Способ получения ронидазы

 

пц 566875

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистически»

Республик (61) Дополнительное к авт. свид-ву ,.(22) Заявлено 30.03.76 (21) 2339841/13 с присоединением заявки № (23) Приоритет

Опубликовано 30.07.77. Бюллетень № 28

Дата опубликования описания 22.08.77 (51) М. Кл е С 12D 13/10 государственный комите

Совета Министров СССР оо делам изобретений и аткрмтий (53) УДК 615.45:615. .779.94 (088. 8) (72) Авторы изобретения Л. И. Стекольников, Б. А. Севастьянов, Г. Г. Шилов, T П. Литвинова, Н. С. Игнатьева и Л. С. Твердохлиб

Всесоюзный научно-исследовательский институт мясной промышленности (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РОНИДАЗЫ

Изобретение относится к производству лекарственных препаратов для применения в медицинской практике.

Известен способ получения ронидазы путем измельчения семенников, экстр акции фермента физиологическим раствором, содержащим 0,25% хлороформа, центрифугирования, высушивания экстракта в сублимационном аппарате при 60 — 70 С, обработки порошка ацетоном (1).

Однако известный способ не обеспечивает высокого выхода и чистоты препарата.

С целью повышения выхода и чистоты препарата экстракцию осуществляют уксусной кислотой, полученный экстракт концентрируют и отделяют балластные белки, затем экстракт обрабатывают спиртом и полученный осадок промывают многократно ацетоном, а затем серным эфиром. Кроме того, экстракцию осуществляют при 2 — 40 С и непрерывном перемешивании, балластные вещества отделяют вакуум-выпаркой экстракта при 0—

30 С, а осаждение целевого продукта осуществляют этиловым спиртом при температуре минус 10 — плюс 6 С.

Пример. 85 кг замороженных семенников крупного рогатого скота измельчают дважды на волчке, добавляют 85 л 0,1 н. раствора уксусной кислоты, температуру смеси доводят до 20 С и экстрагируют при постоянном перемешивании в течение 3 час. Жмых отделяют сепарированием при 8000 об/мин в течение 30 мин и отбрасывают, а 95 л прозрачного экстракта стущаютотод вакуумом при

5 25 С до получения около 9,5 л раствора, который центрифугируют при 3000 об/мин в течение 20 мин. Осадок, содержащий лишь следовые количества фермента, отделяют и отбрасывают, а надосадочную жидкость влива10 ют тонкой струей в 4 объема (около 38 л) охлажденного до 0 С 96% -ного этилового спирта. Смесь тщательно перемешивают, оставляют на 2 час при 0 С, осадок отделяют, промывают пять раз по 2 л ацетоном и

15 дважды по 1 л серным эфиром и сушат на воздухе до удаления запаха эфира. Выход порошка составляет около 1105 г или 1,3% от веса сырья.

После определения активности (активность

2о 512 е. д. в 100 мг) к порошку добавляют

16,57 мг молочного сахара, смесь перемешивают в течение 2 час в шаровой мельнице и расфасовывают во флаконы по 5 г с содержанием фермента во флаконе около 300 мг.

Предлагаемый способ получения ронидазы позволяет значительно повысить качество препарата за счет снижения содержания балластных веществ в продукте, а также в

Зо 3,5 раза повысить выход готового продукта, 3

Формула изобретения

1. Способ получения ронидазы путем экстракции из семенников крупного рогатого скота, отделения экстракта с последующим высушиванием целевого продукта, о тл и ч аю шийся тем, что, с целью повышения выхода и чистоты препарата, экстракцию осуществляют уксусной кислотой, полученный экстракт концентрируют и отделяют балластные белки, затем экстракт обрабатывают спиртом и полученный осадок промывают многократно ацетоном, а затем серным эфиром.

2. Способ по п, 1, отличающийся тем, что экстракцию осуществляют при 2 — 40 С и непрерывном перемешивании.

3. Способ по п. 1, отличающийся тем, 5 что балластные вещества отделяют вакуумвыпаркой экстракта при 0 — 30 С.

4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что осаждение целевого продукта осуществляют этиловым спиртом при температуре ми10 нус 10 — плюс 6 С.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Гуров В. А., Иноземцева М. А., Замиховский А. Б. Справочник по органопрепаратам, 15 М., 1970, с. 96.

Составитель С. Малютина

Редактор М. Дмитриева Техред М. Семенов Корректор Е. Хмелева

Заказ 1888/12 Изд. № 634 Тираж 563 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Типография, пр. Сапунова, 2