Способ получения производных глицерофосфолипидов

 

Изобретение касается получения производных глицеРОФОСФОЛИПИДОВ (ГФП), в частности соединений общей формулы Rj-C(0)-CHKM, где К (0)R3J М CH.jOP(0)0-OCH CHjN+ (R,)i, где R, Н или CHj; R 1 - прямой или Cj-C изоалкил, С ,j-C 514 злкенил (с одной или полиненасыщенными связями); CHjOCHj , СН з(СН -2.)i СНВг - СНВг - (СИ i)-, i Rj прямой Cjj-С ,7 алкил, мононенасыщенный С -С ,,,-алкенил, которые как активные вещества применяют в медицине. Цель изобретения - повьшение выхода ГФП и упрощение процесса. Синтез ГФП ведут ацилированием трифенилметильного производного 8п-глицеро-3-фосфолипида с помощью R2C(0)OH и кapбoнилдиliмиДaзoлa или ангидрида соответствующей кислоты. Затем проводят обработку полученного ацилпроизводного BF в смеси метанола и при , отщепление трифенилметильной группы, адилирование ангидридом R з кислоты в присутствии , N,Ы-диметилиламинопир1здина. В случае, когда получают соединение с трифенилметильной группой, последнюю отщепляют обработкой CFjCOOH при 0°С. Способ позволяет получать чистые промежуточные продукты с высокими выходами (82% и выше ) и лучшим выходом целевого ГФП

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН (51)4 С 07 F 9 10

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

H ПАТЕНТУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

IlO ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21 ) 3896546/23-04 (22) 14. 05. 85 (31) А 1590/84 (32) 15. 05, 84 (33) AT (46) 30.05.88. Бюл. Р 20 (71) Хеми Линц АГ (АТ) (72) Фридрих Пальтауф и Альбин

Херметтер (AT) (53) 547.953.2.07 (088.8) (56) Н.Eibl Phospholipide als funvtionelle Hausteine biologischer ИешЬranen". — Angewanolte Chemic, 1984, 96 Р 4, 247-314; (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ

ГЛИЦЕ РОФО СФОЛИШЩОВ (57) Изобретение касается получения производных глицерофосфолипидов (ГФП), в частности соединений общей формулы RI-С(О)-СНКМ, где K = СН -О-C(0)R3, M СН ОР(0)0-0CHICHIN+ (R,) g, где

К1 = Н или Сн), К, — прямой или С;С24изОалкил С )I С 4 алкенил (с ОднОЙ или полиненасыщенными связями);

СН ОСН, CH (СН z) z CHBr — CHBr — (СН gz,.

R> прямои С -С „ -алкил, мононенасыщенный С „-С, -алкенил, которые как активные вещества применяют в медицине, Цель изобретения — повышение выхода ГФП и упрощение процесса.

Синтез ГФП ведут ацилированием трифенилметильного производного Sn-глицеро-3-фосфолипида с помощью

К С(О)ОН и карбонилдиимидазола или ангидрида соответствующей кислоты.

Затем проводят обработку полученного ацилпроизводного ВГ в смеси метанола и СН С1 при 0 С, отщепление трифенилметильной группы, ацилирование ангидридом R — кислоты в присутствии, N, N-диметилиламинопиридина. В случае, когда получают соединение с трифенилметильной группой, последнюю отщепляют обработкой

CF> C00H при 0 С. Способ позволяет получать чистые промежуточные продукты с высокими выходами (82% и выше) и лучшим выходом целевого ГФП (83 против 48,76%) из доступных исходных производных глицерофосфолипида.

1400511

Изобретение относится к усовершенствованному способу получения производных глицерофосфолипидов,которые находят применение в медицинской промьппленности.

Цель изобретения — упрощение процесса, повьппение выхода.

H p и м е р 1. А), 1-О-Трифенилметил-2-олеил-Sn-глицеро-3-фосфо10 холин °

i,26 r олеиновой кислоты вводят во взаимодействие с 0,794 r карбонилднимидазола в 25 мл тетрагидрофурана в течение 45 мин при комнатной температуре, затем удаляют растворитель в вакууме. После этого остаток, который содержит образовавшийся имидазолид жирной кислоты, смешивают с раст-20 вором 1,1 г неочищенного продукта

1-О-трифенилметил-Sn-глицеро-3-фосфохолина (согласно примеру 1) в 28 мл диметилсульфоксида. После добавки катализатора, который получают раст- 25 ворением 148 мг металлического натрия в 11,5 мл диметилсульфоксида, реакционную смесь отстаивают, периодически встряхивая, в течение

20 мин при 20 С. Наконец, добавляют 30 в смесь 64 мл 0,1 н. водной уксусной .— кислоты, дважды экстрагируют смесью хлороформа с метанолом 2:1 (по объему) и дважды промывают объединенные органические фазы смесью метанола с водой 1:1 (по объему). После выпаривания растворителя в вакууме неочищенный продукт растворяют в хлороформе и наносят на колонку с силикагелем. Чистое соединение (1,1 r) элюируется хлороформ-метанольными градиентами, тонкослойная хроматография на силикагеле (растворитель— хлороформ : метанол : 25X-ный ЫН в соотношении 65:35:5 по объемам) показывает единое пятно, Rl=0,4.

Б). 2-Олеоил-Sn-глицеро-3-фосфохолин.

Раствор 500 мг 1-О-трифенилметил-2-олеоил"Sn-глицеро-3-фосфохолина в 30 мл метиленхлорида смешивают с 0,5 мл 20 -ного раствора трифторида бора в метаноле и после этого перемешивают в течение 30 мин при

0 С . Затем добавляют 15 мл метанола в 9 мл воды, встряхивают и отделяют органическую фазу. Растворитель удаляют путем отгонки в высоком вакууме при комнатной температуре.

В). i-Пальмитоил-2-олеоил-Sn-глицеро-3-фосфохолин.

Остаток, который содержит полученный 2-олеоил-Sn-глицеро-3-фосфохолин, растворяют в 30 мл безводного хлороформа. Затем в этот раствор добавляют 820 мг пальмитинового ангидрида и 200 мг диметиламинопиридина.

Реакционную смесь перемешивают в течение 6 ч при 20 С. После этого добавляют 15 мл метанола и встряхивают сначала с 0,1 í. HCl, а затем с НпО.

После удаления органического растворителя в вакууме вещество очищают путем хроматографии на силикагеле с помощью хлороформ-метанольных градиентов. Очищенное соединение (400 мг—

80,4 теории) при тонкослойной хроматографии на силикагеле (растворитель — хлороформ : метанол : 25X-ный

NH q в соотношении 65:35:5 по объемам) дает епиное пятно. Rg=0,4.

Злементный анализ С Н МО Р (760.0,91).

Рассчитано: С 66,37; Н 10,84;

N 1,84; Р 4,08.

Найдено: С 66,1, Н 11 1;

N1,9; Р 4,0.

SIMP: 0,9 (6Н, СН ); 1,3 (СН z), 1,6-2,3 (альфа- и бета-CHz), 3, t6 (9Н, К, N-СН ), 3,3-4,4 (8Н, CHz, глицерол, холин), 5,1 (1H, СН-глицерол), 5,34 (2Н, олефин).

Пример 2. 1-Стеароил-2-олеоил-Sn-глицеро-3-фосфохолин.

Раствор 2-олеоил-Sn-глицеро-3-фосфохолина (получен из 700 мг 1-О-трифенилметил-2-олеоил-Sn-глицеро-3-фосфохолйна согласно примеру 1, стадии

А и Б) вводят во взаимодействие с

1,2 г ангидрида стеариновой кислоты по указанной в примере 1 (стадия В) методике работы, хроматографически очищают и анализируют. Получают 550 мг (выход 76% в расчете на 1-0-трифенилметил-Sn-глицеро-3-фосфохолин) 1-стеароил-2-олеоил-Sn-глицеро-3-фосфохолина., который в тонкослойной хроматограмме на силикагеле (растворитель — хлороформ : метанол : 25 -ный водный раствор NH3 в соотношении

65. 35:5 по объемам) показывает единое пятно, Rg=0,4.

Рассчитано: С 67,05; Н 11,00;

N 1,78; Р 3,93.

С 14 H 86N08P

Найдено . С 66, 90; Н 11, 20, N i,70; Р 3,80.

1400511

ЯМР: 0,9 (6Н, СН 3) 9 1,3 (СН.7), 1, 6-2, 3 (альфа- и бета-СН ), 3, 15 (9Н, d, N-СН g) 9 3,3-4,4 (8Н, глицерол, холин), 5, 1 (1Н, СН-глицерол), 5,35 (2Н, олефин).

Пример 3. А). 1-О-Трифенилметил-2-линолеоил-Sn-глицеро-3-фосфохолин

60 мг 1-О-трифенилметил-Бп-глице- 10 ро-3-фосфохолина ацилируют с помощью линолеоилимидазолида, который получен из 690 мг линолевой кислоты и

440 мг карбонилдиимидазола по указанной в примере 1 (стадия А) методике.

После хроматографии под средним (умеренным) давлением на силикагеле чистое соединение (690 мг, выход — 75 от теории) в тонкослойной хроматограмме на силикагеле показывает еди- 20 ное пятно, 2 =093 (растворитель— хлороформ :,метанол : 25X-ный водный раствор NH в соотношении 65:35:5 (по объемам).

Б). 2-Линолеоил-Sn-глицеро-3-фос- 25 фохолин.

Раствор 1 г 1-О-трифенилметил-2-линолеоил-Sn-глицеро-3-фосфохолина в 60 мл метиленхлорида для отщепления 1-О-трифенилметильного остатка, как указано в примере 1 (стадия Б), обрабатывают 20 -ным раствором трифторида бора в метаноле °

В) . 1-Стеароил-2-линолеоил-$й-глицеро-3-фосфохолин. 35

Полученный (стадия Б) 2-линолеоил-Sn-глицеро-3-фосфохолин вводят во взаимодействие с 1,6 г ангидрида стеариновой кислоты по указанной в примере 1 (стадия В) методике и хромато40 графически очищают. Получают 820 мг . (выход 8ОХ в расчете на 1-О-трифенилметил 2-линолеоил-Sn-глицеро-3-фосфо.холин) чистого продукта, который в

45 тонкослойной хроматограмме на силикагеле (растворитель — хлороформ:метанол : 25 -ный водный раствор аммиака в соотношении 65:35:5 по объемам) показывает одно пятно; R рО 7.

Рассчитано: С 679239 Н 10977, N 1,78, P 3,94.

С,Н NO P (786, 131)

Найдено: С 66,80; Н 10,70, N 1,90; Р 4,0.

ЯМР: 0,9 (6Н, СН ) 9 1,3 (СН ) 9 55

1,6-2,3 (альфа- и бета-СН )9 2,75 (12Н = С вЂ” СН вЂ” С =), 3, 16 (19Н, N-СН ) 9 3,3-4,4(8Н, СН19 глицерол, холин), 5, 1 (1Н, СН, CH-глицерол), 5,35 (14Н, олефин) .

Пример 4. А) . 1-0-Трифенилметил-2-аце тил-Яп — глицеро-3-фосфохоIHH .

320 мг 1-О-трифенилметил-Sn-глицеро-3-фосфохолина вводят во взаимодействие с 0,7 мг ацетангидрида в 4 мл безводного пиридина в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь выливают затем в ледяную воду, дважды экстрагируют смесью хлороформа с метанолом (2: 1 по объеМу). Объединенные органические фазы дважды промывают смесью хлороформа с метанолом и водой (3:48:47 по объемам), сушат над бикарбонатом натрия и выпаривают. Неочищенный продукт очищают с помощью хроматографии под умеренным (средним) давлением на силикагеле с помощью хлороформ-метанольных градиентов. Чистый. продукт (180 мг, выход 5 1X) в тонкослойной хроматограмме на силикагеле (растворитель — хлороформ : метанол : 25Xный водный раствор аммиака в соотношении 65:35:5 по объемам) показывает единое пятно; R =096.

ЯИР- Н спектр, d м.д. (CDC13-CD OD

2: 1 по объему): 2, 13 (Н С вЂ” СО, синглет, ЗН), 3,16 (H С-N, синглет, 9Н), 3,3-4,4 (глицерол и холин — СН ) 9

5,23 (глицерол — С-Н, i,Н), 7,33 (ароматические, 15Н).

Б). 2-Ацетил-Sn-глицеро-3-фосфохолин.

В). 1-Пальмитоил-2-ацетил-Sn-глицеро-З-фосфохолин.

От 1-О-трифенил-метил-2-ацетил-Sn-глицеро-3-фосфохолина по указанной в примере 1 (стадия Б) методике отщепляют 1-О-трифенилметильную группу и вводят образовавшийся 2-ацетил-Sn-глицеро-3-фосфохолин во взаимодействие с ангидридом пальмитиновой кислоты по указанной в примере 1 (стадия В) методике с получением

1-пальмитоил-2-ацетил-Sn-глицеро-3-фосфохолина.

Пример 5. А). 1-О-Трифенилметил-2-метоксиацетил-Sn-глицеро-3фосфохолин

316 мг 1-О-трифенилметил-Sn-глицеро-3-фосфохолина вводят во взаимо-. действие с метоксиацетилимидазолидом, который получен из 90 мг метоксиуксусной кислоты и 178 мг карбонилди-:. имидазола по указанной в примере 1

5 y qqr (стадия А) методике, и обрабатывают, Получают 250 мг (выход 69%) чистого

1-0- т рифе н илме тил-2-ме то к си аце тил-Sn-глицеро-3-фосфохолина, который в. тонкослойной хроматограмме (растноритель — хлороформ : метанол.:

25%-ный водный раствор аммиака в соотношении 65:35:5 по объемам) показывает, единое пятно, R = 0,25.

Б). 2-Иетоксиацетил-Sn-глицеро-З-фосфохолин.

В). 1-Стеароил-2-метоксиацетил— Sп-глицеро-3-фосфохолин.

От 1-0-трифенилметил-2-метокси15

,ацетил-Sn-глицеро-3-фосфохолина по, указанной в примере 1 (стадия Б) меlтодике отщепляют 1-О-трифенилметиль1

,ную группу, образовавшийся при этом

2 — ме то ксиаце тил-Sn-глицеро-3-фо сфо20 холин вводят, как в примере 2, во взаимодействие с ангидридом стеариновой кислоты с получением 1-стеароил-2-метоксиацетил-Sn-глицеро-3-фосфохолина и хроматографически очищают. 25

Выход 1бб мг (64% от теории); R =

0,35 (растворитель — согласно при:меру 1).

Рассчитано: С 58,47; Н 9,80, N 2 35, Р 5 20.

С ggHggN0gP (595, 750)

Найдено„С.58,10; Н 10,00, И 2,40; Р 5,10.

ЯМР: 0,9 (3Н, СН,), 1,3 (С,), 1,6-2,3 (альфа- и бета-СН ), 3,16 (9H, д, N-СН э) 3,52, (ЗН, д СН О), 3, 3-4, 4 (8Н, СН глицерол, холин), 5, 1 (1H, СН-глицерол), 5,25 (ZH, I, О-СН, -О) .

II р и м е р 6. А) . 1-0-Трифенилметил-2- (2 -этилгексаноил) -Sn-глицеро-3-фосфохолин.

Раствор 250 мг 1-О-трифенилметил-Sn-глицеро-3-фосфохолина вводят во

45 взаимодействие с 2-этилгексаноилимидазолидом, который получен из 144 мг

2-этилгексановой кислоты и 178 мг карбонилдиимидазола по указанному в примере 1 (стадия А) способу и об5О рабатывают. Получают 200 мг (выход

69%) чистого 1-0-трифенилметил-2- (2 —

-этилгексаноил)-Sn-глицеро-3-фосфохолина, который в тонкослойной хроматограмме (растворитель — хлороформ: метанол: 25%-ный водный ра55 створ аммиака в соотношении 65:35:5 по объемам) показывает единое пятно, Rg=0,24, 1 6

Б). 2-(2-Этилгексаноил)-Sn-глицеро-З-фосфохолин.

В). 1.0леоил-2-(2 -этилгексаноил)-Sn-глицеро-3-фосфохолин.

От 1-О-трифенилметил-2-(2 -этилгексаноил)-Sn-глицеро-3-фосфохолина по указанному в примере 5 (стадия Б) способу отщепляют 1-О-трифенилметильную группу, образовавшийся при этом

2-(2 -этилгексаноил)-Sn-глицеро-3-фосфохолин вводят, как в примере 1 (стадия В), во взаимодействие с ангидридом олеиновой кислоты с получением 1-олеоил-2-(2 -этилгексаноил)-Sn-глицеро-3-фосфохолина и хроматографически очищают, выход 177 мг

{82% теории); R =0,4 {растворитель— согласно примеру 1).

Рассчитано: С 63,03; Н 10,27;

N 2,16; Р 4,78.

С Нд ИО P (647, 876)

Найдено: С 62,90; Н 10,40, N 2,00; P 4,80.

5HIP: 0,9 (9H, CH ), 1,3 (СН,}, 1,6-2,5 (альфа- или бета-СН ), 3,16 (9Н, д, N СНз, 3,3-4,4 (8Н, СН, глицерол, холин), 5, 11 (1Н, СН-глицерол), 5,34 (2Н, олефин).

Пример 7. А). 1-О-7рифенилметил-2-(1 — 1 С)-додеканоил-Sn-глицеро-3-фосфохолин.

100 мг (1 — C)-додекановой кислоты, 1 P Ci (ммоль) и 90 мг карбонилдиимидазола вводят во взаимоДействие в течение 45 мин в 30 мл безводного тетрагидрофурана при 20 С. Раствор полученного ацилимидазолида добавляют к 127 мг 1-О-трифенилметил-Sn-глицеро-3-фосфохолина. После удаления растворителя в вакууме остаток растворяют в 1 мл диметилсульфоксида и осуществляют реакцию путем добавки каталитически действующего кислотосвязующего средства, которое получают растворением 23 г металлического натрия в 18 мл диметилсульфоксида. Реакционную смесь, периодически встряхивая, выдерживают в течение 10 мин при

20 С, после этого нейтрализуют путем добавления 10 мл водной уксусной кислоты. Затеи экстрагируют дважды по

15 мл смесью хлороформа с метанолом (2:1 по объему). Объединенные органические фазы промывают последовательно по 6 мл раствором хлороформ метано ч : водный NH (3:48:4? по объемам) и.хлороформом с метанолом и

1400 водой (3:48:47 по объемам). 11осле удаления растворителя в вакууме и выпаривания в присутствии бензола получают неочищенный продукт, который путем хроматографии под средним (умеренным) давлением на силикагеле очищают с помощью хлороформ-метанольных градиентов, при этом элюируется 110 мг чистого вещества (выход

82 ) при соотношении хлороформ : метанол 6:4 (по объему).

Чистое вещество в тонкослойной хроматограмме на силикагеле (растворитель — хлороформ с метанолом и 25 .—

15 ным водным раствором аммиака в соотношении 65:35:5 по объемам) показывает единое пятно; R = 0,25. Радиоактивность составляет 1 p Ci (ммоль).

ЯИР-"Н-спектр: d ì.ä. (CDClg

CD 0D 2:1 по объему), 0,90 (ацил-CH>, 3H, 1,26 (СНе, синглет, 16H), 1,66 (H>0-0-С0, мулътиплет, 2H), 3,16 (Н С вЂ” N, синглет, 9Н), 3,3-4,4 (глицерол и холин-СН ), 8Н), 5,23 (глицерол-СН, мультиплет, 1Н), 7,33 (проматически, 15Н).

Б). 2-(1 — "C)-Додеканоил-Яп-глицеро-3-фосфохолин.

В). 1-Олеиол-2-(1 - C)-додекано30 ил-$п-глицеро-З-фосфохолин.

От 1-О-трифенилметил-2-3 (1 — (С)-додеканоил-Sn-глицерол-3-фосфохолина

;по указанному в примере 1. (стадия Б) .способу отщепляют 1-О-трифенилметиль- ную группу, образующийся при этом

2-(1 - 4С)-додеканойл-Sn-глицеро-3-фосфохолин, как и в примере 1 (стадия В), вводят во взаимодействие с ангидридом олеиновой кислоты с получением 1-олеоил-2-(1 — С)-додекано14 40

mx-Sn-глицеро-3-фосфохолина и хрома. тографически очищают. Выход 102 мг (89 уеории) R<=0,4 (растворитель— согласно примеру 1) .

C H Ng 11 р (703, 983) — Радиоак тивно маркированный материал.

5KP: 0,9 (6Н, СН g, 1,3 (СН ),1,62,3 (альфа- и бета-СН,), 3, 16 (9Н, d, N-СН ), 3,3-4,4 (8Н, СН 9, глицерол, холин), 5,1 (1Н, СН-глицерол), 5,34 (2Н, олефин).

Пример 8. А). 1-О-Трифенилметил-2-(9,10-дибромстеароил)-Sn-глицеро-3-фосфохолин.

300 мг 1-0-трифенилметил-Sn-глицеро-3-фосфохолина по указанному в примере 4 (стадия А) способу вводят во взаимодействие с 1,3 г ангидрида

511 8

9,10-дибромстеариновой кислоты в при-. сутствии 300 мг 4 †-N †диметиламинопиридина в 20 мл хлороформа в течение

5 ч при 20 С и обрабатывают. Полу— чают 460 мг (выход 82% )чистого 1-0-трифенилметил-2(9, 10 -дибромстеароил-Sn-глицеро-3-фосфохолина, который в тонкослойной хроматографии (растворитель — хлороформ : метанол

25 .-ный водный аммиак в соотнон ении 65:35:5 по объемам) показывает единое пятно; К =09 3.

Б). 2-(9,10 -Дибромстеароил)-Sn-rxHijepo-3-фосфохолин.

В). 1-Стеароил — 2-(9,10 -дибромстеароил)-Sn-глицеро-З-фосфохолин.

От 1-О-трифенилметил-2-(9,1Π—

-дибромстеароил)-Sn-глицеро-3-фосфохолина по указанному в примере 1 (стадия Б) способу отщепляют 1-О-трифенилметильную группу, образовавшийся при этом 2-(9., 10 -дибромстеароил)-Sn-глицеро-3-фосфохолин, как указано в примере 2, вводят во взаимодействие с ангидридом стеариновой кислоты с получением 1-стеароил-2-(9,10 -дибромстеароил)-Sn-глицеро"3-фосфохолина и хроматографически очищают. Выход 353 мг (?5 от теории);

R<=0,4 (растворитель — по примеру 1) °

Рассчитано: С 55,75; Н 9,14;

Br 16,86; N 1,48; P 3,27, с 2н >(,BrP (947; 969).

Найдено: С 55,50, Н 9,20;

Br 17,10; N 1,30; P 3,10. я11р: 0,9 (6Н, СН3), 1,3 (СН ), 1,6-2,3 (альфа- и бета-СН ), 3, 6 (9H, N-CH g), 3,3-4, 4 (8Н, СН g, глицерол, холин), 5,1 (ЗН, СН-глицерол, СН-Br) .

Пример 9. A). 1-0-Трифенилметил-2-арахидоноил-Sn-глицеро-3-фосфохолин.

550 мг 1-0-трифенилметил-Яп-глицеро-3-фосфохолина (согласно примеру 1) указанным в примере 8 способом вводят во взаимодействие с t 50 г ангидрида арахидоновой кислоты в атмосфере аргона, после добавки 15 мл метанола промывают с помощью 9 мл смеси хлороформ : метанол : вода (3:48:47 по объемам),-нижнюю фазу выпаривают в вакууме, доводят досуха и очищают путем хроматографии под средним (умеренным) давлением.

Получают 750 мг (выход 80 .) чистого 1-О-трифенилметил-2-арахидоноил-Sn-глицеро-3-фосфохолина, который

9 1ч005 в тонкослойной хроматограмме (растворитель — хлороформ : метанол : 25%.— ный водный аммиак в соотношении 65:

:35:5 по объемам) показывает единое пятно; R =0Ä3.

Б). 2-Лрахидоноил-Бп-глицеро-3-фосфохолин.

В). 1. Стеароил-2-арахидоноил-Бп-глицеро-3-фосфохолин.

От 1-О-трифенилметил-2-арахидоноич-Sn-глицеро-3-фосфохолина указанным в примере 1 (стадия Б) способом отщепляют 1-О-трифенилметильную групйу „образовавшийся при этом 2-арахидоноил-Sn-глицеро-3-фосфохолин, как и в примере 2, вводят во взаимоействие с ангидридом стеариновой

IKHc JIo TI1 Полученный 1-стероил-2-ара идоноил-Бп-глицеро-3-фосфохолин

1роматографически очищают. Выход

633 мг (82% от теории); Rg=0,38 (ра." створитель - по. примеру 1).

Рассчитано: С 69,85, Н 11,32;

И 1,61; Р 355.

С,13 N0 P (872, 311)

Найдейо: С 68,60; Н 11,50, и 1,50; Р З,ЗО.

Я11Р: 0,9 (6Н, СНз) 1,3 (СН ),,6-2,3 (альфа- и бета-СН ), 2,8 30

611, = С-CH -С =), 3, 1 6 (911, Б

-СН ), 3,3-4,4 (8Н, СН г, глицеРол, еголин), 5,1 (1Н, СН-глицеРол), 5,35 (8Н, олефин).

Пример 10. A). i-О-Трифе- 35 нилметил-2-тетракозаноил-Sn-глицеро-З-фосфохолин.

316 мг 1-О-трифенилметил-Бп-гли=1еро-3-фосфохолина указанным в примере 1 (стадия А) способом вводят во .40 взаимодействие с тетракозаноилимидазодидом, который получен из 1,7 r тетракозановой кислоты и 356 мг карбонилимидазола, и обрабатывают. Получа-; ют 850 мг (выход 62%) чистого 1-0- 45

-трифенилметил-2-тетракозаноил-Бп— глицеро-3-фосфохолина, который в тонкослойной хроматограмме (растворитель — раствор хлороформа с метанолом и 25%-ным водным аммиаком, взя- 50 тых в соотношении 65:35:5 по обьемам) показывает единое пятно;К =0,3.

Б). 2-Тетракозаноил-Sn-глицеро-З-фосфохолин.

В). 1-Олеоил-2-тетракозаноил-Sn-глицеро-3-фосфохолин.

От 1-0-трифенилметил-2-тетракозаноил-Sn-глицеро-3-фосфохолина указанным в примере 1 (стадия Б) спосо11 0 бом отщепляют 1-О-трифенилметильную группу, образовавшийся при этом 2-тетракозаноил-Sn-глицеро-3-фо сфохолин, как и в примере 1 (стадия В), вводят во взаимодействие с ангидридом олеиновой кислоты с получением

1-олеоил-2-тетракозаноил-Sn-глицеро-3-фосфохолина и хроматографически очищают. Выход 610 мг (70% теории), R =0,42 (растворитель - по примеру 1).

Рассчитано: С 68,85, Н 11,32, N 1,61; P 3,55.

С5О Нр М08Р (872 ь 311)

Найдено; С 68,70; Н 11 40, N 1,70; P 3,70.

ЯМР:. Оь9 (6H СН з) > 1, 3 (СН,,), 1,3 (СН ), 1,6-2,3 (альфа- и бетаСН ), 3,16 (9Н, S> М-СНЗ), 3,3-4,4 (8Н, глицерол, холин), 5,1 (CH-глицерол), 5,36 (2Н, олефин) .

Пример 11. А). 1-О-Трифенилме тил-2-оле сил- S n-глице ро-3-фо сфо- (N- трифе нил-ме тил) -э таноламин.

386 мг олеиновой кислоты и 255 мг карбонилдиимидазола в 10 мл тетрагидрофурана перемешивают в течение

45 мин при комнатной температуре в отсутствие влаги. После введения

480 мг 1-0-трифенилметил-Sn-глицеро-3-фосфо-(N-трифенилметил)-этаноламина в раствор олеоилимидазолида добавляют 3,1 мл раствора 41 мг металлического натрия в диметилсульфоксиде.

Оставляют реагировать в течение 20 мин при комнатной температуре и нейтрализуют затем 17,8 мл 0,1 н. водной уксусной кислотой, Помещают в ледяную воду, трижды экстрагируют диэтиловым эфиром, объединенные органические фазы дважды промывают водой, сушат над Na SO< затем удаляют растворитель в вакууме, После очистки путем хроматографии на силикагеле с помощью градиентов петролейный эфир — хлороформ получают 633 мг чистого целевого соединения. Тонкослойная хроматография продукта на силикагеле (растворитель — хлороформ : метанол в соотношении 9: 1 по объему) показывает единое пятно; R3=0.6..

ЯМР- Н-спектр: с"м.д. (CDCI ):

0,88 (-CH з), 1,26 (-CH -), i 8-2,3 (-СН,-СН, -С=С-, -СН; СН,-С=О), 3, i4,3 (глицерол и этаноламин С-Н), 5,1 (глицерол-С -С-Н, олеоил НС1СН), 7,25 (трифениуметил, С-Н).

Б). 2- Олеоил-Sn-глицеро-3-фосфо"(N-трифенилметил)-этаноламин.

l 00э l l

Раствор 406 мг 1-О-трифенилметил—

-2-олео ил-Sn- глице ро-3-фо сфо- (N-трифенилметил)-этаноламина в смеси из

30 мл метиленхлорида и 1 мл 20 -ного

5 раствора трифторида бора в метаноле перемешивают в течение 30 мин при

0 С. Затем добавляют 30 мл метиленхлорида, трижды промывают водой и высушивают органическую фазу над

Na

В). 1-Пальмитоил-2-олеоил-Sn-глицеро-3-фосфо-(N-трифенилметил)-этаноламин.

К раствору полученного 2-олеоил— Sп-глицеро-3-фосфо-(N-трифенилметил)—

-этаноламина добавляют 1,3 r ангидрида пальмитиновой кислоты и 230 мг диметиламинопиридина. Реакционную смесь перемешивают в течение 6 ч при 20 С, 2р

Затем растворитель удаляют в вакууме.

После хроматографии остатка на силикагеле с помощью градиентов петролейный эфир — хлороформ получают

361 мг чистого ацилированного про- 25 дукта. Соединение при тонкослойной хроматографии на силикагеле (растворитель — хлороформ : метанол в соотношении 9: 1 по объему) показывает единое пятно; R =0,6. 30

ЯМР--"Н-спектр: д м.д. (CDC13),0,88 (-СН 3), 1,22 (-СН -), 1,55 (-СН-Ч-СО), 1,8-2,3 (-СН g-СН -C=, СН g-C=O), 3, 1. 4,3 (гпицерол и этаноламин С-H), 5,1 (глицерол=С-Н олеоил-CH=CH) 7 25

У Э У

35 (трифенилметил С-Н).

Г). 1.Пальмитоил-2-олеоил-Sn-глицеро-3-фосфоэтаноламин.

Раствор 190 мг 1-пальмитоил-2-оле-

40 о ил- S n-3- глице ро- (N- трифе нилме тил)—

-этаноламина в 12 мл смеси из 6 мл

-метиленхлорида и 6 мл трифторуксусной кислоты в отсутствие влаги оставляют стоять в течение 5 мин при О С, после

45 чего нейтрализуют с помощью 23 мл 6%- . ного водного раствора аммиака. Водную фазу отделяют и экстрагируют смесью хлороформа с метанолом (2:1 ,по объему). Объединенные органические фазы промывают водой. После удаления растворителя в вакууме неочищенный продукт очищают путем хроматографии на силикагеле с помощью градиентов хлороформ — метанол. Соединение в случае тонкослойной хроматографии на силикагеле (растворительхлороформ : метанол : 25 -ный раствор аммиака в соотношении 50:25:6 по объемам) показывает единое пятно, R =0,5. Выход 127 мг (83 . теории) .

Рассчитано: С 65,24, Н l 0, 67, N 1,95; P 431.

С, Н q NO(P (718, 011)

Найдено: С 65, 00, Н 10, 80;

N2,00,, P 4,20.

ЯМР: 0,9 (6Н, CH ), 1,3 (СН ), 1,6-2,3 (альфа- и бета-СН ), 3, l 3 (8H, СН, глицерол, этаноламин), 5,1 (1Н, СН-глицерол), 5, 38 (2Н, олефин? .

Пример 12. А?. 1-0-Трифенилметил-2-линолеоил-Sn — глицеро-3-фосфо-(N-трифенилметил?--этаноламин.

464 мг линолевой кислоты и 365 мг карбонилдиимидазола в 15 мл тетрагидрофурана вводят во взаимодействие в течение 45 мин при 20 С. Раствор образовавшегося ацилимидазолина добавляют к 530 мг 1-0-трифенилметил-Sn— глицеро-3-фосфо †(N-трифенилметил)—

-этаноламина. После удаления растворителя в вакууме остаток растворяют в 15 мл диметилсульфоксида, реакцию вызывают, добавляя каталитически действующее связывающее кислоту средство, которое получают путем растворения 49 мг металлического натрия в

3,7 мл диметилсульфоксида. Реакционную смесь, периодически встряхивая, выдерживают в течение 20 мин при 20 С, нейтрализуют с помощью 10,4 мл водного О, 1 н. раствора уксусной кислоты.

Затем экстрагируют дважды по 20 мл смесью хлороформа с метанолом (2: 1 по объему). Объединенные органические фазы последовательно промывают (по 8 мл) смесью хлороформ : метанол : водный NH в соотношении

3:48:47 по объемам и хлороформ с метанолом и водой, взятые в соотношении 3:48:47 по объемам. После удаления растворителя в вакууме и выпаривания в присутствии бензола получают неочищенный продукт, который после очистки путем хроматографии под средним (умеренным) давлением на силикагеле с помощью градиентов хлороформ — метанол дает 670 мг (выход.

92 ) чистого соединения. Чистое соединение в тонкослойной хроматограмме на силикагеле (растворитель — метанол : хлороформ в соотношении 8:3 по объему) показывает единое пятно, R -.0,61.

Б) . 2-Линолеоил-Sn-глицеро-3-фосфо-(N-трифеншметил)-этаноламин.

; «действие с 1,5 r ангидрида алеиновой кислоты с получением 340 мг

1-олеоил-2-стеараил-Sn-глицера-3-фосфо-(N-трифенилметил) — этаноламина, Детритилирование по примеру 5 (стадия Г) дает 250 мг 1-олеоил-2-стеароил-Sn-глицеро-3-фосфоэтаноламина, из которога путем хроматографии на силикагеле с помощью градиентов хлороформ — метанол получают 140 мг (56,47 теории) чистого продукта, показывающего в тонкослойной хроматограмме (растворитель — хлороформ : метанол : 25 -ный водный ðàствор аммиака в соотношении 50:25:6 по обьемам) единое пятно, R =0,5.

Рассчитано: С 66,01, Н 10,81;

N 18,8; P 4,15.

20 С 41Н доИО Р (746, 061)

Найдено: С 65,90; Н 11 00

N 1,70; Р 4,00.

ЯМР: О 9 (6Н, CH ) 1 3 (CHг), i„G-2,3 (альфа- и бета-СНг), 2,08

25 (ЗН, S, СН О), 3, 1-4,3 (8Н, СН, глицерол, этанол-силин); 5, I (IH, СН- . глицерал).

Пример 14. А). 1-О-Трифенилметил-2-.ацетил-Sn-глицеро-3-фосфо30 †(N-трифенилметил)-этаноламин.

300 мг 1-О-трифенилметил-Sn-глицеро-3-фосфо-(N-трифенилметил)-этаноламина вводят во взаимодействие с 500 мг ацетангидрида в 5 мл безводного пириЗБ дина в течение 20 ч при 20 С, затем выливают в 50 мл ледяной воды и дважды экстрагируют смесью хлороформа с метанолом 2: 1 (па объему) . Объединенные органические фазы дважды промывают смесью хлороформа с метанолом и водой, взятых в соотношении 3:48:47 (па объемам), сушат над бикарбонатом натрия и доводят досуха в вакууме.

Остаточный пиридин удаляют путем выпаривания в присутствии талуола. Не45 очищенный продукт очищают путем хроматографии под средним (умеренным) давлением на силикагеле с помощью градиентов хлороформ — метанол. По50 лученнае чистое вещество (128 мг, выход 40 ) на тонкослайнай хроматограмме на силикагеле (растворитель— хлороформ: метанол в соотношении

8:? по объему) показывает единое пятно;, R =O 50.

ЯМР- Н-спектр: d м.д. (CDC11

CD 0D 2: 1 по объему), 2, 0 (Н С-С-СО, синглет, ЗН), 2,8-4,2 (глицерол и холин-СН ), 5,16 (глицерол-СН„мульl-4005 I i

Из 435 мг 1-О-трифенилметил-Sn— глице ро- 3-фа сфо- (N- т рифе нилме тил)—

-этаноламина согласно указанному в примере 11 (стадия Б) способу отщепляют 1-0-трифенилметильную группу с 0,5 мл 20 -ного раствора трифторида бора в метаноле.

В). 1-Олеоил-2-линолеоил-Sn-глицера-3-фосфо-(N-трифенилиетил)-этаноламин.

Г). 1-Олеоил-2-линолеоил-Sn-глицеро-3 фосфоэтаноламин.

2-Линолеаил-Sn-глицеро-3-фосфо- (N-трифенилметил)-этаноламин анало-.)чна способу, изложенному в приме;.I. 11 (стадия В), путем вэаимодейс .вия с ангидридом олеинавай кислоты я цилируется до 1-олеоил-2-динолеоил†n-глицеро-3-фосфо-(N-трифенилмет л)-этаналамина и от него аналогичи способу, указанному в примере 11 (стадия Д), отщепляют И-трифенилметильную группу. Выход 265 мг (79 теории), R<=0,5 (растворитель — по

:..pим. ру

Рассчитана." С 66,37; H 10,52, И 1,89; Р 4„. 17.

С q, Н 7(NO P (742, 041)

Найдено: С 66,30; Н 10,50;

Ni 1,70, Р 4,00.

ЯМР: 0,9 (6Н, ОН >), 1,3 (СН z), 1 6-2,3 (альфа- и бета-СН <), 2, 74 (2H=C-CH,-C=), 3, 1-4, 3 (8Н, CH „ глицерол, этаноламин), 5,1 (1Н, СН-йицерол)» 5,.36 (6Н, олефин).

П р и и е р 13. А), 1-О-Трифенил..тил-2-стеароил-Sn-глицеро-3-фосфо-- Ы-трифенилметил)-этаноламин.

Получают аналогично примеру 12 (.тадия А), путем взаимодействия

3 0 мг 1-0-трифенилметил-Бп-глицеро-3-фосфо-(N-трифенилметил)этаноламина с 350 мг стеароилимидазолида.

Б). 2-Стеароил-Sn-глицера-3-фосфовЂ(N-трифенилметил)-этаноламин получают путем отщепления 1-0-трифенилметильной группы от полученного на стадии Л продукта указанным в примере 11 (стадия Б) способом.

В). 1-.0леоил-2-стеароил-Sn-глице:;а-3-фосфо-(N-трифенилметил)-этанольмин.

Г). 1-Олеоил-2-стеароил-Sn-глицера-З-фосфоэтаноламин.

Полученный на стадии Б 2-стеароил-8n- глицеро-.3-фосфо-(N-трифенилметилэ таноламин аналогично способу по примеру 11 (стадия В) вводят во вза1400511

15 типлет, 1Н), 7,23 (ароматичес»,не, ЗОН).

1-О-Трифенилметил-2-ацетил-Sn-глицеро-3-фосфо-(N òðèôåíèëìåòèë)-этаноламин способами, использованными на стадиях Б, В и Г примера 11, превращают в следующие продукты:

Б). 2-Ацетил-Sn-глицеро-3-фосфо-(N-трифенилметил)-этаноламин.

В) . 1-Пальмитоил-2-аце тил-Sn-глице ро-3-фо сфо- (N- трифе нилме тил) - э таноламин.

Г). 1-Пальмитоил-2-ацетил-Sn-глицеро-3-фосфоэтаноламин.

Выход 58 мг (68,5 теории), R < =

=0,38 (растворитель — по примеру 11) .

Рассчитано: N 2;83, Р 6,25.

С 2 3H1< NOR Р

Найдено: N 2,70; Р 6,10.

53NP: 0,9 (3H, CH ), 1,3 (CH ), 1,6-2,3 (альфа- и бета-СН<), 2,08 (ЗН, S, СНЗСО), 3, 1-4, 3 (8Н, СН, бета-глицерол, этаноламин), 5, 1 (1Н, СН-глицерол).

Пример 15. А) ° 1-О-Трифенилметил-2-пронионил-Sn-глицеро-3-фосфо-О1-трифенилметил)-этаноламин.

450 мг 1-0-трифенилметил-Бп-глицеро-3-фосфо-(N-трифенилметил)-этаноламина (согласно примеру 2) вводят во взаимодействие с 900 мг пропионового ангидрида в 10 мл пиридина при 30 С, как в примере 14 (стадия А), с получением 1-0-трифенилметил-2-пропионил-Sn-глицеро-3-фосфо-(N-трифенилметил)-ЗЬ

-этаноламина, обрабатывают и очищают.

Выход 220 мг (45 от теории). Rg=0,5.

Полученньп» продукт превращают как в примере 11 (стадии Б, В и Г), в следующие соединения:

Б) . 2-Пропионил-Sn-глицеро-3-фосфо-(N-трифенилметил)-этаноламин.

В). 1-Пальмитоил-2-пропионил-Бп.-глицеро-3-фосфо-(N-трифенилметил)—

-этаноламин ° 45

Г). 1.Пальмитоил-2-пропионил-Бп-глицеро-3-фосфоэтаноламин.

Выход 93 мг (63 теории). К =0,4 (растворитель — по примеру 11).

Рассчитано: N 2;75; P 6, 08.

С1 Н gqNO ВР (509; 620)

Найдено: N 2,60; Р 5,80.

ЯИР: О, 9 (2Н, СН 3), 1,3 (СН g)

1,6-2,3 (альфа- и бета-СН, бета-СН ), 3, 1-4, 3 (8Н, СН, глицерол, этанол- ББ амин); 5, 11 (1Н, CH-глицерол) .

Пример 16. А). 1-0-Трифенилме тил-,2-бутирил-$п-глицеро-З-фо сфо-(N-трифенилметил)-этаноламин.

16

50 мг 1-0-трифенилметил-Sn-глицеро-3-фосфо-(N-трифенилметил)-этаноламина ацилируют бутирилимидазолидом, который получают из 132 мг масляной кислоты и 267 мг карбонилдиимидазола, как в примере 12 (стадия А), обрабатывают и очищают. Полученный продукт (300 мг, выход 56К, Rg=0,52, на силикагеле, растворитель — хлороформ метанол в соотношении 8:2 по объему), описанными в примере 1 1 (стадии

Б, В и Г) способами превращают в следующие соединения;

Б). 2-Бутирил-Бп-глицеро-3-фосфо-(N-трифенилметил)-этаноламин.

В). 1-Пальмитоил-2-бутирил-Sn-глицеро-3-фосфо †(N-трифенилметил)-этаноламин.

Г). 1-Пальмитоил-2-бутирил-Sn-глицеро-3-фосфоэтаноламин.

Выход 110 мг (54 теории), R < =

= 0,44 (растворитель — по примеру 11).

Рассчитано: N 2,,68, P 5,91.

С25Н 5oNOSP (523, 648)

Найдено: N 2,70, Р 5,70.

SMP: 0,9 (6H, CH 3), 1,3 (CH ), 1,6-2,3 (альфа- и бета-СН. ), 3,1

4,3 (8Н, СН, глицерол, этаноламин), 5, 1 (1Н, СН-глицерол) .

Пример 17. А). 1 — О-Трифенилме тил-2-изобутирил-Sn-глицеро-3-фос-. фо-(М-трифенилметил)-этаноламин °

500 мг 1-О-трифенилметил-Sn-rsmцеро-3-фосфо-(N-трифенилметил)-эта-, ноламина ацилируют изобутирилимидазолидом, который получен и» 132 мг изо» масляной кислоты и 267 мг карбонилдиимидазола, как описано в примере 12 (стадия А), обрабатывают и очищают.

Полученный продукт (272 мг, выход

50, R6=0,53), на силикагеле, растворитель — хлороформ : метанол в соотношении 8:2 по объему) имеет следующие спектроскопические данные:

ЯМР- Н-спектр: д м.д. (СРС13-СР300

2:1 по объему): 1,2 (СН3, 6Н), 2,53,9 (глицерол и холин-СН g, 8Н), 5 26 (глицерол-СН, мультипле т, 1 Н), 7, 23 (ароматические, ЗОН).

1-0-Трифенилметил-2-изобутирил-Sn-глицеро-3-фосфо-(5-трифенилметил)-этаноламин по примеру 12 (стадии Б, В и Г) превращают в следующие соедине ния:

Б ), 2-Из о 6утирил-S n- глице ро-3-фосфо- (N-трифенилметил)-этаноламин.

В) . 1-Оле сил-2-изобутирил-Sn-глице ро-3-фосфоэ танол амин.

14005 11

l7

Выход 106 мг (55% теории); R< =

= 0 44 (растворитель — по примеру 11) .

Рассчитано: N 2,55; P 5,63.

C H szN0)P (549, 686)

Найдено: N 2,40, P 5,60.

Пример 18. А). 1-О-Трифенилметил-2-(3-трифторметилбутирил)-Sn-глицеро-3-фосфо-(N-трифенилметил)-этаноламин.

900 мг 1-О-трифенилметил-Sn-глице"".о-3-фосфо-(N- трифенилметил) †этаноламина и 500 мг 3-трифторметилбутирил" ангидрида в 50 мл метиленхлорида после добавления 300 мг 4-N,N-диметил аминопиридина перемешивают в течение ,4 ч при 20 С. После добавки воды ° .

1 встряхивают, органическую фазу сушат над Na>SOq и выпаривают в ваку" уме, После очистки неочищенного про:дукта путем хроматографии под сред ним (умеренным) давлением на силикагеле с помощью градиентов хлороформ метанол в присутствии 0,5. об.% водного раствора NH получают 820 мг (выход 76%, R = 0,50, на силикагеле, растворитель — хлороформ ." метанол

8:2 по объему) 1-О-трифенилметил-2(3-трифторметилбутирил)-Sn-глицеро1-3-фосфо-(N-трифенилметил)-этанолами4а. Этот продукт аналогично примеру

111 (стадии Б, В и Г) превращают в следующие соединения: !

Б), 2-(3 -Трифторметилбутирил)-Бп-глицеро-3-фосфо-(N-трифенилме1чл)-этаноламин.

B). 1-Пальмитоил-2-(3 -трифторме тилбутирил)-Sn-глицеро-3-фосфо-(Б-!

" :рифенилметил)-этаноламин.

Г) 1-Пальмитоил-2-(3 -трифторметилбутирил)-Sn-глицеро-3-фосфоэтаноламин.

Выход 279 мг (49,5% теории); R = 0,42 (растворитель — по примеру 11).

Рассчитано: С 52,79; Н 8,35;

F 9,63; N 2.,37,: P 5,23.

С gg H и Р )NO)P (591, 624)

Найдено: С 52,50; Н 8,40, Р 10 00, N 2,20, Р 5,20.

ЯМР: 0,9 (зн, СН ), I,ç (СН ), 1,6-2,5 (альфа- и бета-СН, гаммаСН з), 3,1-4,5 (9Н; CHg, глицерол, этаноламин, СН-CFg), 5,1 (1Н, СНглицерол) .

Пример 19. А). 1-О-Трифенилметил-2-(2 -бутилгексаноил) -Sn- глице ро-3-фо сфо- (N- т рифе н илме тил)—

-этаноламин.

430 мг 1-0-трифенилметил-Яп-глицеро-3-фосфо-(N-трифенилметил) -этаноламина ацилируют с помощью 2-бутилгексаноилнмидазолида, который получен из 200 мг 2-бутилгексановой кислоты и 210 мг карбонилдиимидазола, как в примере 12 (стадии А), обрабатывают и очищают. Полученный продукт

10 (370 мг, выход 70%; R = 0,55, на силикагеле, растворитель — хлороформ:

:ме ганол в соотношении 8:2 по объему) по примеру I1 (стадии Б, В и Г) превращают в следующие соединения:

Б). 2-(2 -Бутилгексаноил)-$п-глицеро-3-фосфо-(М-трифенилметил)-этаноламин.

В). 1-Пальмитоил-2-(2 -бутилгекI сан оил) -Sn-глицеро-3-фо сфо- (N-vpe@e20 нилме ran) -э TaHoixaMHH °

Г) . 1-Пальмитоил-2- (2 -бутилгексано ил) -S n- глице р о-3-фо сфо э таноламий.

Выход 139 мг (5 IX теории); Rg =

=- 0,5 (растворитель — по примеру 11).

Рассчитано: М 2,30, Р 5,10.

С, Н ИО Р (607, 8 I)

Найдено: N 2, I; Р 4,8.

ЯМР: 0,8 (9Н СНз) 1,3 (СН g), 1,6-2,3 (с(- и р-СН ), 3,1-4,3 (9Н, СН глицерол этаноламин СН-CO), 5,1 (1Н, СН-глицерол).

Пример 20. А). 1-О-Трифенилметил-2-арахидоноил-Sn-глицеро-3-фос35 фо-(И-трифенилметил)-этаноламин.

500 мг 1-О-трифенилметил-Sn-глицеро-3-фосфо-(N-трифенилметил)-этаноламина и 890 мг ангидрида арахидонбвой кислоты в 50 мл метиленхлорида

40 после добавки 400 мг 4-N N-диметиламинопиридина перемешивают в течение 4 ч при 20 С. После добавления воды встряхивают, органическую фазу сушат над Na SO и выпаривают в вакудб уме. После очистки продукта путем хроматографии под средним давлением на силикагеле с помощью градиентов хлороформ - метанол в присутствии

0 5 об.% водного ИЬз получают 520 мг

50 (выход 82%, R< = 0,61, на силикагеле, растворитель — хлороформ : метанол в соотношении 8:2 по объему)

1,0-трифенилметил-2-арахидоноил-Sn-глицеро-3-фосфо-(N-трифенилметил)— чВ -этаноламина. Зтот продукт, следуя примеру 11 (стадии Б, В и Г) превращают в,соединения:

Б). 2-Арахиданоил-Sn-глицеро-3-фосфо-(N-трифенилметил)-этаноламин. . 400511

20! ч

В) . 1-нальмитоил-2-арахидоноил.—

-Sn-глицеро-3-фо сфо- (N- трифенилметил)-этаноламин.

Г). 1-Пальмитоил-2-арахидоноил-Sn-глицеро-3-фосфоэтаноламин.

Выход 119 мг (20% теории); R =

= 0,48 (растворитель — по примеру 11).

Рассчитано: С 66,55, Н 10,08, N 1,89, P 4,18.

С,1„Н, М08Р (740, 021)

Найдено: С 66,3; Н 10,3,"

N 1,7; Р 4,1.

ЯИР: О, 9 (бН, СН э), 1, 3 (СН g), 1,6-2,3 (альфа- и бета-СН ) «2,80 (бН, О=С-Сн -С=), 3, 1-4, 3 (8Н, глицерол, этаноламин), 5, 1 (1Н, СН-глицерол), 5,39 (8Н, олефин), Пример 21. А). 1-0-Трифенилметил-2-те трако заноил-Sn-глицеро-3-фосфо-(N-трифенилметил)-этаноламин.

500 мг 1-0-трифенилметил-Sn-гли- 25 церо-3-фосфо-(N-трифенилметил)-этаноламина (согласно примеру 2) ацилируют тетракозаноилимидазолидом, который получен из 1,57 г тетракозановой кислоты и 267 мг карбонил- 30 диимидазола, как в примере 12 (стадия А), обрабатывают и очищают. Полученный продукт (640 мг, выход 90%, . R = 0,6, на силикагеле, растворитель — хлороформ: метанол в соотно. 35 шенин 8:2 по объему) по методике примера 11 (стадии Б, В и Г) превращают далее в следующие соединения:

Б). 2-Тетракозаноил-Sn-глицеро-3-фосфо-(N-трифенилметил)-этанол40 амин.

В). 1-Пальмитоил-2-тетракозаноил. -Бп-глицеро-3-фосфо-(N-трифенилме-. тил)-этаноламин.

Г) 1 Пальмитоил 2 тетракозаноил 45

-Sn-глицеро-3-фосфоэтаноламин.

Выход 296 мг (60,5% теории); R

= 0,53 (растворитель — по примеру 11}

Рассчитано: С 67,21; Н 11,28;

Ы 1 74, P 3,85. 45Н ÄN0 Р (806; 191}

Найдено: С 66,9, Н 11«4, N 1,5; Р 3,6.

ЯМР: 0 9 (бН, СН,), 1 3 (СН ), 1,6-2,3 (альфа- и бета-СН ), 3,1-4,3 (8Н, Сн « глицерол, этаноламин), 5,1 (1Н, СН-глицерол).

20 !

1 р и м е р 22. A) 1. 1-Стеароил-2-оле о ил — S n- глице ро-3-фо сфо — (N- трифенилметил)-этаноламин.

K раствору 2-олеоил-Sn-глицеро-3-фосфо-(N-òðèôåíèëìåтил)-этаноламина, который получен из i 1 r 1-О-трифенилметил-2-олеоил-Sn-глицеро-3-фосфовЂ(N-.трифенилметил)-этаноламина (см. пример 11 стадии А и Б), в 150 мл метиленхлорида добавляют 3,5 r ангидрида стеариновой кислоты и 625 мг

4-N,N-диметиламинопиридина. Реакционную смесь перемешивают 3 ч при

20 С и затем смешивают с 45 мл смеси хлороформ : метанол : вода, взятых в соотношении 3:48:47 по объемам, и 75 мл метанола. После встряхивания нижнюю фазу отделяют и промывают еще дважды по 45 мл смесью хлороформ метанол : водныи аммиак (в соотношении 3:48:47 по объемам, а также один раз смесью хлороформ : метанол вода (3:48:47 по объемам). После удаления растворителя в вакууме неочищенный продукт очищают путем хроматографии под средним давлением на силикагеле с помощью градиентов хлороформ — метанол, причем получают

990 мг (выход 89%, R = 0,6) на силикагеле (растворитель — хлороформ метанол в соотношении 9: 1 по объему) чистого вещества. I

Б) . 1-Стеароил-2-олеоил-Sn ãëèöåpo-3-фосфоэтаноламин.

1 г. 1-стеароил-2-олеоил-Sn-глицеро-3-фосфо-(N-трифенилметил)-этаноламина в 30 мл трифторуксусной .кислоты отстаивают в течение 5 мин при

0 С. Обработку осуществляют по примеру 11 (стадия Г). Получают 550 мг чистого вещества (выход 72%), которое на тонкослойной хроматограмме на силикагеле (растворитель — хлороформ : метанол : 25%-ный аммиак

50:25:6 по объемам) показывает единое пятно; Rq = 0«5) Рассчитано: С 66,01; Н 10,81;

N 1,88; P 4,15.

С1,Н9 ИО Р

Найдено: С 65,9, Н 10,9, N 1,9; Р 4;3.

ЯМР: 0,9 (бН, СН ), 1,3 (СН ), 1,6-2,3 (альфа- и бета-СН ), 3,1

4,3 (8Н, СН « глицерол, этаноламин), 5,1 (1Н, СН-глицерол), 5,35 (2Н, олефин).

20 к, — соон, R - СООН, 21

14

Пример 23. А). 1-Стеароил-2-линолеоил-Sn-глицеро-3-фосфо-(И-трифенилметил)-этаноламин.

Б). 1-Стеароил-2-линолеоил-$п-глицеро-З-фосфоэтаноламин.

2-Линолеоил-Sn-глицеро-3-фосфовЂ(N-трифенилметил)-этаноламин, полученный из 700 мг 1-0-трифенилметил-2-линолеоил-Sп-глицеро-3-фосфо-(Nтрифенилметил)-этаноламина (см. пример 12, стадии А и Б) в метиленхлориде, смешивают с 2,2 г ангидрида стеариновой кислоты и 390 мг 4-N,N-диметиламинопиридина и перемешиают 3 ч при комнатной температуре.

Полученный продукт, как описано в примере 11 (стадия Г), вводят во взаимодействие с трифторуксусной кислотой и очищают. Получают таким образом 250 мг чистого 1-стеароил-2-линолеоил-Sn-глицеро-3-фосфоэтаноламина, который на тонкослойной хроматограмме на силикагеле (растворитель — хлороформ : метанол, как в примере 20) дает единое пятно; R< =

= 0,5. Выход 250 мг (46% теории).

Рассчитано: С 66,19; Н 10,57;

N t,88; P 4,1á.

С „Н ИО Р (744, 051)

Найдейо: С 66,00, Н 10 70.

N 1,70; Р 4,,10.

SMP: 0,9 (6Н, СН ), 1,3 (СН q),,1,6-2,3 (альфа- и бета-сн ), 2,75 (СН, =С-СН,-С=), 3,1-4,3 (BH, Сн „

Глицерол, этаноламин), 5,1 (1Н, глиьзрол), 5,36 (4Н, олефин).

Описываемый способ получения производных глицерофосфолипидов позволяет повысить выход целевого продукt до 83% (с 48,76%) и упростить процесс благодаря использованию в качестве исходного синтетического трифенилметильного производного глице1 офосфолипида.

Формула.изобретения

Способ получения производных глицерофосфолипидов общей формулы

О

О BgC-OC-Rg

И

Ву-СО" СЕ О"

1 1 + сн аР— - ааеранф(2 1

О где R1 — водород или СН 3

В . а и R — различны и означают:

00511 — линейный или разветвленный

С >-С < <-алкнл, одно- или многократноненасыщенный С >z -С алкенил, Снзосн сн,сн(сг,)сй„

СН (СН ) СН(Вг) СН(Вг) — (СН ) >Кз — линейный С15-С17- лкил, однократноненасыщенный С C

17

10 алкенил, включающий ацилирование производногб глицерофосфата, о т л и ч а ю щ и й— с я тем, что, с целью повышения выхода и упрощения процесса, в качестве производного глицерофосфата используют трифенилметильное производное Sn-глицеро-3-фосфолипида общей формулы гдe T — С(С,Н,),, К вЂ” Н или СН или R1 G(C H )3 э если другие R — Н ацилирование проводят производным

30 карбоновой кислоть1, общей формулы где R имеет указанные значения, и карбонилдиимидазолом или ангидЗ5 ридом соответствующей карбоновой кислоты, полученное моноацилпронзводное общей формулы

О НЗ СОТ

И и - C(:-0- CH

1 1

ГН,ОР- ОСК,СЕЙМ(31)

П

О где R. u R имеют указанные значения, 4б обрабатывают трифтористым бором в смеси метанола и хлористого метилена

О при 0 С и полученный после отщепления 1-0-трифенилметильной группы продукт ацилируют ангидридом карбо60 новой кислоты общей формулы где R имеет указанные значения, в присутствии 4-N, N-диметилиламино5> пиридина и в случае, если получено соединение общей формулы I где R — трифенилметил, отщепляют трифторметильную группу обработкой трифторуксусной кислотой при 0 С,