибора «Минимакс-Доплер-К» с использованием двухэлементного высокочастотного ультразвукового датчика с частотой 25 МГц. Диаметр рабочей части датчика, находящейся в непосредственном контакте с тканью, составляет 1,5 мм. Акустический гель не используют в виду предупреждения искусственного увеличения толщины слизистой оболочки и достаточного контакта датчика с поверхностью. Определяют тканевую перфузию слизистой оболочки и глублежащих тканей на глубине до 3,5 мм и регистрируют интегральную величину скорости кровотока. Угол установки датчика к исследуемой поверхности составляет 60°, что соответствует наилучшему акустическому и визуальному допплеровскому сигналу. Правильная установка датчика в зону локации подтверждается с помощью акустического и визуального сигналов (звуковое оборудование и спектрограммы на программном обеспечении обоих допплерографов). После наложения на экватор первого премоляра нижней челюсти слева датчик УЗДГ продвигают книзу, в характерную область краевой десны в проекции бифуркации корней с язычной стороны.

Для оценки реактивности сосудов микроциркуляторного русла пародонта проводят функциональную пробу с АХ в виде аппликации с АХ на исследуемый участок пародонта.

Абсолютная доза апплицируемого АХ, полученная путем взвешивания аппликаторов из фильтровальной бумаги диаметром 6 мм на электронных весах OHAUS Adventurer без АХ и с нанесенным АХ, составляет 0,0118 мг 3% раствора АХ.

Аппликатор, смоченный АХ, накладывают на исследуемую область пародонта с экспозицией 1 мин, после чего его убирают, измеряют максимальную скорость измененного кровотока пародонта способами ЛДФ и УЗДГ. Получают значения L2 и U2 соответственно.

Определяют скорость кровотока кости пародонта по формуле:

Uкости=U1-(U2-U1)×L1/(L2-L1),

Заявляемый способ дает возможность неинвазивного определения скорости кровотока кости пародонта крысы в эксперименте.

Сущность способа подтверждается следующим экспериментальным примером.

Пример. Определение скорости кровотока кости пародонта у крыс без патологии микроциркуляции пародонта и у крыс с медикаментозно-ассоциированным нарушением микроциркуляции пародонта. В исследование было взято 36 крыс самцов линии Вистар (ФГУП «питомник лабораторных животных «Рапполово») 6-месячного возраста со средними показателями веса 380-440 г.Животные содержались на неограниченном потреблении корма (стационарный рацион для лабораторных крыс К-120, ООО «Лаборатор-корм», РФ) и воды.

Часть крыс подверглись медикаментозному воздействию, вызывающему нарушение микроциркуляции пародонта. Скорость кровотока определяли у крыс в группе без патологии и в группе с патологией пародонта.

В обеих группах соответствии с заявленным способом были определены показатели L1 и U1 методами ЛДФ и УЗДГ до пробы с АХ. Затем проводили пробу с АХ на исследуемом участке с экспозицией 1 мин., после чего аппликацию удаляли и определяли показатели L2 и U2, соответствующие максимальному значению скорости измененного кровотока пародонта, методами ЛДФ и УЗДГ.

Произвели определение скорости пародонта Uкости по формуле:

Uкости=U1-(U2-U1)×L1/(L2-L1),

где:

1. У крыс без патологии микроциркуляции пародонта были получены следующие показатели:

L1=8,6 перф. ед; U1=1,0 мл/с/см3; L2=15,6 перф. ед.; U2=1,3 0 мл/с/см3

Uкости=1,0-(1,30-1,0)×8,6/(15,6-8,6)=0.63 мл/с/см3

2. У крыс с медикаментозно-ассоциированным нарушением микроциркуляции пародонта:

L1=5,5 перф. ед; U1=0,8 мл/с/см3; L2=9,8 перф. ед.; U2=1,1 мл/с/см3

Uкости=0,8-(1,1-0,8)×5,5/(9,8-5,5)=0.42 мл/с/см3

Заявляемый способ дает возможность неинвазивного определения скорости кровотока кости пародонта крысы в эксперименте, позволяет проводить исследования по изучению динамики кровотока кости пародонта с нормальной и нарушенной микроциркуляцией.

Способ определения скорости кровотока кости пародонта крысы в эксперименте, отличающийся тем, что определяют скорость кровотока пародонта исследуемого участка методом лазерной допплеровской флоуметрии (ЛДФ) и методом ультразвуковой допплерографии (УЗДГ), проводят пробу ацетилхолина хлорида (АХ) на исследуемом участке пародонта с экспозицией 1 мин, затем определяют максимальное значение скорости кровотока пародонта методами ЛДФ и УЗДГ и определяют скорость кровотока кости пародонта по формуле

Uкости=U1-(U2-U1)×L1/(L2-L1),

где

Uкости - значение скорости кровотока кости пародонта, мл/с/см3;

L1 - значение скорости кровотока пародонта до пробы с АХ, измеренное методом ЛДФ, перфузионные единицы;

U1 - значение скорости кровотока пародонта до пробы с АХ, измеренное методом УЗДГ, мл/с/см3;

L2 - максимальное значение скорости кровотока пародонта после пробы с АХ, измеренное методом ЛДФ, перфузионные единицы;

U2 - максимальное значение скорости кровотока пародонта после пробы с АХ, измеренное методом УЗДГ, мл/с/см3.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к экспериментальной медицине, а именно к способу моделирования хеликобактериоза. Для этого перорально вводят белым мышам один раз в сутки 52 мкг препарата Париет, являющегося ингибитором протонного насоса в желудке, с последующим введением животным через 1-1,5 ч перорально однократно в сутки суспензии бактерий Helicobacter pylori КМ-11RifR на изотоническом растворе хлорида натрия в объеме 0,2 мл, содержащем 1×105 микробных клеток, причем введение суспензии бактерий Helicobacter pylori КМ-11RifR продолжают в течение 10 суток, ежедневно отбирая фекалии для определения количества хеликобактерий, выводимых из организма животных, путем высева фекалий на селективную плотную питательную среду с рифампицином 150 мкг×мл-1 в чашках Петри, которые инкубируют при температуре 37°С в течение 24-48 ч в микроаэрофильных условиях, затем обрабатывают полученные результаты высева фекалий, основываясь на количестве выросших колоний, и выносят суждение о выживаемости и приживаемости бактерий Helicobacter pylori KM-11RifR в желудке, исходя из величины доли жизнеспособных бактерий Helicobacter pylori KM-11RifR от числа введенных перорально животным, а также о начале бактериовыделения Helicobacter pylori КМ-11RifR с фекалиями животных, интенсивности, длительности и продолжительности бактериовыделения Helicobacter pylori KM-11RifR на основании подсчета колоний, выросших в микроаэрофильных условиях при температуре 37°С при ежедневном отборе и посеве отобранных фекалий белых мышей на селективную плотную питательную среду с рифампицином при следующем количественном соотношении компонентов, г/л: пептон 20,0; дрожжевой экстракт 5,0; натрий хлористый 10,0; глюкоза 5,0; тиамина хлорид 0,008; кальция пантотенат 0,008; натрия сульфит 0,5; гемин 0,01; агар-агар 12,0; твин-80 1,0; рифампицин 150 мкг⋅мл-1; дистиллированная вода остальное, рН среды 7,3±0,2 ед.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии. Выполняют лапаротомию.

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для отработки практических навыков по оказанию первой медицинской помощи и диагностике нарушений внутренних органов путем выслушивания звуковых феноменов легких, сердца, желудка, кишечника и сосудов.

Изобретение относится к медицинской технике. Стенд лабораторный актографический для хронобиологических и хронофармакологических исследований на животных содержит клетку, датчики контроля.

Изобретение относится к области экспериментальной медицины, а именно к офтальмологии, и касается профилактики пролиферативной витриоретинопатии, которая развивается вследствие пролиферации глиальных клеток сетчатки и приводит к образованию хореоретинального рубца.

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для коррекции гипогонадизма у животных при моделировании острого повреждения спинного мозга.
Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной медицине, и может быть использовано для моделирования распространенного гнойного перитонита у кроликов.

Изобретение относится к экспериментальной медицине, комбустиологии и патологической физиологии. После проведения общей анестезии раствором Золетил 50 в дозе 20 мг/кг шерсть на спине животного сбривают.

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть применимо для моделирования трофической раны в эксперименте. Иссекают кожу в межлопаточной области у экспериментального животного в виде геометрической фигуры.

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть применимо для формирования модели открытого пневмоторакса у свиньи. Выполняют торакотомию путем рассечения мягких тканей передней грудной стенки, в переднебоковой проекции на уровне VI межреберья по передней подмышечной линии до париетальной плевры, с последующей резекцией VI ребра, размерами 10,0×2,5 см с предлежащей париетальной плеврой и формированием визуально определяющегося открытого пневмоторакса, дополнительно подтвержденного рентгенографическим исследованием органов грудной полости.

Группа изобретений относится к медицинской технике, а именно к средствам для оценки риска инсульта с использованием ультразвуковой визуализации. Диагностическая ультразвуковая система визуализации для оценки бляшки ультразвуком с контрастированием содержит датчик ультразвуковой визуализации с матричным преобразователем, выполненный с возможностью сбора последовательности ультразвуковых изображений области бляшки в сонной артерии во время подвода контрастного вещества, вычислитель кривых времени-интенсивности для каждого пикселя из пикселей в области бляшки на ультразвуковых изображениях последовательности, где присутствует контраст, компаратор, выполненный с возможностью определения каждого пикселя из пикселей в области бляшки, где происходит перфузия, при этом контраст в данном пикселе базируется на кривой времени-интенсивности для данного пикселя, и дисплей, выполненный с возможностью отображения степени перфузии в области бляшки.

Изобретение относится к медицине, а именно к функциональной диагностике, и может быть использовано для диагностики микроциркуляторно-тканевых нарушений в стопах пациентов с сахарным диабетом.
Изобретение относится к медицине, а именно к сердечно-сосудистой хирургии, и может быть использовано для определения наличия тандемного поражения внутренней сонной артерии (ВСА) при ее хронической атеросклеротической сегментарной окклюзии.
Изобретение относится к области медицины, а именно к нейрохирургии. При хирургическом лечении пациентов с образованиями бластоматозного ряда, локализующимися в медиобазальных отделах височной доли и/или таламуса в процессе хирургической операции проводят контроль за локализацией бластоматозного образования, объемом его удаления и кровотоком в основных артериальных и венозных коллекторах с помощью УЗ-датчика 8863 мониторной системы Flex Focus 800.
Изобретение относится к области медицины, а именно к ультразвуковой диагностике, и может быть использовано для оценки жизнеспособности почки по данным ультразвукового исследования с эхоконтрастированием в раннем послеоперационном периоде при анурии после экстракорпоральной резекции почки в условиях фармако-холодовой ишемии без пересечения мочеточника с ортотопической реплантацией сосудов.

Изобретение относится к медицине. Способ прогнозирования отсутствия регресса двигательного дефицита у пациентов в позднем восстановительном периоде ишемического инсульта с легким или умеренным центральным гемипарезом заключается в том, что у пациентов, перенесших церебральный ишемический инсульт, исследуют микроциркуляцию и состояние нервно-мышечного аппарата по показателям: среднее квадратичное отклонение регистрируемых допплеровских сигналов от среднего значения (уровень флакса), индекс флаксмоций, амплитуда низкочастотных колебаний тканевого кровотока, амплитуда моторного ответа в дистальной точке нерва, регистрируемая с мышцы, отводящей большой палец кисти - m.

Изобретение относится к области медицины, а именно к ультразвуковой диагностике и может быть использовано для выбора тактики ведения беременных группы риска с 28-й недели беременности.
Изобретение относится к области медицины, а именно к ультразвуковой диагностике, и может быть использовано для интраоперационного ультразвукового исследования состояния сосудов почки при экстракорпоральной резекции почки в условиях фармако-холодовой ишемии без пересечения мочеточника с ортотопической реплантацией сосудов.

Изобретение относится к медицине, а именно к урологии, и может быть использовано для лечения мужского бесплодия. Производят открытую биопсию яичка и забор тестикулярных сперматозоидов при высоком показателе ДНК-фрагментации эякуляторных сперматозоидов.
Изобретение относится к косметологии и может быть использовано для контроля результатов лечения отека мягких тканей лица, возникшего при проведении контурной пластики гелями на основе гиалуроновой кислоты.

Изобретение относится к медицине, а именно к сердечно-сосудистой хирургии. После формирования дистального анастомоза проводят флоуметрическую оценку каждого дистального анастомоза шунта.
Наверх