Способ дифференциальной диагностики вирусного гепатита и механической желтухи
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСГ1УБЛИК. Ж 183723о А1
ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) C3lkl ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ : К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4711668/14 : (22) 11.07.89 : (46) 30.08.93. Бюл. № 32 : (71) Ростовский медицинский институт : (72) Л.Д.Левина и И.А.Безуглова (56) Дробинский И.P. и др.//Здравоохранение МолдССР, 1975, ¹ 1, с, 12-16. (54) СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ ВИРУСНОГО ГЕПАТИТА И МЕХАНИЧЕСКОЙ ЖЕЛТУХИ (57) Способ дифференциальной диагностики вирусного гепатита и механической желтухи, Использование: в медицине, в, клинической биохимии, Цель: повышение Изобретение относится к медицине, а :. именно к клинической биохимии, и может быть использовано для дифференциальной -,диагностики вирусного гепатита B и механической желтухи. Целью изобретения является повыше; ние точности способа, Поставленная цель достигается тем, что, определение активности ЛДГ в эритроцитах : проводят по методу Нордмана и соавт, Способ осуществляют следующим образом. У больного с желтухой берут кровь в пробирку с антикоагулянтом. Кровь центрифугируют и удаляют плазму. Из осадка эрит роцитов готовят 20% гемолизат. В субстратную смесь, содержащую 0,2 мл 0,02 М НАД (молекулярный вес 663,45) и 1,0 мл 0,02 М лактата кальция на 0,05 -М боратном буфере рН 8.5, добавляют 0,2 мл точности способа. Сущность изобретения: проводят определение активности лактатдегидрогеназы в 20 гемолизате эритроцитов по образованию формазана в НАД-зависимой реакции с использованием субстратов лактата кальция и нитросинего тетразолия и при значении этого показателя более 9,16 мкмоль/ч.г гемоглобина диагностируют вирусный гепатит, а ниже этого значения — механическую желтуху. Положительный эффект: использование изобретения позволяет почти в 1,2 раза повысить точность дифференциального диагноза вирусного гепатита и механической желтухи. 1 табл. 20% гемолизата эритроцитов и 1 мл 0,0012 М раствора нитросинего тетразолия (M,â, 816), приготовленных на дистиллированной . воде.. Для приготовления боратного буфера растворяют 1 r буры в 100 мл воды и доводят рН до 8,5 с помощью 0,1 н НО. При построении калибровочной кривой в качестве растворителя стандартной навески формазана используют ацетон, который также используется для экстрагирования образовавшегося в опытных пробах формазана и в качестве контроля при спектрофотометрировании. Активность ЛДГ в эритроцитах выражают в мкмоль/ч-r гемоглобина, т.е. в единицах, отражающих количество мкмолей формазана, образовавшегося в ходе химической реакции в пробе объемом 1 мл за 1 ч 1837236 Активность ЛДГ, выявленная Группы обследованных мкмоль/«r Нв по методу I в сыворотке крови по методу!; МЕ/л в эритроцитах, по методу I I Здоровые 8 05 4-0 38 (28) 154 7«-5 4 (45) 39,4 0,67 (12) Больные: Вирусный гепатит 350,0":26,7* (124) 11.0«0,17* (54) 37,6+0,72 (15) Механическая желтуха желчно-каменная 6о7,73 «-0,29 (14) 7,80 «-0,47 (7) 203,7+31,2 (12) 173,0"=16,6 (15) 38.5ч:0,71 (8) 40,0+0,59 (7) лезнь Рак поджелудочной железы П р и м e,÷ а н и е. I — метод Хилла и соавт„ II — модифицированный метод Нордмана и соавт. В скобках указано число больных, * — указывает на достоверность различий по отношению к контролю. Составитель Г. Тюнина Техред М.Моргентал Корректор А. Обручар Редактор Заказ 2863 Тира>к Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 инкубации в расчете на 1 г гемоглобина, содержащегося в пробе, Количество гемоглобина в гемолизате определяли по методу -И.С.Лугановой и М.Н.Блинова, Положительный эффект способа подтверждается результатами обследования 3-х групп больных: с острым вирусным гепатитом В и механической желтухой различного генеза при желчно-каменной болезни и при опухолях поджелудочной железы. Исследовали активность ЛДГ в сыворотке крови по известной методике, описанной в работе A.В. Чижевик, В.К.Кухта, а также активность фермента в эритроцитах по описанной выше методике. Данные сравнительного анализа активности ЛДГ в сыворотке крови и эритроцитах, определенных различными методами представлены в таблице, из которой следует, что различие между контрольной группой здоровых лиц и больными, а также между, больными с вирусным гепатитом и желчно-каменной болезнью не достоверно по показателю активности ЛДГ, определенному известным способом. Предлагаемый способ определения активности ЛДГ в эритроцитах напротив выявляет достоверную разницу данного показателя у больных при вирусном гепатите и механической желтухе. Формула изобретения Способ дифференциаль««ой диагностики вирусного гепатита и механической желтухи, включающий определение активности ЛДГв крови, отл ич а ющийся тем, что, с целью повышения точности способа, проводят определение активности фермента в 15 20 $-ном гемолизате эритроцитов по абразованию формазана в НАД-зависимой реакции с использованием субстратов лактата кальция и нитросинего тетразолия и при значении этого показателя более 9,16 20 мкмолв/ч r гемоглобина диагностируют вирусный гепатит В, а ниже этого значен«ия— механическую желтуху.
