Способ диагностики ишемических поражений миокарда у детей

 

Изобретение относится к медицине, а именно к детской кардиологии, и может быть использовано для диагностики ранних ишемических поражений миокарда. Цель изобретения - повышение точности способа диагностики. Исследуют биохимически сыворотку крови, определяя активность фермента пирофосфатазы, отражающего изменения энергетического обмена, спектрофотометрическим методом и при значениях показателей активности, превышающих 11,92 ммоль/л относительно нормы, диагностируют ранние ишемические поражения миокарда у детей с нарушением ритма и проводимости сердца. Способ обладает более высокой точностью по сравнению с прототипом , является простым и позволяет определять начальную стадию ишемии миокарда . 1 табл.

(!9) (1() СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)э G 01 N 33/50

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

1 (21) 4807676/14 (22) 23.01.90 (46) 23.07.92. Бюл. t4 27 (71) Научно-исследовательский институт охраны материнства и детства Министерства здравоохранения ЛитССР (72) Ю;А.С.Жемайтайтите. Б.З.Балькявичюс, P,Ê.Фирантене. А.П.Гаркаускене и P.Ï:Ê83лаускайте (56) Они Х.Л. Физиология и патофизиология сердца. — М,: Медицина, 1988. с. 763. (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ИШЕМИЧЕСКИХ ПОРАЖЕНИЙ МИОКАРДА У ДЕТЕЙ (57) Изобретение относится к медицине, а именно к детской кардиологии, и может быть использовано для диагностики ранних

Изобретение относится к области медицины, а именно к детской кардиологии и может быть использовано для диагностики ишемических поражений миокарда, Целью изобретения является повышение точйости способа диагностики.

Поставленная цель достигается тем, что дополнительно определяют активность фермента пйрофосфатаэы, отражающего изменения энергетического обмена, путем измерения оптической плотности на спектрофотометре(при длине световой волны 660 манометра) в пересчете в единицах ферментативной активности на литр сыворотки «рови по формуле и при наличии значений Е/л, превышающих аналогичные верхние показатели здоровых детей (11,92 мМ/л) диагностирую ранние ишемические поражения миокарда у детей с нарушением ритма и проводимости сердца.

2 ишемических поражейий миокарда. Цель изобретения — повышение точности способа диагностики. Исследуют биохимически сыворотку крови; определяя активность фермента пирофосфатаэы, отражающего изменения энергетического обмена, спектрофотометрическим методом и при значениях показателей активности, превышающих

11,92 ммоль/л относительно нормы, диагностируют ранние ишемические поражения миокарда у детей с нарушением ритма и проводимости сердца. Способ обладает более высокой точностью по сравнению с прототипом, является простым и позволяет

onðôäåëÿòü начальную стадию ишемии миокарда. 1 табл.

Способ осуществляется следующим образом.

В пробирку с 1,9 мл буфера (при приготовлении которого берется 5,26 мМ MgClz (или MgS04) в 50 мМ трис-(оксиметил)-амино-метан) HCl, рН 9,0) и 0,1 мл субстрата (при приготовлении которого берется раствор 20 мМ N34P207 10Н20) добавляют 0,1 мл отцентрифугированной сыворотки крови (опытная проба). В другую пробирку берется все тоже самое, кроме субстрата, вместо которого вносят 0,1 мл дистиллированной воды (контрольная проба).

Затем проводят инкубацию проб, т.е, опытную и контрольную пробы нагревают в водяной бане при температуре 37 С в течение 10 мин. Реакцию останавливают, добавляя 0,1 мл. Затем отбирают 0,5 мл инкубационной смеси и к нему добавляют 2,7 мл реактива моли бдата аммония, который ro1749833 товится следующим образом: 12 r сухого (NH4)63407024 4Hz0 растворяют в 800 мл дистиллированной воды, приливают 38 мл концентрированной HzS04, добавляют 22 мл 1 MNagP04 и доливают дистиллированной воды до 1000 мл, и 0,8 мл красителя метилового зеленого, который готовится следующим образом: 600 мг сухого красителя метииоеого зеленого растворяют в небольшом количестве дистиллированной воды и 1,7 r сухого тритона Х305 растворяют в небольшом количестве дистиллированной воды. затем на следующий день оба раствора соединяют в доводят дистиллированной водой до 250 мл, Раствор используют в течение 2 мес. Через 30 с измеряют оптическую плотность (интенсивность развившейся окраски) на спектрофотометре (при длине световой волны 660 нм) против контрольной пробы. Калибровочную кривую строили по раствору КЗНРО4 в концентрациях 10

10 M (см. график), Активность фермента пирофосфатазы на литр сыворотки крови (Е/л) рассчитывали по формуле:

Е т "6 где Š— активность пирофосфатазы в мМ/л; (Аоп — Аконтр) — экстинкция разницы опытной и контрольной проб, измеренная на спектрофотометре.

1 л содержит 1000 мл, поэтому умножаем íà 1000. Реакция происходит в течение

10 мин и образуются 2 молекулы, поэтому делим на 20.

Нормы диагностических значений активности фермента пирофосфатазы разработаны на основании обследования 17 здоровых детей в возрасте с 3 до 15 лет, Для контрольной группы здоровых детей верхние пределы значений активности фермента пирофосфзтаэы в сыворотке крови были

11,92 мМ/л (Х 7,58; m 1,08; o 4,38) (в пределах 0-12,5).

Пример 1. Больной К.К„9 лет. Поступил с диагнозом стойкой супраеентрикулярной экстрзсистолии. Ребенок был обследовзн по поводу ишемических поражений миокарда. На электрокардиограмме были ишемические изменения зубца Т и сегмента $Т. При анализе клинических данных не выявлено органической патологии сердца, кроме нарушения ритма (включая рентгенограмму и эхоскопию сердца).

Общепринятое биохимическое исследоез we сыворотки крови также было е пределах нормы (включая определение иактата — его койцеитрзция 1,98 мМ/л).

Наряду с указанным биохимическим излучением сыворотки крови определяли зкгде Š— активность пирофосфатазы в мМ/л;

Аоп — Аконтр — экстинкция разницы ofl43Tной и контрольной проб, измеренная на спектрометре, равняется 0,28 при длине световой волны 660 нм.

По калибровочной кривой это равняется

1650.

Активность фермента пирофосфатазы в сыворогке крови согласно форме равняется:

1650 1000 82,5 мМ/л, тиеность фермента пирофосфатазы следую- щим образом.

В пробирку с 1,9 мл буфера (при приготовлении которого берется 5,26 мМ М9О2

5 или MgS04 в 50 мМ трис-(окси-метил)-амино-метан (HCI, рН 9,0) и 0,1 мл субстрата (при приготовлении которого берется раствор 20 мМ NagP20y 10 Hz0) добавляют 0,1 мл отцентрифугированной сыворотки крови

10 (опытная проба), В другую пробирку берется все то же. кроме субстрата. вместо которого вносят 0,1 мл дистиллированной воды (контрольная проба). Затем проводят инкубацию проб, т,е. опытную и контрольную

15 пробы нагревают в водяной бане при температуре 37 С в течение 10 мин. Реакцию останавливают, добавляя 0,1 мл 1 М, Затем отбирают 0,5 мл инкубационной смеси и к нему добавляют 2,7 мл реактивз—

20 молибдата аммония (который готовится следующим образом: 12 r сухого (йН4)6Мот02д4Н20 растворяют в 800 мл дистиллированной воды, приливают 38 мл концентрированной добавляют 22 мл 1 М

25 ИазР04 и доливают дистиллированной воды до 1000 мл, и 0,8 Мл реактива красителя метилового зеленого, который готовится следующим образом: 600 мг сухого красителя метилоеого зеленого растворяют в не30 большом количестве дистиллированной воды и 1,7 г сухого тритона Х305 растворяют в небольшом количестве дистиллированной воды, затем на следующий день оба раствора соединяют и доводят дистиллированной

35 водой до 250 мл. Раствор используют в течение 2 мес, Через 30 с измеряют оптическую плотность (интенсивность развившейся окра ски) на спектрофотометре (при длине световой волны 660 нм) против контрольной

40 пробы, Калибровочную кривую строили по раствору К НРО4 в концентрациях 10

10 М

Активность фермента пирофосфатазы на литр сыворотки крови(Е/л) рассчитывали

45 по формуле:

1749833 что превышает показатели группы здоровых детей (11,92 мМ/л), На основании результатов электрокардиографии, биохимического исследования сыворотки крови (с определением концентрации лактата) и определения активности фермента пирофосфатазы в сыворотке крови установлены сопутствующие нарушению ритма сердца ишемические поражения миокарда.

Пример 2. Больной, В.B.. 6 лет.

Поступил в клинику с диагнозом стойкой супрзвентрикулярной экстрасистолии. С помощью общепринятых способов исследования (электрокардиогрзфия, определение лактзта в сыворотке крови) исключены ишемические поражения миокарда. Наряду с общепринятым биохимическим изучением сыворотки крови, определяют активность фермента пирофосфатаэы и производят расчет в единицах ферментативной активности на л сыворотки по формуле. Активность фермента пирофосфатзэы составляла согласно формуле в сыворотке крови:

Е 1300 078 цЮО 65 М/

10 2 что превышает показатели группы здоровых детей (11,92 мМ/л), На основании результатов определения активности фермента пирофоафатазы установлены сопутствующие нарушению ритма сердца ишемические поражения миокарда, Преимущества предлагаемого способа по сравнению с известным приведены в таблице.

В таблице приняты обозначения: Х— среднее значение; а — ошибка: о- среднее квадратическое отклонение: Р— достоверность; 1 — изучаемая rpynna детей с нзрушекием ритма и проводимости сердца, сопутствуемыми ишемическими поражениями миокарда; la — часть больных изучаемой группы, у которых ишемические поражения

5 миокарда установлены при определении активности фермента пирофосфатаэы в сыворотке крови; Н вЂ” больные с нарушением ритма и проводимости сердца при отсутствии ишемических поражений миокарда; И!—

10; P — при сравнении показателей с аналогичными средними значениями практически здоровых лиц.

Из таблицы видно, что в 52.57 случаев (у 31 больного из 59 детей изучаемой груп15 пы) ишемические поражения миокарда установлены только с помощью предлагаемого способа диагностики, т,е. когдз показатели активности фермента пирофосфатазы превышали верхние границы здоровых детей

20 (11,92 мМ).

Предлагаемый способ диагностики представляет воэможность выявить ранние ишемические изменения миокарда у детей с нарушением ритма и проводимости серд25 ца. Способ обладает более высокой точностью и простотой определения, что позволяет повторять его в динамике лечения и определить начальную стадию ишемии миокарда, 30

Формула изобретния

Способ диагностики ишемических поражений миокарда у детей, включающий определение лактзта в сыворотке крови, о т35 личающийся тем,что,сцельюповышения точности, дополнительно определяют уровень пирофосфатаэы и при значении показателя более 11,92 ммоль/л диагностируют ишемические поражения, 40