Способ оценки функциональной активности мононуклеарных фагоцитов у больных туберкулезом легких

 

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии туберкулеза. Цель изобретения - повышение точности оценки функциональной активности мононуклеэрных фагоцитов у больных туберкулезом. Указанная цель достигается тем, что из исследуемой крови выделяют моноциты, в качестве антигена используют БЦЖ, а регистрацию осуществляют с помощью радиоактивного тимидина и при увеличении количества меченых моноцитов выше 0, по сравнению с-контролем, не содержащем БЦЖ, оценивают функциональную активность моноцитов как повышенную, а при снижении количества меченых моноцитов - как сниженную.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)э G 01 N 33/534

ГОСУДАРСТВЕННЫИ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4744545/14 (22) 16.08.89 (46) 07.04.92. Бюл. t+ 13 (71) Новосибирский филиал Московского научно-производственного объединения

"Фтизиопульмонология" (72) Г.В.Селедцова и В.А.Козлов (53) 615.375 (088.8) (56) Пахомов А.M. Проблемы туберкулеза.—

1983, М9, с,23. (54) СПОСОБ ОЦЕНКИ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ МОНОНУКЛЕАРНЫХ

ФАГОЦИТОВ У БОЛЬНЫХ ТУБЕРКУЛЕЗОМ ЛЕГКИХ

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии туберкулеза.

Цель изобретения — повышение точности оценки состояния функциональной активности мононуклеарных фагоцитов у больных туберкулезом, Способ осуществляют следующим образом.

Из периферической крови больного в градиенте фиколл-верографина выделяют мононуклеарные клетки. Моноциты получают методом адгезии клеток к пластику, для чего мононуклеары помещают по 500 тыс в лунки 96-луночного планшета. По окончании инкубации неприлипшие клетки удаляются от прилипших к пластику моноцитов многократным промыванием теплой средой. Затем к моноцитам добавляют БЦЖ (50 мкг/мл) на 1,5-2 ч. После отмывания от БЦЖ в лунки к моноцитам вносят смесь Т- и В-лимфоцитов (по 1О);

„„Ж „„1725127 А1 (57) Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии туберкулеза. Цель изобретения — повышение точности оценки функциональной активности мононуклеар- ных фагоцитов у больных1уберкулеэом, Указанная цель достигается тем, что из исследуемой крови выделяют моноциты, в качестве антигена используют БЦЖ, а регистрацию осуществляют с помощью радиоактивного тимидина и при увеличении количества меченых моноцитов выше О, по сравнению с контролем, не содержащем

БЦЖ, оценивают функциональную активность моноцитов как повышенную. а при снижении количества меченых моноцитов— как сниженную. предварительно освобожденную от прилипающих клеток. Культивирование производят в среде РРМ 1. 1640 с 10%-ной эмбриональной телячьей сывороткой, 2 мМ . L-глютамина, 50 мкг/мл гентамицина, 15 мМ

Нерез, во влажной атмосфере с 5% СОг в течение 72 ч. За 18 ч до окончания культивирования в лунки вносят по 1 МСи Н -тимидина. Учет включения в клетки радиоактивного тимидина проводят с использование Р-счетчика (Mark). Индекс стимуляции (ИС) пролиферации лимфоцитов, обусловленной антигенным воздействием, вычисляют по формуле: число иыпупчсов попытке-число пыл псов в конт ле ис число импульсов в контроле

I . При увеличении индекса стимуляции с

0,28 0,16 у здоровых лиц до 0,75 + 0,14 у больных говорят об активном участии моноцитов больных в процессах распознавания и презентации антигена T-клеткам.

1725127 воздействует и на Т-клетки, что вносит дополнительные ошибки при исследовании.

Формула изобретения

Составитель Б.Мануйлов

Техред M.Ìîðãåíòàë Корректор 3.Лончакова

Редактор С.Кулакова

Заказ 1172 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035; Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101

Пример 1. Больной Кондрашов М,Г.

25. лет, инфильтрационный туберкулез легкого в фазе распада. Включение радиактивного тимидина в пролиферирующие клетки фиксируется .)3-счетчиком в виде радиоактивных импульсов, Получают счет импульсов в опытных (с добавлением антигена (АГ) и контрольных(без АГ) пробах, втрех параллельных вариантах, Вычисляют среднее значение М и по формуле — индекс стимуляции пролиферации, Индекс стимуляции равен 0,6. Следовательно, функциональная активность моноцитов у больного снижена.

Положительный эффект (повышение точноети) подтверждается результатами исследования 26 больных впервые выявленным туберкулезом легких.

В предлагаемом способе показано повышение точности исследования за счет воздействия АГ только непосредственно на .моноциты в отличие от прототипа, где АГ

Способ оценки функциональной активности мононуклеарных фагоцитов у больных туберкулезом легких путем добавления специфического антигена к исследуемой

10 крови с последующей регистрацией реакции, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, из исследуемой крови выделяют моноциты, в качестве антигена используют БЦЖ, а регистрацию

15 осуществляют с помощью радиоактивного тимидина и при увеличении количества меченых моноцитов выше 0,61 по индексу стимуляции по сравнению с контролем, не содержащем БЦЖ, оценивают I функцио20 нальную активность моноцитав как повышенную.