Способ дифференциальной диагностики инфекционного мононуклеоза эпштейна-барр-вирусной этиологии, острого бактериального тонзиллита и острого вирусного гепатита "в" у взрослых

Изобретение относится к медицине и предназначено для дифференциальной диагностики инфекционного мононуклеоза Эпштейна-Барр-вирусной этиологии, острого бактериального тонзиллита и острого вирусного гепатита «В» у взрослых. Предложено комплексное исследование факторов крови пациента и при условии определенных отклонений относительно нормы их значений дифференцируют заболевания. Способ позволяет упростить и ускорить дифференциальную диагностику. 1 табл., 3 пр.

 

Предлагаемое изобретение относится к медицине, а именно к инфекционным заболеваниям, и может быть использовано для дифференциальной диагностики инфекционного мононуклеоза Эпштейна-Барр-вирусной этиологии, острого бактериального тонзиллита и острого вирусного гепатита «В» у взрослых.

Одной из актуальных проблем современной медицины является высокая заболеваемость герпесвирусными инфекциями. Герпесвирусы достаточно широко распространены в человеческой популяции, они способны поражать практически все органы и системы организма, вызывая латентную, острую, хроническую и медленную формы инфекции [1, 2, 4]. Особое место среди герпесвирусов занимает инфекция, вызванная вирусом Эпштейна-Барр (ВЭБ). ВЭБ-инфекция относится к наиболее актуальным и распространенным заболеваниям в современной педиатрии и детской инфектологии, а также среди взрослого населения [3, 5]. Одной из часто встречаемых форм Эпштейна-Барр-вирусной инфекции является инфекционный мононуклеоз (ИМ) [1, 4]. Такие заболевания, как острый бактериальный тонзиллит и острый вирусный гепатит были выбраны с учетом схожих клинических проявлений. Так, острый бактериальный тонзиллит или ангина, могут встречаться как самостоятельное заболевание или как симптом инфекционного мононуклеоза; также и острый вирусный гепатит может быть отдельным заболеванием или симптомом инфекционного мононуклеоза, что затрудняет проведение дифференциального диагноза между этими заболеваниями.

Наиболее распространенным способом диагностики инфекционного мононуклеоза Эпштейна-Барр-вирусной этиологии является иммуноферментный анализ (ИФА) и полимеразно-цепная реакция (ПЦР), но на ранних стадиях процесса или происходит медленный иммунный ответ, когда эти методы дают отрицательный результат. Сложность диагностики и изучения проблемы инфекционного мононуклеоза Эпштейна-Барр-вирусной этиологии заключается в том, что у взрослых исследования практически не проводятся, в основном это заболевание изучается у детей.

Известен «Способ диагностики инфекционного мононуклеоза». Пархоменко В.А., Каргаполов А.В. Патент на изобретение №2299439 от 20.05.2007 г основанный на исследовании сыворотки крови методом инфракрасной (ИК) спектроскопии. Характеристика: данный способ позволяет оценивать функциональное состояние организма на молекулярном уровне, позволяет проводить диагностику на уровне особенностей химических процессов, составляющих основу жизнедеятельности тканей организма. Исследование ИК спектра сыворотки крови проводили с помощью 9-ти канального инфракрасного анализатора, сопряженного с ПЭВМ. Аппарат имеет набор специальных фильтров для определения по характерным зонам поглощения количества различных химических связей веществ, входящих в состав биологической ткани. При этом цикл одного измерения не превышает одной секунды. В кювету помещают 30 мкл сыворотки крови. Анализ ИК-спектра сыворотки крови проводят в девяти диапазонах, которые характеризуют химические связи основных компонентов крови: 1 канал - 3500-3200 см-1, 2 канал - 3085-2832 см-1, 3 канал - 2120-1880 см-1, 4 канал - 1710-1610 см-1, 5 канал - 1600-1535 см-1, 6 канал - 1543-1425 см-1, 7 канал - 1430-1210 см-1, 8 канал - 1127-1057 см-1 и 9 канал - 1067-930 см-1.

Недостатком способа является сложность аппаратуры и неудобство вычисления.

Также известен «Способ дифференциальной диагностики дифтерии, ангины и инфекционного мононуклеоза». Краснов В.В., Гордецов А.С., Игнатьев А.А. Патент на изобретение №2184962 от 10.08.2000 г. Характеристика: в качестве объекта исследования является сыворотка крови. Образец крови высушивают, вводят полученный сухой остаток в вазелиновое масло с последующим приготовлением суспензии и регистрации спектров поглощения образца в области 1200-1000 см-1, определяют показатели и диагностируют заболевание. Недостаток способа - сложность вычисления.

За ближайший аналог заявляемого способа является «Способ диагностики инфекции, вызванной вирусом Эпштейна-Барр» (Левина А.С., Иванова В.В., Железникова Г.Ф., Монахова Е.Н. Патент на изобретение №2285262 от 20.04.2005 г.). Сущность способа заключается в том, что на ранних сроках заболевания определяют комплекс цитокинов - гамма-интерферона, фактора некроза опухоли - альфа, интерлейкина-4, устанавливают следующие уровни этих цитокинов: при первом обследовании (с 2 по 10 день болезни) - гамма-интерферона ниже 400 пг/мл, фактора некроза опухоли альфа ниже 50 пг/мл, интерлейкина-4 выше 150 пг/мл, при выписке (с 12 по 20 день болезни) - гамма-интерферона ниже 250 пг/мл, на основании которых прогнозируют развитие у детей рецидивирующего течения инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ-инфекцией.

Недостатком данного аналога является узкий спектр исследуемых цитокинов, что может привести к недостоверности дифференциальной диагностики инфекционного мононуклеоза Эпштейна-Барр-вирусной этиологии и схожих с ним заболеваний (острый бактериальный тонзиллит, острый вирусный гепатит).

Задача изобретения - разработка эффективного способа дифференциальной диагностики инфекционного мононуклеоза Эпштейна-Барр-вирусной этиологии, острого бактериального тонзиллита и острого вирусного гепатита «В» в короткие сроки, что крайне важно для выбора обоснованной тактики ведения пациента.

Сущность изобретения заключается в исследование пробы венозной крови и определение в комплексе цитохимическую активность кислой фосфатазы (КФ) лимфоцитов, уровень про- (IL-1α, IL-1β, IFN-γ) и противовоспалительных (IL-4, IL-1Ra) цитокинов в сыворотке крови, субпопуляционный состав (CD3-, CD4-, CD8-, CD16-, CD19-) лимфоцитов периферической крови, экспрессию молекул B-клеточного рецепторного комплекса (CD19+CD21+CD81+) и при условии снижения активности кислой фосфатазы лимфоцитов в 0,6 раза (на 19,0%) относительно нормы с равномерным распределением клеток всех степеней активности; повышения в сыворотке крови уровней IL-1α в 1,7 раза, IL-1β в 1,6 раза и INF-γ в 4,3 раза также от нормы; увеличения количества CD3+- и CD8+-лимфоцитов, снижения числа CD4+-, CD16+- и CD19+-лимфоцитов, включая CD19+CD21+CD81+-, CD19+CD21-CD81+- и CD19+CD21+CD81--клеток, в периферической крови при увеличении плотности молекул CD19, CD21 и CD81 в экспрессирующих их субпопуляциях В-клеток, подтверждают наличие инфекционного мононуклеоза Эпштейна-Барр-вирусной этиологии; при остром бактериальном тонзиллите определяют снижение активности КФ лимфоцитов в 2,4 раза (на 60,0%) от значений нормы; повышение в 2 раза уровней IL-1β и INF-γ; увеличение количества CD19+CD21+CD81+- и CD19+CD21-CD81+-лимфоцитов относительно нормы при неизменной плотности молекул CD19, CD21 и CD81 в экспрессирующих их субпопуляциях В-клеток; снижение активности КФ лимфоцитов в 3,5 раза (на 70,0%), повышение уровней IL-1β в 18 раз, INF-γ в 2,3 раза и IL-1Ra в 1,3 раза определяют острый вирусный гепатит «В».

Технический результат настоящего изобретения состоит в сокращении сроков идентификации этиологического агента, вызвавшего заболевание, что крайне важно для выбора обоснованной тактики ведения пациента, и приведет к сокращению пребывания на койке и сроков медико-социальной реабилитации.

Способ осуществляют следующим образом: Было обследовано 93 человека с предварительными диагнозами «инфекционный мононуклеоз», «острый бактериальный тонзиллит» и «острый вирусный гепатит В». В качестве контроля при исследовании в сыворотке крови используют образцы сыворотки здоровых доноров, не имеющих хронических заболеваний. Оценку результатов проводят с использованием статистических методов.

Активность кислой фосфатазы определяют по методу Goldberg, Barka в модификации М.Г. Шубича, М.Г. Авдеевой (1989). Уровень содержания про- (IL-1α, IL-1β, IFN-γ) и противовоспалительных (IL-1Ra, IL-4) цитокинов в периферической крови (сыворотка) обследуемых определяют методом иммуноферментного анализа (ИФА) с использованием соответствующих коммерческих тест-систем производства ООО «Цитокин» (г. Санкт-Петербург, Россия) на иммуноферментном анализаторе «ASCENT» (Финляндия), с чувствительностью 1 пикограмм на миллилитр (пг/мл). В основу используемого метода ИФА положен принцип «сэндвич-варианта», для реализации которого используют два моноклональных антитела с различной эпитопной специфичностью к цитокинам. Методом лазерной проточной цитофлюориметрии (Cytomics FC-500 «BeckmanCoulter», США) проводят оценку состояния клеточного звена иммунитета с применением моноклональных антител к CD3-, CD4-, CD8-, CD16-, CD19-рецепторам лимфоцитов. Оценку рецепторного аппарата лимфоцитов проводят при тестировании одномоментной экспрессии на мембране клеток молекул CD19, CD21, CD81 методом проточной цитометрии на CYTOMIC SFC500 (Beckman Coulter, США) с использованием панели моноклональных антител: CD19, CD21, CD81 (фирма Beckman Coulter, США). Наряду с оценкой абсолютного содержания лимфоцитов, одномоментно экспрессирующих CD19, CD21, CD81, исследуют уровень плотности экспрессируемых молекул по показателю интенсивности флуоресценции (MFI). Субпопуляционный состав лимфоцитов определяют путем двойного гейтирования по CD19+. Статистическую обработку полученных данных производят с использованием программы для IBM PC "BIOSTAT" (Stenton A. Glantz, Ph.D., 1999).

Способ можно проиллюстрировать на конкретных примерах:

Пример 1.

Больная Т., 18 лет, история болезни №5264. Предварительный диагноз: Инфекционный мононуклеоз? Острый бактериальный тонзиллит.

Поступила в ГБУЗ СКИБ на 5-й день болезни с жалобами на выраженную общую слабость, повышение температуры тела до 39,5С ежедневно, першение, боль в горле, усиливающиеся при глотании, увеличение шейных лимфатических узлов.

При поступлении состояние средней степени тяжести за счет интоксикационного синдрома, температура тела 38,5°С, носовое дыхание свободное, голос осиплый, зев ярко гиперемирован, миндалины отечные, гипертрофированы до 2-3 степени, покрыты гнойными налетами с двух сторон, увеличены подчелюстные лимфатические узлы в диаметре до 1,0-1,5 см, при пальпации эластичные, болезненные, не спаянные с окружающими тканями. Печень при пальпации на уровне края реберной дуги, селезенка нормальных размеров. В общем анализе крови лейкоцитоз 10,6×109/л, лимфоцитоз 55%, атипичные мононуклеары 17%; в биохимическом анализе крови - цитолиз (АЛТ 58 Ед/л, ACT 45 Ед/л). ИФА ВЭБ - IgM - сомнительный, ЕА IgG, NA IgG - отрицательный, ДНК ВЭБ - отрицательно.

Проведены дополнительные методы исследования:

активность КФ - 124,0 у.е. (в 0,6 раза ниже контрольной группы 210,4±12,85 у.е) с относительно равномерным распределением по степеням активности: нулевая - 28%, слабая - 30%, умеренная - 20%, выраженная - 22% (определена по методу Goldberg, Barka в модификации М.Г. Шубича, М.Г. Авдеевой (1989));

цитокиновый профиль (определяется методом иммуноферментного анализа (ИФА) с использованием соответствующих коммерческих тест-систем производства ООО «Цитокин» (г. Санкт-Петербург, Россия) на иммуноферментном анализаторе «ASCENT» (Финляндия), с чувствительностью 1 пикограмм на миллилитр (пкг/мл): IL-1α - 2528,9 пкг/мл (в 1,7 раза выше контрольной группы 1452,6±226,82 пкг/мл), IL-1β - 4,32 пкг/мл (в 1,6 раза выше контрольной группы 2,7±0,29 пкг/мл), IL-1Ra - 521,8 пкг/мл (не отличается от контрольной группы 502,2±73,82 пкг/мл), IL-4 - 45,7 пкг/мл (не отличается от контрольных значений 43,6±5,48 пкг/мл), INF-γ - 160,2 пкг/мл (в 4,3 раза выше значений контрольной группы 37,1±3,14 пкг/мл);

иммунологические параметры (клеточное звено иммунитета определяется методом лазерной проточной цитофлюориметрии (Cytomics FC-500 «BeckmanCoulter», США; оценка рецепторного аппарата лимфоцитов проводят при тестировании одномоментной экспрессии на мембране клеток молекул CD19, CD21, CD81 методом проточной цитометрии на CYTOMIC SFC500 (Beckman Coulter, США) с использованием панели моноклональных антител): CD3+ - 80,3% (повышен результат при норме 73,2±2,5), CD4+ - 16,8% (показатель снижен, норма 42,1±1,8%), CD8+ - 52,5% (повышен, норма 33,7±1,6%), CD16+ - 11,8% (снижен, норма 16,2±2,4%), CD19+ - 3,6% (снижен, норма 10,0±1,32%); CD19+CD21+CD81+ - 1,25% (снижен при норме 3,65±1,06) при MFI 19 - 9,83% (повышен, норма 6,6±0,33), MFI 21 - 3,68% (повышен, норма 2,5±0,34), MFI 81 - 8,43% (повышен, норма 3,1±0,31); CD19+CD21+CD81- - 0,93% (снижен, норма 2,2±0,57) при MFI 21 - 4,16% (повышен, норма 2,2±0,20); CD19+CD21-CD81+ - 0,63% (снижен, норма 1,3±0,32) при MFI 81 - 14,3% (повышен, норма 4,7±0,84).

Заключительный диагноз: Инфекционный мононуклеоз, средней тяжести.

Пример 2.

Больной М., 21 год, история болезни №10559. Предварительный диагноз: Острый бактериальный тонзиллит. Инфекционный мононуклеоз?

Поступил в ГБУЗ СКИБ на 3-й день болезни с жалобами на общую слабость, ломоту во всем теле, повышение температуры тела до 38,5°С с ознобом ежедневно, першение, боль в горле, усиливающиеся при глотании, увеличение шейных лимфатических узлов.

При поступлении состояние средней степени тяжести за счет интоксикационного синдрома, температура тела 37,5°С, носовое дыхание свободное, зев ярко гиперемирован, миндалины отечные, гипертрофированы до 2-3 степени, покрыты умеренно гнойными налетами с двух сторон, увеличены подчелюстные, передне-шейные лимфатические узлы в диаметре до 1,0 см, при пальпации эластичные, болезненные, не спаянные с окружающими тканями. Печень при пальпации 10/+0,5×9×8 см, селезенка не увеличена. В общем анализе крови лейкоцитоз 26,1×109/л, сегментоядерный сдвиг 75%, СОЭ 40 мм/ч; в биохимическом анализе крови - цитолиз (АЛТ 48 Ед/л, ACT 39 Ед/л). ИФА ВЭБ - отрицательно.

Проведены дополнительные методы исследования:

активность КФ - 87,0 у.е. с распределением по степеням активности: нулевая - 54%, слабая - 37%, умеренная - 7%, выраженная - 2% (снижен на 60% нормы);

цитокиновый профиль - IL-1α - 1459,2 пкг/мл (не отличается от нормы), IL-1β - 5,72 пкг/мл (повышен в 2 раза от нормы), IL-1Ra - 506,3 пкг/мл (не отличается от нормы), IL-4 - 40,31 пкг/мл (не отличается от нормы), INF-γ - 75,14 пкг/мл (повышен в 2 раза от нормы);

иммунологические параметры - CD3+ - 77,4% (норма), CD4+ - 39,9% (норма), CD8+ - 34,3% (норма), CD16+ - 15,7% (норма), CD19+ - 10,2% (норма); CD19+CD21+CD81+ - 54,1% (повышен) при MFI 19 - 9,7% (норма), MFI 21 - 3,4% (норма), MFI 81 - 2,8% (норма); CD19+CD21+CD81- - 2,25% (норма) при MFI 21 - 2,3% (норма); CD19+CD21-CD81+ - 20,2% (повышен) при MFI 81 - 4,2% (норма).

Заключительный диагноз: Острый бактериальный тонзиллит, средней тяжести.

Пример 3.

Больная Ф., 25 лет, история болезни 10864. Предварительный диагноз: Острый вирусный гепатит. Инфекционный мононуклеоз?

Поступила в ГБУЗ СКИБ на 6-й день болезни с жалобами на общую слабость, ломоту во всем теле, повышение температуры тела до 38,0°С с ознобом ежедневно, увеличение шейных лимфатических узлов, желтушность склер, потемнение мочи, разбитость.

При поступлении состояние средней степени тяжести за счет интоксикационного синдрома, температура тела 37,2°С, носовое дыхание свободное, зев спокойный, миндалины за дужками, увеличены подчелюстные лимфатические узлы в диаметре до 0,5 см, при пальпации эластичные, безболезненные, не спаянные с окружающими тканями. Умеренная иктеричность склер и слизистых, кожные покровы загорелые. Активных проявлений геморрагического синдрома нет. Печень при пальпации 12/+1,5×10×10 см, край эластичный, селезенка +2,0 см, край эластичный. В общем анализе крови лейкоциты 5,7×109/л, лимфоцитоз 64%, СОЭ 10 мм/ч; в биохимическом анализе крови - холестаз (общий билирубин 80,1 мкмоль/л, прямой билирубин 40,2 мкмоль/л), цитолиз (АЛТ 1115 Ед/л, ACT 1069 Ед/л). ИФА ВЭБ - отрицательно, ИФА на маркеры вирусных гепатитов В, С - отрицательно.

Проведены дополнительные методы исследования:

активность КФ - 64,0 у.е. (снижена на 70,0% от нормы) с распределением по степеням активности: нулевая - 68%, слабая - 30%, умеренная - 2%, выраженная - 0;

цитокиновый профиль - IL-1α 1528,4 пкг/мл (норма), IL-1β 50,64 пкг/мл (в 18 раз выше нормы), IL-1Ra 658,5 пкг/мл (в 1,3 раза выше нормы), IL-4 41,31 пкг/мл, INF-γ 90,4 пкг/мл (в 2,3 выше нормы);

при повторном исследовании в ИФА ВЭБ отрицательно, обнаружены HBsAg, At HBcor IgM.

Заключительный клинический диагноз: Острый вирусный гепатит «В», желтушная форма, циклическое течение, средней тяжести.

Список литературы:

1. Инфекционные болезни: национальное руководство / Под ред. Н.Д. Ющука, Ю.Я. Венгерова. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009.

2. Исаков В.А., Архипова Е.И., Исаков Д.В. Герпесвирусные инфекции человека: руководство для врачей / под ред. В.А. Исакова. - СПб.: СпецЛит, 2013. - 2-е изд., перераб. и доп. - 670 с.: ил.

3. Павленко О.А., Щербак В.А. Роль вируса Эпштейна-Барр в патологии верхних отделов пищеварительного тракта // Дальневосточный медицинский журнал. - 2009. - №3. - С. 53-55.

4. Руководство по инфекционным болезням / Под ред. чл.-кор. РАМН, проф. Ю.В. Лобзина. 3-е, доп. и перераб. - СПб.: «Издательство Фолиант», 2003.

5. Симованьян Э.Н., Денисенко В.Б., Григорян А.В., Ким М.А., Бовтало Л.Ф., Белугина Л.В. Эпштейна-Барр вирусная инфекция у детей: совершенствование программы диагностики и лечения // Детские инфекции. - 2016. - №1. - С. 15-24.

6. Лебедев В.В., Авдеева М.Г., Шубич М.Г. Цитохимическое изучение лейкоцитов в клинике инфекционных болезней // Учебно-методическое пособие. - 1994. - С. 10-13, 20-22.

Способ дифференциальной диагностики инфекционного мононуклеоза Эпштейна-Барр-вирусной этиологии, острого бактериального тонзиллита и острого вирусного гепатита «В» у взрослых, включающий клиническое обследование больного, исследование пробы венозной крови, отличающийся тем, что определяют в комплексе цитохимическую активность кислой фосфатазы (КФ) лимфоцитов, уровень про- (IL-lα, IL-lβ, IFN-γ) и противовоспалительных (IL-4, IL-1Ra) цитокинов в сыворотке крови, субпопуляционный состав (CD3-, CD4-, CD8-, CD16-, CD19-) лимфоцитов периферической крови, экспрессию молекул В-клеточного рецепторного комплекса (CD19+CD21+CD81+) и при условии снижения активности кислой фосфатазы лимфоцитов в 0,6 раза относительно нормы (210,4±12,85 у.е.) с равномерным распределением клеток всех степеней активности; повышения в сыворотке крови уровней IL-lα в 1,7 раза (норма 1452,6±226,82 пкг/мл), IL-1β в 1,6 раза (норма 2,7±0,29 пкг/мл) и INF-γ в 4,3 раза также от нормы (37,1±3,14 пкг/мл); увеличения количества CD3+- и СD8+-лимфоцитов, снижения числа CD4+-, CD16+- и СD19+-лимфоцитов, включая CD19+CD21+CD81+-, CD19+CD21-CD81+- и CD19+CD21+CD81--клеток, в периферической крови при увеличении плотности молекул CD19, CD21 и CD81 в экспрессирующих их субпопуляциях В-клеток, подтверждают наличие инфекционного мононуклеоза Эпштейна-Барр-вирусной этиологии; при остром бактериальном тонзиллите - снижение активности КФ лимфоцитов в 2,4 раза от нормы; повышение в 2 раза уровней IL-1β и INF-γ; увеличение количества CD19+CD21+CD81+- и CD19+CD21-CD81+-лимфоцитов относительно нормы при неизменной плотности молекул CD19, CD21 и CD81 в экспрессирующих их субпопуляциях В-клеток; при снижении активности КФ лимфоцитов в 3,5 раза, повышении уровней IL-1β в 18 раз, INF-γ в 2,3 раза и IL-1Ra в 1,3 раза (норма 502,2±73,82 пкг/мл) определяют острый вирусный гепатит «В».



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к медицине, а именно к инфекционным болезням, акушерству, и может быть использовано в лабораторной диагностике для выбора тактики ведения беременности и снижения риска развития внутриутробной инфекции новорожденного.

Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ дифференциальной диагностики грибовидного микоза от хронических дерматозов, включающий проведение у больного конфокальной лазерной сканирующей микроскопии наиболее инфильтрированного участка кожи, выявление патоморфологических признаков и балльную оценку их степени выраженности, характеризующийся тем, что определяют F – суммарный диагностический индикатор указанных патоморфологических признаков по формуле , где p1 – эпидермальная деструкция (от 0 до 3 баллов); р2 – микроабсцессы Потрие (от 0 до 1 балла); р3 – присутствие атипичных лимфоцитов в эпидермисе (от 0 до 3 баллов); р4 – присутствие атипичных лимфоцитов в дермо-эпидермальном соединении (от 0 до 3 баллов); р5 – потеря контура сосочков (от 0 до 3 баллов); р6 – присутствие атипичных лимфоцитов в дерме (от 0 до 3 баллов); и при значении F<5,8 диагностируют хронический дерматоз, при значении 5,9≤F≤6,8 – диагноз не уточнен, а при значении F≥6,9 – грибовидный микоз.

Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ дифференциальной диагностики грибовидного микоза от хронических дерматозов, включающий проведение у больного конфокальной лазерной сканирующей микроскопии наиболее инфильтрированного участка кожи, выявление патоморфологических признаков и балльную оценку их степени выраженности, характеризующийся тем, что определяют F – суммарный диагностический индикатор указанных патоморфологических признаков по формуле , где p1 – эпидермальная деструкция (от 0 до 3 баллов); р2 – микроабсцессы Потрие (от 0 до 1 балла); р3 – присутствие атипичных лимфоцитов в эпидермисе (от 0 до 3 баллов); р4 – присутствие атипичных лимфоцитов в дермо-эпидермальном соединении (от 0 до 3 баллов); р5 – потеря контура сосочков (от 0 до 3 баллов); р6 – присутствие атипичных лимфоцитов в дерме (от 0 до 3 баллов); и при значении F<5,8 диагностируют хронический дерматоз, при значении 5,9≤F≤6,8 – диагноз не уточнен, а при значении F≥6,9 – грибовидный микоз.

Изобретение относится к медицине, а именно к патологической анатомии и гистологии, и может быть использовано для хранения биопсийно-операционного материала щитовидной железы.

Изобретение относится к микробиологии и может быть использовано при выявлении протективного действия микроорганизмов на молекулу гемоглобина. Для этого исследуемую культуру микроорганизмов выращивают в жидкой питательной среде, отделяют супернатант от микробных клеток центрифугированием, параллельно с опытной пробой готовят контрольную пробу из жидкой питательной среды.

Изобретение относится к микробиологии и может быть использовано при выявлении протективного действия микроорганизмов на молекулу гемоглобина. Для этого исследуемую культуру микроорганизмов выращивают в жидкой питательной среде, отделяют супернатант от микробных клеток центрифугированием, параллельно с опытной пробой готовят контрольную пробу из жидкой питательной среды.

Изобретение относится к биологии и токсикологической химии. Способ определения нифедипина в биологическом материале заключается в том, что биологический объект измельчают, двукратно по 30 минут обрабатывают порциями органического изолирующего агента, которым является ацетон, полученные органические извлечения объединяют, растворитель из объединенного извлечения испаряют в токе воздуха, остаток неоднократно обрабатывают ацетоном, ацетоновые извлечения отделяют, объединяют, упаривают в токе воздуха при температуре 18-22°С до полного удаления растворителя, остаток растворяют в смеси растворителей ацетон-вода в отношении 7:3 по объему, хроматографируют в макроколонке с сорбентом «Силасорб С-18» 30 μ, элюируя смесью растворителей ацетон-вода в отношении 7:3 по объему, фракции элюата, содержащие анализируемое вещество, объединяют, элюент испаряют, остаток растворяют в смеси растворителей ацетонитрил-фосфатный буферный раствор с рН 9 в отношении 5:5 по объему и проводят определение методом ВЭЖХ с применением подвижной фазы ацетонитрил-фосфатный буферный раствор с рН 9 в отношении 5:5 по объему, подаваемой со скоростью 1000 мкл/мин, и УФ-детектора, регистрирующего оптическую плотность при 250 нм.

Изобретение относится к медицине, а именно к фтизиатрии и бактериологии, и может быть использовано для проведения туберкулостатической пробы у больных туберкулезом легких для лабораторного обоснования персонифицированного лечения.

Изобретение относится к области медицины и медицинской диагностики. Раскрыт способ микроскопической диагностики качества спермы после седиментации эякулята, включающий отбор клеток из осадка эякулята (ОЭ), подготовку цитологических препаратов из отобранных клеток ОЭ с размещением на предметные стекла, высушивание и окрашивание препаратов, последующий подсчет количества, оценку различных типов клеток и сравнение с данными контрольной группы для получения заключения.
Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ диагностики степени тяжести гнойного холангита у больных механической желтухой с установлением оптимальной хирургической тактики лечения, заключающийся в обследовании больного, отличающийся тем, что в крови больного газохроматографическим методом определяют количество уксусной кислоты и при концентрации уксусной кислоты, равной 0,31-0,34 ммоль/л, устанавливают наличие легкой степени тяжести гнойного холангита, при которой билиарная декомпрессия не показана, при концентрации уксусной кислоты, равной 0,35-0,41 ммоль/л, устанавливают наличие средней степени тяжести гнойного холангита, при которой билиарная декомпрессия показана при отсутствии эффекта от терапевтического лечения, а при концентрации уксусной кислоты, равной 0,42 ммоль/л или более, устанавливают наличие тяжелой степени гнойного холангита, при которой показана неотложная билиарная декомпрессия.

Способ относится к клинической медицине, а именно - к стоматологии и клинической лабораторной диагностике. Способ оценки степени тяжести хронического генерализованного пародонтита основан на цитологическом исследовании буккального (щечного) эпителия, при котором производится подсчет числа буккальных эпителиоцитов с конденсированным хроматином. По уровню таких клеток определяют степень тяжести хронического генерализованного пародонтита. У здоровых людей в норме содержание клеток буккального эпителия с конденсированным хроматином составляет менее 1%. У лиц с клинико-рентгенологическими признаками пародонтита при значениях 1.0-3.5% делается заключение о хроническом пародонтите легкой и средней тяжести, при значении более 3.5% - о тяжелой степени. Способ прост в исполнении, повышается скорость выполнения и точность определения тяжести заболевания. 2 табл.
Изобретение относится к медицине и может быть использовано для прогнозирования тяжелого течения диабетической полинейропатии (ДПН) и развития синдрома диабетической стопы (СДС). Для этого у пациента с сахарным диабетом исследуют сывороточный уровень тропомиозинового рецептора киназы (TrkB) методом твердофазного иммуноферментного анализа, дополнительно определяют уровень гликированного гемоглобина в крови. В последующем высчитывают коэффициент по формуле регрессионной модели K=0,3*HbA1C+0,4*TrkB, где K - коэффициент, 0,3 - константа регрессии, HbAlC - уровень гликированного гемоглобина, 0,4 - константа регрессии, TrkB - сывороточный уровень тропомиозинового рецептора киназы типа В. Коэффициент K>5 свидетельствует о высокой вероятности тяжелого течения диабетической полинейропатии и высоком риске развития синдрома диабетической стопы. Использование данного способа позволяет прогнозировать тяжесть течения диабетической полинейропатии за счет определения степени компенсации углеводного обмена, что исключает возможность выявления иной неврологической патологии, сопровождающейся демиелинизирующим процессом, а также позволяет принять заблаговременные терапевтические меры по предотвращению данных осложнений. 3 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для определения изменения поверхностного заряда эритроцитов у пациентов. Для этого отбирают образец крови у здоровых доноров и больных. После чего из крови выделяют эритроциты и проводят их инкубирование с катионным красителем. В качестве красителя используют акридиновый оранжевый. При этом краситель инкубируют с эритроцитами при 37°С в течение 30 минут. Определяют оптическую плотность раствора при 412 нм до и после инкубации с эритроцитами. Поверхностный заряд рассчитывают по количеству связанного красителя. Определяют изменение поверхностного заряда эритроцитов у больных по сравнению с эритроцитами, взятыми у здоровых доноров. Изобретение позволяет определить изменение поверхностного заряда эритроцитов у пациентов. 3 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно - онкологии, и может быть использовано для прогнозирования сроков ответа на андроген-депривационную терапию (АДТ) у больных раком предстательной железы (РПЖ). Способ включает исследование биологически активных молекул ткани опухоли с определением экспрессии AR, ERα, также учитывают возраст пациента, уровень тестостерона и простат-специфического антигена (ПСА) и рассчитывают значения дискриминантных функций Yl, Y2 по уравнениям: Y1=-33,37+1,0⋅Х1+0,01⋅Х2+0,01⋅Х3+1,08⋅Х4-0,0004 Х5 (раннее рецидивирование РПЖ с эффектом АДТ в течение 12 месяцев), Y2=-59,27+1,75⋅Х1+0,03⋅Х2+0,23⋅Х3-4,02⋅Х4+0,007 Х5 (отсроченное рецидивирование РПЖ с эффектом АДТ более 12 месяцев), где X1 - возраст пациента, годы, Х2 - экспрессия AR в опухоли, УЕ, Х3-экспрессия ERα в опухоли, УЕ, Х4 - содержание тестостерона в сыворотке крови, нмоль/л, Х5 - содержание простат-специфического антигена (ПСА) в сыворотке крови, нг/мл. При Y1>Y2 - прогнозируют ответ на АДТ в сроки менее 12 месяцев от начала лечения, а при Y1<Y2 - более 12 месяцев от начала лечения. Использование изобретения позволяет прогнозировать сроки рецидивирования заболевания на фоне АДТ, прогнозировать ожидаемые эффекты лечения и оценить его эффективность, повысить точность и информативность диагностики. 4 табл., 2 пр.

Изобретение относится к способу определения производных катехоламинов в биологической жидкости (моче), который может найти применение в клинической диагностике. Способ определения производных катехоламинов в моче методом высокоэффективной жидкостной хроматографии отличается тем, что пробоподготовку образца осуществляют, пропуская образец исследуемой мочи через патрон для твердофазной экстракции ISOLUTE SCX, добавляют раствор 9-флуоренил-метоксикарбонил хлорида и выдерживают 20 минут при комнатной температуре, а затем смывают 5% раствором ацетата аммония в метаноле, далее полученный раствор анализируют УВЭЖХ, в качестве элюента используют двухкомпонентную систему, ацетонитрил: 0,1% муравьиная кислота, при скорости потока 0.45 мл/мин. Детектирование производных катехоламинов проводят с использованием тройного квадрупольного масс-спектрометра с нагреваемым источником электрораспылительной ионизации. Изобретение обеспечивает упрощение способа, сокращение времени анализа и снижение трудоемкости без потери в эффективности и селективности. 1 з.п. ф-лы, 2 ил., 1 табл., 1 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к эндокринологии, и касается прогнозирования развития сахарного диабета 2 типа у лиц, проживающих в Башкортостане. Для этого выделяют ДНК из лимфоцитов периферической венозной крови, осуществляют генотипирование методом полимеразной цепной реакции синтеза ДНК и проводят амплификацию участка rs2107538 гена хемокина CCL5 и участка rs6749704 гена хемокина CCL20. При выявлении генотипов С/Т или Т/Т полиморфного локуса rs2107538 гена CCL5 или генотипа С/С полиморфного локуса rs6749704 гена CCL20 прогнозируют риск развития сахарного диабета 2 типа у обследуемого. Способ обеспечивает высокую точность прогнозирования за счет оценки полиморфизмов хемокинов – специфических маркеров воспаления, прогностически значимых в определении риска развития сахарного диабета 2 типа. 1 табл., 4 пр.

Группа изобретений относится к биосенсорам для определения концентрации аналита в пробе жидкости. Тестовый сенсор для определения концентрации аналита в биологической жидкости содержит: сенсорную пластинку, включающую в себя зону приема жидкости и область вставки в порт; один или более контактов сенсора, расположенных в области вставки в порт; первый ряд оптически прозрачных и непрозрачных позиций, образующих кодовую комбинацию калибровки, расположенную в первой зоне области вставки в порт; и второй ряд оптически прозрачных и непрозрачных позиций, образующих кодовую комбинацию синхронизации, расположенную во второй зоне области вставки в порт, причем вторая зона отличается от первой зоны, так что один или более контактов сенсора расположены между первой зоной и второй зоной. При этом кодовая комбинация синхронизации соответствует кодовой комбинации калибровки таким образом, что кодовая комбинация синхронизации обеспечивает синхронизацию кодовой комбинации калибровки во время вставки области вставки в порт в приемный порт измерителя аналита, и причем один или несколько контактов сенсора выполнены с возможностью обеспечивать передачу электрических сигналов при вставке области вставки в порт в приемный порт измерителя аналита. Также раскрывается тестовый сенсор для определения концентрации аналита в биологической жидкости, биосенсоркая система для определения концентрации аналита в биологической жидкости, а также способ определения концентрации аналита в биологической жидкости. Группа изобретений обеспечивает повышение точности и прецизионности измерений концентрации аналитов. 4 н. и 24 з.п. ф-лы, 10 ил.
Изобретение относится к медицине и предназначено для прогнозирования лимфогенного метастазирования при аденокарциноме толстого кишечника. Исследуют ткани опухоли, проводят иммуногистохимическое исследование с антителами: Rb pAb to Beclin 1 (ab62472, Abeam), Rb Anti-mTOR PAb (El8590, Bioscience), p53 Protein (Clone DO-7, monoclonal mouse, RTU, Dako), Ki67 Antigen (Clone MIB-1, monoclonal mouse, RTU, Dako), Bcl2 Oncoprotein (Clone 124, monoclonal mouse, RTU, Dako). Исследуют экспрессию указанных маркеров в опухолевой ткани по следующим параметрам: процент опухолевых клеток с позитивной экспрессией белка beclin 1, процент опухолевых клеток с позитивной экспрессией белка m-TOR, наличие экспрессии белка р53 в ткани опухоли, характер экспрессии белка р53 в ткани опухоли, наличие экспрессии ki67 в клетках воспалительного инфильтрата, наличие экспрессии bcl2 в клетках воспалительного инфильтрата и рассчитывают риск развития лимфогенных метастазов. Способ позволяет повысить эффективность раннего определения риска лимфогенного метастазирования. 2 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к патоморфологии, и может быть использовано для определения срока физиологически протекавшей беременности у женщин в I триместре. Для этого фрагменты соскоба из полости матки фиксируют в нейтральном 10% формалине в течение 24-48 часов при комнатной температуре. Далее обезвоживают в спиртах восходящей концентрации, заливают в парафин с последующим приготовлением срезов толщиной 4-5 мкм, которые помещают на предметное стекло и окрашивают гематоксилином и эозином. Полученные препараты помещают на предметный столик светового микроскопа и отбирают участки, содержащие компактный слой гравидарного эндометрия. С помощью видеокамеры, установленной на световом микроскопе, видимое поле зрения выводят на экран компьютера. Затем морфометрически определяют площади 30 или более децидуальных клеток и площади их ядер в 3-х или более полях зрения одного или нескольких препаратов. Далее определяют средние значения площади клетки и площади ядра и рассчитывают дискриминантную функцию (X) по формуле: X=К+К1 × ср.Sкл - К2 × ср.Sя, где X - срок беременности в акушерских неделях; К - коэффициент равный 3,414; К1 - коэффициент равный 0,019; cp.Sкл - средняя площадь клетки в мкм; К2 - коэффициент равный 0,008; ср.Sя - средняя площадь ядра в мкм. Изобретение обеспечивает достоверность и объективность морфологического заключения о сроке физиологически протекавшей беременности в первом триместре в акушерских неделях. 1 табл., 2 пр.

Изобретение относится к способу подготовки образцов поствитальной или пострезекционной костной ткани человека для исследования методом растровой электронной микроскопии. Способ характеризуется тем, что образцы вырезают абразивным кругом из костной заготовки, охлажденной жидким азотом, на 5 мин помещают в ультразвуковой диспергатор с ацетоном, далее погружают в заливочную эпоксидную смолу, сушат в вакууматоре в течение 24 ч при 60°C, после высушивания шлифуют шлифовальной бумагой вначале с дисперсностью 800, затем с дисперсностью 1200, далее полируют на сукне с алмазной пастой с зернистостью порошка в пасте 6 мкм и на заключительном этапе подготовки напыляют наночастицами углерода. Достигаемый при этом технический результат заключается в получении высокой контрастности исследуемой поверхности образцов костной ткани человека как материала для исследования в растровом электронном микроскопе, без использования токсичных реагентов при простоте исполнения и снижении материальных, трудовых и временных затрат. 4 ил.

Изобретение относится к медицине и предназначено для дифференциальной диагностики инфекционного мононуклеоза Эпштейна-Барр-вирусной этиологии, острого бактериального тонзиллита и острого вирусного гепатита «В» у взрослых. Предложено комплексное исследование факторов крови пациента и при условии определенных отклонений относительно нормы их значений дифференцируют заболевания. Способ позволяет упростить и ускорить дифференциальную диагностику. 1 табл., 3 пр.

Наверх