Способ определения концентрации декстрана в крови
ОП ИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
Союз Советския
Социалистическик
Респубйии
<1998953 (61) Дополнительное к авт. свид-ву— (22) Заявлено 3 11 280 (21)3 2 56628/28-13 с присоединением заявки ¹(23) ПриоритетР4) М. Кл.з
G 01 0 33/48
Государственный комитет
СССР.по делам изобретений и открытий
)33) УДК 612.1 (088. 8) Опубликовано 230283. Бюллетень №7
Дата опубликования описания 23.0233
Г.H.Ñóøêåâè÷, Г.Т.Черненко и Т.Е j) àêÜÔ3ã, $pт
Всесоюзный научно-исследовательский ту1"технолог кровезаменителей и гормональных препаратов и исследовательский институт медицинской радиологии (72) Авторы изобретения (733 Заявители (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОНЦЕНТРДЦИИ
ДЕКСТРАНА В КРОВИ
Изобретение относится к аналитической биохимии; а именно к способам определения концентрации декстрана в крови и может быть использовано в медицинской практике для определения концентрации кровозаменяющих средств декстрановой природы полиглюкина и реополиглюкина.
Известен способ определения кон центрации декстрана,основанный на осаждении из щелочного фильтрата,полученного после удаления белков плазмы, медного комплекса с последующим определением меди, остающейся над осадком (1 ).
Однако этот способ весьма трудоемок и неточен, так как в крови всегда присутствуют и другие вещества, обраэукщие комплекс с медью.
Известен также способ определения концентрации декстрана в крови методом Меткалфа и Русло. Способ включает центрифугирование содержащей декстран крови, взятой с генерином, добавление к полученной плазме равного объема 10%-ной трнхлоруксусной кислоты; второе центрифугирование раствора, добавление к центрифугату 94Ъного этилового спирта,колориметрирование раствора, и вычисление по калибровочной кривой искомой концентрации раствора декстрана (.2)
Однако известный способ трудоемок
5 и занимает довольно длительное(время 1 ч на пробу). Кроме того, способ, недостаточно точен, так как после добавления.спирта оптическая плотность раствора не остается постоянной, & быстро изменяется.
Цель изобретения — сокращение времени определения декстрана и повыше« ние точности этого определения.
Поставленная цель достигается тей, - что согласно способу определения коицентрации декстрана в крови, включающему обработку цельной крови или ев плазмы химическим реагентом, пробу обрабатывают раствором тромбина определяют тромбиновое время и концентрацию декстрана определяют по форму ле (декстран) =а t+a„ t+a <, где t — тромбиновое.время, а,2та И а коэффициенты учитываю
25 2
2 1 щие природу декстрана.
Способ осуществляется следующим образом.
Центрифугируют или отстаивают содержащий декстран препарат крови, стабилизированной 3,8Ъ-ным раство998953
Коэффициенты для опр декстрана в кр
Пре
О, 146
0,234
Полиглюк ин
Реополиглюкин
-5,57
-10 15
53, 13
110 i 0
Таблица 2
Время забор проб крови
Полиглюкин 63
До введения .препарата
19,5+0,2
103+0,1
12,4+0,2
15,1+0,1 через 10 мин
2 ч
ll 34+1,03
6 28+1,5
2,47+0,6
11, 24
6,51
2,31
Реополиглюкин 10%
До введения препарата
:через 10 мин
2 ч
24 ч
21, 7+1 8
11,5+1,05
14,0+0,8
19 0+1 0
24, 22
13,76
1,62
24,9+0,2
l3 2+1,35
2,83+0,35
poN цитрата Мд в соотношении 9:l, .добавляют к 0,2 мл исследуемой плазмы 0,1 мл предварительно приготовленного раствора тромбина с активI остью 2,5 ед/мл в 0,9%-ном раствое NaCl. Определяют под влиянием 5 . ромбина время свертывания плазмы (тромбиновое время).
Вычисляют искомую концентрацию декстрана по формуле.
Конкретные значения. коэффициентов, $Q полученные на ЭВМ-М-6000 методом наименьших квадратов по 4 экспериментальным точкам, приведены в таб. 1. . Пример 1. Берут 0,2 мл плазмы, содержащей полиглюкин. Приливают
0,1 мл раствора тромбина. Определяют тромбиновое время по секундомеру.
Оно равно 15,i с. Вычисляют концентрацию полиглюкина в крови по формуле 1 полиглюкий)= 0,146t- 5,57t+53,13 Я3 или = 0,146i222288 01-5,57 >15,1+53,13=
"33,28-28-84,1+53,13 2,31, следова:тельно, концентрация декстрана в кро.ви равна 2,31 мг/мл.
- Д р и м е р 2. Берут 0,4 мл кро.ви, содержашей реополиглюкин.,Отстаивают ее. К 0,2 мл плазмы приливают
0 1 мл раствора тромбина. Определяют тромбиновое время {t) по секундомерУ.
Оно равно 15 с. Вычисляют концентра.цию реополиглюкина в крови по формуле реополиглюкин 0,234х-l0,15х+
+110 йли =0,234" 225-10,15 ° 15+110=
53-153+110=-10, следовательно, концентрация декстрана в крови равна
10 мг/мл.
Способ позволяет сократить время исследования до нескольких минут. Кроме того, способ менее трудоемок, так как отпадает необходимость второго центрифугирования и построение калибровочной кривой. Повышение точности способа обусловлено тем, что при выводе форму. ы используют усредненные значения концентрации декстрана в крови, измеренные ранее известным способом. В табл. 2 представлены результаты сопоставительного анализа определения концентрации препаратов декстрана, в крови после внутривенного введения B динамике IIQ предложенному и известному способам.
Т а б л и ц а 1 еделения концентрации ови
998953
Формула изобретения
Составитель A,Äîíöîâ
Редактор .С.Патрушева Техред А.Бабннец Корректор Е.Рошко
Заказ 1146/67 Тираж 871 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5 филиал ППП Патент, г. ужгород, ул. Проектная 4
Способ определения концентрации декстрана в крови, включающий обработку цельной крови или ее плазмы химическим реагентом, о т л н ч аю шийся тем, что, с целью повышения точности и сокращения времени исследования, пробу обрабатывают раствором тромбина; определяют тромбиновое время н концентрацию декстрана по формуле (декстран).=ат t+a„ t +ао где — тромбиновое время в секундаху а, а„и а — коэффициенты, учитывгпацие природу, дек .страна.
Источники информации, принятые во внимание прн экспертизе
Полушина Т.В., фром A A Q сро» ках циркуляции в крови и выведении полиглюкина с мочой.- Елиническая медицина,1959, В 3, с. 118-123.
2. Полушина Т.В.Синтетический кровезаменитель полиглюкин..Разработка метода получения и изучение химических, физико-химических и биологических свойств. Докторская диссертация.
15 М., 1968, (прототип).
