Способ прогнозирования затяжного течения сальмонеллеза

 

Способ прогнозирования течения с альмонеллеза. Использование: медицина , касается способов диагностики и прогнозирования течения инфекционных заболеваний. Цель: повышение точности способа. Сущность изобретения: у больного в остром периоде заболевания берут пробу крови, пробу делят на две части, каждую часть разводят средой 199 в соотношении 1:2,1:4.1:8, 1:16,15:2.1:64. в каждое разведение добавляют аутолимфоциты в концентрации 2 млн. клеток на 1 мл с последующей предварительной инкубацией в течение 40 мин одной части пробы при 15°С, а другой - при 37°С, а затем в каждое разведение добавляют комплемент в стандартной концентрации с дальнейшей инкубацией в течение 3,5 ч и определением % жизнеспособных аутолимфоцитов и при значении этого показателя 20% и выше в любом из разведений прогнозируют затяжное течение сальмонеллеза. 2 табл. СО с

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (51)ю G 01 N 33/68

ННОЕ ПАТЕНТНОЕ

CCP

CP), нлт i3;

АНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

КОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (f f

- ( (1) 4902641/14

2) 17.01.91

6) 30.08.93, Бюл. N. 32

1) Луганский медицинский институт

2) Н.Д.Ющук, В.M.Ôðoëoâ, В.А.Зюзин, .А.Пересадин и А.Д.Старик

6) Определение кортизолрезистентной опуляции лимфоцитов у больных сальмоеллезом. 2-ой Всесоюзный сьезд инфекцинистов. Ташкент, Медицина, УЗ ССР, 1985, . 69 — 71.

4) СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ЗАЯЖНОГО ТЕЧЕНИЯ САЛЬМОНЕЛЛЕЗА

7) Способ прогнозирования течения альмонеллеза. Использование: медициа, касается способов диагностики и пронозирования течения инфекционных

Изобретение относится к медицине и асается способов диагностики инфекционых заболеваний.

Целью изобретения является повышение очности и надежности способа прогнозироания затяжного течения сальмонеллеза, Эта цель достигается оценкой функциоального состояния лимфоцитов перифериеской крови больных.сальмонеллеэом при омощи реакции термоэависимой лимфоциотоксичности в двух режимах — холодовом ри+150С) в тепловом (при+37 С) под воэействием сыворотки крови больных, раэвеенной в 2-64 раза.

Использование данного предложения тало возможным благодаря впервые выяв„„Я „„1837237 А1 заболеваний. Цель: повышение точности способа. Сущность изобретения: у больного в остром периоде заболевания берут пробу крови, пробу делят на две части, каждую часть разводят средой 199 в соотношении

1:2, 1:4, 1;8, 1:16, 15:2, 1:64, в каждое разведение добавляют аутолимфоциты в концентрации 2 млн. клеток на 1 мл с последующей предварительной инкубацией в течение 40 мин одной части пробы при 15 С, а другой— при 37 С, а затем в каждое разведение добавляют комплемент в стандартной концентрации с дальнейшей инкубацией в течение 3,5 ч и определением жизнеспособных аутолимфоцитов и при значении этого показателя 20 и выше в любом из разведений прогнозируют затяжное течение сальмонеллеза. 2 табл. ленной авторами заявки опытным путем закономерности, заключающейся в том, что, в случае затяжного течения сальмонеллеза реакция лимфоцитотоксичности резко положительна (20% погибших лимфоцитов и выше) в одном или нескольких разведениях.

При этом лимфоцитотоксичность может проявляться как в холодовом, так и в тепловом режиме или в обоих режимах одновременно. В то же время при благоприятном прогнозе заболевания (острое циклическое течение) реакция термоэависимой лимфоцитотоксичности отрицательна или слабоположительна (1-5 ).

Необходимость исследования реакции лимфоцитотоксичности в двух режимах и 6

1837237 разведениях в каждом иэ них обусловлена тем, что эта реакция может быть, как показано авторами заявки опытным путем, резко положительна лишь в одном каком-то разведении одного иэ режимов, а в остальных — отрицательна или слабо положительна.

Способ осуществляется следующим образом. Сыворотку крови больного сальмонеллезом, взятую в остром периоде заболевания, разводят средой 199 в концентрациях 1/2, 1/4, 1/8, 1/16, 1/32 и 1/64, Аутологические лимфоциты выделяют в градиенте плотности фикол-верографина (с удельной плотностью 1,076), инкубируют с аутосывороткой во всех разведениях в концентрации 2 млн клеток/мл в течение 40 мин. Инкубация проводится при температуре+37 С (тепловой режим) и +15 С (холодовой режим), после чего в пробирки добавляется комплемент, приготовленный из стандартного коммерческого сухого комплемента, предназначенного для постанов. ки реакции связывания комплемента (РСК).

После добавления комплемента инкубация продолжается при тех же температурных режимах в течение 3,5 ч, Затем производится суправитальное окрашивание лимфоцитов трипановым синим и в камере Горяева подсчитывается количество клеток, нежиз° неспособных вследствие лимфоцитотоксического действия сыворотка крови больного, выражаемое в отношении к общему числу лимфоцитов.

При наличии отрицательной или слабоположительной (2 — 5 ) реакции лимфоцитотоксичности сыворотки больного дают заключение о малой вероятности развития затяжного течения сальмонеллеза (менее

5 ). Резко положительная (20 и более) реакция лимфоцитотоксичности, вне зависимости от того, регистрируется она в тепловом (+37 С), холодовом (+15 С), или в обоих режимах одновременно, свидетельствует о высокой вероятности формирования затяжного течения сальмонеллеза. При этом более высоки показатели лимфотоксичности, и чем в, большем числе разведений они выявляются, тем больше вероятности формирования затяжного течения сальмонеллеза.

В связи с этим при положительной реакции лимфоцитотоксичности сыворотки необходимо осуществлять коррекцию лечения, в частности, назначать препараты имунно модулирующего действия, что способствует улучшению прогноза.

При неопределенных результатах реакции(от 6 до 19 ) необходимо ее повторение в динамике через 3-5 дней, при этом в

40 подавляющем большинстве случаев, как показывает клинический опыт, она снижается до 5 или повышается до 20 и более, что дает основание для заключения о вероятности затяжного течения сальмонеллеза, 8 клинике инфекционных болезней Ворошиловградского медицинского института проведено сопоставление эффективности существующего способа (прототип) и предлагаемого способа прогнозирования затяжного течения сальмонеллеза. Полученные результаты сведены в табл.1.

Как следует из таблицы, предлагаемый способ прогнозирования затяжного течения сальмонеллеза имеют преимущества перед существующим (прототип), поскольку его информативность по диагностики выше на 21,7 1,5 P < 0,05), При этом его результаты хорошо воспроизводимы и получаются уже через 4,5 ч от момента начала постановки реакции, что весьма важно для клинической практики.

При предлагаемом способе прогнозирования диагностики достоверно выше, чем при существующем, что свидетельствует о достижении цели изобретения — повышения точности и надежности способа прогнозирования затяжного течения сальмонеллеза.

Пример. Больная К., 65 лет, пенси.онерка, Страдает атеросклерозом, гипертонической болезнью, хроническим гипоацидным гастритом, холециститом, колитом. Заболела остро, беспокоила тошнота, многократная рвота, обильный зловонный зеленоватого цвета стул с примесью слизи, боли в животе, слабость, повышение температуры до 38,5ОС.

Заболевание связывает с употреблением в пищу несвежей колбасы. Клинически заподозрен сальмонеллез. Диагноз подтвержден бактериологически выделением из кала и промывных вод желудка возбудителя— сальмонеллы тифимуриум. Лечение прово45 дилось солевыми растворами, поливитаминами, детоксицирующими препаратами, Состояние больной улучшилось, температура нормализовалась на 3 день лечения, прекратилась тошнота и рвота, появился

50 аппетит. Тем йе менее сохранялся неустойчивый стул, повторно из кала выделена сальмонелла. Это заставило подумать врача о возможности формирования затяжного течения сальмонеллеза. С целью уточнения

55 прогноза заболевания проведены иммунологические исследования. Исследование кортизолреэистентной популяции лимфоцитов (способ-прототип) дало неопределенные результаты. Исследована реакция термоэависимой лимфоцитотоксичности, 5 !

,При этом получены показатели, приведенные в табл.2.

Таким образом, в тепловом режиме полчена резко положительная реакция лимфоцитотоксичности в разведениях 1/8 и 1/16, 5 положительная в разведениях 1/4, в то же время в холодовом режиме реакция была лишь слабоположительной. Положительная реакция лимфоцитотоксичности дала основание для прогнозирования затяжного тече- 10 ния сальмонеллеза у больной К., что в ! дальнейшем подтвердилось при клиниче-! ском наблюдении. Дальнейшее лечение в связи с этой особенностью клинического те-! чения заболевания включало иммуномоду- 15 ляторы. Наступило выздоровление, Использование предлагаемого способа позволяет повысить точность прогнозиро вания затяжного течения сальмонеллеза и, ! следовательно, индивидуализировать про- 20 !

; :ведение лечения с учетом предполагаемых

: особенностей клинического течения. Спо,соб технически не сложен, не требует спе: циального оборудования и дефицитных . реактивов и может осуществляться в усло- 25

1837237

Таблица 1

Существующий способ Предлагаемый способ (и рототи и) Изученные показатели 2 1 6

216

46

31

89,2

67,4%

179

168

176

163

98,3 7О

36

33,(91,6 }

3 (8,4®

82 5 22о

31 (86,1%) 15

5 (13,9 ) 60,8 +-1,9%

Р<0,O1

Количество обследованных больных

Результаты реакции положительны: предполагается затяжное течение сальмонеллеза

Иэ них фактически сформировалось затяжное течение сальмонеллеза совпадения ожидаемого и фактического результатов

Результаты реакции отрицательны— предполагается отсутствие затяжного течения

Из них фактически затяжное течение сальмонеллеза отсутствовало

Сформировалось затяжное течение сальмонеллеза совпадения ожидаемого и фактического результатов

Всего случаев формирования затяжного течения сальмонеллеза

B том числе возникновение затяжного течения совпало с прогнозом

Ложноположительные результаты

Ложноотрицательные результаты

Процент диагностики виях диагностических лабораторий больниц и других учреждений практического здравоохранения.

Формула изобретения

Способ прогнозирования затяжного течения сальмонеллеза, включающий иммунологический анализ крови, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью повышения точности способа, пробу крови у больного берут в остром периоде заболевания, пробу делят на две части, каждую часть разводят средой

199 в соотношении 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, t:32, 1:64, в каждое разведение добавляют аутолимфоциты в концентрации 2 млн клеток в 1 мл с последующей предварительной инкубацией в течение 40 мин одной части пробы при 15ОС, а другой — при 37 С, затем в каждое разведение добавляют комплемент в стандартной концентрации с последующей инкубацией в течение 3,5 ч и определением процента жизнеспособных аутолимфоцитов и при значении этого показателя 20% и выше в любом иэ разведений прогнозируют затяжное течение сальмонеллеза.

1837237

Таблица 2

Составитель А. Марусенко

Техред М.Моргентал Корректор А. Обручар

Редактор

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул,Гагарина, 101

Заказ 2863 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5