Способ количественного определения трихомонацида

 

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К А ВТОРСКОМ,Ф СВИДЕТЕЛЬСТВУ ()

О (Л о

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГННТ СССР (21) 2853685/25 (22) 18.12.79 (46) 07.08.92. Бюл. Р 29 (71) Читинский государственный медицинский институт (72) A.À.Õàáàðoâ и Л.И.Поваляева (53) 535.37 (088.8) (56) Государственная фармакопея Х издания. М., 1968, с. 708-710.

Государственная фармакопея Х издания, М., 1968, с. 709 (прототип).

Изобретение относится к области аналитической химии и может найти применение в технике определения трихомонацида.

Известен способ количественного определения трихомонацида, заключающийся в измерении собственного поглощения в ультрафиолетовой области спектра при 357 нм.

Этот способ малоэффективен, так как многие органические соединения поглощают в ультрафиолетовой области, при этом известный способ обладает малой чувствительностью, которая составляет всего 2 мкг/мл.

Наиболее близким к данному изобретению по технической сущности и достигаемому результату является способ качественного определения трихомонацида, осуществляемый путем воздействия на пробу неорганическим реагентом. Данный способ малочувствительный — чувствительность составляет всего 50 мкг/мл.

„„5U „„860580 А1 (51)5 G 01 N 21/64, A 61 В 10/00 (54) (57) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО OIIPEДЕЛЕНИЯ ТРИХОМОНАЦИДА путем обработки пробы неорганическим реагентом с последующим измерением интенсивности флуоресценции раствора, о т л и— ч а ю шийся тем, что, с целью повышения чувствительности, пробу обрабатывают хлоридом цинка в диоксане.

Целью изобретения является повышение чувствительности.

Поставленная цель достигается тем, что при способе количественного определения трихомонацида путем обра-о ботки пробы неорганическим реагентом с последующим измерением интенсивности флуоресценции раствора, пробу обрабатывают хлоридом цинка в диоксане.

Спектр возбуждения полученного при этом раствора лежит в области от 300 до 440 нм с максимумом 376 нм, а спектр излучения флуоресценции — от

420 до 580 нм с максимумом 502 нм.

Прямолинейная зависимость между концентрацией трихомонацида и интенсивностью флуоресценции раствора лежит от 0,04 до 1,5 мкг/мл. Опытные данные изложены в таблицах 1,2,3,4.

В лекарственной форме сопутствующие ингредиенты (наполнители) не влияют на интенсивность флуоресценции.

Таблица 1

Зависимость интенсивности флуоресценции трихомонацида от концентрации.хлорида цинка (с = 0,5 мкг/мл) Концентрация хлори- Относительная инда цинка, 7 тенсивность флуоресценции

0,01

0 05

0,10

0,50

1,00

2,00

Таблица 2

Влияние времени на устойчивость

Алуоресценции трихомонацида с хлоридом цннка в диоксане

72

15, 72

20

25

3 8бО

При содержании 1 мкг/мл крови илн мочи трихомонацид открывается полносФ . тью (100X), то есть компоненты крови и мочи не влияют на интенсивность флуоресценции. Чувствительность способа — 0,04 мкг/мл.

Способ осуществляется следующим образом.

Пример. Определение трихомонацида в таблетках по 0,05 r 0,030,04 r (точная навеска) мелкоизмельченных таблеток переносят в мерную колбу на 100 мл, прибавляют 70-80 мл диоксана и энергично встряхивают 3з мин. Затем доливают диоксаном до метки (раствор А). 10 мл раствора А переносят в мерную колбу на 100 мл и добавляют диоксаном до метки (ра580 створ Б). К 1 мл раствора Б прибавля ют диоксаном до метки (раствор Б).

К 1 мл раствора Б прибавляют 1 мл

17-ного раствора хлорида цинка в диоксане, 8 мл диоксана и флуориметрируют относительно стандартного раствора трихомонацида и диоксане с содержанием 10 мкг/мл, для чего к

10 1 мл стандартного раствора прибавляют 1 мл 1Х-ного раствора хлорида цинка в диоксане, 8 мл диоксана и флуориметрируют по отношению к ис- следуемым растворам (табл. 4).

Использование способа определения трихомонацида позволило повысить чувствительность, доведя ее до величины п>рядка 0,04 мкг/мл.

Продолжение табл.2

30

40

50

60

Та блица 3

Зависимость интенсивности флуоресценции комплекса от концентрации трихомонацида при взаимодействии с 17ным раствором хлорида цинка в диоксане

Концентрация трихомонаци- Относительная интенсивность да, мкг/мл флуоресценции

0,2

10

0,4

26

0,6

27

26

0,8

57

1,0

73

0,06 0,6

0,07 0,7

1,2

89

1,4

99

1,6

68

100

1,8

76

100

2,0

85

100

Таблица4

Флуориметрическое определение трихомонацида в таблетках по 0,05 г

0,76 х = 0,0503

0,75

0,76

16.10 "

0,0305

0,0311

0,77

0,78

Ео у=13 -10

0,0319

0,0328

0,90

О, 90.

0,01 0,1

0,02 0,2

0,03 0,3

0,04 0,4

0,05 0,5

0,08 0,8

0,09 0,9

0,10 1,0

0,0281

0,0285

0,0298

0i0524

О, 0511

О, 0495

0,0490

0,0486

0,0511

0,0532

860580

Продолжение табл.4

0,91.О, 91

0,92

Редактор Е. Гиринская Техред M. Моргентал Корректор П. Гере1ви

Заказ 3469

Тираж

Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Иосква, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат Патент, r.Óæãîðîä, ул. Гагарина, 101

0,0353

0,0358

0,0371

0,0502 а=0,0503 -10

О, 0493

0,0482